一种喹啉酸合酶突变体及其应用的制作方法

技术特征：
1.喹啉酸合酶突变体，其特征在于，以谷氨酸棒杆菌野生型喹啉酸合酶的氨基酸序列为参考序列，所述喹啉酸合酶突变体含有第312位天冬氨酸被除天冬氨酸以外的氨基酸取代的突变。2.根据权利要求1所述的喹啉酸合酶突变体，其特征在于，以谷氨酸棒杆菌野生型喹啉酸合酶的氨基酸序列为参考序列，所述喹啉酸合酶突变体含有第312位天冬氨酸被天冬酰胺取代的突变；优选地，所述喹啉酸合酶突变体具有如seq id no.1所示的氨基酸序列。3.编码权利要求1或2所述的喹啉酸合酶突变体的核酸。4.含有权利要求3所述的核酸的生物材料，所述生物材料为表达盒、载体或宿主细胞。5.权利要求1或2所述的喹啉酸合酶突变体或权利要求3所述的核酸或权利要求4所述的生物材料的如下任一种应用：(1)提高微生物的依赖还原力合成的代谢物的产量、生产强度或转化率；(2)提高微生物的还原力水平；(3)提高微生物的喹啉酸的产量、生产强度或转化率。6.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物与出发菌株相比，喹啉酸合酶的表达量和/或活性增强；优选地，所述重组微生物表达权利要求1或2所述的喹啉酸合酶突变体。7.根据权利要求6所述的重组微生物，其特征在于，所述重组微生物为棒杆菌属细菌或短杆菌属细菌；优选地，所述棒杆菌属细菌为选自谷氨酸棒杆菌(corynebacterium glutamicum)、有效棒杆菌(corynebacterium efficiens)、钝齿棒杆菌(corynebacterium crenatum)、嗜热产氨棒杆菌(corynebacterium thermoaminogenes)、产氨棒杆菌(corynebacterium aminogenes)中的一种；所述短杆菌属细菌为选自黄色短杆菌(brevibacterium flavum)、乳糖发酵短杆菌(brevibacterium lactofermentum)中的一种；更优选地，所述重组微生物为谷氨酸棒杆菌。8.权利要求6或7所述的重组微生物的构建方法，其特征在于，包括：使所述重组微生物表达酶活性增强的喹啉酸合酶突变体，或者，增加所述喹啉酸合酶的编码基因的拷贝数，或者，将所述喹啉酸合酶的编码基因的转录和/或翻译调控元件替换为活性更高的调控元件；优选地，所述方法包括：将携带编码权利要求1或2的喹啉酸合酶突变体的基因的重组质粒导入出发菌株中。9.权利要求6或7所述的重组微生物的如下任一种应用：(1)依赖还原力合成的代谢物的发酵生产；(2)喹啉酸的发酵生产。10.一种生产依赖还原力合成的代谢物或喹啉酸的方法，其特征在于，包括将权利要求6或7所述的重组微生物进行发酵培养的步骤。

技术总结
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种喹啉酸合酶突变体及其应用。本发明提供一种喹啉酸合酶突变体，以谷氨酸棒杆菌野生型喹啉酸合酶的氨基酸序列为参考序列，所述喹啉酸合酶突变体含有第312位天冬氨酸被天冬酰胺取代的突变。该喹啉酸合酶突变体具有显著增强的喹啉酸合酶的催化活性，能够增强微生物细胞NADH、NADPH的合成能力，提高其还原力水平，进而能够显著促进喹啉酸和依赖还原力合成的代谢物的积累。本发明提供的表达该喹啉酸合酶突变体的重组微生物的还原力水平显著提高，有利于喹啉酸以及谷氨酸、赖氨酸等依赖还原力的代谢物的产量和转化率的提升。产量和转化率的提升。


技术研发人员：牛松峰 程江红 贾贝贝 李岩
受保护的技术使用者：廊坊梅花生物技术开发有限公司
技术研发日：2021.05.31
技术公布日：2021/10/19