促细胞团消化解离液及细胞计数方法与流程

技术特征：
1.一种促细胞团消化解离液，其特征在于，包括以质量百分比计的以下原料：其余为水。2.根据权利要求1所述的促细胞团消化解离液，其特征在于，所述聚乙二醇辛基苯基醚以质量百分比计的含量为1％～2％。3.根据权利要求1所述的促细胞团消化解离液，其特征在于，所述两性离子型去垢剂为3
‑
[3
‑
(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐或3
‑
[(3
‑
胆固醇氨丙基)二甲基氨基]
‑2‑
羟基
‑1‑
丙磺酸。4.根据权利要求1所述的促细胞团消化解离液，其特征在于，所述ph调节剂为正磷酸。5.根据权利要求1所述的促细胞团消化解离液，其特征在于，所述ph调节剂以质量百分比计的含量为4％～5％。6.一种细胞计数方法，其特征在于，包括以下步骤：将载有细胞的载体从生物反应器中转移到离心管内；添加磷酸缓冲盐溶液至所述离心管内以清洗载体，清洗完毕后除去磷酸缓冲盐溶液；添加促细胞团消化解离液至所述离心管内处理并促使细胞团解离，所述促细胞团消化液为如权利要求1
‑
5任一项所述的促细胞团消化解离液；加入染色剂对细胞核进行染色；将离心管内样品稀释至计数器的工作范围，通过对细胞核计数以完成细胞的计数。7.根据权利要求6所述的细胞计数方法，其特征在于，所述载有细胞的载体为细胞培养支架材料，所述细胞在所述细胞培养支架材料上成细胞团样三维类组织结构设置。8.根据权利要求6所述的细胞计数方法，其特征在于，多次添加磷酸缓冲盐溶液至所述离心管内以对细胞的载体进行反复冲洗。9.根据权利要求6所述的细胞计数方法，其特征在于，所述添加促细胞团消化解离液至所述离心管内后，对所述离心管内样品涡旋0.8～1.5min或者静置2～3min。10.根据权利要求6所述的细胞计数方法，其特征在于，所述染色剂为台盼蓝，且所述台盼蓝的终浓度为0.03～0.05％。

技术总结
本申请提供一种促细胞团消化解离液及细胞计数方法，所述促细胞消化解离液包括以质量百分比计的以下原料：聚乙二醇辛基苯基醚1％～5％；烷基糖苷0.1％～4％；非表面活性剂型磺基甜菜碱0.1％～1％；两性离子型去垢剂0.1％～1％；pH调节剂1％～10％；其余为水。该促细胞消化解离液可通过破坏细胞的脂质双分子层，溶解胞质和细胞膜，并破坏分子间的微弱结合键，从而实现细胞团的消化解离，对细胞团的解离效率高，使得本申请的细胞计数方法可实现对生物反应器内支架材料上培养细胞数量的快速、低成本测定。本测定。本测定。


技术研发人员：高毅 李阳 张贵锋 彭青
受保护的技术使用者：广东乾晖生物科技有限公司
技术研发日：2021.07.07
技术公布日：2021/10/28