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从猪皮中获取去端肽胶原蛋白的制备方法及胶原蛋白与流程

2021-10-09 14:59:00 来源:中国专利 TAG:胶原蛋白 猪皮 制备 制备方法 获取

技术特征:
1.一种从猪皮中获取去端肽胶原蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:获取猪皮并进行脱脂处理;制备成均质脱脂猪皮之后用蛋白提取液除去水溶性杂蛋白;用胃蛋白酶和盐酸/乙酸提取猪皮中的胶原蛋白,获取提取液;对所述提取液进行中性低温盐析,获取沉淀;对所述沉淀进行精制处理之后,获得去端肽胶原蛋白。2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述猪皮来源于spf级动物;所述猪皮来源于三月龄的猪。3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述脱脂处理包括:配制脱脂剂;将所述猪皮和脱脂剂按照固液体积比1:10进行混合之后搅拌脱脂;去上清。4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述脱脂剂选用0.1mol/l的naoh、0.6%的sds或2%的na2co3;脱脂的搅拌时间为2~8h。5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,进行所述脱脂处理之前,包括:去除所述猪皮表面脂肪,切成边长为毫米尺寸的小块。6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,制备所述均质脱脂猪皮用的溶液为磷酸缓冲液或10%的nacl溶液;所述蛋白提取液为磷酸缓冲液或10%的nacl溶液。7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述胃蛋白酶的添加量为所述均质脱脂猪皮质量的1/100~1/20质量比;所述盐酸/乙酸的使用浓度为0.5mol/l,添加量为所述均质脱脂猪皮体积的10倍体积比;所述胶原蛋白的提取温度为4℃,提取时间为24~48h。8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述中性低温盐析的过程如下:将所述提取液调整至ph=7.0,在4℃的条件下静置8h以上。9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述精制过程包括以下步骤至少之一:对所述沉淀进行洗涤,洗涤液选用磷酸缓冲液;对所述沉淀进行复溶之后,进行超滤分离;所述超滤分离所要求的截流分子量为3kd、10kd或50kd;对所述沉淀进行复溶之后,进行冷冻干燥。10.一种胶原蛋白,其特征在于,所述胶原蛋白不含i型胶原蛋白的n端端肽和c端端肽,其采用如权利要求1~9任一项所述的从猪皮中获取去端肽胶原蛋白的制备方法获得。

技术总结
本申请公开一种从猪皮中获取去端肽胶原蛋白的制备方法及胶原蛋白,制备方法以三月龄SPF猪皮为原料,用脱脂剂脱脂后,采用酶解法提取猪皮胶原蛋白并去除端肽,利用盐洗和超滤纯化胶原蛋白,冷冻干燥后获得高纯度海绵状去端肽胶原蛋白。本申请所述的制备方法工艺过程简单、高效,经蛋白质凝胶电泳及LC


技术研发人员:倪贺 程健
受保护的技术使用者:杭州芳禾生物科技有限公司
技术研发日:2021.08.24
技术公布日:2021/10/8
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