一种蔷薇科樱属植物瓶外生根的方法与流程

1.本发明属于组培生根技术领域，具体涉及一种蔷薇科樱属植物瓶外生根的方法。


背景技术：

2.近年来，随着科学技术的迅猛发展，植物组织培养技术已进入生产应用阶段，广泛应用于花卉、果树大规模的离体快繁。植物组培脱毒苗木快繁可在人工控制条件下一年四季生产，并在短时间内获得大量组培脱毒苗木。但组培苗在无菌条件下、专用培养基中多次转接培养，生产成本高；由其生根苗的移栽，从室内到室外，由瓶内的弱光、恒温、近饱和湿度、无菌环境逐渐向自然环境条件转化，对生产环境要求高，温湿度控制难度大，是制约组培脱毒苗规模化、产业化生产的瓶颈。


技术实现要素：

3.有鉴于此，本发明的目的在于提供一种蔷薇科樱属植物瓶外生根的方法，提高蔷薇科樱属植物的组培苗生根率，且生产设施设备简易，操作简单，生产成本低，出苗率高，适用于欧李组培苗工厂化生产。
4.为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
5.本发明提供了一种蔷薇科樱属植物瓶外生根的方法，包括以下步骤：(1)将蔷薇科樱属植物的组培丛生芽切割成单芽接种至壮苗培养基中进行壮苗培养，得壮苗；所述壮苗培养基以1/2ms培养基为基础培养基，还包括：naa 0.05mg/l、iba 0.2mg/l、糖15g/l、ccc 15mg/l和蔗糖15g/l；
6.(2)对所述壮苗进行遮阳炼苗3～4d，扦插至移栽基质中进行栽后管理，得生根苗；所述移栽基质包括蛭石。
7.优选的，所述蔷薇科樱属植物包括欧李。
8.优选的，步骤(1)所述单芽带顶芽，株高2～3cm。
9.优选的，步骤(1)所述壮苗培养的光照强度为1800～2000lx，光照时间为16h/d。
10.优选的，步骤(2)选择株高4～5cm的壮苗进行遮阳炼苗。
11.优选的，步骤(2)所述遮阳炼苗包括保持光照度2000
‑
3000lx，温度为24～26℃，湿度在80％以上。
12.优选的，步骤(2)所述移栽基质在使用前还包括浇透水和消毒，所述消毒包括利用高锰酸钾和多菌灵的混合溶液进行消毒。
13.优选的，所述混合溶液中高锰酸钾的质量百分含量为0.5％，多菌灵的质量百分含量为0.08％。
14.优选的，步骤(2)所述扦插的深度为1～2cm，在所述扦插后盖薄膜和拱棚。
15.优选的，步骤(2)所述栽后管理，包括：每天早晨和晚上喷洒营养液，并保持湿度在80％以上。
16.有益效果：本发明提供了一种蔷薇科樱属植物瓶外生根的方法，减去了组培苗瓶
内生根和瓶内生根苗移栽的环节，大幅度降低了组培苗生产的成本，同时又提高了出苗率。本发明所述方法通过模拟试管苗瓶内生根环境，使组培小苗在较封闭的、带有营养液的基质中使之生根，后逐步撤去营养液、塑料膜、直接进入基质栽培阶段。本发明所述方法合并了组培苗瓶内生根和移栽的过程，使组培小苗直接在瓶外、移栽基质中生根，简化了生产环节，降低了生产成本，提高了出苗率。本发明实施例中对欧李组培苗进行所述瓶外生根，生根率最高可达80.6％。
附图说明
17.图1为实施例2的组培苗丛芽图；
18.图2为实施例2的组培苗壮苗图；
19.图3为实施例2的组培苗移栽后瓶外生根情况；
20.图4为实施例2的不同激素处理下瓶外生根10d生长情况；
21.图5为实施例2的不同激素处理下瓶外生根30d生长情况；
22.图6为实施例2的不同激素处理根系生长情况比较。
具体实施方式
23.本发明提供了一种蔷薇科樱属植物瓶外生根的方法，包括以下步骤：(1)将蔷薇科樱属植物的组培丛生芽切割成单芽接种至壮苗培养基中进行壮苗培养，得壮苗；所述壮苗培养基以1/2ms培养基为基础培养基，还包括：naa 0.05mg/l、iba 0.2mg/l、糖15g/l、ccc 15mg/l和蔗糖15g/l；
24.(2)对所述壮苗进行遮阳炼苗3～4d，扦插至移栽基质中进行栽后管理，得生根苗；所述移栽基质包括蛭石和珍珠岩泥炭的混合物。
25.在本发明中，常规组培苗生根在组培瓶内完成，本发明所述瓶外为在组培瓶外完成生根。
26.本发明将蔷薇科樱属植物的组培丛生芽切割成单芽接种至壮苗培养基中进行壮苗培养，得壮苗；所述壮苗培养基以1/2ms培养基为基础培养基，还包括：naa 0.05mg/l、iba 0.2mg/l、糖15g/l、ccc 15mg/l和蔗糖15g/l。本发明所述蔷薇科樱属植物优选包括欧李，本发明对所述欧李的品种并没有特殊限定，实施例中以农大6号(晋审果(认)2012001)和农大7号(晋审果(认)2010005)为例进行说明，但不能仅将其认定为本发明的全部保护范围。本发明优选长势良好，叶片鲜绿的组培芽，进行壮苗培养。本发明优选将所述将组培丛生芽分单株剪下，选择带顶芽，株高2～3cm的单芽转接至壮苗培养基中，培养40d，待苗高4～5cm时进行炼苗。本发明所述壮苗培养的光照强度为1800～2000lx，光照时间为16h/d。
27.得壮苗后，本发明对所述壮苗进行遮阳炼苗3～4d，扦插至移栽基质中进行栽后管理；所述移栽基质包括蛭石和珍珠岩泥炭的混合物。
28.本发明优选将上述壮苗放置在带有遮阳网的炼苗室，温度控制在24～26℃，培养3～4d，且在所述炼苗时，保持光照度2000
‑
3000lx，湿度在80％以上。本发明在所述遮阳炼苗后，优选将幼苗从瓶中取出，用自来水洗掉幼苗根部的培养基，再用高锰酸钾水溶液(质量百分含量为0.5％)进行消毒，扦插在移栽基质中，所述扦插深度优选为1～2cm。本发明在所述扦插后优选加盖薄膜拱棚，并保持拱棚内湿度控制在80％以上。
29.本发明所述移栽基质优选为蛭石。本发明所述移栽基质在使用前，优选还包括将其分装至育苗容器中，浇透水，并用高锰酸钾和多菌灵的混合溶液对基质进行消毒，所述混合溶液中高锰酸钾的质量百分含量优选为0.5％，多菌灵的质量百分含量优选为0.08％。
30.本发明所述栽后管理，优选包括：每天早晨和晚上喷洒营养液，保持叶片表面湿润且基质含水量丰富，并保持湿度在80％以上，且在所述栽后管理的光照强度和光照时间同壮苗培养。本发明所述营养液优选包括吲哚乙酸(iba)0.2mg/l的水溶液、naa 0.2mg/l的水溶液或iba(0.2mg/l) naa(0.2mg/l)的混合溶液，每次喷洒至移栽基质保持湿润为宜。利用本发明所述方法，栽后管理30d天后，生根率可达80％以上，根长4～6cm；当营养钵小苗叶片变绿变厚，根系长度达4～6cm时，将小苗单株移栽至土和腐熟有机肥的营养钵中，及时浇透水，待小苗长至5cm以上，带土移栽至大田，参照大田育苗方法管理。
31.下面结合实施例对本发明提供的一种蔷薇科樱属植物瓶外生根的方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
32.实施例1
33.欧李组培苗的瓶外生根方法，包括生根材料的剪取、生根设施的准备、营养液的配置、组培小苗的扦插、生根期管理、炼苗期管理、分栽期管理步骤：
34.瓶外生根苗的选择：选择长势良好，叶片鲜绿的组培芽，进行生根培养；
35.壮苗培养：将组培苗分单株剪下，选择带顶芽，株高2～3cm的单芽转接至壮苗培养基(1/2ms naa 0.05mg/l iba 0.2mg/l 15g/l糖 ccc 15mg/l 蔗糖15g/l)中，培养40d，待苗高4～5cm时，进行炼苗；
36.遮阳炼苗：打开瓶盖，在有遮阳网的炼苗室，温度控制在24～26℃，培养3～4d，且在所述炼苗时，保持光照度2000
‑
3000lx，湿度在80％以上。
37.基质准备及处理：将经过灭菌处理后的移栽基质(蛭石)分装至穴盘中，并将其浇透营养液。
38.营养液的配置：1号营养液：1/2ms naa 0.2mg/l；2号营养液：1/2ms iba0.2mg/l；3号营养液：naa0.2mg/l iba 0.2mg/l；1/2ms为对照。
39.组培苗瓶外生根：将幼苗从瓶中取出，用自来水洗掉幼苗根部的培养基，再用高锰酸钾水进行消毒，栽种至穴盘中，并加盖薄膜拱棚。
40.栽后管理：栽种后每天早晨和晚上喷洒营养液(0.2mg/l iba水溶液)，保持叶片表面湿润且基质含水量丰富，30d天后，统计生根率如表1所示，根长4～6cm，等小苗长到5～10cm时，带土移入大田，参照大田育苗方法管理。
41.表1实施例1欧李组培苗瓶外生根统计
[0042][0043]
实施例2
[0044]
瓶外生根苗的选择：选择长势良好，叶片鲜绿的组培芽(图1)，进行生根培养；
[0045]
壮苗培养：将组培苗分单株剪下，选择带顶芽，株高2～3cm的单芽转接至壮苗培养基(1/2ms naa 0.05mg/l iba 0.2mg/l 15g/l糖 ccc 15mg/l 蔗糖15g/l)中，培养40d，待苗高4～5cm时，进行炼苗(图2)；
[0046]
炼苗：打开瓶盖，继续培养2～3d。
[0047]
基质准备及处理：将经过灭菌处理的移栽基质(蛭石)装至穴盘中，并将其浇透营养液。
[0048]
营养液的配置:1号：h2o iba 0.2mg/l、2号营养液：h2o naa 0.2mg/l、3号营养液：h2o naa 0.2mg/l iba 0.2mg/l，h2o作对照。
[0049]
组培苗瓶外生根：将幼苗从瓶中取出，用自来水洗掉幼苗根部的培养基，再用高锰酸钾水进行消毒，栽种至穴盘中，并加盖薄膜拱棚：
[0050]
栽后管理：栽种后每天早晨和晚上喷洒营养液，保持叶片表面湿润且基质含水量丰富，瓶外生根如图3所示，不同激素处理10d后的生根统计如图4所示，不同激素处理30d后的生根统计如图5和表2所示，根系生长情况如图6所示，生根率可达80.6％，根长4～6cm，等小苗长到5～10cm时，带土移入大田，参照大田育苗方法管理。
[0051]
表2实施例2欧李组培苗瓶外生根统计
[0052][0053]
实施例3
[0054]
瓶外生根苗的选择：选择长势良好，叶片鲜绿的组培芽，进行生根培养；
[0055]
壮苗培养：将组培苗分单株剪下，选择带顶芽，株高2～3cm的单芽转接至壮苗培养基(1/2ms naa 0.05mg/l iba 0.2mg/l 15g/l糖 ccc 15mg/l 蔗糖15g/l)中，培养40d，待苗高4～5cm时，进行炼苗；
[0056]
遮阳炼苗：打开瓶盖，在有遮阳网的炼苗室，温度控制在24～26℃，培养3～4d，且在所述炼苗时，保持光照度2000
‑
3000lx，湿度在80％以上。
[0057]
不同移栽基质准备及处理：1号基质：蛭石；2号基质：蛭石和珍珠岩泥炭的混合物，且蛭石和珍珠岩泥炭的体积比优选为1:1；3号基质为珍珠岩泥炭。分别将经过灭菌处理不同移栽基质装至穴盘中，并将其浇透营养液
[0058]
营养液的配置:h2o iba 0.2mg/l，h2o作对照。
[0059]
组培苗瓶外生根：将幼苗从瓶中取出，用自来水洗掉幼苗根部的培养基，再用高锰酸钾水进行消毒，栽种至穴盘中，并加盖薄膜拱棚：
[0060]
栽后管理：栽种后每天早晨和晚上喷洒营养液，保持叶片表面湿润且基质含水量丰富，30d天后，统计结果如表3所示，生根率可达80.6％，根长4～6cm，等小苗长到5～10cm时，带土移入大田，参照大田育苗方法管理。
[0061]
表3实施例3欧李组培苗瓶外生根统计
[0062][0063]
综上可知，实施例3中1号营养液、2号营养液和3号营养液对欧李瓶外生根的作用效果较好；其中1号营养液的瓶外生根效果最佳，平均生根率高达80.6％。
[0064]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。