一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法与流程

1.本发明属于化学提取技术领域，具体涉及一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法。


背景技术：

2.毛蕊花糖苷是一种苯乙醇苷类物质，在自然界多种植物内广泛存在。毛蕊花糖苷为类白色或淡黄色结晶粉末，分子式c
29
h
36
o
15
，相对分子质量624.59。其结构特点为中心葡萄糖单元的c
‑
1位与苯乙醇的α
‑
羟基成苷，葡萄糖的c
‑
3位连接鼠李糖，苯丙烯酞酚与中心葡萄糖的c
‑
4位连接。众多研究表明毛蕊花糖苷具有抗肿瘤、抗神经损伤、抗糖尿病肾病、血管保护等多种药理活性，在新药研发过程中具有重要意义。此外，按《中国药典》2020版记载，毛蕊花糖苷还是紫珠叶、大叶紫珠、裸花紫珠等多种中药材，以及裸花紫珠胶囊等多种中药制剂的关键对照品，在有关药物的标准制定、质量管理过程中发挥着至关重要的作用。
3.杜虹花花果艳丽，挂果期长，适宜于园林中栽培观赏，也可用于盆栽观赏或植于灌木丛中、树林下，是一种野生花卉。杜虹花还是一种多用途的药材，能补肾清血，治风湿、神经痛、喉痛等。叶可治疮疖、痈肿及各种内外伤出血。现今从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的研究甚少，并且多存在提取效率低的问题。


技术实现要素：

4.本发明的目的是针对现有的问题，提供了一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法。
5.本发明是通过以下技术方案实现的：
6.一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法，包括如下步骤：
7.(1)激光冲击波处理：
8.选用美国3m公司的铝箔作为保护层单层包裹杜虹花叶，以水为约束层，将铝箔包裹的杜虹花叶置于nd:yag激光器内进行激光冲击处理，完成后取出备用；
9.(2)深冷处理：
10.将步骤(1)中激光冲击波处理后的铝箔包裹的杜虹花叶浸入液氮中，进行深冷处理，处理30～40s；
11.(3)超微粉碎处理：
12.将步骤(2)中的杜虹花叶从液氮中取出后立马置于超微粉碎机内进行超微粉碎处理，完成后得杜虹花叶粉末备用；
13.(4)浸提处理：
14.利用索氏提取装置对步骤(3)中所得的杜虹花叶粉末进行反复浸提处理，浸提后利用旋转蒸发仪浓缩至无醇味，得提取物备用；
15.(5)分离纯化：
16.将步骤(4)中所得的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化即可。
17.进一步地，步骤(1)中所述的激光冲击处理时激光器的波长为2～3μm，脉冲宽度为20～30ns，激光冲击功率密度为0.3～0.5gw/cm2，能量为4～8j，激光冲击的时间为10～14min。
18.进一步地，步骤(3)中所述的超微粉碎处理时控制粉碎机的转速为4000～6000rpm，粉碎的时间为20～30min。
19.进一步地，步骤(4)中所述的浸提处理时所用的浸提剂为乙醇。
20.进一步地，步骤(4)中所述的反复浸提处理的时间为3～4h。
21.进一步地，步骤(5)中色谱仪旋转速度为800～950rpm，流动相流速为1.5～3ml/min，柱温为25～35℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花糖苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分。
22.本发明相比现有技术具有以下优点：
23.1、本技术用铝箔纸将杜虹花叶进行包裹后进行激光冲击波处理，激光冲击波穿过约束层辐射到保护层上，杜虹花叶表面在极短的时间内充分吸收激光冲击波强脉冲能量并汽化电离，形成高温高等离子体并迅速向外喷射，但是由于约束层的存在，等离子体膨胀受到约束限制，导致等离子体内部压力快速上升，在杜虹花叶表面产生高达gpa的冲击载荷，在极短的时间内产生强冲击波向杜虹花叶内部传播，诱导出高幅值的残余应力，然后置于液氮中进行深冷处理，同样的急速降温，在极短的时间内会产生极大的内外温差，但是由于铝箔的束缚作用，会在极短的时间内产生极大的内应力，进一步加强内应力，提高细胞的通透性，为后续有效成分的融出奠定基础；
24.2、将处理后的杜虹花叶进行超微粉碎，利用超微粉碎的优势，与内应力相互协同作用，破坏细胞壁，并细化粉末，增大比表面积，增大粉末与浸提剂的接触面积，从而提高浸提的效率。
具体实施方式
25.一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法，包括如下步骤：
26.(1)激光冲击波处理：
27.选用美国3m公司的铝箔作为保护层单层包裹杜虹花叶，以水为约束层，将铝箔包裹的杜虹花叶置于nd:yag激光器内进行激光冲击处理，激光冲击处理时激光器的波长为2～3μm，脉冲宽度为20～30ns，激光冲击功率密度为0.3～0.5gw/cm2，能量为4～8j，激光冲击的时间为10～14min，完成后取出备用；
28.(2)深冷处理：
29.将步骤(1)中激光冲击波处理后的铝箔包裹的杜虹花叶浸入液氮中，进行深冷处理，处理30～40s；
30.(3)超微粉碎处理：
31.将步骤(2)中的杜虹花叶从液氮中取出后立马置于超微粉碎机内进行超微粉碎处理，控制粉碎机的转速为4000～6000rpm，粉碎20～30min后得杜虹花叶粉末备用；
32.(4)浸提处理：
33.利用索氏提取装置，以乙醇为浸提剂，对步骤(3)中所得的杜虹花叶粉末进行反复浸提3～4h，浸提后利用旋转蒸发仪浓缩至无醇味，得提取物备用；
34.(5)分离纯化：
35.将步骤(4)中所得的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化即可，色谱仪旋转速度为800～950rpm，流动相流速为1.5～3ml/min，柱温为25～35℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花糖苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分。
36.为了对本发明做更进一步的解释，下面结合下述具体实施例进行阐述。
37.实施例1
38.一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法，包括如下步骤：
39.(1)激光冲击波处理：
40.选用美国3m公司的铝箔作为保护层单层包裹杜虹花叶，以水为约束层，将铝箔包裹的杜虹花叶置于nd:yag激光器内进行激光冲击处理，激光冲击处理时激光器的波长为2μm，脉冲宽度为20ns，激光冲击功率密度为0.3gw/cm2，能量为4j，激光冲击的时间为10min，完成后取出备用；
41.(2)深冷处理：
42.将步骤(1)中激光冲击波处理后的铝箔包裹的杜虹花叶浸入液氮中，进行深冷处理，处理30s；
43.(3)超微粉碎处理：
44.将步骤(2)中的杜虹花叶从液氮中取出后立马置于超微粉碎机内进行超微粉碎处理，控制粉碎机的转速为4000rpm，粉碎20min后得杜虹花叶粉末备用；
45.(4)浸提处理：
46.利用索氏提取装置，以乙醇为浸提剂，对步骤(3)中所得的杜虹花叶粉末进行反复浸提3h，浸提后利用旋转蒸发仪浓缩至无醇味，得提取物备用；
47.(5)分离纯化：
48.将步骤(4)中所得的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化即可，色谱仪旋转速度为800rpm，流动相流速为1.5ml/min，柱温为25℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花糖苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分。
49.实施例2
50.一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法，包括如下步骤：
51.(1)激光冲击波处理：
52.选用美国3m公司的铝箔作为保护层单层包裹杜虹花叶，以水为约束层，将铝箔包裹的杜虹花叶置于nd:yag激光器内进行激光冲击处理，激光冲击处理时激光器的波长为2.5μm，脉冲宽度为25ns，激光冲击功率密度为0.4gw/cm2，能量为6j，激光冲击的时间为12min，完成后取出备用；
53.(2)深冷处理：
54.将步骤(1)中激光冲击波处理后的铝箔包裹的杜虹花叶浸入液氮中，进行深冷处理，处理35s；
55.(3)超微粉碎处理：
56.将步骤(2)中的杜虹花叶从液氮中取出后立马置于超微粉碎机内进行超微粉碎处理，控制粉碎机的转速为5000rpm，粉碎25min后得杜虹花叶粉末备用；
57.(4)浸提处理：
58.利用索氏提取装置，以乙醇为浸提剂，对步骤(3)中所得的杜虹花叶粉末进行反复浸提3.5h，浸提后利用旋转蒸发仪浓缩至无醇味，得提取物备用；
59.(5)分离纯化：
60.将步骤(4)中所得的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化即可，色谱仪旋转速度为870rpm，流动相流速为2.25ml/min，柱温为30℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花糖苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分。
61.实施例3
62.一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法，包括如下步骤：
63.(1)激光冲击波处理：
64.选用美国3m公司的铝箔作为保护层单层包裹杜虹花叶，以水为约束层，将铝箔包裹的杜虹花叶置于nd:yag激光器内进行激光冲击处理，激光冲击处理时激光器的波长为3μm，脉冲宽度为30ns，激光冲击功率密度为0.5gw/cm2，能量为8j，激光冲击的时间为14min，完成后取出备用；
65.(2)深冷处理：
66.将步骤(1)中激光冲击波处理后的铝箔包裹的杜虹花叶浸入液氮中，进行深冷处理，处理40s；
67.(3)超微粉碎处理：
68.将步骤(2)中的杜虹花叶从液氮中取出后立马置于超微粉碎机内进行超微粉碎处理，控制粉碎机的转速为6000rpm，粉碎30min后得杜虹花叶粉末备用；
69.(4)浸提处理：
70.利用索氏提取装置，以乙醇为浸提剂，对步骤(3)中所得的杜虹花叶粉末进行反复浸提3～4h，浸提后利用旋转蒸发仪浓缩至无醇味，得提取物备用；
71.(5)分离纯化：
72.将步骤(4)中所得的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化即可，色谱仪旋转速度为950rpm，流动相流速为3ml/min，柱温为35℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花糖苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分。
73.实施例4
74.一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法，包括如下步骤：
75.(1)深冷处理：
76.将铝箔包裹的杜虹花叶浸入液氮中，进行深冷处理，处理35s；
77.(2)超微粉碎处理：
78.将步骤(1)中的杜虹花叶从液氮中取出后立马置于超微粉碎机内进行超微粉碎处理，控制粉碎机的转速为5000rpm，粉碎25min后得杜虹花叶粉末备用；
79.(3)浸提处理：
80.利用索氏提取装置，以乙醇为浸提剂，对步骤(2)中所得的杜虹花叶粉末进行反复浸提3.5h，浸提后利用旋转蒸发仪浓缩至无醇味，得提取物备用；
81.(4)分离纯化：
82.将步骤(3)中所得的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化即可，色谱仪旋转速度为870rpm，流动相流速为2.25ml/min，柱温为30℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花
糖苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分。
83.实施例5
84.一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法，包括如下步骤：
85.(1)激光冲击波处理：
86.选用美国3m公司的铝箔作为保护层单层包裹杜虹花叶，以水为约束层，将铝箔包裹的杜虹花叶置于nd:yag激光器内进行激光冲击处理，激光冲击处理时激光器的波长为2.5μm，脉冲宽度为25ns，激光冲击功率密度为0.4gw/cm2，能量为6j，激光冲击的时间为12min，完成后取出备用；
87.(2)超微粉碎处理：
88.将步骤(1)中激光冲击波处理后的杜虹花叶置于超微粉碎机内进行超微粉碎处理，控制粉碎机的转速为5000rpm，粉碎25min后得杜虹花叶粉末备用；
89.(3)浸提处理：
90.利用索氏提取装置，以乙醇为浸提剂，对步骤(2)中所得的杜虹花叶粉末进行反复浸提3.5h，浸提后利用旋转蒸发仪浓缩至无醇味，得提取物备用；
91.(4)分离纯化：
92.将步骤(3)中所得的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化即可，色谱仪旋转速度为870rpm，流动相流速为2.25ml/min，柱温为30℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花糖苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分。
93.实施例6
94.一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法，包括如下步骤：
95.(1)超微粉碎处理：
96.将杜虹花叶置于超微粉碎机内进行超微粉碎处理，控制粉碎机的转速为5000rpm，粉碎25min后得杜虹花叶粉末备用；
97.(2)浸提处理：
98.利用索氏提取装置，以乙醇为浸提剂，对步骤(1)中所得的杜虹花叶粉末进行反复浸提3.5h，浸提后利用旋转蒸发仪浓缩至无醇味，得提取物备用；
99.(3)分离纯化：
100.将步骤(2)中所得的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化即可，色谱仪旋转速度为870rpm，流动相流速为2.25ml/min，柱温为30℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花糖苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分。
101.实施例7
102.一种从杜虹花叶中提取制备毛蕊花糖苷的方法，包括如下步骤：
103.(1)激光冲击波处理：
104.选用美国3m公司的铝箔作为保护层单层包裹杜虹花叶，以水为约束层，将铝箔包裹的杜虹花叶置于nd:yag激光器内进行激光冲击处理，激光冲击处理时激光器的波长为2.5μm，脉冲宽度为25ns，激光冲击功率密度为0.4gw/cm2，能量为6j，激光冲击的时间为12min，完成后取出备用；
105.(2)深冷处理：
106.将步骤(1)中激光冲击波处理后的铝箔包裹的杜虹花叶浸入液氮中，进行深冷处
理，处理35s；
107.(3)粉碎处理：
108.将步骤(2)中的杜虹花叶从液氮中取出后立马置于粉碎机内进行粉碎处理，控制粉碎机的转速为5000rpm，粉碎25min后得杜虹花叶粉末备用；
109.(4)浸提处理：
110.利用索氏提取装置，以乙醇为浸提剂，对步骤(3)中所得的杜虹花叶粉末进行反复浸提3.5h，浸提后利用旋转蒸发仪浓缩至无醇味，得提取物备用；
111.(5)分离纯化：
112.将步骤(4)中所得的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化即可，色谱仪旋转速度为870rpm，流动相流速为2.25ml/min，柱温为30℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花糖苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分。
113.为了对比本技术技术效果，分别用上述实施例2、实施例4～7的方法对应制备毛蕊花糖苷，然后测定各组方法对应的毛蕊花糖苷的提取率。
114.具体试验对比数据如下表1所示：
115.表1
[0116][0117][0118]
由上表1可以看出，将实施例4、实施例5与实施例2相比，得出在浸提之前进行激光冲击波处理和深冷处理，能有效的提高毛蕊花糖苷的浸提率，将实施例6与实施例2、实施例4、实施例5相比，得出激光冲击波处理与深冷处理具有相互协同增强的效果，能显著促进杜虹花叶中有效成分的融出，从而提高毛蕊花糖苷的提取率，将实施例7与实施例2相比，得出超微粉碎相比较普通粉碎能显著提高提取率。
[0119]
以上所述仅为本发明的较佳实施例，但本发明不以所示限定实施范围，凡是依照本发明的构想所作的改变，或修改为等同变化的等效实施例，仍未超出说明书所涵盖的精神时，均应在本发明的保护范围内。