降低由于病毒污染的饲料而引起的病毒感染的风险的制作方法

1.本公开涉及用于降低动物由于消耗病毒污染的饲料而引起的病毒感染的风险的方式。


背景技术：

2.据信，猪流行性腹泻病毒(pedv)于2013年通过允许将病毒引入动物饲料中的被污染饲料成分容器引入美国。已经证实，病毒病原体能够在跨境装运期间存活于动物饲料成分或饲料产品中(dee等,《公共科学图书馆
·
综合(plos one)》13(3):e0194509)。有证据表明，某些饲料添加剂可以降低被一些病毒污染的饲料中的病毒存活率和病毒载量(cottingim等人,2015,艾伦李曼养猪大会(allen d.leman swine conference)；cottingim等人,2017,《猪健康管理(porcine health management)》3:5doi10.1186/s40813
‑
016
‑
0048
‑
8)。因此，需要的是用于降低由于消耗可能被病毒污染的饲料而引起的动物感染的风险的方式。


技术实现要素：

3.本公开的一方面涵盖了一种用于降低由于消耗被病毒污染的饲料而引起的感染的风险的方法，所述方法包括向有需要的动物施用有效浓度的饲料添加剂，其中所述饲料添加剂包括有机酸的混合物，并且所述病毒是猪流行性腹泻病毒(pedv)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(prrsv)或a型塞内加谷病毒(seneca valley a virus，sva)。
4.本公开的另一方面提供了一种用于降低动物被病毒感染的风险的方法，所述方法包括向所述动物施用有效量的饲料添加剂，其中所述饲料添加剂包括有机酸的混合物，所述动物的饲料被所述病毒污染或未被所述病毒污染，并且所述病毒是猪流行性腹泻病毒(pedv)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(prrsv)或a型塞内加谷病毒(sva)。
5.下文更详细地讨论了本公开的其它方面和迭代。
具体实施方式
6.本公开提供了用于降低或减轻动物由于消耗被病毒污染的饲料而引起的病毒感染的风险的方法。所述方法包括向有需要的动物施用有效量的饲料添加剂，其中所述饲料添加剂包括有机酸的混合物。本文公开的方法还可以用于降低动物被病毒感染的风险，所述动物的饲料可能或可能未被某些病毒污染。
7.(i)用于降低由于消耗病毒污染的动物饲料而引起的感染的风险的方法
8.本公开的一方面提供了用于降低或减轻动物由于消耗被病毒污染的饲料而引起感染的风险的方法。具体地，所述方法包括向有需要的动物施用有效浓度的包括有机酸的混合物的饲料添加剂，所述有机酸的混合物通常包含2
‑
羟基(甲硫基)丁酸(hmtba)。
9.(a)被污染饲料
10.所述动物饲料可能被各种病毒病原体污染。可能的病毒的实例包含猪流行性腹泻
病毒(pedv)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(prrsv)、a型塞内加谷病毒(sva)、口蹄疫病毒(fmdv)、猪瘟病毒(csfv)、非洲猪瘟病毒(asfv)、猪甲型流感病毒(iav
‑
s)、伪狂犬病病毒(prv)、尼帕病毒(nipah virus，niv)、猪水疱病病毒(svdv)、水泡性口炎病毒(vsv)、猪2型圆环病毒(pcv2)、猪水疱疹病毒(vesv)、猪德尔塔冠状病毒(porcine delta coronavirus，pdcov)、传染性胃肠炎病毒(tgev)、猪萨佩罗病毒(psv)、牛病毒性腹泻病毒(bvdv)、牛1型疱疹病毒(bhv
‑
1)、牛呼吸道合胞体病毒(brsv)、牛副流感病毒3型、犬瘟热病毒(cdv)、猫杯状病毒(fcv)、鸡贫血病毒(cav)、禽痘病毒(apv)、新城疫病毒(newcastle disease virus，ndv)、禽传染性支气管炎病毒(aibv)、禽流感病毒a型(aiv)、高致病性禽流感病毒(hpaiv)等。在一些实施例中，所述饲料可能被pedv、prrsv或sva污染。在具体实施例中，所述饲料可能被pedv污染。
11.所述饲料可能由于包含病毒污染的饲料成分而被污染。可能被病毒污染的饲料成分的非限制性实例包含氨基酸(例如，赖氨酸、甲硫氨酸、亮氨酸、缬氨酸等)、维生素(维生素d、维生素c等)、矿物质(例如，钙、镁、锌、铜等)、其它营养素(例如，磷、胆碱、甜菜碱等)、酶(例如，植酸酶、木聚糖酶、蛋白酶等)、益生菌(例如，乳杆菌属(lactobacillus)、芽孢杆菌属(bacillus)、链球菌属(streptococcus)、片球菌属(pediococcus)、肠球菌属(enterococcus)、双歧杆菌属(bifidobacterium)或其组合)、益生元(例如，乳果糖、甘露寡糖、菊粉、低聚果糖、低聚半乳糖等)、油或脂肪(例如，植物油、油籽油、熔炼的动物脂肪等)、蛋白质粉(例如，大豆粉、玉米粉、玉米麸质粉、鱼粉、血粉等)、蛋白质饼(例如，大豆饼、大豆油饼等)、颗粒饲料、磨碎的谷物、啤酒糟等。可替代地，所述饲料可能被来自一些其它来源的病毒污染。
12.(b)饲料添加剂
13.在本文公开的方法中使用的饲料添加剂包括有机酸的混合物。通常，所述饲料添加剂包括两种或更多种有机酸。在一些实施例中，所述饲料添加剂可以包括两种有机酸。在其它实施例中，所述饲料添加剂可以包括三种有机酸。在仍其它实施例中，所述饲料添加剂可以包括四种有机酸。在另外的实施例中，所述饲料添加剂可以包括五种有机酸。在另外的实施例中，所述饲料添加剂可以包括多于五种的有机酸。
14.所述有机酸可以是羧酸或羟基酸(即在α、β或γ碳原子上被羟基取代的羧酸)。羧酸可以是单羧酸、二羧酸或三羧酸。通常，有机酸可以含有约一个到约二十二个碳原子。通过非限制性实例，合适的有机酸包含乙酸、己二酸、α羟基甲硫氨酸、α羟基半胱氨酸、苯甲酸、丁酸、柠檬酸、甲酸、富马酸、戊二酸、乙醇酸、乳酸、苹果酸、扁桃酸、草酸、丙酸、山梨酸、琥珀酸、酒石酸、尿酸或其盐前述各项中的任何一种。在具体实施例中，所述饲料添加剂包括α羟基甲硫氨酸或其盐，以及至少一种另外的有机酸，所述至少一种另外的有机酸选自苯甲酸、丁酸、柠檬酸、富马酸或乳酸。α羟基甲硫氨酸的盐可以是钙、铜、铁、锰、锌或其组合。
15.饲料添加剂中存在的有机酸的量可以并且将会根据酸的身份而变化。通常，饲料添加剂中的有机酸的总量可以为至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约75％、至少约80％或至少约85％。
16.在具体实施例中，饲料添加剂可以包括以下或由以下组成：α羟基甲硫氨酸(或2
‑
羟基
‑4‑
(甲硫基)丁酸)或其盐、苯甲酸和富马酸。α羟基甲硫氨酸的盐可以是钙盐。
17.在某些实施例中，α羟基甲硫氨酸或其盐的量的范围可以为约30重量％到约45重
量％，苯甲酸的量的范围可以为约15重量％到约25重量％，富马酸的量的范围可以为约35重量％到约50重量％，前提是总量不超过100重量％。在其它实施例中，α羟基甲硫氨酸或其盐的量的范围可以为约33重量％到约40重量％，苯甲酸的量的范围可以为约18重量％到约22重量％，富马酸的量的范围可以为约38重量％到约46重量％，前提是总量不超过100重量％。在一些实施例中，α羟基甲硫氨酸或其盐的量的范围可以为约36重量％到约37重量％，苯甲酸的量的范围可以为约19重量％到约21重量％，富马酸的量的范围可以为约41重量％到约43重量％，前提是总量不超过100重量％。在一些实施例中，α羟基甲硫氨酸或其盐与苯甲酸与富马酸的重量比的范围可以为约1:0.5
‑
0.6:1.1
‑
1.2。
18.向动物施用的饲料添加剂的量的范围可以取决于饲料添加剂中存在的有机酸的身份。在一些实施例中，所施用的饲料添加剂的量的范围可以是向动物提供的饲料的约0.05重量％到约1重量％。在某些实施例中，所施用的饲料添加剂的量可以是向动物提供的饲料的约0.1重量％、约0.15重量％、约0.2重量％、约0.3重量％、约0.4重量％、约0.5重量％、约0.6重量％或约0.7重量％。在具体实施例中，所施用的饲料添加剂的量可以是向动物提供的饲料的约0.5重量％。
19.在一些实施例中，饲料添加剂可以包括至少一种赋形剂。合适的赋形剂包含抗氧化剂、填料、粘合剂或其组合。
20.在具体实施例中，任选的赋形剂可以是抗氧化剂。抗氧化剂可以是天然的或合成的。合适的抗氧化剂的非限制性实例包含抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸硬脂酸酯、丁基羟基茴香醚(bha)、丁基羟基甲苯(bht)、6
‑
乙氧基
‑
1,2
‑
二氢
‑
2,2,4
‑
三甲基喹啉(乙氧喹啉)、没食子酸乙酯、没食子酸丙酯、特丁基对苯二酚(tbhq)或其组合。
21.在仍其它实施例中，任选的赋形剂可以是填料。合适的填料包含但不限于：纤维素、微晶纤维素、纤维素醚(例如，乙基纤维素、甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠等)、纤维素酯(即，乙酸纤维素、丁酸纤维素和其混合物)、淀粉(例如，玉米淀粉、大米淀粉、马铃薯淀粉、木薯淀粉等)、改性淀粉、预胶凝淀粉、磷酸化淀粉、淀粉
‑
乳糖、淀粉
‑
碳酸钙、羧基乙酸淀粉钠、葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、木糖、乳糖醇、甘露醇、麦芽糖醇、山梨醇、木糖醇、麦芽糊精、海藻糖、碳酸钙、硫酸钙、磷酸钙、硅酸钙、碳酸镁、氧化镁、粘土、滑石粉或其组合。
22.在另外的实施例中，任选的赋形剂可以是粘合剂。合适的粘合剂的非限制性实例包含淀粉(例如，玉米淀粉、马铃薯淀粉、小麦淀粉、大米淀粉等)、预胶凝淀粉、水解淀粉、纤维素、微晶纤维素、纤维素衍生物(例如，甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠等)、糖类(例如，蔗糖、乳糖等)、糖醇(例如，麦芽糖醇、山梨醇、木糖醇、聚乙二醇等)、海藻酸盐类(例如，海藻酸、海藻酸盐、海藻酸钠等)、树胶(例如，阿拉伯胶、瓜尔豆胶、结冷胶、黄原胶等)、果胶、明胶、c12
‑
c18脂肪酸醇、聚乙烯吡咯烷酮(也称为共聚维酮(copovidone))、聚环氧乙烷、聚乙二醇、聚乙烯醇、蜡(例如，小烛树蜡、巴西棕榈蜡、蜂蜡等)或上述物质中的任何物质的组合。
23.(c)施用策略
24.可以向动物一起共同施用饲料添加剂与饲料。在一些实施例中，可以将饲料添加剂添加到制备的动物饲料和/或将饲料添加剂与制备的动物饲料混合。在其它实施例中，在将饲料成分共混以制备动物饲料之前，可以将饲料添加剂添加到被污染饲料成分和/或将
饲料添加剂与被污染饲料成分混合。
25.可替代地，饲料添加剂可以与被污染饲料分开施用于动物。例如，饲料添加剂可以在不同时间或不同位置施用于动物。
26.(d)动物
27.合适的动物包含但不限于家畜或农业动物、陪伴动物、动物学动物和研究动物。动物的年龄范围可以是从新生儿到老年人。在某些实施例中，动物可以是家畜或农业动物。合适的家畜或农业动物的非限制性实例可以包含奶牛、牛、猪、山羊、绵羊、家禽、美洲驼、羊驼、水生动物(例如，养殖的鱼和贝类)等。在其它实施例中，所述动物可以是陪伴动物。陪伴动物的非限制性实例可以包含宠物，如狗、猫、马、兔子和鸟。在又其它实施例中，所述动物可以是动物学动物。如本文所使用的，“动物学动物”是指可以在动物园中发现的动物。此类动物可以包含非人灵长类动物、大型猫科动物、狼、熊、河马、袋鼠等。在仍其它实施例中，所述动物可以是研究或实验室动物。实验室动物的研究的非限制性实例包含啮齿动物(例如，小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠等)、犬科动物、猫科动物和非人类灵长类动物。在具体实施例中，所述动物可以是农业动物，例如，所述动物可以是猪。猪可以是乳猪、断奶幼猪、生长猪、待肥育猪、育成猪、种猪、临产母猪等。
28.(e)方法的结果
29.通常，与消耗病毒污染的饲料但未施用饲料添加剂的动物相比，向暴露于病毒污染的饲料的动物施用饲料添加剂可能会导致病毒载量减少或病毒核酸的量减少。在一些实施例中，施用了饲料添加剂的动物可能不会表现出临床感染症状。在仍其它实施例中，施用了饲料添加剂的动物的增重可能会增加，平均日增重(agd)可能会增加，和/或其饲料转化率(fcr)可能会提高。
30.(ii)用于降低动物被病毒感染的风险的方法
31.本公开的另一方面涵盖用于降低饲料可能被病毒污染或可能未被病毒污染的动物被病毒感染的风险的方法。具体地，所述方法包括向所述动物施用有效浓度的饲料添加剂，其中所述饲料添加剂包括有机酸的混合物，并且其中所述动物的饲料的病毒状态是未知的(即饲料可能被污染或可能未被污染)。换言之，所述方法可以是防备性的、预防性的或规避性的。
32.所述动物的饲料可能被上文部分(i)(a)所列的病毒中的任何病毒的污染。饲料添加剂如上文部分(i)(b)所详述。上文部分(i)(c)中描述了用于施用饲料添加剂的各种策略。上文部分(i)(d)和(i)(e)中详述了合适的动物和结果。
33.(iii)包括饲料添加剂的饲料成分或饲料
34.本公开的仍另一方面涵盖如上文(i)(b)部分中详述的包括饲料添加剂的饲料成分或饲料。
35.(a)饲料成分
36.饲料成分的非限制性实例维生素、矿物质、氨基酸或氨基酸类似物、抗氧化剂、多不饱和脂肪酸、酶、益生元、益生菌、后生元(postbiotics)、药草、色素、经批准的抗生素或其组合。
37.在一些实施例中，饲料成分可以是一种或多种维生素。合适的维生素包含维生素a、维生素b1(硫胺素)、维生素b2(核黄素)、维生素b3(烟酸)、维生素b5(泛酸)、维生素b6(吡
哆醇)、维生素b7(生物素)、维生素b9(叶酸)、维生素b12、维生素c、维生素d、维生素e、维生素k、其它b复合维生素(例如，胆碱、肉碱、腺嘌呤)或其组合。维生素的形式可以包含维生素的盐、维生素的衍生物、与维生素具有相同或类似活性的化合物以及维生素的代谢物。
38.在另外的实施例中，饲料成分可以是一种或多种氨基酸。非限制性的合适的氨基酸包含标准氨基酸(即丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸)、非标准氨基酸(例如，l
‑
dopa、gaba、2
‑
氨基丁酸等)、氨基酸类似物(例如，α羟基类似物)或其组合。
39.在替代性实施例中，饲料成分可以是一种或多种抗氧化剂。合适的抗氧化剂包含但不限于抗坏血酸和其盐、抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸硬脂酸酯、阿诺克索牟(anoxomer)、n
‑
乙酰半胱氨酸、苄基异硫氰酸酯、间氨基苯甲酸、邻氨基苯甲酸、对氨基苯甲酸(paba)、丁基化羟基茴香醚(bha)、丁基化羟基甲苯(bht)、咖啡酸、角黄素、α
‑
胡萝卜素、β
‑
胡萝卜素、β
‑
胡萝卜素、β
‑
阿朴
‑
胡萝卜素酸(beta
‑
apo
‑
carotenoic acid)、鼠尾草酚、香芹酚、儿茶素、没食子酸十六烷基酯、绿原酸、柠檬酸和其盐、丁香提取物、咖啡豆提取物、对香豆酸、3,4
‑
二羟基苯甲酸、n,n'
‑
二苯基
‑
对苯二胺(dppd)、硫代二丙酸二月桂酯、硫二丙酸二酯、2,6
‑
二叔丁基苯酚、没食子酸十二酯、依地酸、鞣花酸、异抗坏血酸、异抗坏血酸钠、七叶亭、七叶灵、6
‑
乙氧基
‑
1,2
‑
二氢
‑
2,2,4
‑
三甲基喹啉(乙氧喹啉)、没食子酸乙酯、乙基麦芽酚、乙二胺四乙酸(edta)、桉树提取物、丁香酚、阿魏酸、类黄酮(例如，儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表焙儿茶素(egc)、表焙儿茶素没食子酸酯(egcg)、多酚表焙儿茶素
‑3‑
没食子酸酯、黄酮(例如，芹黄素、白杨素、木樨草素)、黄酮醇(例如，橡精、杨梅酮、山茶酚(daemfero))、黄烷酮类、白蜡树内酯、富马酸、没食子酸、龙胆提取物、葡萄糖酸、甘氨酸、愈创木脂、橙皮素、α
‑
羟基苄基次膦酸、羟基肉桂酸、羟基戊二酸、对苯二酚、n
‑
羟基丁二酸、羟基酪醇、羟基脲、米糠提取物、乳酸和其盐、卵磷脂、卵磷脂柠檬酸酯；r
‑
α
‑
硫辛酸、叶黄素、番茄红素、苹果酸、麦芽酚、5
‑
甲氧基色胺、没食子酸甲酯、柠檬酸单甘油酯；柠檬酸单异丙酯；桑色素、β
‑
萘黄酮、去甲二氢愈创木酸(ndga)、没食子酸辛酯、草酸、柠檬酸棕榈酯、吩噻嗪、磷脂酰胆碱、磷酸、磷酸盐、植酸、植基泛色稀醇(phytylubichromel)、甘椒提取物、没食子酸丙酯、多磷酸盐、槲皮素、白藜芦醇、迷迭香提取物、迷迭香酸、鼠尾草提取物、芝麻酚、水飞蓟素、芥子酸、琥珀酸、柠檬酸硬脂酰酯、丁香酸、酒石酸、百里酚、生育酚(即α
‑
生育酚、β
‑
生育酚、γ
‑
生育酚和δ
‑
生育酚)、生育三烯酚(即α
‑
生育三烯酚、β
‑
生育三烯酚、γ
‑
生育三烯酚和δ
‑
生育三烯酚)、酪醇、香草酸、2,6
‑
二叔丁基
‑4‑
羟甲基苯酚(即ionox 100)、2,4
‑
(三
‑
3',5'
‑
二叔丁基
‑
4'
‑
羟基苄基)
‑
均三甲苯(即ionox 330)、2,4,5
‑
三羟基苯丁酮、泛醌、特丁基对苯二酚(tbhq)、硫化二丙酸、三羟基丁酰苯、色胺、酪胺、尿酸、维生素k和其衍生物、维生素q10、小麦胚芽油、玉米黄素或其组合。
40.在仍其它实施例中，饲料成分可以是一种或多种多不饱和脂肪酸。合适的多不饱和脂肪酸(pufa)包含通常呈顺式构型的具有至少18个碳原子和至少两个碳
‑
碳双键的长链脂肪酸。在具体实施例中，pufa可以是ω脂肪酸。pufa可以是ω
‑
3脂肪酸，其中第一个双键出现在从碳链的甲基末端(即与羧酸基团相反)开始的第三个碳
‑
碳键中。ω
‑
3脂肪酸的合适的实例包含全顺式7,10,13
‑
十六碳三烯酸；全顺式
‑
9,12,15
‑
十八碳三烯酸(α
‑
亚麻酸，ala)；全顺式
‑
6,9,12,15
‑
十八碳四烯酸(亚麻油酸)；全顺式
‑
8,11,14,17
‑
二十碳四烯酸
licheniformis)、嗜酸乳杆菌(lactobacillus acidophilus)、干酪乳杆菌(lactobacillus casei)、屎肠球菌(enterococcus faecium)、双裂双歧杆菌(bifidobacterium bifidium)、产丙酸丙酸杆菌(propionibacterium acidipropionici)、费氏丙酸杆菌(propionibacteriium freudenreichii)和假长双岐杆菌(bifidobacterium pseudolongum)。
42.在替代性实施例中，饲料成分可以是一种或多种酶或酶变体。酶的合适的非限制性实例包含淀粉酶、糖酶、纤维素酶、酯酶、半乳聚糖酶、半乳糖苷酶、葡聚糖酶、半纤维素酶、水解酶、脂酶、氧化还原酶、果胶酶、肽酶、磷酸酶、磷脂酶、植酸酶、蛋白酶、转移酶、木聚糖酶或其组合。
43.在另外的实施例中，饲料成分可以是一种或多种草药。如本文所使用的，合适的草药和草药衍生物是指草药提取物和源自植物和如叶、花和根(非限制性地)等植物部分的物质。非限制性的示例性草药和草药衍生物包含龙牙草、苜蓿、芦荟、苋菜、当归、茴芹、伏牛花、罗勒、杨梅、蜂花粉、桦木、拳参、黑莓、黑升麻、黑胡桃、赐福蓟草、蓝升麻、蓝花马鞭草、兰草、琉璃苣、合香叶、鼠李、夏枯草、牛蒡、辣椒、红辣椒、香菜、鼠李皮、猫薄荷、芹菜、矢车菊、洋甘菊、灌木丛、繁缕、菊苣、金鸡纳树、丁香、款冬、聚合草、玉米雌穗花丝、茅草、荚迷皮、草本威灵仙、矢车菊(cyani或cornflower)、透椭树叶、蒲公英、钩果草、当归、紫锥菊、土木香、麻黄、桉树、月见草、小米草、黄地百合、小茴香、胡芦巴、玄参、亚麻籽、大蒜、龙胆草、生姜、人参、北美黄莲、积雪草、树胶草、山楂树、蛇麻草、苦薄荷、辣根、问荆、何首乌、绣球花、牛膝草、冰岛藓、爱尔兰藓、荷荷巴、杜松、海带、兜兰、柠檬香茅、甘草、半边莲、曼德拉草、金盏花、马郁兰、药蜀葵、槲寄生、毛蕊花、芥菜、没药树、荨麻、燕麦杆、俄勒冈葡萄、番木瓜树、欧芹、西番莲、桃树、唇萼薄荷、胡椒薄荷、长春花、车前草、马利筋根、商陆、花椒、洋车前子、苦木、夏雪草、红三叶草、覆盆子、雷蒙德粘土(redmond clay)、大黄、蔷薇果、迷迭香、芸香、红花、藏红花、鼠尾草、圣约翰草(st.john's wort)、洋菝、黄樟、塞润榈、黄岑、美远志根、番泻叶、荠菜、榆树、留兰香、甘松、孪果藤、草乌桕、草莓、红花风铃木(taheebo)、百里香、熊果叶、缬草、紫罗兰、豆瓣菜、白橡树皮、白松皮、野黑樱桃、野莴苣、野山药、柳树、冬青树、金缕梅、水苏、苦艾、蓍草、皱叶酸模、散塔草、丝兰或其组合。
44.在仍其它实施例中，饲料成分可以是一种或多种天然色素。合适的色素包含但不限于海葵赤素(actinioerythrin)、茜草素、异黄素、β
‑
阿朴
‑
2'
‑
胡萝卜素醛、阿朴
‑2‑
番茄红素醛、阿朴
‑
6'
‑
番茄红素醛、虾红素、虾青素、玄参红酸醛(azafrinaldehyde)、菌红素(aacterioruberin)、aixin、α
‑
胡萝卜素、β
‑
胡萝卜素、γ
‑
胡萝卜素、β
‑
胡萝卜酮、角黄素、辣椒黄素、辣椒红素、柠檬黄素、柠黄质、藏花酸、藏红花酸半醛、藏红花素、甲壳黄素、隐辣椒质、α
‑
隐黄质、β
‑
隐黄质、隐单黄质、梳黄质、癸异戊二烯黄素、脱氢金盏花红素(dehydroadonirubin)、硅甲藻黄素、1,4
‑
二氨基
‑
2,3
‑
二羟基蒽醌、1,4
‑
二羟基蒽醌、2,2'
‑
双色吡咯黄质、花菱草类胡萝卜素、沙棘酮、屈曲黄素、铃兰色素(foliachrome)、岩藻黄质、尬赞黄素、六氢番茄红素、霍普金斯叶黄素(hopkinsiaxanthin)、氢基球形烯酮(hydroxyspheriodenone)、异岩藻黄质(isofucoxanthin)、绿藻黄素、叶黄素、黄体黄质、番茄红素、十氢番茄红素、番茄黄素、桑酮、玉米黄质、新色素、新黄质、壬异戊二烯黄素(nonaprenoxanthin)、oh
‑
绿菌烯、奥克酮、颤藻黄素、paracentrone、扇贝醇酮(pectenolone)、梳黄质、多甲藻素、草分枝杆菌叶黄素、芬尼酮(phoeniconone)、芬尼黄酮
(phoenicopterone)、芬尼黄质(phoenicoxanthin)、酸浆果红素、六氢番茄红素、皮洛苍耳素醇、醌类、玫红品、玫红品醛、玫红品醇、紫菌红醇、紫杉紫素、玉红黄素酮(rubixanthone)、腐菌黄素、半
‑
α
‑
胡萝卜酮、半
‑
β
‑
胡萝卜酮、辛塔黄素(sintaxanthin)、管藻黄素、管藻素、球形烯、福橘黄素、红酵母红素、罗丹素甲酯、圆酵母红素醛(torularhodinaldehyde)、类胡萝卜素、1,2,4
‑
三羟基蒽醌、臭橘黄素、金莲花色素、无隔藻黄素、紫黄素、瓦明酮(wamingone)、叶黄素、玉米黄素、α
‑
玉米胡萝卜素或其组合。
45.在仍其它实施例中，饲料成分可以是一种或多种被批准用于家畜和家禽的抗生素(例如，认为对人类健康不是关键或重要的抗生素)。批准的抗生素的非限制性实例包含杆菌肽、卡巴多司(carbadox)、头孢噻呋(ceftiofur)、恩诺沙星(enrofloxacin)、氟苯尼考(florfenicol)、莱特洛霉素(laidlomycin)、利诺霉素(linomycin)、氧四环素(oxytetracycline)、洛克沙胂(roxarsone)、替米考星(tilmicosin)、泰乐菌素(tylosin)和维吉霉素(virginiamycin)。
46.在另外的实施例中，饲料成分可以是蛋白质粉(例如，大豆粉、玉米粉、玉米麸质粉、玉米胚芽粉、鱼粉、血粉、骨粉、家禽副产品粉等)、蛋白质饼(例如，大豆饼、大豆油饼等)、谷物(例如，玉米粒、燕麦粒、小麦粒、磨碎的谷物、啤酒糟、发芽的大脑等)、颗粒状饲料、油或脂肪(例如，植物油、油籽油、熔炼的动物脂肪等)。
47.(b)饲料
48.动物饲料被设计成通过向动物提供蛋白质、碳水化合物和/或脂肪来满足动物的维持能量的需求。此类成分的实例包含谷物、草料产品、饲料粉、饲料浓缩物等。
49.合适的谷物包含玉米、大豆、小麦、大麦、燕麦、高粱、黑麦、大米和其它谷物和谷物粉(例如，大豆粉)。
50.草料产品是如处于新鲜状态(牧草或植被)、干燥状态或青贮状态的营养植物等饲料成分并且可以附带地包含较小比例的谷物(例如，收获后保留在所收获的玉米植物材料中的玉米粒)。草料包含作为反刍动物膳食的一部分被提供给反刍动物之前已经收获并任选地发酵的植物。因此，草料包含干草、半干青贮料和青贮饲料。干草的实例包含从原产于被喂养的反刍动物的位置或从遥远的位置运到喂养位置的所收获的草。干草的非限制性实例包含苜蓿、百慕大草、百喜草、稀树草、黑麦草、小麦草、羊茅草、三叶草等以及可以是原产于反刍动物饲料配量被提供给的反刍动物的位置的其它草种类。
51.如果草料质量相对较高，则是有益的(即含有相当水平的可代谢营养物，所述可代谢营养物允许动物在达到其消耗能力之前满足其营养物和维持能量的需求)。如果草料质量低，则动物可能无法使其充分代谢以实现期望的性能效果(例如，满足其营养物和/或维持能量需求)，不仅损害草料本身的营养益处，而且引起动物感到饱腹或发胀，并且可能阻止其消耗足够的营养物。
52.半干青贮料是当汁液仍在植物中时通过收获干草作物而已经自然发酵的草料产品。然后将所收获的干草或干草捆以可以发生发酵的密封的方式储存。发酵过程将植物中的糖转化为酸，所述酸降低所收获的干草的ph并保存草料。
53.类似于半干青贮料的青贮饲料是从如玉米和高粱植物等绿色草料作物的收获、储存和发酵产生的草料产品。在准备好收获谷物之前，这些作物(茎和全部)被切碎。将植物材料储存在引起材料发酵的筒仓、储存袋、仓或有盖的堆中，从而降低ph并保存植物材料直到
其可以被投喂。
54.草料产品还包含高纤维来源和废植被产品如切碎青草、玉米棒子、植物秸秆等。
55.饲料浓缩物是能量高而粗纤维低的饲料原料。浓缩物还包含一种或多种成分的来源，所述成分用于增强饲料补充混合物的营养充分性，如维生素和矿物质。
56.饲料可以用脂肪来源来补充。非限制性脂肪包含植物油、鱼油、动物脂肪、黄色油脂、鱼粉、油籽、酒糟或其组合。脂肪来源将通常占总饲料配量的干质量的约1％到约10％、更优选地约2％到约6％，并且最优选地约3％到约4％。
57.饲料通常被调配成满足特定动物的营养物和能量需求。已经测量了许多常见动物饲料成分的营养物和能量含量并且可提供给公众。国家研究委员会(national research council)出版了含有常见反刍动物饲料成分和其相应的所测量的营养物和能量含量的表格的书籍。另外，根据牛的重量，为牛的生长和肥育提供营养物和维持能量需求的估计值。国家科学、工程和医学研究院(national academies of sciences,engineering,and medicine).2016.《肉牛的营养素需求(nutrient requirements of beef cattle)》:第八次修订版.华盛顿特区(washington,dc):国家学术出版社(the national academies press),第396
‑
403页，所述文献以其整体并入本文。本领域的技术人员可以利用此信息估计动物的营养需求和维持能量的需求，并确定动物饲料成分的营养物和能量含量。
58.实例
59.以下实例说明了本公开的各个实施例。
60.实例1：评估饲料添加剂在降低在消耗病毒污染的饲料后感染的方面的功效
61.本研究的目的是评估包括2
‑
羟基
‑4‑
(甲硫基)丁酸甲酯(hmtba)钙类似物、苯甲酸和富马酸的共混物的饲料添加剂(da，诺伟司国际公司(novus international))在降低在消耗被prrsv 174、pedv和sva污染的饲料后感染风险的方面的功效。
62.材料和方法。所述研究是在派普斯通应用研究生物安全2级研究设施(pipestone applied research biosafety level 2research facility)(明尼苏达州派普斯通(pipestone,mn))中进行的。实验设计由3个组组成，所述组包含：
63.第1组：全价饲料与包合率为0.5％的饲料添加剂混合，
64.第2组：全价饲料与包合率为0.15％的饲料添加剂混合，以及
65.第3组：全价饲料阳性对照(无饲料添加剂)。
66.本研究基于感染事件的差异将因组而异的假设，为期15天，以房间为实验单位，每个房间100头猪(每个房间12个围栏)，每个房间一个指定的饲料仓。猪(15kg)来自源猪群，所述源猪群通过月度测试和临床病史文件记录为不含所有3种病毒病原体。病毒攻击涉及454g的“冰块模型(ice block model)”，其由100ml sva(5logs tcid50/ml，ct＝20.72)，100ml prrsv 174(5logs tcid50/ml，ct＝21.38)，100ml pedv(5logs tcid50/ml，ct＝24.25)组成，并且用154ml最小必需培养基(mem)进行平衡。在研究的第0天和第6天，块在
‑
80℃下冷冻并被放入每个饲料仓中。这些块继续融化，液体渗透饲料，这预示着所述液体进入房间以供猪通过自然进食行为消耗。
67.在饲料接种后(dpi)的第0天和第6天，从3个房间中的每个房间在12个围栏内收集死前样品，包含待肥育猪的口腔液和swiffer样品。在14dpi时单独收集饲料样品。为收集饲
料样品，将单独的swiffer布拉过饲料槽，从而接触存在的饲料颗粒。将布浸入无菌生理盐水中，并倒出3ml等分试样以进行测试。在dpi 14时，从每个房间的30头猪收集死后样品。所收集的样品包含用于sva的扁桃体、用于prrsv的血清和用于pedv的直肠拭子。通过pcr评估样品中是否存在病毒核酸，并根据需要对选择样品执行orf 5的核酸测序。另外，从所有猪收集开始重量和结束重量(0和14dpi)。使用anova或t检验分析各组间ct值(循环阈值)差异的显著性(p<0.05)。
68.结果。每天对出现以下临床体征的猪进行评分：跛行/囊泡(sva)、呼吸困难/重量下降/毛发粗糙(prrsv)；和腹泻(pedv)。在整个研究过程期间，在治疗房间中未发现上述任何临床体征。相比而言，在第10
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14天前，在阳性对照房间中注意到跛行(12头猪中的2头)、呼吸困难(12头猪中的6头)、毛发粗糙(12头猪中的5头)和腹泻(12头猪中的8头)的临床体征。
69.如通过pcr确定的，在0dpi时收集的所有样品的所有3种病毒均为阴性。表1和2中总结了在6dpi时饲料样品和口腔液样品中的病毒检测结果，而表3中总结了来自14dpi饲料样品的结果。表4中总结了死后结果，而表5中总结了生长表现。各组之间发现的显著差异(p<0.05)在表格中用粗体表示。
[0070][0071]
a,b
同一行内不同上标是不同的(p<0.05)
[0072]1prrs疫苗株142测序
[0073]2prrs攻击菌株174测序
[0074][0075]
a,b
同一行内不同上标是不同的(p<0.05)
[0076]1prrs疫苗株142测序
[0077]2prrs攻击菌株174测序
[0078][0079]
a,b
同一行内不同上标是不同的(p<0.05)，na＝不适用
[0080][0081][0082]
a,b
同一行内不同上标是不同的(p<0.05)，na＝不适用
[0083][0084]
a,b
同一行内不同上标是不同的
[0085]
讨论。在饲料中两种水平的饲料添加剂中，均未检测到prrs、sva或pedv的临床体征。死后，饲料添加剂组中没有prrs或sva的迹象。然而，pedv感染在两个饲料添加剂组中出现的水平显著不同。相比而言，在阳性对照群中观察到pedv、sva和prrsv 174感染的证据和临床体征。另外，与0.15％的包含率和阳性对照组相比，在喂养包合率为0.5％的饲料添加剂的猪中观察到显著的生长差异。
[0086]
在研究的条件下，得出以下结论。1)使用冰块成功污染了仓中的饲料，从而导致将所有3种病毒递送到所有房间。2)在阳性对照组中文件记录了prrsv、pedv和sva通过饲料传输。3)这些数据支持被污染饲料以病毒进入农场的方式的风险。4)任一水平的饲料添加剂都不会对饲料进行“消毒”。5)喂养标记剂量或减少剂量的饲料添加剂的猪仍不含prrsv 174和sva。6)喂养标记剂量或减少剂量的饲料添加剂的猪感染了pedv，但在各组之间检测到阳性百分比和ct值的显著差异。7)在任一饲料添加剂房间中均未检测到临床体征。8)喂养标记剂量的饲料添加剂的猪比喂养减少剂量的饲料添加剂的猪生长得更快。