一种黑果枸杞黄色花青素的制备方法与流程

1.本发明涉及植物提取技术领域，具体是一种黑果枸杞黄色花青素的制备方法。


背景技术：

2.黑果枸杞(lycium ruthenicum murr.)系茄科枸杞属，主要分布于中亚地区，在我国分布于青海、宁夏、新疆、甘肃、陕西等地，是我国干旱地区特有的多年生灌木野生植物。据《四部医典》记载，藏医将黑果枸杞用于治疗心热病、心脏病、月经不调、停经等病症；民间则用作滋补强壮、明目及降压药等。研究表明，黑果枸杞中含有多糖、黄酮、原花色素、花青素、酚酸等多种活性成分，具有抗疲劳、降血糖、抗氧化、抑制肿瘤、营养保健等功效。
3.花青素(anthocyanins)，是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，属黄酮类化合物。花青素主要以葡萄糖苷、鼠李糖苷等形式存在与植物的果实、表皮、花中。黑果枸杞中花青素含量极高，其中90%以上的花青素为矮牵牛素类衍生物，具有抗氧化，保护视力，抑制肿瘤等功能，有重要的生物活性和提取价值。但因黑果枸杞花青素具有易氧化、热敏性，稳定性极差等特点，且通过糖苷键连接的大量糖链会直接影响花青素的纯度，故提取分离纯化比较困难，现有技术中对黑果枸杞花青素的有效提取率较低。
4.目前，国内外报道黑果枸杞花青素主要以黑果枸杞果实为原料，采用溶剂浸提的方法，辅以超声、微波和酶等现代技术进行常规制备，得到的黑果枸杞花青素均为洋红色，其水溶液通常均为洋红色，只有在特定ph值下，呈现与亮蓝色（cas：3844
‑
45
‑
9）相似的颜色特征。如专利公布号cn105339437a所述的含有花青素苷的天然蓝色着色剂，如专利公布号cn109574979a所述的花青素是一种蓝色的着色剂。但未见有相关黄色花青素天然着色剂报道。
5.综上所述，可知现有含有花青素苷的天然黄色着色剂未有报道。故而，提供一种制备简单高效、花青素为黄色的黑果枸杞花青素具有很重要的意义和非常好的市场前景。


技术实现要素：

6.为了解决上述问题，本发明涉及提供一种简单高效且花青素为黄色的黑果枸杞花青素的方法。
7.具体地，本发明提供了从黑果枸杞中提取制备黄色花青素的方法，它包括如下内容：(1)将黑果枸杞超微粉加入无机盐a水溶液和亲水性低分子有机溶剂中，提取，静置分相；(2)除去上相溶剂，加入无水乙醇析出无机盐，过滤后，液体部分除去无水乙醇得到固形物, 将固形物复溶于无机盐b水溶液中，静置，减压除去溶剂后即得黄色花青素；所述无机盐a选自氯化钠、硫酸铵、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾中的一种或两种以上的组合；亲水性低分子有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇中的一种或两种以上的组合；无机盐b选自氯化镁：氯化钙：氯化铝为0.2m:0.6m:0.3m。
8.进一步地，无机盐a选自硫酸铵。
9.进一步地，亲水性低分子有机溶剂选自乙醇。
10.其中，步骤（2）中，将固形物以0.1
‑
3mg/ml复溶于0
‑
2mol/l浓度中的无机盐b水溶液。
11.其中，亲水性低分子有机溶剂占无机盐a水溶液和亲水性低分子有机溶剂总质量的20
‑
40%。
12.其中无机盐a占无机盐a水溶液和亲水性低分子有机溶剂总质量的15
‑
25%。
13.其中，黑果枸杞超微粉与无机盐a水溶液和亲水性低分子有机溶剂总质量比为1：5
‑
1：20。
14.其中，步骤（1）的提取方法，可以采用常规提取办法，例如超声、浸渍、回流等等。本发明中可以采用超声提取。
15.本发明还提供了上述方法制备的黄色花青素。
16.本发明还提供了一种黄色着色剂，其特征在于：它包括权利要求9所述的黄色花青素。
17.本发明提供的黑果枸杞黄色花青素：水溶液在500~780nm有强吸收峰，色调角h
ab
值为85~100；粉末为具有金属光泽的黄色粉末，其在780nm有最高反射峰。
18.本发明方法可以有效得到黑果枸杞黄色花青素，且与现有黄色着色剂相比，具有以下优点：（1）该花青素与亮黄色（cas：56279
‑
27
‑
7）具有相似的颜色特征，可作为化工合成黄色着色剂的天然替代物；（2）工艺步骤简单，工序精炼，制备效率高。
附图说明
19.图1 产品分光光光度法图谱图2 cie1931观察者坐标图图3 不同无机盐处理后的cie1931观察者坐标图
具体实施方式
20.为了使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步说明本发明，并不以任何方式限制本发明，这些实施例只用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在不背离本发明的技术解决方案的前提下，对本发明所做的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。
21.实施例1一种黑果枸杞黄色花青素及其制备方法(1)黑果枸杞干果用超微粉碎机粉碎，过100目筛网，得黑果枸杞超微粉；(2)称取1.7g硫酸铵加入5.9g水配置成水溶液，然后加入2.4g无水乙醇，制备乙醇
‑
硫酸铵双水相体系，将1.0g黑果枸杞超微粉加入双水相体系中，超声协助萃取30min，室温下静置1h分层；(3)将步骤(2)中上相50℃下旋转蒸发溶剂后，用无水乙醇溶解过滤回收无机盐，再次50℃旋转蒸发回收无水乙醇，即得花青素粗品50毫克，测得花青素含量为14%，将花青
素以浓度0.2mg/ml复溶于混合离子溶液中，离子溶液中各氯化镁：氯化钙：氯化铝摩尔浓度比为0.2m:0.6m:0.3m，静置平衡20min等待反应完全，旋转蒸发仪60℃蒸干溶剂后即得黄色花青素；分析评价参考《sn/t4675.25
‑
2016 出口葡萄酒颜色的测定cie1976（l*a*b*）色空间法》第2~5页的规定，测定样品在380~780nm波长范围内的吸光度，对吸光度进行相对色刺激函数、色匹配函数进行积分，再与标准三刺激值比较，计算出样品的色调角h
ab
值；参考《gb/t3979
‑
2008物体色的测量方法》第2~4页的规定，测定样品的反射光谱，计算出样品的色调角h
ab
值；参考《aoac officialmethod2005.02total monomeric anthocyanin pigment content offruitjuices, beverages, natural colorants and wines phdifferential method first action 2005》(j.aoac int. 88,1269(2005))的规定，测定样品的花青素含量。经测试，本发明方法制备得到的黑果枸杞花青素的0.2mg/ml水溶液，如图1所述在520~780nm有吸收峰，h
ab
值为99.32，如图2是该水溶液在cie1931观察者坐标的位置；ph值为7.0；黑果枸杞花青素为具有金属光泽的黄色粉末，其在780nm有最高反射峰；黑果枸杞花青素a的花青素含量为14%。
22.试验例采用实施例1中方法，探究比氯化镁：氯化钙：氯化铝比例与产物颜色之间的关系颜色测定方法参考《gb/t3979
‑
2008物体色的测量方法》，以0.2mg/ml花青素浓度进行检测；组1：黑果枸杞花青素原液组2：0.2：0.1：0.6组3：0.1：0.6：0.1组4：0.2：0.3：0.6组5：0.2：0.6：0.3结果如图3所示。
23.由图3可知，通过调整各个氯化金属物之间的比例使其达到不同的颜色，其原因为金属和花青素结合产生络合物，不同的络合物及络合比例产生不同的颜色，这也是花色素在不同植物花瓣上呈现各种不同颜色的原因之一，为了达到黄色我们可以选择组5作为最佳改色配方。
24.实施例2花青素粗品制备方法如下，其他步骤参见实施例1。
25.黑果枸杞干果用超微粉碎机粉碎，过150目筛网，得黑果枸杞超微粉；称取300g硫酸铵加入1300g水配置成水溶液，然后加入400g无水乙醇，制备乙醇
‑
硫酸铵双水相体系，将100g黑果枸杞超微粉加入双水相体系中，超声协助萃取60min，室温下静置3h分层；将上相旋转蒸发溶剂后，用无水乙醇溶解过滤回收无机盐，再次旋转蒸发回收无水乙醇，即得花青素粗品。
26.实施例3花青素粗品制备方法如下，其他步骤参见实施例1。
27.黑果枸杞干果用超微粉碎机粉碎，过80目筛网，得黑果枸杞超微粉；称取125g硫酸
铵加入200g水配置成水溶液，然后加入200g无水乙醇，制备乙醇
‑
硫酸铵双水相体系，将100g黑果枸杞超微粉加入双水相体系中，超声协助萃取20min，室温下静置2h分层；将上相旋转蒸发溶剂后，用无水乙醇溶解过滤回收无机盐，再次旋转蒸发回收无水乙醇，即得花青素粗品。
28.实施例4花青素粗品制备方法如下，其他步骤参见实施例1。
29.黑果枸杞干果用超微粉碎机粉碎，过100目筛网，得黑果枸杞超微粉；称取200g硫酸铵加入500g水配置成水溶液，然后加入300g无水乙醇，制备乙醇
‑
硫酸铵双水相体系，将100g黑果枸杞超微粉加入双水相体系中，超声协助萃取40min，室温下静置2h分层；将上相旋转蒸发溶剂后，用无水乙醇溶解过滤回收无机盐，再次旋转蒸发回收无水乙醇，即得花青素粗品。