靶向白介素17受体的siRNA、修饰的siRNA及其载体系统和应用

本发明涉及sirna，尤其涉及靶向白介素17受体的sirna、对该sirna进行修饰得到的修饰的sirna及其载体系统和在制备预防或治疗银屑病的基因治疗药物中的应用，属于靶向白介素17受体的sirna及其应用领域。

背景技术：

1、银屑病是一种以表皮增生和真皮炎症细胞浸润为特征的慢性炎症性系统性疾病。该病的发病率与种族、地理位置、环境等因素有关。目前认为，银屑病发病机制的核心为树突状细胞受刺激后产生tnf-α、il-23等细胞因子，il-23刺激th17细胞产生il-17与il-22，通过jak-stat通路与tnf-α共同作用于表皮角质形成细胞，角质形成细胞的增殖和异常分化，导致皮肤表面出现肥厚的鳞屑。角质形成细胞在il-17的刺激下释放更多的炎症介质，形成恶性循环导致银屑病的各种表现。此外，银屑病也可由局部因素(皮肤损伤、刮擦)、系统因素(链球菌和hiv感染等)、心理压力、药物(锂剂、β-受体阻滞剂、干扰素和抗疟药)等诱发。

2、治疗银屑病的药物可以根据病情的严重程度和患者的具体情况分为不同类别。布罗利尤单抗是目前中国国内首个以白介素17受体a(il-17ra)为靶点的全人源化单克隆抗体。白介素17a在银屑病的发病机制中发挥核心作用，白介素17c，17f，17e同样也发挥致病作用。而白介素17受体a是白介素17a，17c，17f，17e共同的受体亚单位，立美芙通过抑制白介素17受体a，不仅能够抑制白介素17a，而且还能抑制白介素17c，17f，17e。目前在研的rna干扰(rnai)疗法无上市药物。

3、sirna是一种长约21-25bp带负电荷的双链rna，在细胞内通过诱导形成risc复合体，实现对目标靶mrna高效和高特异性的结合，后续触发对靶mrna的特异性降解，从而发挥rnai作用调节基因的表达；如果筛选获得有效降低白介素17a基因的表达水平的sirna，则能够实现预防或治疗银屑病的目的。

技术实现思路

1、本发明的目的之一是提供靶向白介素17受体的sirna。

2、本发明的目的之二是将靶向白介素17受体的sirna进行修饰得到修饰的sirna；

3、本发明的目的之三是提供含有靶向白介素17受体的sirna或其修饰的sirna的表达载体；

4、本发明的目的之四是将所述的靶向白介素17受体的sirna或修饰的靶向白介素17受体的sirna制备成治疗银屑病的基因治疗药物。

5、本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：

6、本发明的一方面是提供了靶向白介素17受体的sirna；所述的sirna特异性的与il-17ra基因的mrna相结合；优选的，所述的sirna是以il-17ra基因的全长为8566的mrna的93-2693区域为靶标设计得到的sirna；筛选结果表明，尤其是以il-17ra基因的mrna的354-396区域、680-749区域或1334-1357区域为靶标设计得到的sirna能够有效降低il-17ra基因的表达水平。

7、本发明的一种优选的具体实施方案，所述的sirna含有正义链和反义链，其选自以下(1)-(94)中的任何一种sirna：

8、(1)由核苷酸序列为seq id no.1所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.2所示的反义链组成的双链rna；(2)由核苷酸序列为seq id no.3所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.4所示的反义链组成的双链rna；(3)由核苷酸序列为seq id no.5所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.6所示的反义链组成的双链rna；(4)由核苷酸序列为seq idno.7所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.8所示的反义链组成的双链rna；(5)由核苷酸序列为seq id no.9所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.10所示的反义链组成的双链rna；(6)由核苷酸序列为seq id no.11所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.12所示的反义链组成的双链rna；(7)由核苷酸序列为seq id no.13所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.14所示的反义链组成的双链rna；(8)由核苷酸序列为seq id no.15所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.16所示的反义链组成的双链rna；(9)由核苷酸序列为seq idno.17所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.18所示的反义链组成的双链rna；(10)由核苷酸序列为seq id no.19所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.20所示的反义链组成的双链rna；(11)由核苷酸序列为seq id no.21所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.22所示的反义链组成的双链rna；(12)由核苷酸序列为seq id no.23所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.24所示的反义链组成的双链rna；(13)由核苷酸序列为seq idno.25所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.26所示的反义链组成的双链rna；(14)由核苷酸序列为seq id no.27所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.28所示的反义链组成的双链rna；(15)由核苷酸序列为seq id no.29所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.30所示的反义链组成的双链rna；(16)由核苷酸序列为seq id no.31所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.32所示的反义链组成的双链rna；(17)由核苷酸序列为seq idno.33所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.34所示的反义链组成的双链rna；(18)由核苷酸序列为seq id no.35所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.36所示的反义链组成的双链rna；(19)由核苷酸序列为seq id no.37所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.38所示的反义链组成的双链rna；(20)由核苷酸序列为seq id no.39所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.40所示的反义链组成的双链rna；(21)由核苷酸序列为seq idno.41所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.42所示的反义链组成的双链rna；(22)由核苷酸序列为seq id no.43所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.44所示的反义链组成的双链rna；(23)由核苷酸序列为seq id no.45所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.46所示的反义链组成的双链rna；(24)由核苷酸序列为seq id no.47所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.48所示的反义链组成的双链rna；(25)由核苷酸序列为seq idno.49所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.50所示的反义链组成的双链rna；(26)由核苷酸序列为seq id no.51所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.52所示的反义链组成的双链rna；(27)由核苷酸序列为seq id no.53所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.54所示的反义链组成的双链rna；(28)由核苷酸序列为seq id no.55所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.56所示的反义链组成的双链rna；(29)由核苷酸序列为seq idno.57所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.58所示的反义链组成的双链rna；(30)由核苷酸序列为seq id no.59所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.60所示的反义链组成的双链rna；(31)由核苷酸序列为seq id no.61所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.62所示的反义链组成的双链rna；(32)由核苷酸序列为seq id no.63所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.64所示的反义链组成的双链rna；(33)由核苷酸序列为seq idno.65所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.66所示的反义链组成的双链rna；(34)由核苷酸序列为seq id no.67所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.68所示的反义链组成的双链rna；(35)由核苷酸序列为seq id no.69所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.70所示的反义链组成的双链rna；(36)由核苷酸序列为seq id no.71所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.72所示的反义链组成的双链rna；(37)由核苷酸序列为seq idno.73所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.74所示的反义链组成的双链rna；(38)由核苷酸序列为seq id no.75所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.76所示的反义链组成的双链rna；(39)由核苷酸序列为seq id no.77所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.78所示的反义链组成的双链rna；(40)由核苷酸序列为seq id no.79所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.80所示的反义链组成的双链rna；(41)由核苷酸序列为seq idno.81所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.82所示的反义链组成的双链rna；(42)由核苷酸序列为seq id no.83所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.84所示的反义链组成的双链rna；(43)由核苷酸序列为seq id no.85所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.86所示的反义链组成的双链rna；(44)由核苷酸序列为seq id no.87所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.88所示的反义链组成的双链rna；(45)由核苷酸序列为seq idno.89所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.90所示的反义链组成的双链rna；(46)由核苷酸序列为seq id no.91所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.92所示的反义链组成的双链rna；(47)由核苷酸序列为seq id no.93所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.94所示的反义链组成的双链rna；(48)由核苷酸序列为seq id no.95所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.96所示的反义链组成的双链rna；(49)由核苷酸序列为seq idno.97所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.98所示的反义链组成的双链rna；(50)由核苷酸序列为seq id no.99所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.100所示的反义链组成的双链rna；(51)由核苷酸序列为seq id no.101所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.102所示的反义链组成的双链rna；(52)由核苷酸序列为seq id no.103所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.104所示的反义链组成的双链rna；(53)由核苷酸序列为seq idno.105所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.106所示的反义链组成的双链rna；(54)由核苷酸序列为seq id no.107所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.108所示的反义链组成的双链rna；(55)由核苷酸序列为seq idno.109所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.110所示的反义链组成的双链rna；(56)由核苷酸序列为seq id no.111所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.112所示的反义链组成的双链rna；(57)由核苷酸序列为seq idno.113所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.114所示的反义链组成的双链rna；(58)由核苷酸序列为seq id no.115所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.116所示的反义链组成的双链rna；(59)由核苷酸序列为seq id no.117所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.118所示的反义链组成的双链rna；(60)由核苷酸序列为seq id no.119所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.120所示的反义链组成的双链rna；(61)由核苷酸序列为seq idno.121所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.122所示的反义链组成的双链rna；(62)由核苷酸序列为seq id no.123所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.124所示的反义链组成的双链rna；(63)由核苷酸序列为seq id no.125所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.126所示的反义链组成的双链rna；(64)由核苷酸序列为seq id no.127所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.128所示的反义链组成的双链rna；(65)由核苷酸序列为seq idno.129所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.130所示的反义链组成的双链rna；(66)由核苷酸序列为seq id no.131所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.132所示的反义链组成的双链rna；(67)由核苷酸序列为seq id no.133所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.134所示的反义链组成的双链rna；(68)由核苷酸序列为seq idno.135所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.136所示的反义链组成的双链rna；(69)由核苷酸序列为seq idno.137所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.138所示的反义链组成的双链rna；(70)由核苷酸序列为seq id no.139所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.140所示的反义链组成的双链rna；(71)由核苷酸序列为seq id no.141所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.142所示的反义链组成的双链rna；(72)由核苷酸序列为seq id no.143所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.144所示的反义链组成的双链rna；(73)由核苷酸序列为seq idno.145所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.146所示的反义链组成的双链rna；(74)由核苷酸序列为seq id no.147所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.148所示的反义链组成的双链rna；(75)由核苷酸序列为seq id no.149所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.150所示的反义链组成的双链rna；(76)由核苷酸序列为seq id no.151所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.152所示的反义链组成的双链rna；(77)由核苷酸序列为seq idno.153所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.154所示的反义链组成的双链rna；(78)由核苷酸序列为seq id no.155所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.156所示的反义链组成的双链rna；(79)由核苷酸序列为seq id no.157所示的正义链和核苷酸序列为seqidno.158所示的反义链组成的双链rna；(80)由核苷酸序列为seq id no.159所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.160所示的反义链组成的双链rna；(81)由核苷酸序列为seqidno.161所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.162所示的反义链组成的双链rna；(82)由核苷酸序列为seq id no.163所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.164所示的反义链组成的双链rna；(83)由核苷酸序列为seq id no.165所示的正义链和核苷酸序列为seqid no.166所示的反义链组成的双链rna；(84)由核苷酸序列为seq id no.167所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.168所示的反义链组成的双链rna；(85)由核苷酸序列为seqid no.169所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.170所示的反义链组成的双链rna；(86)由核苷酸序列为seq id no.171所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.172所示的反义链组成的双链rna；(87)由核苷酸序列为seq id no.173所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.174所示的反义链组成的双链rna；(88)由核苷酸序列为seq id no.175所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.176所示的反义链组成的双链rna；(89)由核苷酸序列为seq id no.177所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.178所示的反义链组成的双链rna；(90)由核苷酸序列为seq id no.179所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.180所示的反义链组成的双链rna；(91)由核苷酸序列为seq id no.181所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.182所示的反义链组成的双链rna；(92)由核苷酸序列为seq id no.183所示的正义链和核苷酸序列为seq idno.184所示的反义链组成的双链rna；(93)由核苷酸序列为seq id no.185所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.186所示的反义链组成的双链rna；(94)由核苷酸序列为seq idno.187所示的正义链和核苷酸序列为seq id no.188所示的反义链组成的双链rna。

9、本发明还提供了一种sirna，其含有与所述的sirna序列中连续15个及以上核苷酸序列相同的核苷酸序列。

10、本发明的另一方面是将所述的sirna进行修饰得到修饰的sirna。

11、为了提高sirna在体内的稳定性、降低核酸外切酶的降解或促进sirna在体内细胞内的递送以更好的发挥敲降il-17ra基因的功效，本发明将所述的sirna进行修饰得到的修饰sirna；其中，所述的修饰的方式可以按照各种常规的修饰方式对本发明提供的sirna进行修饰得到稳定性提高或敲降il-17ra基因的功效得到改善的修饰的sirna；譬如，所述的修饰的方法包括但不限于：将所述的sirna进行骨架修饰、糖环修饰或碱基修饰；或者是将所述的sirna的反义链的5′末端进行磷酸化或磷酸化类似物修饰；或者是将所述的sirna的端基进行胆固醇分子修饰；或者是将所述sirna序列的正义链或反义链的3'末端的两个突出非配对的碱基tt替换成其它的两个核苷或脱氧核苷的碱基；或者是将所述的sirna的核苷酸键变为硫代磷酸酯、硼烷磷酸酯或甲基膦酸酯；或者是将所述的sirna变为肽核酸、锁核酸或解锁核酸；

12、优选的，所述骨架修饰包括但不仅限于：将sirna的正义链rna和反义链rna的磷酸骨架进行硫代修饰、氨基修饰、手性胍基修饰或磺酰基修饰；

13、优选的，所述糖环修饰包括但不仅限于：将核苷酸中的2′′-oh用-och3、-ch3、-nh2或-f进行取代；或者将核苷酸中的2′-oh进行脱氧修饰；或者将核苷酸中糖结构中的氧用硫进行取代；

14、优选的，所述碱基修饰包括但不仅限于：对核苷碱基的5-甲基胞嘧啶、6-甲基腺嘌呤、利巴韦林、假尿嘧啶和/或肌苷进行碱基修饰或取代。

15、本发明的一种具体实施方案，本发明所述的修饰sirna是采用选自以下中的至少一种的修饰方式对所述的sirna进行修饰所得到的修饰sirna：

16、(1)将rna的磷酸二酯之间的一个非酯氧键转变为硫；

17、(2)将核酸碱基2′碳位置处的-oh基团用ch3(甲基)、-och3(甲氧基)、-f(氟)或nh2取代；优选的，将核酸碱基2′碳位置处的-oh基团交替用甲氧基和氟进行替代修饰；

18、(3)将sirna的正义链或反义链的末端用两个硫代磷酸进行修饰；

19、(4)sirna的正义链或反义链的3′末端的tt碱基更换为原本和白介素17受体基因的mrna互补配对的2个碱基。

20、本发明的一种更优选的具体实施方案，所述的修饰的sirna选自以下(1)-(22)中含有正义链的核苷酸和含有反义链的核苷酸组成的sirna中的任何一种：

21、(1)正义链：ma*mg*mgmumumufgmafgfufumumcmumgmumcmcma*ma*ma；

22、反义链：mu*fu*mumgmgfamcfafgmamamamcfumcfamamamc*mc*mu；

23、(2)正义链：ma*mc*mgmumumufgmufgfcfgmumcmamgmgmumumu*mg*ma；

24、反义链：mu*fc*mamamafcmcfufgmamcmgmcfamcfamamamc*mg*mu；

25、(3)正义链：mu*mu*mgmumgmcfgmufcfafgmgmumumumgmamgmu*mu*mu；

26、反义链：ma*fa*mamcmufcmafafamcmcmumgfamcfgmcmamc*ma*ma；

27、(4)正义链：mc*ma*mgmamumcfcmufgfcfumgmamcmcmamgmumu*mu*mu；

28、反义链：mu*fg*mcmamufgmufgfcmumcmamafamgfcmamamc*mu*mg；

29、(5)正义链：mc*ma*mgmamumcfcmufgfcfumgmamcmcmamgmumu*mu*mu；

30、反义链：ma*fa*mamamcfumgfgfumcmamgmcfamgfgmamumc*mu*mg；

31、(6)正义链：mc*ma*mgmcmumgfamafcfafcmcmamamumgmamamc*mg*mu；

32、反义链：ma*fc*mgmumufcmafufumgmgmumgfumufcmamgmc*mu*mg；

33、(7)正义链：mg*mc*mumgmamafcmafcfcfamamumgmamamcmgmu*mu*mu；

34、反义链：ma*fa*mamcmgfumufcfamumumgmgfumgfumumcma*mg*mc；

35、(8)正义链：ma*mu*mcmumamcfcmcfafufumamcmcmamgmamumc*mc*mu；

36、反义链：ma*fg*mgmamufcmufgfgmumamamufgmgfgmumamg*ma*mu；

37、(9)正义链：mg*mu*mumumgmafgmufufufcmumgmumcmcmamama*dt*dt；

38、反义链：mu*fu*mumgmgfamcfafgmamamamcfumcfamamamc*dt*dt；

39、(10)正义链：mg*mu*mgmcmgmufcmafgfgfumumumgmamgmumumu*dt*dt

40、反义链：ma*fa*mamcmufcmafafamcmcmumgfamcfgmcmamc*dt*dt；

41、(11)正义链：mg*mu*mgmcmgmufcmafgfgfumumumgmamgmumumu*dt*dt；

42、反义链：ma*fa*mamcmufcmafafamcmcmumgfamcfgmcmamc*dt*dt；

43、(13)正义链：mg*ma*mumcmcmufgmcfufgfamcmcmamgmumumumu*dt*dt；

44、反义链：ma*fa*mamamcfumgfgfumcmamgmcfamgfgmamumc*dt*dt；

45、(13)正义链：mc*mu*mgmgmamufgmafafgfamamgmumgmumumumg*ma*ma；

46、反义链：mu*fu*mcmamafamcfafcmumumcmufumcfamumcmc*ma*mg；

47、(14)正义链：mc*ma*mgmcmumgfcmufufufgmamumgmumcmgmumu*ma*ma；

48、反义链：mu*fu*mamamcfgmafcfamumcmamafamgfcmamgmc*mu*mg；

49、(15)正义链：mg*ma*mumgmumcfumgfufgfumcmgmgmumgmamgmg*ma*ma；

50、反义链：mu*fu*mcmcmufcmafcfumgmamcmafcmafgmamcma*mu*mg；

51、(16)正义链：mg*mu*mcmamgmufgmafgfgfamamgmamamamgmuma*mg*ma；

52、反义链：mu*fc*mumamcfcmufufcmumumcmcfumcfamcmumg*ma*mc；

53、(17)正义链：mc*mu*mgmcmumufumgfafufgmumcmgmumumamama*mc*ma；

54、反义链：mu*fg*mumumufamafcfgmamcmamufcmafamamgmc*ma*mc；

55、(20)正义链：mg*mc*mumgmcmufumufgfafumgmumcmgmumumama*dt*dt；

56、反义链：mu*fu*mamamcfgmafcfamumcmamafamgfcmamgmc*dt*dt；

57、(21)正义链：ma*ma*mgmumumcfcmafgfufumumcmumgmumcmcma*mu*mg；

58、反义链：mc*fa*mumgmgfamcfafgmamamamcfumgfgmamamc*mu*mu；

59、(20)正义链：mc*ma*mgmcmumgfamafcfafcmcmamamumgmamgmc*mg*mg；

60、反义链：mc*fc*mgmcmufcmafufumgmgmumgfumufcmamgmc*mu*mg；

61、(21)正义链：mg*mc*mumgmamafcmafcfcfamamumgmamgmcmgmg*mc*mu；

62、反义链：ma*fg*mcmcmgfcmufcfamumumgmgfumgfumumcma*mc*mg；

63、(22)正义链：mg*mu*mumcmcmafgmufufufcmumgmumcmcmamumg*dt*dt；

64、反义链：mc*fa*mumgmgfamcfafgmamamamcfumgfgmamamc*dt*dt。

65、其中，*为硫代磷酸修饰、m为2′-甲氧基修饰、f为2′-氟代修饰。

66、本发明的另一方面是提供了含有所述sirna的干扰载体或表达载体；其中，本领域技术人员可按照本领域的常规制备方法将所述的sirna或修饰的sirna构建得到干扰载体或表达载体以及基于上述sirna相应序列的sdrna和shrna及它们的重组表达载体；优选的，所述重组表达载体可以是原核重组表达载体或真核重组表达载体，更优选的，所述表达载体为真核重组表达载体，特别优选的，所述真核重组表达载体为重组腺病毒表达载体，作为基因治疗药物降低白介素17受体基因表达水平进而治疗因白介素17受体表达过高导致的银屑病。

67、本发明的另一方面提供了一种含有如上所述的重组表达载体的宿主细胞，优选的，所述宿主细胞为原核细胞或真核细胞，更优选的，所述宿主细胞为真核细胞，特别优选的，所述宿主细胞为哺乳动物细胞。

68、譬如，本发明所述的sirna分子可以使用本领域中已知的方法以其天然结构递送至细胞内部。备选地，本发明的sirna分子可以自真核启动子在细胞内表达。能够表达sirna分子的重组表达载体可以被递送并保留在靶细胞中进行表达。在表达后，所述sirna分子与靶mrna相互作用并产生rna干扰反应。以此方式产生的sirna分子通常被称为shrna(短发夹rna)，因为其正义链和反义链通过小的核苷酸环连接。表达sirna分子的载体的递送可以是全身性的，如通过静脉内或肌肉内施用，通过施用至从受试者中外植的靶细胞继之以重新引入所述受试者中，或通过任何其他允许引入到所需的靶细胞中的方式；例如，sirna分子可以包含递送载体，包括脂质体，以用于施用至受试者。载体和稀释剂及其盐可存在于药用制剂中。核酸分子可以通过本领域技术人员已知的多种方法施用至细胞，所述方法包括但不限于：囊封在脂质体中，通过离子透入法或通过结合到其他载体中，如可生物降解的聚合物，水凝胶，微球体，可生物降解的纳米囊和生物粘合剂微球体，或通过蛋白质载体。细胞内递送组件也可以是病毒组件，其包括但不限于，破坏内体从而允许核酸避免溶酶体分解的成融病毒肽，维持表达的病毒蛋白或与细胞表面蛋白相互作用的病毒组件。合适的病毒细胞内递送组件包括但不限于，反转录病毒，单纯疱疹病毒，腺病毒和优选地腺病毒伴随病毒等。

69、本发明的另一方面是提供了含有所述sirna或修饰的sirna的载体系统，通过该载体系统将所述的sirna或修饰的sirna递送到体内细胞中；所述载体系统选自核酸-脂质颗粒、脂质体、聚合物、糊精或其聚合物、微团、病毒颗粒、核酸复合物或者由其中一种以上载体组成的混合物。

70、本发明的一种优选的实施方案，所述的载体系统可以是将sirna或所述修饰的sirna与脂质(如阳离子脂质)复合形成脂质核酸复合物；所述的载体系统也可以是将sirna或所述修饰的sirna与聚合物(如阳离子聚合物)复合形成聚合物-核酸复合物；所述的载体系统还可以是将sirna或所述修饰的sirna与环糊精或其聚合物复合得到复合物；优选的，将所述sirna或修饰的sirna包封在核酸-脂质颗粒中。

71、本发明的再一方面是提供了一种预防或治疗银屑病的药物组合物，其中，该药物组合物含有所述的sirna或修饰的sirna以及药学上可接受的载体系统和制剂辅料；其中，所述载体系统含有选自核酸-脂质颗粒、脂质体、聚合物、糊精或其聚合物、微团、病毒颗粒或核酸复合物中的任何一种或者由一种以上组成的混合物；所述的制剂辅料包括但不限于：生理盐水、无菌水、林格氏溶液、缓冲盐水、右旋糖溶液、麦芽糖糊精溶液、甘油或乙醇；另外，通过进一步添加各种制剂辅料或载体，将该药物组合物制备成常规的药物制剂，譬如注射制剂或冻干制剂等，这些均属于本领域的常规方法。

72、本发明所述的药物制剂的形式部分取决于用途或进入途径，例如口服，经皮或通过注射。本发明还包括制备成用于储存或施用的组合物，其包含在药用载体或稀释剂中的药物有效量的所需化合物。可用于治疗用途的载体或稀释剂是药物领域中已知的。例如，可以提供防腐剂，稳定剂，染料和/或调味剂。这些包括苯甲酸钠，山梨酸和对羟基苯甲酸的酯。此外，可以使用抗氧化剂和助悬剂。

73、本发明的和本文中所述的药物制剂或sirna可以含常规无毒性药用载体，助剂和/或赋形剂的单位剂量制剂施用。制剂的形式可适用于口服使用，用于口服使用的组合物可以根据本领域中任何已知的用于制备药物组合物的方法制备并且此种组合物可以包含一种更多种此种增甜剂，调味剂，着色剂或防腐剂以提供药学上好的且适口的制剂。

74、本发明对白介素17受体(il-17ra)基因进行sirna药物设计，设计了一系列靶向白介素17受体的sirna，并筛选得到了多条由正义链和反义链rna组成的sirna，所筛选得到sirna序列能够有效敲降il-17ra的mrna表达水平，其中部分序列能够将il-17ra的mrna表达水平敲降至25％左右，且具有明显的浓度效应；本发明进一步将sirna的核苷酸链进行核酸骨架硫代修饰和/或碱基核苷修饰后得到修饰的sirna，修饰后的sirna能够有效提升sirna序列稳定性、降低核酸外切酶的降解或促进sirna在体内细胞内的递送，最终更好的发挥敲降il-17ra基因的功效,修饰后的sirna序列对il-17ra基因敲降的ic50可达0.074nm，有望成为治疗由il-17ra基因过表达引起的银屑病的基因治疗药物。

75、本发明涉及的术语及定义

76、除非另外说明，则本文中提及的核酸序列以5’至3’方向书写。术语“核酸”是指dna或rna或其修饰形式，其包含存在于dna中的(腺嘌呤″a″，胞嘧啶″c＂，鸟嘌呤″g″，胸腺嘧啶″t″)或存在于rna中的(腺嘌呤″a″，胞嘧啶″c″，鸟嘌呤″g″，尿嘧啶″u″)嘌呤或嘧啶碱基。本文中提供的干扰rna可以包含″t″碱基，例如在3’端，即使″t″碱基并不天然出现在rna中。在一些情况中，这些碱基可以作为″dt″出现以区分存在于核糖核苷酸链中的脱氧核糖核苷酸。

77、术语“干扰rna”或“rnai”或“干扰rna序列”是指双链rna(即双链体rna)，当所述干扰rna在与靶基因相同的细胞中时，其能够减少或者抑制靶基因表达(即，通过调控与所述干扰rna的序列互补的mrnas的降解)。因此，干扰rna是指通过两个互补链或通过单一的、自我互补的链形成的双链的rna。干扰rna可以具有与靶基因基本或完全的同一性，或者可以包括错配区。干扰rna的序列可与全长的靶基因或其亚序列一致。干扰rna包括“小的-干扰rna”或“sirna”，例如，长度约15-60，15-50或15-40个双链体核苷酸。其中，本发明中sirna的实例包括，但不限于由两个单链分子组装的双链多核苷酸分子，其中一条链是正义链，另一条链是互补的反义链；由单链分子组装的双链多核苷酸分子，其中正义和反义区通过基于核酸或不基于核酸的接头连接；带有具有自我互补的正义和反义区的发夹二级结构的双链多核苷酸分子；和带有两个或多个环结构以及具有自我互补的正义和反义区的茎的环形单链多核苷酸分子，其中所述环形多核苷酸可以在体内或在体外加工，以产生活性双链sirna分子。

78、本发明中sirna的“有效量”或“治疗上的有效量”是足以产生理想效果的量，所述理想效果是例如与在缺乏sirna时检测到的正常表达水平比较靶序列表达的抑制。