气相色谱测定盐酸苯海索中杂质1-环己基-1-苯乙醇含量的方法与流程

1.本发明属于药物技术领域，涉及药物杂质检测分析领域，具体涉及气相色谱测定盐酸苯海索中杂质1-环己基-1-苯乙醇含量的方法。


背景技术：

2.盐酸苯海索(trihexyphenidylhydrochloride)，化学名称：1-环己基-1-苯基-3-(1-哌啶基)-丙醇盐酸盐，结构式如下：
[0003][0004]
盐酸苯海索为中枢抗胆碱抗帕金森病药，用于治疗老年震颤病症,作用在于选择性阻断纹状体的胆碱能神经通路，而对外周作用较小，从而有利于恢复帕金森病患者脑内多巴胺和乙酰胆碱的平衡，改善患者的帕金森病症状。
[0005]
盐酸苯海索作为抗帕金森病常用药物，50年代就已在国外上市，在国外技术基础上，国内于60年代陆续上市，代表生产厂家有上海第六制药厂、常州康普药业有限公司、山东健康药业有限公司等单位，据调查目前国内的生产工艺路线与文献基本一致(《医药产品生产工艺汇编》1966版，434-435，《全国医药工艺汇编》1986版，835-837)。
[0006]
现有技术主要采用以下合成路线：
[0007]
盐酸苯海索目前通用的合成路径以苯乙酮为原料，与甲醛、盐酸哌啶在乙醇中进行曼尼希反应得到下述盐酸哌啶苯丙酮：
[0008][0009]
盐酸哌啶苯丙酮作为中间体，与氯代环已烷、镁屑进行格氏加成、得到下述化合物：
[0010]
[0011]
其经过水解，即可得到盐酸苯海索。
[0012]
按照上述路线合成盐酸苯海索的过程中，通过杂质分析，发现一种新的杂质，该杂质为1-环己基-1-苯乙醇，目前尚未见公开资料报道过该杂质的含量检测分析方法。
[0013]
药品上市前必须进行质量、安全性和效能科学评价，药物杂质与药物质量以及药物安全性密切相关，杂质的检测分析，对药品检验方法及质量标准的建立将会起着极大的促进作用。


技术实现要素：

[0014]
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供气相色谱测定盐酸苯海索中杂质1-环己基-1-苯乙醇含量的方法，该方法专属性、精密度、耐用性、稳定性均良好。
[0015]
本发明是通过以下技术方案实现的：
[0016]
气相色谱测定盐酸苯海索中杂质1-环己基-1-苯乙醇含量的方法，
[0017]
包括如下步骤：
[0018]
精密称取待测样品0.20g，置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密称取盐酸苯海索杂质1-环己基-1-苯乙醇(下面统一称为盐酸苯海索杂质5)对照品，加甲醇溶解并稀释制成2.0μg/ml的溶液，作为对照品溶液；
[0019]
精密量取对照品溶液和供试品溶液各1.0μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图；
[0020]
供试品溶液色谱图中如有与盐酸苯海索杂质5峰保留时间相同的色谱峰，按外标法以峰面积计算待测样品中杂质的含量。
[0021]
所述待测样品含盐酸苯海索杂质5不得超过0.10％。
[0022]
本发明的进一步改进方案为：
[0023]
所述气相色谱仪的色谱条件为：
[0024]
色谱柱：db-624(30m
×
0.320mm，1.80μm)毛细管柱；
[0025]
柱温：208℃～212℃；
[0026]
进样口温度：238℃～242℃；
[0027]
检测器：fid，以氮气为载气，检测器温度为250℃；
[0028]
分流比：2:1；
[0029]
柱流速：1.9ml/min～2.1ml/min；
[0030]
进样量：1.0μl。
[0031]
进一步的，所述柱温为210℃；所述进样口温度为240℃；所述柱流速为2.0ml/min。
[0032]
本发明的有益效果为：
[0033]
本发明提供的气相色谱法中盐酸苯海索杂质5的峰面积及保留时间rsd分别为0.87％、0.06％，表明仪器精密度良好；
[0034]
本发明提供的气相色谱法中空白溶剂、盐酸苯海索对盐酸苯海索杂质5的测定无干扰；盐酸苯海索杂质5测定方法专属性良好。
[0035]
本发明提供的气相色谱法中盐酸苯海索杂质5的检测限：0.16μg/ml，为限度的8％。
[0036]
本发明考察了不同流速、不同进样口温度、不同柱温对测定结果的影响，结果盐酸苯海索杂质5的rsd为1.66％，表明本发明提供的方法耐用性良好。
[0037]
本发明提供的气相色谱法测定12小时内盐酸苯海索杂质5的rsd为1.11％，结果表明盐酸苯海索杂质5溶液12小时稳定性良好。
附图说明
[0038]
图1为实施例1中对照品溶液的色谱图；
[0039]
图2为实施例1中供试品溶液的色谱图；
[0040]
图3为实施例2中空白溶剂的色谱图；
[0041]
图4为实施例2中对照品溶液的色谱图；
[0042]
图5为实施例2中盐酸苯海索供试品溶液的色谱图；
[0043]
图6为实施例2中盐酸苯海索供试品加对照品溶液的色谱图；
[0044]
图7为实施例4的色谱图。
具体实施方式
[0045]
试验仪器、对照品、试剂及色谱柱来源：
[0046][0047]
实施例1
[0048]
精密称取待测样品(批号：1803081)0.20g，置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密称取盐酸苯海索杂质5对照品，加甲醇溶解并稀释制成2.0μg/ml的溶液，作为对照品溶液；
[0049]
精密量取对照品溶液和供试品溶液各1.0μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，其中，气相色谱仪的色谱条件为：
[0050]
色谱柱：db-624(30m
×
0.320mm，1.80μm)毛细管柱；
[0051]
柱温：210℃；
[0052]
进样口温度：240℃；
[0053]
检测器：fid，以氮气为载气，检测器温度为250℃；
[0054]
分流比：2:1；
[0055]
柱流量：每分钟2.0ml/min；
[0056]
进样量：1.0μl。
[0057]
对照品溶液与供试品溶液色谱图分别如图1、图2所示，按外标法以峰面积计算待测样品中盐酸苯海索杂质5的含量为0.10％。
[0058]
实施例2：专属性
[0059]
(1)空白溶剂：甲醇。
[0060]
(2)对照品溶液：取盐酸苯海索杂质5约2mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液1ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
[0061]
(3)盐酸苯海索供试品溶液：取本品(批号：1803081)约0.20g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
[0062]
(4)盐酸苯海索供试品加对照品溶液(简称：供试品加标溶液)：取本品(批号：1803081)约0.20g，精密称定，置100ml量瓶中，加入1ml的对照品贮备液，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品加标溶液。
[0063]
精密量取上述溶液各1.0μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图(色谱图见图3～图6)。
[0064]
结果表明：空白溶剂、盐酸苯海索对盐酸苯海索杂质5测定无干扰；盐酸苯海索杂质5测定方法专属性良好。
[0065]
实施例3：仪器精密度
[0066]
精密量取对照品溶液1.0μl，重复进样6次，计算盐酸苯海索杂质5峰面积的rsd，结果见表:1。
[0067]
表1，仪器精密度(jb4014)
[0068][0069][0070]
结果表明：本方法的仪器精密度良好。
[0071]
实施例4：检测限
[0072]
用信噪比法确定检测限，以信噪比为3:1时相应浓度确定检测限。精密量取对照品溶液2ml，置10ml量瓶，用甲醇稀释至刻度，再精密量取2.5ml，置10ml量瓶，用甲醇稀释至刻
度，按基线噪音的3倍计算盐酸苯海索杂质5的检测限，结果为0.16μg/ml，为限度的8％。(色谱图见图7)
[0073]
实施例5：耐用性试验
[0074]
取盐酸苯海索杂质5约2mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液1ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
[0075]
取本品(批号：1803081)约0.20g，精密称定，置100ml量瓶中，加入1ml的对照品贮备液，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品加标溶液。
[0076]
精密量取供试品加标溶液及对照品溶液各1.0μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。
[0077]
通过改变柱流速(2.0
±
0.1ml/min)、进样口温度(240
±
2℃)和柱温(210
±
2℃)，测定盐酸苯海索杂质5的含量，结果见表2。
[0078]
表2，耐用性试验
[0079][0080][0081]
结果表明：本方法的耐用性良好。
[0082]
实施例6：溶液稳定性试验
[0083]
取本品(批号：1803081)约0.20g，精密称定，置100ml量瓶中，加入1ml的对照品贮备液，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为稳定性溶液。
[0084]
精密量取12小时内稳定性溶液1.0μl，间隔1h分别注入气相色谱仪，记录色谱图，计算峰面积的rsd。结果见表3。
[0085]
表3，溶液稳定性试验
[0086][0087]
结果表明：供试品溶液中的盐酸苯海索杂质5在12小时内稳定性良好。
[0088]
实施例7：样品中盐酸苯海索杂质5测定
[0089]
按照本发明的方法测定本公司7批盐酸苯海索样品(1706011、1707101、1709182、1712141、1712142、1803081、1811021)，结果如表4。
[0090]
表4，7批样品中盐酸苯海索杂质5测定
[0091][0092]
结果表明：按盐酸苯海索杂质5检测方法，7批盐酸苯海索样品中均未检出盐酸苯海索杂质5。