一种抗AQP4蛋白的抗体及其应用的制作方法

本发明涉及生物医药，具体而言，涉及一种抗aqp4蛋白的抗体及其应用。

背景技术：

1、水通道蛋白4（aquaporin 4，aqp4）是中枢神经系统分布最多的一类水通道蛋白，多分布于室管膜周围，如延髓最后区、丘脑、下丘脑、第三和第四脑室周围、脑室旁、胼胝体、大脑半球白质等，对维持脑内血脑屏障、脑脊液-脑屏障的渗透压平衡有着重要作用。抗aqp4自身抗体是一种致病性的自身抗体，通过抗原抗体结合引起一系列细胞损伤及炎性反应，造成中枢神经脱髓鞘病变，即视神经脊髓炎谱系病（nmosd）。aqp4自身抗体在nmosd疾病中具有高度特异性，血清中aqp4自身抗体滴度与整个病程相关，可预示和监控病情的发展与治疗。在nmosd及其相关疾病的发病治疗及预后研究中，监测aqp4自身抗体水平极其重要。

2、目前常见的检测aqp4自身抗体的试剂盒中所用抗aqp4抗体多为鼠源、兔源多克隆抗体，存在批间差异大、难以规模化生产、无法与抗人源二抗匹配等问题，难以满足临床精准诊断与标准化应用需求。上述缺陷严重制约aqp4相关自身免疫性疾病的早期筛查与辅助诊断，因此开发一种特异性强、可规模化生产、适配人源二抗的aqp4人鼠嵌合单克隆抗体具有重要临床价值与应用前景。

3、鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种抗aqp4蛋白的抗体及其应用，以解决现有检测aqp4自身抗体的试剂盒存在的批间差异大、难以规模化生产、无法与人源二抗匹配的问题。

2、本发明是这样实现的：

3、第一方面，本发明提供了一种抗aqp4蛋白的抗体，该抗体包含重链可变区和轻链可变区，重链可变区中的hcdr1、hcdr2和hcdr3分别与seq id no.8所示的可变区中的hcdr1、hcdr2和hcdr3的氨基酸序列一致，轻链可变区中的lcdr1、lcdr2和lcdr3分别与seqid no.4所示的可变区的lcdr1、lcdr2和lcdr3的氨基酸序列一致。

4、第二方面，本发明提供了一种抗aqp4蛋白的抗体，该抗体包括上述可变区，以及恒定区。

5、第三方面，本发明提供了一种抗aqp4蛋白的抗体，该抗体包括重链和轻链；重链的氨基酸序列如seq id no.16所示；轻链的氨基酸序列如seq id no.15所示。

6、第四方面，本发明提供了与上述抗aqp4蛋白的抗体相关的生物材料，其选自如下（1）~（4）中任一项；

7、（1）编码上述抗体的多核苷酸；

8、（2）携带上述多核苷酸的载体；

9、（3）携带上述多核苷酸，或含有上述载体，或能够表达上述抗体的重组细胞；

10、（4）含有上述抗体以及与其偶联的偶联部分的抗体偶联物。

11、第五方面，本发明提供了上述抗体的制备方法，其包括：培养上述重组细胞。

12、第六方面，本发明提供了一种试剂盒，其包含上述抗体或生物材料。

13、第七方面，本发明提供了上述抗体、生物材料或试剂盒在如下任一项中的应用：

14、（1）非诊断和治疗目的地检测抗aqp4抗体；

15、（2）制备用于检测抗aqp4抗体的产品；

16、（3）制备诊断和/或辅助诊断aqp4相关自身免疫性疾病的产品；

17、（4）非诊断和治疗目的地检测aqp4；

18、（5）制备用于检测aqp4的产品。

19、本发明具有以下有益效果：

20、本发明的抗aqp4蛋白的人鼠嵌合单克隆抗体不仅具备高度靶标专一性，能够精准识别aqp4蛋白功能表位，适用于靶蛋白的高效捕获及免疫学检测；而且依托基因工程表达系统，可实现该抗体的规模化、标准化生产，有效规避传统动物源抗体的批间差异性与量产瓶颈；同时，该抗体人源化恒定区使其广泛兼容elisa、免疫荧光及免疫组织化学等多种抗人igg检测体系，应用灵活性强；而且基于该抗体可制备组分清晰、性能稳定的质控品，突破了对患者阳性血清的依赖，从源头解决了传统血清质控品来源有限、质量不稳定的问题，为aqp4自身抗体检测的标准化提供了可靠的物质基础。因此，本发明的抗体具有良好的应用前景。

1.一种抗aqp4蛋白的抗体，其特征在于，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区中的hcdr1、hcdr2和hcdr3分别与seq id no.8所示的可变区中的hcdr1、hcdr2和hcdr3的氨基酸序列一致，所述轻链可变区中的lcdr1、lcdr2和lcdr3分别与seq id no.4所示的可变区的lcdr1、lcdr2和lcdr3的氨基酸序列一致。

2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2和lcdr3由kabat、chothia、imgt、abm或contact任意一种系统定义；

3.根据权利要求2所述的抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列与seq id no.8所示序列具有至少80%以上同一性，所述轻链可变区的氨基酸序列与seq idno.4所示序列具有至少80%以上同一性，且包括权利要求2中所述的互补决定区。

4.根据权利要求1~3任一项所述的抗体，其特征在于，所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no.8所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.4所示。

5.一种抗aqp4蛋白的抗体，其特征在于，所述抗体包括权利要求1~4任一项所述的可变区，以及恒定区；

6.一种抗aqp4蛋白的抗体，其特征在于，所述抗体包括重链和轻链；所述重链的氨基酸序列如seq id no.15所示；所述轻链的氨基酸序列如seq id no.14所示。

7.与权利要求1~6任一项所述的抗aqp4蛋白的抗体相关的生物材料，其特征在于，选自如下（1）~（4）中任一项；

8.权利要求1~6任一项所述的抗体的制备方法，其特征在于，包括：培养如权利要求7中所述的重组细胞。

9.一种试剂盒，其特征在于，包含权利要求1~6任一项所述的抗体或权利要求7所述的生物材料。

10.如权利要求1~6任一项所述的抗体、权利要求7所述的生物材料，或权利要求9所述的试剂盒在如下任一项中的应用：