一种雪茄烟叶晾制提质减害调节剂及其使用方法与流程

本发明属于烟草种植生产技术领域，特别是在雪茄烟叶晾制时提质减害的调节剂。

背景技术：

雪茄烟晾制过程是品质形成的重要时期，最直观的是颜色的变化由绿色变为黄色，最终被氧化为褐色。雪茄烟晾制过程中，随着叶片饥饿代谢时间的增长，超氧化物歧化酶(sod)、过氧化物酶(pod)和过氧化氢酶(cat)的活性下降，防御酶体系功能丧失，细胞清除活性氧的能力下降，进而导致烟叶内部活性氧大量累积，膜系统遭到破坏，细胞膜破裂后细胞内各种物质和酶类、氧气、微生物混杂在一起，相互作用促使硝酸盐向亚硝酸盐转化，进而使晾制后的烟叶中亚硝胺(tsnas)含量升高。tsnas是一类已被确认与肺部、口腔、食道、胰脏、肝脏等器官肿瘤产生有关的物质，在鲜烟中几乎没有，但在晾制后的雪茄烟叶中可检测到。同时雪茄烟叶晾制周期长达40-50天，烟叶易出现霉变腐烂现象，造成严重经济损失。现阶段利用晾制期间化学调控改善烟叶品质的研究较少。

现有技术中，例如专利申请cn107613762a公开了减少烟草中的烟草特异性亚硝胺nnk的方法，然而该方法是利用基因工程技术，将含有编码pon降解酶的核苷酸序列的异源性核酸分子引入烟草植物、植物部分和/或植物细胞，从而减少转基因烟草植物和/或植物部分中的pon和/或nnk含量。这种方法前期工作繁琐复杂，对技术人员专业水平要求较高，成本加大。

又例如专利申请cn110786542a中公开了将采收的鲜烟叶在晾房内逐步干燥，干燥过程中分2次用05-101、j45、j54中至少一种菌种配制的od600值为1的菌液接种；将晾制后的烟叶采用集中堆垛进行发酵，发酵过程中分2次用05-101、j45、j54中至少一种菌种配制的od600值为1的菌液接种，即可得到低tsnas的雪茄烟烟叶，然而该方法通过给烟叶喷施菌液抑制tsnas的产生，存在菌种不能定殖或烟叶表面微环境不适宜而失效的风险。又例如专利申请cn111972698a中公开了褪黑素在降低雪茄烟发酵过程中烟草特有亚硝胺含量中的应用，向待发酵雪茄烟叶上喷施na2co3-nahco3缓冲液调节ph；配制不同浓度的褪黑素的喷施液；将褪黑素喷施液均匀喷洒在处理过的雪茄烟叶上即可。褪黑素不属于食品添加剂，允许作为保健食品原料使用，限制了其在烟叶上的使用。这两种方法操作较为繁琐。

技术实现要素：

针对以上现有技术的不足，本发明提供了一种雪茄烟叶晾制提质减害调节剂，这种调节剂能够有效降低烟草晾制、发酵制备过程中亚硝胺的含量，且采用的原料均为安全可靠的食品添加剂，作用机理完全不同于上述现有方法，具体通过以下技术实现。

一种雪茄烟叶晾制提质减害调节剂，所述调节剂为水溶液，且溶质包含l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖。

本发明的申请人偶然地发现了将l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖进行联用，能够有效降低雪茄烟叶在晾制、发酵过程中tsnas的产生，改善了雪茄烟的吸食质量和安全性。经申请人分析，可能是由于l-半胱氨酸可作为有效的外源处理应用于植物的抗逆境胁迫中，具有良好的抑菌和抗氧化性能；壳聚糖能够协调雪茄烟的化学成分、增加香气物质含量；茶多酚是天然活性物，抗菌活性高，这几种物质联用制成的调节剂复合物抗氧化效果更强，大大减轻晾制及发酵过程中雪茄烟叶片的氧化损伤，并抑制微生物活动，防止霉变的发生。目前尚未发现其他采用本发明的上述方法，达到降低烟叶tsnas含量的现有技术。

优选地，上述调节剂的所述溶质中，按质量浓度包含0.1-5g/ll-半胱氨酸、1-30g/l茶多酚、1-20g/l壳聚糖。

更优选地，上述调节剂的所述溶质中，按质量浓度包含0.5-3g/ll-半胱氨酸、5-20g/l茶多酚、5-10g/l壳聚糖。

进一步优选地，上述调节剂的所述溶质中，l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖的重量比例为1:10-15:5-10。

更进一步优选地，上述调节剂的所述溶质中，按质量浓度包含1.5g/ll-半胱氨酸、15g/l茶多酚、7.5g/l壳聚糖。

本发明还提供了上述雪茄晾制提质减害调节剂的使用方法，按以下任意一种方法使用：

在雪茄叶片采收前一天下午16点以后，喷施所述调节剂在叶片表面直至叶面湿润，然后进行常规晾制；

在雪茄叶片采收编烟并悬挂晾制时，喷施所述调节剂在叶片表面直至叶面湿润，然后进行常规晾制；

在雪茄叶片晾制结束进入发酵阶段时，喷施所述调节剂在叶片表面直至叶面湿润。

上述调节剂的使用方法中，叶片采收前一天、叶片晾制、叶片发酵是雪茄烟叶生产制备的3个必须环节，在这3个中任意1个环节对叶片喷施调节剂，就可以实现降低烟叶中tsnas含量的作用。

作为另一种上述调节剂的使用方法，也可以将所述调节剂的所述溶质浓度稀释一倍，在叶片采收编烟并悬挂晾制和雪茄叶片晾制结束进入发酵阶段时分别喷施稀释后的调节剂。

更优选地，上述两种使用方法，喷施的所述调节剂的用量为15-20l/亩。当采用第二种方法时，在叶片采收编烟并悬挂晾制和晾制结束进入发酵阶段这2个环节的稀释后的调节剂用量相同。

与现有技术相比，本发明的有益之处在于：本发明开创性地将l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖进行联用，能够有效降低雪茄烟叶在晾制、发酵过程中tsnas的产生，改善了雪茄烟的吸食质量和安全性。同时抑制霉变发生，降低了烟叶因霉变造成的经济损失。

附图说明

图1为本发明对采收的雪茄烟叶在晾制前喷施调节剂的示意图；

图2为本发明在晾制结束进入发酵阶段时对雪茄叶片喷施调节剂的示意图；

图3为本发明在采收前一天傍晚对雪茄叶片喷施调节剂的示意图：

具体实施方式

下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动条件下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

以下实施例和对比例所制备的调节剂溶液，如果不做特殊说明，则是将l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖溶于水中制备而成。

实施例1

本实施例提供的雪茄烟叶晾制提质减害调节剂溶液，调节l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖的浓度分别为1.5g/l、15g/l、7.5g/l。

实施例2

本实施例提供的雪茄烟叶晾制提质减害调节剂溶液，调节l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖的浓度分别为5g/l、1g/l、20g/l。

实施例3

本实施例提供的雪茄烟叶晾制提质减害调节剂溶液，调节l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖的浓度分别为0.1g/l、30g/l、1g/l。

实施例4

本实施例提供的雪茄烟叶晾制提质减害调节剂溶液，调节l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖的浓度分别为3g/l、5g/l、10g/l。

实施例5

本实施例提供的雪茄烟叶晾制提质减害调节剂溶液，调节l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖的浓度分别为0.5g/l、20g/l、5g/l。

实施例6

本实施例提供的雪茄烟叶晾制提质减害调节剂溶液，调节l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖的浓度分别为2.5g/l、25g/l、25g/l。

实施例7

本实施例提供的雪茄烟叶晾制提质减害调节剂溶液，调节l-半胱氨酸、茶多酚、壳聚糖的浓度分别为2.5g/l、37.5g/l、12.5g/l。

对比例1

本对比例提供的雪茄烟叶晾制提质减害调节剂，不含有l-半胱氨酸，即只含有茶多酚和壳聚糖，且浓度分别为15g/l和7.5g/l。

对比例2

本对比例提供的雪茄烟叶晾制提质减害调节剂，只含有半胱氨酸且浓度为2.5g/l，不含有茶多酚、壳聚糖或其他成分。

应用例1：雪茄烟叶外观质量评测，化学成分测试，感官评吸质量评价和烤后烟叶tsnas含量比较

1、雪茄烟叶成品制备

针对上述实施例和对比例制备的调节剂，对不同制备环节阶段的楚雪2号和楚雪14号两个品种的雪茄烟叶喷施调节剂，最终放入相同的晾房中晾制，并采用相同的发酵等后续方法制备而成。每组使用的雪茄烟叶为60片，喷施的用量为20l/亩。

(1)选择湖北某产地的楚雪2号雪茄烟叶长势正常田块，取叶片采收编烟并悬挂于晾房晾制时，用喷雾器分别喷施实施例1-7和对比例1-2制备的调节剂，叶面全部湿润后结束喷施，按照常规方法进行晾制；

(2)选择湖北省某产地楚雪2号和楚雪14号雪茄烟叶长势正常田块，在两个品种的雪茄叶片采收前一天傍晚，分别喷施实施例1和对比例1制备的调节剂，叶面全部湿润后结束喷施，整株斩收挂入相同的晾房中晾制；

(3)选择相同晾房内晾制的楚雪2号和楚雪14号雪茄茄芯，在两个品种的雪茄茄芯叶片晾制结束进入发酵阶段时，分别喷施实施例1和对比例1制备的调节剂进行回潮，叶片表面全部湿润后结束喷施。

(4)对上述第(1)-(3)组的雪茄烟叶设置空白对照，即将调节剂替换成等量的清水。

2、雪茄烟叶外观质量评价

对上述第(1)-(3)组最终制备的雪茄烟叶进行外观质量评价，具体结果见下表1所示。

表1雪茄烟叶外观质量评价结果

从上表1的结果可以看到，当同时采用l-半胱氨酸、茶多酚和壳聚糖制备调节剂时，采用(1)-(3)种喷施方式，最终制备的楚雪2号和楚雪14号的烟叶成品外观差异相差不大，当按照实施例1的原料浓度和比例制备调节剂，所制备得到的烟叶成品外观质量最好，相比于对比例和空白对照，油分得到明显改善。当调节剂中缺少l-半胱氨酸，或缺少茶多酚和壳聚糖时，都或多或少影响烟叶的某部分外观质量。

3、雪茄烟叶成品化学成分检测

常规化学成分检测采用美国api公司生产的305d型连续流动分析仪参照行业标准测定；对上述第(1)-(3)组制备的雪茄烟叶成品进行化学成分分析，结果如下表2所示。

表2雪茄烟叶化学成分分析结果

从上表2的结果可以看到，当同时采用l-半胱氨酸、茶多酚和壳聚糖制备调节剂时，采用(1)-(3)种喷施方式，最终制备的楚雪2号和楚雪14号的烟叶成品各化学成分的含量，相比于对比例和空白对照更加协调。

4、雪茄烟叶成品感官评吸质量

由7名专业评吸技术人员进行综合评价打分，选取香气质、香气量、杂气、刺激性、余味、燃烧性、灰色、浓度、劲头等指标，参照yc/t415—2011烟草在制品感官评价方法制订评分标准。对上述第(1)-(3)组制备的雪茄烟叶成品进行感官评吸结果评定，结果如下表3所示。

表3雪茄烟叶感官评吸结果

从上表2的结果可以看到，当同时采用l-半胱氨酸、茶多酚和壳聚糖制备调节剂时，采用(1)-(3)种喷施方式，最终制备的楚雪2号和楚雪14号的烟叶成品感官评吸质量，相比于对比例和空白对照刺激性、杂气明显改善，总体评吸质量有明显提升。

5、烤后烟叶tsnas含量比较

试验方法：仪器与试剂：agilent1290-6460液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(g4220a四元泵，g4226a自动进样器，g1316c柱温箱，美国agilent公司)，agilentzorbaxeclipseplusc18色谱柱(2.1mm×50mm，1.8μm)。甲醇(lc-ms级)、醋酸铵(99％)和醋酸(>99.7％)购自美国sigmaaldrich公司。nnn(2mg)、nnk(10mg)和nab(2mg)标准品购自美国sigmaaldrich公司，nat(25mg)、nnn-d4(10mg)、nnk-d4(10mg)、nab-d4(10mg)、和nat-d4(10mg)购自加拿大trc公司。样品制备：称取0.25g烟末于100ml锥形瓶中，加入0.2ml5000ng/ml内标溶液及19.8ml醋酸铵溶液(100mmol/l)，于回旋振荡器上150r/min振荡1h后，取萃取液过0.22μm滤膜后收集至色谱瓶中，用lc-ms/ms仪进行定量分析。

采用上述方法对上述第(1)-(3)组制备的雪茄烟叶成品进行tsnas含量测定，结果如下表4所示。

表4雪茄烟叶烤后烟叶tsnas含量比较，单位ng/g

从上表4可以看出，与对比例和空白对照相比，采用本发明的调节剂能够显著降低tsnas含量，降幅达30％以上，吸食安全性得到明显改善。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。