一种银杏蜜环口服溶液多成分含量检测及其指纹图谱方法的构建与流程

技术特征：
1.一种银杏蜜环口服溶液多成分检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
⑴
、供试品溶液的制备：精密量取银杏蜜环口服溶液，置于量瓶中，用5～12％甲醇水溶液定容至刻度线，摇匀，取适量进行离心，其离心转速为10000～14000rpm，离心时间为8～12min，取上清液即得；
⑵
、混合对照品溶液的制备：分别取称定安赛蜜、5
‑
羟甲基糠醛、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、苯甲酸钠，使用5～15％甲醇水溶液稀释成对照品储备液；再称定尿苷、腺苷、鸟苷、山柰酚
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o
‑
芸香糖苷、异鼠李素
‑3‑
o
‑
芸香糖苷和槲皮素
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o
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(6”'
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p
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香豆酰基)
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β
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d
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葡萄糖基]
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α
‑
l
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鼠李糖苷，并使用30～50％甲醇水溶液及少量二甲基亚砜助溶稀释制备而成；
⑶
、色谱条件：色谱柱为十八烷基键合硅胶色谱柱；所述检测波长：252～256nm，检测流速：0.25～0.35ml/min，检测柱温：48～52℃，流动相：流动相a为0.1％～0.3甲酸水溶液，流动相b为甲醇；采用下述梯度洗脱程序为：0～3min，流动相a的体积百分比由94％匀速降至86％，流动相b的体积百分比由6％匀速上升至14％；3～6min流动相a的体积百分比由86％匀速降至77％，流动相b的体积百分比由14％匀速上升至23％；6～8.3min，流动相a的体积百分比由77％匀速降至69.5％，流动相b的体积百分比由23％匀速上升至30.5％；8.3～10.3min流动相a的体积百分比由69.5％匀速降至66.5％，流动相b的体积百分比由30.5％匀速上升至33.5％；10.3～12.5min，流动相a的体积百分比由66.5％匀速降至58.5％，流动相b的体积百分比由33.5％匀速上升至41.5％；12.5～19min流动相a的体积百分比由58.5％匀速降至26％；流动相b的体积百分比由41.5％匀速上升至74％；
⑷
、色谱峰的检测：对上述步骤
⑴
供试品溶液和步骤
⑵
对照品溶液，按照上述步骤
⑶
色谱条件，采用超高效液相色谱法检测色谱峰面积，采用外标法计算本发明药物中对应的多成分的含量。2.根据权利要求1所检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤
⑴
甲醇水溶液的浓度为10％。3.根据权利要求1所检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤
⑴
离心转速为12700rpm，离心时间为10min。4.根据权利要求1所检测方法，其特征在于，所述步骤
⑵
混合对照品中尿苷浓度为0.7688～49.20μg/ml、腺苷浓度为0.3712～23.76μg/ml、鸟苷浓度为0.2944～18.84μg/ml、安赛蜜浓度为2.400～153.6μg/ml、5
‑
羟甲基糠醛浓度为0.1024～6.552μg/ml、原儿茶酸浓度为0.2680～17.15μg/ml、对羟基苯甲酸浓度为0.09656～6.180μg/ml、苯甲酸钠浓度为28.30～1811μg/ml、山柰酚
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o
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芸香糖苷浓度为0.3717～23.79μg/ml、异鼠李素
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o
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芸香糖苷浓度为0.3698～23.67μg/ml、槲皮素
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o
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香豆酰基)
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β
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d
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葡萄糖基]
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α
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l
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鼠李糖苷浓度为0.6102～39.05μg/ml。5.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法步骤
⑶
检测波长：254nm，检测流速：0.3ml/min，检测柱温：50℃。6.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述色谱柱型号为：acquityhss t3。7.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述检测方法为指纹图谱检测方法，其
包括以下步骤：
⑴
、采用超高效液相色谱法对多批银杏蜜环口服溶液供试品溶液和对照品溶液进行检测，并记录指纹图谱；
⑵
、再将所述步骤
⑴
记录的指纹图谱全部导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件，并选择不同批次银杏蜜环口服溶液的指纹图谱中的共有特征色谱峰作为特征指纹峰，生成标准对照指纹图谱，计算各共有特征指纹峰的相对保留时间、相对峰面积。8.根据权利要求7所述检测方法，其特征在于，根据权利要求7所述指纹图谱检测方法生成指纹图谱包括19个特征指纹峰，通过液质联用技术及对照品比对鉴定了其中15个指纹峰，分别为：1号峰为尿苷、2号峰为腺苷、3号峰为鸟苷、4号峰为安赛蜜、5号峰为5
‑
羟甲基糠醛、7号峰为原儿茶酸、10号峰为对羟基苯甲酸、12号峰为苯甲酸钠、13号峰为芦丁和异槲皮苷、14号峰为槲皮素
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β
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d
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葡萄糖基]
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α
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l
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鼠李糖苷、15号峰为山柰酚
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芸香糖苷、16号峰为异鼠李素
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o
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芸香糖苷、17号峰为槲皮素
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o
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香豆酰基)
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β
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d
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葡萄糖基]
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α
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鼠李糖苷、18号峰为山柰酚
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o
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(2"
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β
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d
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葡萄糖基)
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α
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鼠李糖苷，19号峰为山柰酚
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o
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p
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香豆酰基)
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β
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d
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葡萄糖基]
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α
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l
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鼠李糖苷。

技术总结
本发明涉及一种银杏蜜环口服溶液多成分含量检测及其指纹图谱方法的构建，本发明建立的含量检测分析方法其精密度、重现性、稳定性、加样回收率良好。由此可知，该含量检测方法操作简便，准确可靠，可用于银杏蜜环口服溶液含量测定。该指纹图谱检测方法能同时检测银杏蜜环口服溶液中19个特征指纹峰，通过液质联用技术及对照品对比鉴定了其中15个指纹峰，分别为尿苷、腺苷、鸟苷、安赛蜜、5


技术研发人员：王益民 杨静 薛根 赫少清 张建 柴欣 于卉娟 崔英 王丹妮 王跃飞
受保护的技术使用者：邛崃天银制药有限公司
技术研发日：2021.09.01
技术公布日：2021/10/29