一种新型UCST型温敏性聚合物固定化酶的方法与流程

技术特征：
1.一种新型ucst型温敏性聚合物固定化酶的方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：步骤1，将聚丙烯酸类聚合物和引发剂用去离子水溶解，转移到三口烧瓶中，缓慢加入甲基丙烯酸缩水甘油酯，摇匀后通氮气鼓泡半小时后转入单口烧瓶中，氮气保护下抽真空，进行磁力搅拌反应，待反应结束后，离心去除上层清液，用丙酮重复洗涤，烘干，得到白色的固体产物；步骤2，将固体产物用缓冲液进行溶解，之后加入酶，进行恒温震荡反应，再加入胶原及其水解物，恒温震荡30min，离心，用去离子水清洗，所得到的沉淀物即为固定酶，将固定酶置于冰箱冷藏，即可完成固定酶。2.根据权利要求1所述的一种新型ucst型温敏性聚合物固定化酶的方法，其特征在于，所述步骤1中，聚丙烯酸类聚合物、甲基丙烯酸缩水甘油酯、引发剂和去离子水的摩尔比为1
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12：0.01
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0.024：0.01
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0.012：20
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480。3.根据权利要求1所述的一种新型ucst型温敏性聚合物固定化酶的方法，其特征在于，所述步骤1中，反应温度为50℃
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100℃，反应时间为4
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24h；烘干温度为0
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40℃，烘干时间为10
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12h。4.根据权利要求1所述的一种新型ucst型温敏性聚合物固定化酶的方法，其特征在于，所述步骤1中，引发剂为过硫酸铵、过硫酸钾或者过硫酸钠；聚丙烯酸类聚合物的结构简式为(c3o2h3‑
r)
n
，其中，r为甲基、乙基、异丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基中的任意一种。5.根据权利要求1所述的一种新型ucst型温敏性聚合物固定化酶的方法，其特征在于，所述步骤2中，固体产物、缓冲液、酶、胶原及其水解物的摩尔比为0.1
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1：1
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10：10
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40：0.1
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1。6.根据权利要求1所述的一种新型ucst型温敏性聚合物固定化酶的方法，其特征在于，所述步骤2中，缓冲液为乙酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液中的任意一种；胶原及其水解物为胶原、明胶或者胶原多肽；酶为纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶、糖化酶、淀粉酶、漆酶、木聚糖酶中的任意一种或者多种。7.根据权利要求1所述的一种新型ucst型温敏性聚合物固定化酶的方法，其特征在于，所述步骤2中，恒温震荡反应温度为40℃
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100℃，恒温震荡反应时间2h
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24h。

技术总结
本发明公开了一种新型UCST型温敏性聚合物固定化酶的方法，具体为：首先，将聚丙烯酸类聚合物和引发剂用去离子水溶解，转移到三口烧瓶中，缓慢加入甲基丙烯酸缩水甘油酯，摇匀后通氮气鼓泡半小时后转入单口烧瓶中，氮气保护下抽真空，进行磁力搅拌反应，离心，用丙酮洗涤，烘干，得到固体产物；再将固体产物用缓冲液进行溶解，加入酶，进行恒温震荡反应，再加入胶原及其水解物，恒温震荡，离心，清洗，所得到的沉淀物即为固定酶载体，将固定酶载体置于冰箱冷藏，即可完成固定酶载体的制备。该UCST型温敏性聚合物


技术研发人员：朱兴 田祎 贺斌 王学川 张慧洁
受保护的技术使用者：陕西科技大学
技术研发日：2021.04.15
技术公布日：2021/10/18