专利名称：含有肽醛的液体洗涤剂的制作方法
发明涉及含有酶的液体洗涤剂组合物更确切地是，本发明涉及含有洗涤表面活性剂、蛋白酶、和肽醛的液体洗涤剂组合物。
含蛋白酶的液体含水洗涤剂，特别在洗衣范围中是公知的。通过在组合物中第二类酶的蛋白酶，如脂酶、淀粉酶和纤维素酶，或在蛋白酶本身上的降解现象是这种含蛋白酶液体含水洗涤剂通常遇到的问题。
结果，洗涤剂组合物中第二种酶或蛋白酶本身的稳定性受到影响，从而该洗涤剂的使用不太好。
为解决这一问题，已有人提出使用各种不同的蛋白酶抑制剂或稳定剂。例如US4566985提出使用苄脒盐酸化物，EP 376705提出使用低级脂族醇或羧酸，EP381262提出使用多羟基化合物和硼化合物的混合物，以及同时待批申请EP 91870072.5提出使用芳族硼酸盐酯。
从而，本发明的一个目的是提供有效的并适用于含水液体洗涤剂组合物的其他可逆蛋白酶抑制剂。
根据这一目的，本发明提出使用肽醛作为含水液体洗涤剂组合物中可逆蛋白酶抑制剂。
本发明的一个特殊优点在于，在本文所述的液体洗涤剂组合物中仅需使用极低量的肽醛。从而使材料的某些部分可适合于其他成分。这在本发明包括的浓缩液体洗涤剂组合物的本文配方中特别关键。
由于本发明的肽醛对抑制蛋白酶是如此有效，所以本发明的另一优点是，甚至可将对蛋白降解高度敏感的酶掺入含有蛋白酶的液体洗涤剂组合物中。
使用肽的衍生物抑制蛋白质迄今看来似乎仅在医疗用途中被公开过。例如，EP293881公开了使用肽硼酸作为胰蛋白酶类丝氨酸蛋白酶的抑制剂。EP185390和US4399065公开了将某些肽醛衍生物用于抑制血液凝固。J9002967公开了将旋光α氨基醛用于抑制通常的酶。还可参见“Inhibition of Thrombin and Trypsin by Tripeptide Aldehydes”Int J Peptide Protein Res.，Vol 12(1978)，PP217-221;Gaal，Bacsy & Rappay，and“Tripeptide Aldehyde Protease Inhibitors May Depress in Vitro Prolactin and Growth Hormone Release”Endocrinology，Vol.116，No.4(1985).PP.1426-1432;Rappy，Makara，Bajusz & Nagy。EP-A-473502中也已公开了某些肽醛对抑制蛋白酶所传递的皮肤刺激。
本发明是一种液体含水洗涤剂组合物，该组合物含有-1%-80%洗涤表面活性剂，-0.0001%-1.0%活性蛋白酶或其混合物，其特征在于它还包括含有2-50个氨基酸的0.00001%-5%肽醛，或者混合物。
本发明的液体含水洗涤剂组合物包括含三种基本成分(A)肽醛或其混合物，(B)蛋白酶或其混合物，以及(C)洗涤表面活性剂。本发明的组合物较佳的是还含有(D)洗涤剂可混溶的第二种酶或其混合物，还可含有(E)任选的成分。
A.肽醛本发明的洗涤剂组合物，作为第一种基本成分含有2-50氨基酸的肽醛，或其混合物。本文所用的术语肽醛是指含有肽链的化合物，其中所述链的C末端由羧基转化成醛基。肽醛本身以及其制备方法是已知的并且在例如US5015627，EP185930和DE3200812中已被公开。本文所用的较佳的肽醛含有2-6氨基酸，最佳3-4。
尽管不是企图受到理论的束缚，但可认为，本发明的肽醛与液体洗涤剂组合物中的蛋白酶组合，由此抑制所述的蛋白酶。在水中稀释时，蛋白水解活性通过蛋白酶/肽醛配合物的离解而恢复。
本发明肽醛中所述肽链的N末端可被本领域普通技术人员公知的合适的保护基团所保护。然而，在本发明的高度优选实施的方案中，所述肽链的N末端被氨基甲酸甲酯(CH3O-(O)C-)或甲脲(CH3N-(O)C-)基团所保护。事实上已发现，具有氨基甲酸甲酯或甲脲为N端保护基团的本发明的肽醛与未保护的或另外保护的肽醛相比较是特别稳定的，其中所述保护的肽醛对抑制蛋白水解活性的效率自始至终更好的维持。
本发明的特殊优点是对每个单独的场合来说可以订制，特别是，根据在给定的洗涤剂组合物中所用的蛋白酶，可选择在可逆抑制所述蛋白酶方面比其他的更有效的肽醛。存在的蛋白酶可被区分为胰蛋白酶、枯草溶菌素、胰疑蛋白酶和弹性蛋白酶型蛋白酶。对于胰蛋白酶型蛋白酶，合适的肽醛包括Lys-Ala-LysH、Ile-Phe-LysH、Phe-Por-ArgH和PheVal-ArgH。对于枯草溶菌素型蛋白酶，合适的肽醛包括Lys-Ala、AlaH、Ala-ALa-ProH、Gly-Ala-LeuH、Gly-Ala-PheH、Phe-Gly-Ala-PheH和Phe-Gly-Ala-LeuH。对于胰凝蛋白酶型蛋白酶，合适的肽醛包括Leu-Leu-PheH Ala-Ala-PheH和Leu-Leu-TyrH。对于弹性蛋白酶型蛋白酶，合适的肽醛包括Val-Pro-Val和Ala-Val-LeuH。
用于下文B)部中所述洗涤剂组合物中的较佳蛋白酶为枯草溶菌素型蛋白酶。从而，本文使用的较佳肽醛是Lys-Ala-Ala-H、Ala-Als-ProH、Gly-Ala-LeuH、Gly-Ala-PheH、Phe-Gly-Ala-PheH和Phe-Gly-Ala-LeuH。本文中使用的特别优选的是Gly-Ala-LeuH、Gly-Ala-PheH Phe-Gly-Ala-PheH和Phe-Gly-Ala-LeuH、即肽的N末端分别为Gly，Gly，Phe和Phe，而肽的C的末端分别为Leu，Phe，Phe和Leu。这些C端氨基酸的羧基被转化成醛基。
当然，本文所列出全部肽醛较佳的是将以其氨基甲酸甲酯或甲脲N端保护的形式使用。在下文的实施例中公开了合成CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH、CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-PheH、CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH和CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-PheH的方法。
本发明的组合物含有总组合物重量0.00001%-5%的肽醛或其混合物，较佳的是0.0001%-1%，最佳是0.0005%-0.2%。
B.蛋白酶本发明液体洗涤剂组合物的第二种基本成分是约0.0001-1.0，较佳约0.0005-0.2，最佳约0.002-0.1重量%的活性蛋白酶。也可包括蛋白酶的混合物。蛋白酶可是动物、植物或微生物(较佳)来源。本文中使用的较佳的是枯草溶菌素型蛋白酶。特别优选的是由Bacillus Subtilis和/或Bacillus<p>
阴离子表面活性剂可使用的一种阴离子表面活性剂类型包括烷基酯磺酸盐。由于它们可用可再生的，非石油原料制备，故是合乎要求的。烷基酯磺酸盐成分的制备可按照技术文献中所述的已知方法进行。可按照“The Journal of the American Oil Chemists Society”52(1975).PP323-329用气态SO3将C8-C20羧酸的直链酯磺化。合适的原料包括由动物脂、棕榈树和椰子油等得到的天然脂肪物质。
特别适于洗衣用途的较佳烷基酯磺酸盐表面活性剂包括如下结构式的烷基酯磺酸盐表面活性剂
其中R3为C8-C20烃基，较佳的是一个烷基，或其结合体，R4为C1-C6烃基，较佳的是一个烷基，或其结合体，M是水溶性成盐阳离子。合适的盐包括金属盐，如钠、钾和锂盐，以及取代的或未取代的铵盐，如甲基一、二甲基-三甲基-和季铵阳离子，例如四甲基铵和二甲基哌啶鎓，以及由链烷醇胺，例如单乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺衍生的阳离子。较佳的是，R3为C10-C16烷基、R4为甲基、乙基或异丙基。甲基酯磺酸盐，其中R3为C14-C16烷基特别优选。
烷基硫酸盐是另一类型的对本文使用重要的阴离子表面活性剂，当与多羧基脂肪酸酰胺(参见下文)结合使用时，除了提供优良的完全清洗能力外，包括在广泛的温度、洗涤浓度和洗涤时间内良好的油脂/油清洗，还可获得烷基硫酸盐的溶解，以及改进的液体洗涤剂配方的配制性能，这些配方是分子式ROSO3M的水溶性盐或酸，其中R较佳为C10-C24烃基，优选的为具有C10-C20烷基组分的烷基或羟烷基，更佳为C12-C18烷基或羟烷基，M为H或阳离子，例如碱金属阳离子(例如钠、钾、锂)，取代的或未取代的铵阳离子，如甲基、二甲基和三甲基铵以及季铵阳离子、例如四甲基铵和二甲基哌啶鎓，以及由链烷醇胺，如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、及其混合物衍生的阳离子，等等。通常C12-C16的烷基链对较低洗涤温度(例如低于约50℃)较佳，而C16-C18烷基链对较高洗涤温度(例如高于50℃)较佳。
烷氧基化的烷基硫酸盐表面活性剂是另一类型有用的阴离子表面活性剂。这些表面活性剂通常是分子式RO(A)mSO3M的水溶性盐或酸，其中R为具有C10-C24烷基组分的未取代的C10-C24烷基或羟烷基，较佳的是C12-C20烷基或羟烷基，更佳的是C12-C18烷基或羟烷基，A为乙氧基或丙氧基单元，m大于0，通常在约0.5和约6之间，优选大约0.5和大约3之间，M为H或阳离子，可以是，例如金属阳离子例如钠、钾、锂、钙、镁等)，铵或取代的铵阳离子。本文所预期的是乙氧基化的烷基硫酸盐以及丙氧基化的烷基硫酸盐。取代的铵阳离子的特定例子包括甲基一、二甲基一、三甲基铵和季铵阳离子，如四甲基铵、二甲基哌啶鎓和由链烷醇胺，例如单乙醇胺。二乙醇胺和三乙醇胺衍生的阳离子，或它们的混合物。典型的表面活性剂为C12-C18烷基聚乙氧基化物(1.0)硫酸盐、C12-C18烷基聚乙氧基化物(2.25)硫酸盐、C12-C18烷基聚乙氧基化物(3.0)硫酸盐和C12-C18烷基聚乙氧基化物(4.0)硫酸盐，其中M方便地选自钠和钾。
其它阴离子表面活性剂在本发明的组合物中也可包括对洗涤目的有用的其它阴离子表面活性剂。这些表面活性剂包括皂盐(例如包括钠、钾、铵和取代的铵盐，如单、二和三乙醇胺盐)、C9-C20直链烷基苯磺酸盐、C8-C22初级或二级烷基苯磺酰盐、C8-C24烯属磺酸盐、通过例如英国专利说明书No1082179所述的磺化碱土金属柠檬酸盐的热解产物制得的磺化聚羧酸，烷基甘油磺酸盐、脂酰基甘油磺酸盐、脂肪油甘油硫酸盐、烷基酚环氧乙烷醚硫酸盐、石蜡磺酸盐、烷基磷酸盐、异硫代硫酸盐、如酰基异硫代硫酸盐、N-酰基牛磺酸盐、甲基牛磺酰的脂肪酸酰胺、烷基琥珀酰胺酸盐和磺基琥珀酸盐、磺酸琥珀酸盐的单酯(特别是饱和的和不饱和的C12-C18单酯)、磺基琥珀酸盐的二酯(特别是饱和的和不饱和的C6-C14二酯)、N-酰基肌氨酸盐、烷基多糖类的硫酸盐，如烷基聚葡糖苷的硫酸盐(非离子型未硫酸盐化的化合物，下面描述)、支链伯烷基硫酸盐、烷基聚乙氧基羧酸盐、如分子式RO(CH2CH2O)kCOO-M 的那些化合物，其中R为C8-C22烷基，K为0-10的整数，M为可溶性成盐阳离子，以及用羟乙磺酸酯化和用氢氧化钠中和的脂肪酸。树脂酸和氢化的树脂酸也适用，如松香、氢化松香、以及在妥尔油中存在或衍生的树脂酸和氢化树脂酸。在“Surface Active Agents and Detergents”(Vol.Ⅰ and Ⅱ by Schwartz，Perry andBerch)中给出了另外的实例。1975年12月30日颁发给Laughlin等人的美国专利3929678，在23栏58行直至29栏23行(本文结合参照)中也概要地公开了多种这些表面活性剂。
非离子洗涤剂表面活性剂在结合本文供参考的1975年12月30日颁发的Laughlin等人的美国专利3929678 13栏14行直至16栏6行中概要地公开了合适的非离子洗涤剂表面活性剂。下面列出了典型的、非限定种类的有用非离子表面活性剂。
1.烷基酚的聚环氧乙烷、聚环氧丙烷和聚环氧丁烷缩合物。通常，较佳的是聚环氧乙烷缩合物。这些化合物包括在与烯化氧的直链或支链结构型中具有含约6-约12个碳原子烷基的烷基酚的缩合产物。在较佳的实施例方案中，环氧乙烷存在的量相当于每摩尔烷基酚形成约5-约25摩尔环氧乙烷。市场上可购得的这一类型非离子表面活性剂包括GAF公司出售的Igepal
CO-630;以及全部由Rohml Haas公司出售的Triton
X-45.X-114.X-100和X-102。这些化合物通常称为烷基酚烷氧基化物(例如烷基酚乙氧基化物)。
2.具有约1-约25摩尔环氧乙烷的脂族醇缩合产物。脂族醇的烷基链可以是直链或支链，伯或仲醇，通常含有约8-约22个碳原子。特别优选的醇缩合产物是每摩尔醇含有约2-约18摩尔环氧乙烷与含约10-约20个碳原子烷基的缩合产物。市场上可购得的这一类型表面活性剂的例子包括Tergitol
15-S-9(含9摩尔环氧乙烷的C11-C15直链仲醇的缩合产物)，Tergitol
24-L-6NMWC含有以窄分子量分布的6摩尔环氧乙烷的C12-C14伯醇的缩合产物)两者均由Vnion Carbide公司出售;Shell Chemical<p>
式中R’是H或C1-4烃基、2-羟乙基、2-羟丙基或其混合物，R2是C5-C31烃基;而且Z是具有其上直接连有至少三个羟基的直烃链的多羟基烃基或其烷氧化物洗生物。优选的情况是R1是甲基，R2是直链C11-C15烷基或链烯基链(如椰子烷基)或其混合物，而是Z是由葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖与还原糖类在还原性胺化反应中衍生将得到。本发明的组合物还可以含助洗剂体系。任何传统的助洗剂均适于本发明使用，其中包括硅铝酸盐、硅酸盐、多羧盐酯和脂肪酸，以及乙二胺四乙酸之类物质及氨基聚磷酸等金属离子螯合剂，尤其是乙二胺四亚甲基磷酸和二亚乙基三胺五亚甲基磷酸。磷酸盐助洗剂虽然由于明显的环境上原因而不优选使用，但是也可以在本发明中使用。
适用的助洗剂可以是无机离子交换材料，通常是无机水合的硅铝酸盐材料，更优选水合的合成沸石，如水合的沸石A、X、B或HB。
另一类适用的无机助洗剂是层状硅酸盐，如SKS-6(Hoechst)。SKS-6是由硅酸钠(Na2Si2O5)组成的结晶层状硅酸盐。
适于本发明使用的多羧酸酯助洗剂包括柠檬酸(优选呈水溶性盐形)，式R-CH(COOH)CH2(COOH)的丁二酸衍生物，其中R为C10-20烷基或链烯基、(优选有C12-C16的)或者R或以被羟基、磺基、亚磺基或砜基取代。具体实例包括月桂基丁二酸酯、十四烷基丁二酸酯、十六烷基丁二酸酯、2-十二烯基丁二酸酯、2-十四烯基丁二酸酯。丁二酸酯助洗剂优选使用其水-约18个碳原子的一个烷基部分由部分选自含有约1-约3个碳原子的烷基和羟烷基的水溶性氧膦;以及含有约10-约18个碳原子的一个烷基部分和选自含有约1至约3个碳原子的烷基和羟烷基部分的水溶性亚砜。
半极性非离子表面活性剂包括下式的氧化胺表面活性剂
其中，R3是一个含有约8-约22个碳原子的烷基，羟烷基、或烷基苯基或其混合物;R4是一个含有约2-约3个碳原子的亚烷基或羟亚烷基或其混合物;x为0-约3;每个R5为含约1-约3个碳原子的一个烷基或羟烷基或含约1-约3个环氧乙烷基团的聚环氧乙烷基。R5的基团可彼此结合，例如通过一个氧或氧原子连接，以形成环结构。
这些氧化胺表面活性剂特别包括C10-C18烷基氧化二甲胺和C8-C12烷氧乙基氧化二羟乙胺。
6.1968年1月21日授予Llenado的美国专利4565647中所公开的烷基多糖类，具有一个含约6-约30个碳原子的疏水基团，较佳的为约10-约16个碳原子以及一个多糖，例如一个聚糖苷、含有约1.3-约10，较佳为约1.3-约3，最佳为约1.3-约2.7糖单元的疏水基。可使用任何含5-6个碳原子的还原糖，例如葡萄糖，半乳糖并且半乳糖基部分可取代葡糖基部分。(任选地疏水基团可在2-，3-，4-等位置结合，从而对照葡糖苷或半乳糖苷得到葡萄糖或半乳糖)。糖之间的链可在例如补充糖单元的一个位置和在先前糖单元上的2-，4-和/或6位之间。
任选地，并且较不受欢迎的，可以存在结合疏水部分和多糖部分的聚环氧乙烷链。较佳的烯化氧为环氧乙烷。通常的疏水基团包括含有约8-约18，较佳为约10-约16个碳原子的饱和的或不饱和的，支链或非支链的烷基。较佳的是，烷基为直链饱和烷基。烷基可含有最高达约3个羟基和/或聚烯化氧部分。合适的烷基多糖为辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基和十八烷基的二-、三-、四-、五-、和六-葡糖苷、半乳糖苷、葡萄糖，果糖苷、果糖和/或半乳糖。合适的混合物包括椰子烷基二、三、四和五葡糖苷以及牛脂烷基四、五和六葡萄苷。
较佳的烷基聚苷通式如下R2O(CnH2nO)t(葡糖基)x其中R2选自烷基、烷基-苯基、羟烷基、羟烷基苯基、及其混合物，其中烷基含有约0-约18，较佳为约12-约14个碳原子;n为2或3，较佳为2;t为0-约10，较佳为0;x为约1.3-约10，较佳为约1.3-约3，最佳为约1.3-约2.7。糖基较佳的是来自葡萄糖。为了制备这些化合物，首先形成醇或烷基聚乙氧基醇，然后与葡萄糖或葡糖源反应生成葡糖苷(在其1-位)。之后，补充的糖基单元可以结合在它们的1-位与先前糖基单元的2-，3-，4-和/或6-位之间，优选占主要地位的2-位之间。
7.具有如下通式的脂肪酸酰胺表面活性剂
其中R6为含有约7-约21(较佳为约9-约17)个碳原子的烷基，每个R7选自H，C1-C10烷基，C1-C9羟烷基和-(C2H4O)xH，其中x从1至约3变化。
较佳的酰胺为C8-C20氨酰胺、单乙醇酰胺、二乙醇酰胺和异丙醇酰胺。
阳离子表面活性剂在本发明的洗涤剂组合物中也可包括阳离子洗涤表面活性剂。阳离子活性剂包括铵表面活性剂，如卤化烷基二甲铵，以及具有如下通式的那些表面活性剂
其中R2是一个在烷基链中具有约8-约18个碳原子的烷基或烷基苯基，各个R3选自-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-、-CH2CH-(CH2OH)-、-CH2CH2CH2-、及其混合物;各个R4选自C1-C4烷基、C1-C4羟烷基、苯基、结合两个R4基团形成的环结构、-CH2CHOH-CHOHCOR6CHOHCH2OH，其中R6为任何己糖或分子量小于约1000的己糖聚合物、并且当Y不是0时为氢;R5与R4相同或是一个烷基链，其中R2加R5碳原子的总数不大于约18;各个Y为0-约10，Y值的总数为0-约15;X为任何可混溶的阴离子。
在结合入本文参考的1980年10月14日授予Cambre的美国专利4228044也描述了本文有用的其它阳离子表面活性剂。
其它表面活性剂两性表面活性剂也可被掺入本发明的洗涤剂组合物中。这些表面活性剂可概括地称作仲和叔胺的脂族衍生物，或脂族基可为直链或支链的杂环仲和叔胺的脂族衍生物。脂族取代基中的一种至少含有约8个碳原子，通常为约8-约18个碳原子，以及至少一种含有一个阴离子水溶性基团，例如羟基、磺酸根、硫酸根。参见1975年12月30日授予Laughlin等人的美国专利No3929678 19栏18-35行(结合八本文参考)两性表面活性剂的实例。
两性离子表面活性剂也可被掺入本发明的洗涤剂组合物中。这些表面活性剂可概括地称作仲和叔胺的衍生物、杂环仲和叔胺的衍生物、或季胺、季磷鎓或叔锍化合物的衍生物。参见1975年12月30日授予Laughlin等人的美国专利No3929678第19栏38行至22栏48行(结合八本文参考)两性离子表面活性剂的实例。
两性和两性离子表面活性剂通常与一种或多种阴离子和/或非离子表面活性剂结合作用。
多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂本发明的液体洗涤剂组合物也可含有一种“增强酶性能量”的多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂。“增强酶”是指组合物的配方可选择一定量的欲掺入组合物中的多羟基脂肪酸酰胺，掺入的量会改进洗涤剂组合物的清洗性能。通常，对常规的酶含量，掺入约1%(重量)多羟基脂肪酰胺将增强酶的性能。
本发明的洗涤剂组合物通常含有至少1%(重量)多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂，较佳的是至少约3%-约50%，最佳是约3%-30%多羟基脂肪酸酰胺。
多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂组分包括如下结构式的化合物
其中R1是H、C1-C4烃基、2-羟乙基、2-羟丙基、或其混合物、较佳为C1-C4烷基，更佳为C1或C2烷基，最佳为C1烷基(即甲基);R2是C5-C31烃基，较佳是直链C7-C19烷基或烯烃基，更佳为直链C9-C17烷基或烯烃基，最佳为直链C11-C15烷基或烯烃基，或其混合物;Z是具有含至少3个直接连在链上羟基的直链烃链的多羟基烃基，或其烷氧化衍生物(较佳的是乙氧化的或丙氧化的)。Z较佳的是由还原胺化反应中还原糖得到的。更佳的是Z为糖基。合适的还原糖包括葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、牛乳糖、甘露糖和木糖。除了上面列出的各种糖外还可使用高右旋糖玉米糖浆、高果糖玉米糖浆、和高麦芽糖玉米糖浆作为原料。这些玉米糖浆可以产生Z的混合糖组分。应该理解到，这不是意味要排除其它合适的原料。Z较佳的是选自-CH2-(CHOH)n-CH2O-CH(CH2OH)-(CHOH)n-1-CH2OH、-CH2-(CHOH)2(CHOR’)(CHOH)-CH2OH，及其烷氧化衍生物，其中n是3-5的整数，而R1是H或环状或脂族单糖。最佳的是n为4的糖基，特别是-CH2-(CHOH)4-CH2OH。
在式(Ⅰ)中，R′可以是，例如N-甲基，N-乙基、N-丙基、N-异丙基、N-丁基、N-2-羟乙基、或N-2-羟丙基。
R2-CO-N＜可以是，例如柯卡酰胺(Cocamide)、硬脂酰胺、油酰胺、月桂酰胺、肉豆蔻酰胺、癸酰胺、棕榈酰胺、牛脂酰胺等。
Z可以是1-脱氧葡糖基，2-脱氧果糖基、1-脱氧麦芽糖基、1-脱氧乳糖基、1-脱氧半乳糖基、1-脱氧甘露糖基、1-脱氧木糖基等。
制备多羟基脂肪酸酰胺的方法在本领域中是已知的。通常，它们可通过在还原胺化反应中使一种烷基胺与还原糖反应，生成相应的N-烷基多羟基胺，然后在缩合/酰胺化步骤中使N-烷基多羟基胺与脂族酯或甘油三酯反应，生成N-烷基、N-多羟基脂肪酰胺产物而制得。在例如Thomas Hedley & CO，Ltd的1958年2月18日公布的英国专利说明书809060，1960年12月20日授予E.R.Wilson的美国专利2965576，和1955年3月8日授予Anthony M.Schwartz的美国专利2703798，以及1934年12月25日授予Piggott的美国专利1985424(各专利均结合入本文参考)中公开了制备含多羟基脂肪酸酰胺的组合物的方法。
D.第二种酶本发明较佳的组合物还包含增强性能量的洗涤剂可混溶的第二种酶。“洗涤剂可混溶”是指与其他液体洗涤剂组合物的成分，如洗涤表面活性剂和洗涤助剂的可混性。这些第二种酶较佳的是选自脂酶，淀粉酶，纤维素酶，及其混合物。术语“第二种酶”包括上述的蛋白酶，故每种组合物含至少两种酶，包括至少一种蛋白酶。组合物中所用第二种酶的量根据酶的类型变化。通常较佳的使用约0.0001-0.3%，更佳的为0.001%-0.1%(重量)这些第二种酶。可以使用相同种类的酶(例如脂酶)或二种以上(例如纤维素酶和脂酶)的混合物。可以使用纯化的或非纯化形式的酶。
在这些组合物中可使用适用于液体洗涤剂组合物的任何解脂酶。适于本发明使用的脂酶包括细菌和真菌来源的那些酶。
合适的细菌脂酶包括由假单胞菌属(Pseudomonas)的衍生物，如结合在本文参考的英国专利1372034中所公开的Pseudomonas Stutzeri ATCC 19.154所制得的那些脂酶。合适的脂酶包括那些显示出与由微生物Pseudomonas fluorescens IAM 1057制得的脂酶抗体阳性免疫交叉反应的脂酶。在1978年2月24日公开的日本专利申请53-20487中已经公开了这一脂酶及其提纯的方法。这一脂酶可从Amano Pharmaceutical Co Ltd.Nagoya，Japan购得，商品名为Lipase“Amano”，本文下面称作“Amano-P”。使用Ouchlerlony(Acta.Med.Scan.133，Pages76-79(1950))的标准和公知的免疫扩散操作，这些脂酶会显示出与Amano-P抗体的阳性免疫交叉反应。在1987年11月17日授予Thom等人的美国专利4707291(结合入本文参考)中也公开了这些脂酶及它们与Amano-P免疫交叉反应的方法。其典型的实例是Amano-P脂酶.脂酶ex Pseudomonas fnagi FERM P1339可以商品名Amano-B购得)脂酶ex Pseudomonas nitroreducens var.lipolyticum FERM P1338(可以商品名Amano-CES购得)、脂酶ex Chromobacter Viscosum，例如Chromobacter Viscosum Var.lipolyticum NRRLB 3673，市场上可由Toyo Jozo Co，Tagata，Japan购得);还有从U.S.Biochemical Corp，U.S.A和Disoynth Co，The Nethelands购得的Chromobacter Viscosum脂酶，和脂酶ex Pseudomonas gladioli。
合适的真菌脂酶包括能通过Humicola lanuginosa和ThermomycesLanuginosa产生的那些脂酶。最佳的是欧洲专利申请0258068(NovoInduetri A/S)中所述的通过克隆来自Humicola lanuginosa的基因并在Aspergillus oryzae中表达该基因而得到的脂酶，市场上可以NovoNordisk A/S以商品名Lipolase
购得。
在这些组合物中可使用约10-18000，较佳的60-6000脂酶单位/g(LU/g)的脂酶。1脂酶单位是在PH为9.0，温度为30℃时在恒PH槽中产生1μmol可滴定脂肪酸/每分钟的脂酶量，基体是在5μmol/lTris缓冲剂中有13μmol/lCa 和20μmol/lNaCl存在下3.3%(重量)橄榄油和3.3%阿拉伯树胶的乳液。
在这些组合物中可以使用适用于液体洗涤剂组合物的任何纤维素酶。适于本发明使用的纤维素酶包括由细菌和真菌来源得到的那些酶。它们的最佳PH为5和9.5之间。可使用约0.0001-1%(重量)的纤维素酶。
结合在本文参考的，1984年3月6日授予Barbesgaard等人的美国专利4435307中公开了合适的纤维素酶，该专利描述了由Humicola insolens产出的真菌纤维素酶。GB-A-2075028，GB-A- 2095275和DE-OS-2247832中也公开了合适的纤维素酶。
这些纤维素酶的实例是由Humicola insoens(Humicola griseavor.thermoidea)的菌株，特别是Humicola菌株DSM 1800产生的纤维素酶，和由Bacillus N或属于Aeromonas属的产生脂酶212真菌所产生的脂酶，以及由海生软体动物的肝胰腺(Dolabella Auricula Solander)提取的纤维素酶。
在这些组合物中可使用适用于液体洗涤剂组合物的任何淀粉酶。这些淀粉酶包括例如，由英国专利说明书No1296839(Novo)中详细描述的B.licheniformis的特殊菌株所得到的淀粉酶。淀粉分解蛋白质包括例如，Rapidase
(Intenational Bio-Synthetics Inc.)和Termamyl
(Novo Industries)。
可使用约0.0001%-0.55，较佳为0.0005-0.1%(重量)的淀粉酶。
E.任选成分在本发明的组合物中可任选地包括洗涤助洗剂。本发明可使用0-约50%(重量)的洗涤助洗剂。可使用有机以及无机助洗剂。当存在助洗剂时，这些组合物通常含有至少1%助洗剂。液体配方较佳的是含有以重量计的约3%-30%，更佳约5-20%洗涤助洗剂。
无机洗涤助洗剂包括，但不限于，多磷酸(以三磷酸、焦磷酸、和玻璃状聚偏磷酸为例)、膦酸、肌醇六磷酸、硅酸、碳酸(包括重碳酸和倍半碳酸)、硫酸、硅铝酸的碱金属、铵和链烷醇铵盐。也可使用硼酸盐助洗剂，以及在洗涤剂贮存和洗涤条件下能产生硼酸盐的硼酸盐生成材料(在下文中总称“硼酸盐助洗剂”)。欲在洗涤条件低于约50℃，特别是低于约40℃下使用的本发明的组合物中，较佳的是使用非硼酸盐助洗剂。
硅酸盐助洗剂的实例是碱金属硅酸盐，特别是SiO2∶Na2O比例范围为1.6∶1-3.2∶1的那些硅酸盐和多层硅酸盐，如结合入参考的1987年5月12日颁布的美国专利4664839中所述的多层硅酸钠。然而，其他硅酸盐也可使用，例如硅酸镁，它可作为颗粒配方中的轮廓加重剂，作为氧漂白的稳定剂，以及作为泡沫控制系统的组分。
碳酸盐助洗剂的实例是碱土金属和碱金属碳酸盐，包括如结合入本文参考的1973年11月15日公开的德国专利申请No.2321001中所述的碳酸和倍半碳酸钠及其与超细碳酸钙的混合物。
硅铝酸盐助洗剂对本发明有用。硅铝酸盐助洗剂在市场上最广泛的重垢型颗粒洗涤剂组合物中有重要意义，并也可是液体洗涤剂配方中重要的助洗剂成分。硅铝酸盐助洗剂包括如下经验式的那些助洗剂
其中M是钠、钾、铵或取代的铵，Z为约0.5-约2;而y是1;这一物质的镁离子交换能力至少为约50毫克当量CaCO3硬度/克无水硅铝酸盐。较佳的硅铝酸盐为具有如下通式的沸石助洗剂
其中Z和Y为至少6的整数，Z与Y的摩尔比范围为1.0-约0.5，而X为一个约15-约264的整数。
有用的硅铝酸盐离子交换材料市场上可购得。这些硅铝酸盐可以是结晶的或非晶态结构并可以是天然存在的硅铝酸盐或合成得到的。结合入本文参考的1976年10月12日授予Krummel等人的美国专利3985669中公开了制备硅铝酸盐离子交换材料的方法。本发明有用的较佳合成结晶硅铝酸盐离子交换材料可以牌号Zeolite A、Zeolite P(B)和Zeolite X购得。在一个特定的较佳实施方案中，结晶硅铝酸盐离子交换材料具有如下通式
其中X为约20-约30，特别是约27。这一材料称作Zeolite A。较佳的是，硅铝酸盐的粒度为直径约0.1-10微米。
多磷酸盐的特定实例为碱金属三磷酸盐、焦磷酸钠、钾和铵、正磷酸钠如钾、聚偏磷酸钠、其中聚合度范围为约6-约21，以及肌醇六磷酸盐。
膦酸盐助洗剂的实例为乙烷1-羟基-1，1-二膦酸的水溶性盐，特别是钠和钾盐，亚甲基二膦酸的水溶性盐，例如三钠和三钾盐以及取代的亚甲基二膦酸水溶性盐，如亚乙基、异亚丙基苯基亚甲基和卤代亚甲基膦酸三钠和三钾。结合入本文参考的1964年12月1日和1965年10月19日授予Diehl的美国专利Nos 3159581和3213030，1969年1月14日授予Roy的美国专利No3422021，以及1968年9月3日和1969年1月14日授予Ouimby的美国专利Nos3400148和3422137中公开了上述类型的膦酸盐助洗剂。
对本发明较佳的有机洗涤助洗剂包括广泛种类的多元羧酸盐化合物。本文所用的“多羧酸盐”是指含有多个羧酸盐的化合物，较佳的至少3个羧酸盐。
多羧酸盐助洗剂通常可以酸形式加入组合物中，但也可以中性盐形式添加。当以盐形式使用时，较佳的是碱金属，如钠、钾和锂，或链烷醇铵盐。
在多羧酸盐助洗剂中包括有多种类型的有用物质。一种重要的多羧酸盐助洗剂包括多羧酸醚盐。已公开了一系列多羧酸醚盐用作洗涤助洗剂。有用的多羧酸醚盐的实例包括结合入本文参考的1964年4月7日颁布的Berg的美国专利3128287和1972年1月18日颁布的Lamberti等人的美国专利3635830中公开的氧联二丁二酸氢盐。
本发明中用作助洗剂的特定类型多羧酸醚盐也包括如下通式的那些化合物
其中A是H或OHB是H或-O-CH(COOX)-CH2(COOX);X是H或一个成盐阳离子。例如，当上述通式A和B均为H时，则该化合物为氧联二丁二酸及其水溶性盐。如A为OH而B为H时，则该化合物为单丁二酸酒石酸盐(TMS)及其水溶性盐。当A是H而B是-O-CH(COOX)-CH2(COOX)时，则该化合物为二丁二酸酒石酸盐(TDS)及其水溶性盐。对本发明使用特别优选的是这些助洗剂的混合物。TMS与TDS的重量比为约97∶3-约20∶80的TMS和TDS混合物特别优选。在1987年5月5日授予Bush等人的美国专利4663071中公开了这些助洗剂。
合适的多羧盐醚盐也包括环状化合物，特别是脂环化合物，如结合入本文参考的美国专利3923679;3835163;4158635;4120874和4102903中所公开的那些化合物。
其它有用的洗涤助洗剂包括如下结构式所表示的羟基多羧酸醚盐
其中M是氢或一个其中生成的盐是水溶性的阳离子，较佳是一个碱金属、铵或取代的铵阳离子，n是约2-15(较佳的n是约2-约10，更佳的是n平均为约2-约4)以及每个R相同或不同并选自氢、C1-4烷基或C1-4取代的烷基(较佳的R为氢)。
其它多羧酸醚盐还包括马来酐与亚乙基或乙烯基甲基醚、1，3，5-三羟基苯-2，4，6-三磺酸和羧基甲氧基丁二酸的共聚物。
有机多羧酸盐助洗剂也包括各种不同的多乙酸的碱金属、铵和取代的铵盐。实例包括乙二胺四乙酸、和次氮基三乙酸的钠、钾、锂、铵和取代的铵盐。
多羧酸盐也包括如马来酸、丁二酸、氧联二丁二酸、多马来酸、苯1，3，5-三羧酸、羧甲氧基丁二酸、及其可溶性盐。
酒石酸盐助洗剂，例如酒石酸及其可溶性盐(特别是钠盐)是重垢型液体洗涤剂的特别重要的多羧酸盐助洗剂，但也能用于颗粒组合物中。
其他羧酸盐助洗剂包括结合在本文参考的1973年3月28日授予Diehl的美国专利3723322中公开的羧化的碳水化合物。
结合入本文参考的1986年1月28日授予Bush的美国专利4566984中公开的3，3-二羧基-4-氧杂-1，6-己二酸盐和相关的化合物也适用于本发明的洗涤剂组合物。有用的丁二酸助洗剂包括C5-C20烷基丁二酸及其盐。这一类型的一种特别优选的化合物是十二碳烯基丁二酸。烷基丁二酸通常是如上述专利所述的通式R-CH(COOH)CH2(COOH)，即丁二酸的衍生物，其中R为烃，例如C10-C20烷基或链烯基，较佳的是C12-C16或其中R可以用羟基、磺基、氧硫基或砜取代基所取代。
丁二酸盐助洗剂较佳的是以其水溶性盐的形式使用，包括钠、钾、铵和链烷醇铵盐。
丁二酸助洗剂的特定例子包括月桂基丁二酸盐、肉豆蔻基丁二酸盐、棕榈基丁二酸盐、2-十二烷基丁二酸盐(较佳)，2-十五烯基丁二酸、等等。月桂基丁二酸盐是这一组的较佳助洗剂并分开在1986年11月5日出版的欧洲专利申请86200690.5/0200263中。
有用的助洗剂实例还包括钠和钾的羧甲氧基丙二酸盐、羧甲氧基丁二酸盐、顺式-环-乙烷-六羧酸盐、顺式-环丙烷-四羧酸盐、水溶性聚丙烯酸盐(分子量达约2000以上的这些聚丙烯酸盐也可有效地用作分散剂)，以及马来酐与乙烯甲醚或乙烯的共聚物。
其他合适的聚羧酸酯是结合入本文参考的1979年3月13日授予Crutchfield等人的美国专利4144226中所述的聚乙酰羧酸酯。这些聚乙酰羧酸酯可通过在聚合条件下将二羟乙酸酯和聚合引发剂放在一起而制得。而后将得到的聚乙酰羧酸酯结合在化学稳定的端基上以便该聚乙酰羧酸酯针对碱性溶液中的快速解聚保持稳定，转化成相应的盐，并加入到表面活性剂中。
结合入本文参考的1967年3月7日授予Diehl的美国专利3308067中也公开了多羧酸盐助洗剂。这些材料包括脂族类羧酸均聚和共聚物的水溶性盐，如马来酸、衣康酸和亚甲基丙二酸。
现有技术中已知的其他有机助洗剂也可使用。例如，也可使用具有长链烃基的单羧酸及其可溶性盐。这些包括通常称作“皂”的材料。通常使用C10-C20链长。烃基可以是饱和的或不饱和的。
其他任选成分包括去污剂、螯合剂、去泥污/抗再沉淀剂、聚合分散剂、漂白剂、增白剂、抑泡剂、溶剂和美化剂。
本文的洗涤剂组合物可配制成多种组合物，例如洗衣洗涤剂以及硬表面清洁剂或洗碟组合物。
通过以下实施例进一步说明本发明的组合物。
实施例A通过按所列比例的成分制得下列组合物。在后面的实施例中，肽醛为肽醛1CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH肽醛2CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH肽醛3CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH肽醛4CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH组合物1 2 3 4 5 6-直链烷基苯磺酸 8.5 15 6.5 10 12.5 4-C12-15烷基硫酸钠 1 2 1 2 0 0-C14-15烷基2.5倍乙 10 5 10.5 0 11 9氧化硫酸盐-C12葡糖酰胺 0 0 9 0 0 5-7倍乙氧化C12-15醇 3 10 4 7 2.5 0-脂肪酸 2 5 5 4 2 2-酒石酸 5 6 7 4 6 4-C12-14链烯基取代的丁二酸 0 6 0 5 0 6-氢氧化钠 2 6 2 4 1 1.5-乙醇 2 1.5 2 4 2 1.5-单乙醇胺 6 5 4 0 0 0-1,2-丙二醇 12 10 5 5 4 6-淀粉酶(143KNU/g) 0 0 0.1 0 0 0.2-LipolaseR(100KLU/g 0.5 0.2 0.5 0.5 0.4 0市售溶液)-ProtaseB(34g/L市售溶液) 0.9 0 0.5 0 1.2 0-SavinaseR(市售溶液) 0 0.3 0 0.4 0.2 0.3-CarezymeR(实验试样) 0.5 1 0.8 0 0.2 0.8-肽醛1 0.009 - - - - 0.0003-肽醛2 - - 0.001 - 0.008 --肽醛3 - 0.005 - - - --肽醛4 - - - 0.0005 - --水及次要成分 补充至100%实施例B按照流程图A(CH3O-(O)C-Phe-Gly-LeH)和B(CH3N(O)C-Phe-Gly-LeH)合成肽醛。在流程图A和B中由供应商购得某些中间体并且在流程图内注明了这些情况。按照Martin(J.Org.Chem.，1983，48，4155)的操作合成Dess-Martin Periodinane。Z-Gly-Ala-Leu-OMe(5)-在10分钟周期内向Z-Gly-Ala-OH(3)(20.0g，0.071M)和Leu-OMe.HCl(12.9g，0.71M)的250ml二氯甲烷溶液逐滴加入21.9ml(0.157M)三乙胺(TEA)。在加完后添加11.9ml(0.078M)二氰基膦酸二乙酯(DECP)。将该混合物搅拌过夜并除去溶剂。将残渣溶于乙酸乙酯中并用1NHCl、饱和NaHCO3，和盐水洗涤。用MgSO4将该溶液脱水、过滤并除去溶剂。回收的29.0g通过薄层色谱法(TLC)是均匀的。13CNMR(CDCl3)15.93，18.60，21.77，22.69，24.72，40.80，44.20，48.70，50.87，52.13，65.28，66.84，127.92，128.00，128.41，136.36，156.76，169.31，172.58，173，24。
Moc-Phe-Gly-Ala-Leu-OMe(6)……-将Z-Gly-Ala-Leu-OMe(5)(29.0g，0.071M)溶于300ml MeOH和35ML 4.0MHCl的二噁烷中。向这一溶剂混合物分批添加5.8g10% Pd/C。用吸气器将该浆料脱气并通过球形瓶引入H2。将该浆料保持在H2正压下并搅拌过夜。通过硅藻土和多孔玻璃漏斗过滤浆料并用MeOH充分洗涤。除去溶剂并用醚研制残渣。过滤浆料并在真空下干燥滤瓶。回收20.2g灰白色粉末。将粗产物和Moc-Phe-OH(15.3g，0.068M)溶于500mlCH2Cl2中并逐滴添加29.9ml TEA，随后逐滴添加11.7ml(0.072M)DECP。将该混合物搅拌过夜并除去溶剂。将残渣溶于EcOAc并用1NHCl、饱和NaHCO3和盐水洗涤。将有机相脱水(MgSO4)、过滤并除去溶剂，得到21.3g产物。13CNMR(CDCl3)16.66，16.83，20.01，22.46，23.41，25.40，40.11，41.72，43.75，49.39，51.37，52.87，56.42，65.92，77.39，77.55，77.81，78.24，127.42，128.96，129.19，130.09，137.41，157.62，169.00，172.63，173.24，174.00。
Moc-Phe-Gly-Ala-Leucinal-将Moc-Phe-Gly-Leu-OMe(21.3g，44.5mmol)溶于400mlEcOH和250mlTHF的混合物中。将该溶液冷却至0℃并添加9.88g(89.0mmol)CaCl2。将该浆料均化5分钟并在5分钟内逐滴添加6.73g(178.0mmol)NaBH4。将该溶液在0℃搅拌2小时并用1NHCl小心将该反应抑制。在真空下除去EcOH和THF并用500mlEcOAc萃取剩余的含水混合物。用饱和NaHCO3·盐水洗涤这一有机相并用MgSO4使有机相脱水。过滤并除去溶剂，得到20.2g灰白色结晶物质。在硅胶(3.5%MeOH/CH2Cl2)上色谱分离得到13.0g产物。Rf-0.3(10% MeOH/CH2Cl2)，13CNMR(CDCl3)17.50，22.23，23.12，24.84，37.22，39.76，43.96，49.88，50.93，52.48，58.22，65.27，98.46，98.54，127.04，128.68，129.10，136.62，157.85，170.71，173.85，174.45。
Moc-Phe-Gly-Leu-H(7)-将29.9g(70.0mmol)Dess-Martin Periodinane悬浮在500ml CH2Cl2中并搅拌10分钟。将Moc-Phe-Gly-Ala-Leucinol(10.6g，23.5mmol)溶于100ml CH2Cl2中并以中等速度加入到Periodinane浆料中。将该混合物搅拌1小时并倾注入150ml含有123g Na2S2O3的NaHCO3中。使该混合物搅拌15分钟并用EtOAc萃取。将有机相脱水过滤，随后除去溶剂。在硅胶上色谱分离(3.5%MeOH/CH2Cl2)得到5.1g甲氧基半缩醛和醛的混合物的纯白色固体。13CNMR(CDCl3CD3OD)17.62，17.94，21.53，21.71，22.99，23.30，23.39，24.54，37.05，37.70，37.92，38.24，42.87，49.83，51.79，52.14，56.75，57.19，98.40，99.18，127.00，128.60，129.06，136.44，157.27，169.19，169.67，172.73，173.40，200.43。
Moc-Phe-OH(2)…-将L-苯基丙氨酸(5.0g，30.2mmol)溶于30ml 1N NaOH中并冷却至0℃。逐滴添加氯甲酸甲酯(2.53ml，31.8mmol)，同时用单独的添加漏斗添加30ml 1N NaOH。在加入完毕后用200ml EtOAc洗涤该溶液并将水相酸化至pH＝2。用EtOAc(2x200ml)萃取混合物。脱水(MgSO4)，过滤并除去溶剂，得到6.0g产物。13CNMR(CDCl3)37.75，52.57，54.64，128.63，129.35，135.74，156.77，175.76。Mac-Phe-OH(9)…室温向1.00g(2.34mmol)Phe-OBn.PTSA的Et2O溶液添加0.36ml(2.57mmol)TEA。随后添加10mlMeOH，然后逐滴添加0.14ml(2.34mmol)异氰酸甲酯的4ml Et2O溶液。将该反应混合物倾入50ml水中并分相。用MgSO4将有机相脱水，过滤并除去溶剂，得到0.66g产物(产率96%)。13CNMR(CDCl3)27.05，38.47，53.45，54.64，65.90，127.43，127.85，128.48，129.28，130.27，135.23，136.22，158.17，173.08。向该粗产物(2.11mmol)的25mlMeOH溶液添加Pd/c并将浆料脱气。通过球形瓶在H2正压下将该浆料搅拌1.5小时。通过硅藻土过滤浆料并用MeOH洗涤滤瓶。除去溶剂得到0.430g产物。13CNMR26.60，37.92，54.28，126.69，128.28，129.28，136.65，159.36，175.33。
Mac-Phe-Gly-Ala-Leucinol(10)-将0.250ml TEA(1.80mmol)加入到0.200g Mac-Phe-OH(0.900mmol)和按化合物(6)概述的步骤氢化5所产生的0.253g Gly-Ala-Leu-OMe.HCl(0.818mmol)的15ml DMF溶液，随后添加0.147mlDECP(0.900mmol)。将该混合物搅拌过夜并除去溶剂。将残渣重新溶于EcOAc中并依次用0.3N HCl、饱和NaHCO3和盐水洗涤。将溶液脱水、过滤并除去溶剂，得到0.300g产物。将粗产物(0.628mmol)溶于17ml乙醇中并冷却至0℃。向这一溶液加入在4mlTHF中的0.140gCaCl2(1.25mmol)。以一批向生成的浆料加入0.095 NaBH4。45分钟后，用水急冷该溶液并用EtOAc萃取。用MgSO4使有机相脱水，过滤并除去溶剂。用4% MeOH/CH2Cl2色谱分离得到0.200g纯产物。13CNMR(CD3OD)16.84，21.05，22.60，24.51，25.66，37.41，39.73，42.67，49.65，56.63，64.33，126.63，128.32，128.96，137.12，160.01，170.45，173.60，175.03。
Mac-Phe-Gly-Ala-Leu-H(11)-向Dess-Martin Peridinane(0.565g，1.33mmol)的15ml CH2Cl2浆料中加入Mac-Phe-Gly-Ala-Leuinol(0.200g，0.445mmol)的CH2Cl2悬浮液，得到的浆料搅拌0.5小时。将该混合物倾入含有2.32g Na2S2O3的饱和NaHCO3液并将该溶液搅拌10分钟，随后用EtOAc萃取。用MgSO4将有相脱水，过滤并除去溶剂。将残渣在硅胶上色谱分离得到0.081g产物。13CNMR(10%在CDCl3中的CD3OD)17.18，17.43，21.35，21.55，23.26，23.34，24.40，24.47，26.36，26.60，37.25，37.38，38.60，42.86，42.97，51.77，51.93，54.94，56.75，57.00，98.7，99.32，126.87，128.49，128.91，136.51，159.53，159.55，169.93，170.39，173.63，173.85，174.70。
Z＝苄酯基Gly＝甘氨酸Ala＝丙氨酸Leu＝亮氨酸Phe＝苯丙氨酸OMe＝甲酯TEA＝三乙胺DECP＝氰基膦酸二乙酯TLC＝薄层色谱
MeOH＝甲醇Pd/C＝披钯活性炭EeOH＝乙醇THF＝四氢呋喃Mac＝甲氨羰基
权利要求
1.一种液体含水洗涤剂组合物，该组合物含有-1%-80%洗涤表面活性剂，-0.0001%-1.0%活性蛋白酶或其混合物，其特征在于还含有0.00001%-5%的含2-50个氨基酸的一种肽醛，或其混合物。
2.权利要求1的组合物，含有0.0001%-1%，较佳为0.0005%-0.2%(组合物重量计)的所述肽醛。
3.权利要求1的组合物，其中所述肽醛含有2-6个氨基酸。
4.权利要求1的组合物，其中所述肽醛的肽链的N-末端被氨基甲酸甲酯或甲脲基团所保护。
5.权利要求1的组合物，含有0.0005%-0.2%的活性蛋白酶或其混合物。
6.权利要求1的组合物，其中所述蛋白酶是枯草溶菌素型蛋白酶。
7.权利要求1的组合物，其中所述蛋白酶选自Alcalase 、枯草溶菌素BPN′、ProteaseA、ProteaseB，及其混合物。
8.权利要求1的组合物，其中所述肽醛选自Phe-Gly-Ala-LeuH或Phe-Gly-Ala-PheHa或其氨基甲酸甲酯或甲脲N-端保护的形式。
9.权利要求1的组合物，该组合物还含有选自脂酶、淀粉酶、纤维素酶及其混合物的性能增强量的洗涤剂可混溶的第二种酶。
10.权利要求9的组合物，其中所述第二种酶是脂酶。
11.权利要求10的组合物，其中脂酶是通过克隆来自Humicola Lanuginosa的基因并在Aspergillus Oryzae中表达该基因而得到的。
12.权利要求10的组合物，该组合物含有10-18000脂酶单位/克。
13.权利要求12的组合物，该组合物含有60-6000单位/克。
14.权利要求9的组合物，其中所述第二种酶是由Humicola Insolens衍生的纤维素酶。
15.权利要求14的组合物，该组合物含有0.0001%-0.1%(以组合物重计)的所述纤维素酶。
16.一种适用于权利要求1的组合物的肽醛，该肽醛选自CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH.CH3O-(O)-(O)C-Phe-Gly-Ala-PheH.CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH和CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-PheH。
全文摘要
所公开的含水液体洗涤剂组合物含有一种蛋白酶，其中蛋白分解活性被肽醛可逆地抑制。
文档编号C07K5/087GK1085943SQ93117788
公开日1994年4月27日 申请日期1993年8月14日 优先权日1992年8月14日
发明者J·P·庄士敦, P·M·A·伦诺尔, J·M·麦克艾弗, R·拉贝克, C·A·J·K·托恩 申请人:普罗格特-甘布尔公司
发明涉及含有酶的液体洗涤剂组合物更确切地是，本发明涉及含有洗涤表面活性剂、蛋白酶、和肽醛的液体洗涤剂组合物。
含蛋白酶的液体含水洗涤剂，特别在洗衣范围中是公知的。通过在组合物中第二类酶的蛋白酶，如脂酶、淀粉酶和纤维素酶，或在蛋白酶本身上的降解现象是这种含蛋白酶液体含水洗涤剂通常遇到的问题。
结果，洗涤剂组合物中第二种酶或蛋白酶本身的稳定性受到影响，从而该洗涤剂的使用不太好。
为解决这一问题，已有人提出使用各种不同的蛋白酶抑制剂或稳定剂。例如US4566985提出使用苄脒盐酸化物，EP 376705提出使用低级脂族醇或羧酸，EP381262提出使用多羟基化合物和硼化合物的混合物，以及同时待批申请EP 91870072.5提出使用芳族硼酸盐酯。
从而，本发明的一个目的是提供有效的并适用于含水液体洗涤剂组合物的其他可逆蛋白酶抑制剂。
根据这一目的，本发明提出使用肽醛作为含水液体洗涤剂组合物中可逆蛋白酶抑制剂。
本发明的一个特殊优点在于，在本文所述的液体洗涤剂组合物中仅需使用极低量的肽醛。从而使材料的某些部分可适合于其他成分。这在本发明包括的浓缩液体洗涤剂组合物的本文配方中特别关键。
由于本发明的肽醛对抑制蛋白酶是如此有效，所以本发明的另一优点是，甚至可将对蛋白降解高度敏感的酶掺入含有蛋白酶的液体洗涤剂组合物中。
使用肽的衍生物抑制蛋白质迄今看来似乎仅在医疗用途中被公开过。例如，EP293881公开了使用肽硼酸作为胰蛋白酶类丝氨酸蛋白酶的抑制剂。EP185390和US4399065公开了将某些肽醛衍生物用于抑制血液凝固。J9002967公开了将旋光α氨基醛用于抑制通常的酶。还可参见“Inhibition of Thrombin and Trypsin by Tripeptide Aldehydes”Int J Peptide Protein Res.，Vol 12(1978)，PP217-221;Gaal，Bacsy & Rappay，and“Tripeptide Aldehyde Protease Inhibitors May Depress in Vitro Prolactin and Growth Hormone Release”Endocrinology，Vol.116，No.4(1985).PP.1426-1432;Rappy，Makara，Bajusz & Nagy。EP-A-473502中也已公开了某些肽醛对抑制蛋白酶所传递的皮肤刺激。
本发明是一种液体含水洗涤剂组合物，该组合物含有-1%-80%洗涤表面活性剂，-0.0001%-1.0%活性蛋白酶或其混合物，其特征在于它还包括含有2-50个氨基酸的0.00001%-5%肽醛，或者混合物。
本发明的液体含水洗涤剂组合物包括含三种基本成分(A)肽醛或其混合物，(B)蛋白酶或其混合物，以及(C)洗涤表面活性剂。本发明的组合物较佳的是还含有(D)洗涤剂可混溶的第二种酶或其混合物，还可含有(E)任选的成分。
A.肽醛本发明的洗涤剂组合物，作为第一种基本成分含有2-50氨基酸的肽醛，或其混合物。本文所用的术语肽醛是指含有肽链的化合物，其中所述链的C末端由羧基转化成醛基。肽醛本身以及其制备方法是已知的并且在例如US5015627，EP185930和DE3200812中已被公开。本文所用的较佳的肽醛含有2-6氨基酸，最佳3-4。
尽管不是企图受到理论的束缚，但可认为，本发明的肽醛与液体洗涤剂组合物中的蛋白酶组合，由此抑制所述的蛋白酶。在水中稀释时，蛋白水解活性通过蛋白酶/肽醛配合物的离解而恢复。
本发明肽醛中所述肽链的N末端可被本领域普通技术人员公知的合适的保护基团所保护。然而，在本发明的高度优选实施的方案中，所述肽链的N末端被氨基甲酸甲酯(CH3O-(O)C-)或甲脲(CH3N-(O)C-)基团所保护。事实上已发现，具有氨基甲酸甲酯或甲脲为N端保护基团的本发明的肽醛与未保护的或另外保护的肽醛相比较是特别稳定的，其中所述保护的肽醛对抑制蛋白水解活性的效率自始至终更好的维持。
本发明的特殊优点是对每个单独的场合来说可以订制，特别是，根据在给定的洗涤剂组合物中所用的蛋白酶，可选择在可逆抑制所述蛋白酶方面比其他的更有效的肽醛。存在的蛋白酶可被区分为胰蛋白酶、枯草溶菌素、胰疑蛋白酶和弹性蛋白酶型蛋白酶。对于胰蛋白酶型蛋白酶，合适的肽醛包括Lys-Ala-LysH、Ile-Phe-LysH、Phe-Por-ArgH和PheVal-ArgH。对于枯草溶菌素型蛋白酶，合适的肽醛包括Lys-Ala、AlaH、Ala-ALa-ProH、Gly-Ala-LeuH、Gly-Ala-PheH、Phe-Gly-Ala-PheH和Phe-Gly-Ala-LeuH。对于胰凝蛋白酶型蛋白酶，合适的肽醛包括Leu-Leu-PheH Ala-Ala-PheH和Leu-Leu-TyrH。对于弹性蛋白酶型蛋白酶，合适的肽醛包括Val-Pro-Val和Ala-Val-LeuH。
用于下文B)部中所述洗涤剂组合物中的较佳蛋白酶为枯草溶菌素型蛋白酶。从而，本文使用的较佳肽醛是Lys-Ala-Ala-H、Ala-Als-ProH、Gly-Ala-LeuH、Gly-Ala-PheH、Phe-Gly-Ala-PheH和Phe-Gly-Ala-LeuH。本文中使用的特别优选的是Gly-Ala-LeuH、Gly-Ala-PheH Phe-Gly-Ala-PheH和Phe-Gly-Ala-LeuH、即肽的N末端分别为Gly，Gly，Phe和Phe，而肽的C的末端分别为Leu，Phe，Phe和Leu。这些C端氨基酸的羧基被转化成醛基。
当然，本文所列出全部肽醛较佳的是将以其氨基甲酸甲酯或甲脲N端保护的形式使用。在下文的实施例中公开了合成CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH、CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-PheH、CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH和CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-PheH的方法。
本发明的组合物含有总组合物重量0.00001%-5%的肽醛或其混合物，较佳的是0.0001%-1%，最佳是0.0005%-0.2%。
B.蛋白酶本发明液体洗涤剂组合物的第二种基本成分是约0.0001-1.0，较佳约0.0005-0.2，最佳约0.002-0.1重量%的活性蛋白酶。也可包括蛋白酶的混合物。蛋白酶可是动物、植物或微生物(较佳)来源。本文中使用的较佳的是枯草溶菌素型蛋白酶。特别优选的是由Bacillus Subtilis和/或Bacillus<p>
阴离子表面活性剂可使用的一种阴离子表面活性剂类型包括烷基酯磺酸盐。由于它们可用可再生的，非石油原料制备，故是合乎要求的。烷基酯磺酸盐成分的制备可按照技术文献中所述的已知方法进行。可按照“The Journal of the American Oil Chemists Society”52(1975).PP323-329用气态SO3将C8-C20羧酸的直链酯磺化。合适的原料包括由动物脂、棕榈树和椰子油等得到的天然脂肪物质。
特别适于洗衣用途的较佳烷基酯磺酸盐表面活性剂包括如下结构式的烷基酯磺酸盐表面活性剂
其中R3为C8-C20烃基，较佳的是一个烷基，或其结合体，R4为C1-C6烃基，较佳的是一个烷基，或其结合体，M是水溶性成盐阳离子。合适的盐包括金属盐，如钠、钾和锂盐，以及取代的或未取代的铵盐，如甲基一、二甲基-三甲基-和季铵阳离子，例如四甲基铵和二甲基哌啶鎓，以及由链烷醇胺，例如单乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺衍生的阳离子。较佳的是，R3为C10-C16烷基、R4为甲基、乙基或异丙基。甲基酯磺酸盐，其中R3为C14-C16烷基特别优选。
烷基硫酸盐是另一类型的对本文使用重要的阴离子表面活性剂，当与多羧基脂肪酸酰胺(参见下文)结合使用时，除了提供优良的完全清洗能力外，包括在广泛的温度、洗涤浓度和洗涤时间内良好的油脂/油清洗，还可获得烷基硫酸盐的溶解，以及改进的液体洗涤剂配方的配制性能，这些配方是分子式ROSO3M的水溶性盐或酸，其中R较佳为C10-C24烃基，优选的为具有C10-C20烷基组分的烷基或羟烷基，更佳为C12-C18烷基或羟烷基，M为H或阳离子，例如碱金属阳离子(例如钠、钾、锂)，取代的或未取代的铵阳离子，如甲基、二甲基和三甲基铵以及季铵阳离子、例如四甲基铵和二甲基哌啶鎓，以及由链烷醇胺，如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、及其混合物衍生的阳离子，等等。通常C12-C16的烷基链对较低洗涤温度(例如低于约50℃)较佳，而C16-C18烷基链对较高洗涤温度(例如高于50℃)较佳。
烷氧基化的烷基硫酸盐表面活性剂是另一类型有用的阴离子表面活性剂。这些表面活性剂通常是分子式RO(A)mSO3M的水溶性盐或酸，其中R为具有C10-C24烷基组分的未取代的C10-C24烷基或羟烷基，较佳的是C12-C20烷基或羟烷基，更佳的是C12-C18烷基或羟烷基，A为乙氧基或丙氧基单元，m大于0，通常在约0.5和约6之间，优选大约0.5和大约3之间，M为H或阳离子，可以是，例如金属阳离子例如钠、钾、锂、钙、镁等)，铵或取代的铵阳离子。本文所预期的是乙氧基化的烷基硫酸盐以及丙氧基化的烷基硫酸盐。取代的铵阳离子的特定例子包括甲基一、二甲基一、三甲基铵和季铵阳离子，如四甲基铵、二甲基哌啶鎓和由链烷醇胺，例如单乙醇胺。二乙醇胺和三乙醇胺衍生的阳离子，或它们的混合物。典型的表面活性剂为C12-C18烷基聚乙氧基化物(1.0)硫酸盐、C12-C18烷基聚乙氧基化物(2.25)硫酸盐、C12-C18烷基聚乙氧基化物(3.0)硫酸盐和C12-C18烷基聚乙氧基化物(4.0)硫酸盐，其中M方便地选自钠和钾。
其它阴离子表面活性剂在本发明的组合物中也可包括对洗涤目的有用的其它阴离子表面活性剂。这些表面活性剂包括皂盐(例如包括钠、钾、铵和取代的铵盐，如单、二和三乙醇胺盐)、C9-C20直链烷基苯磺酸盐、C8-C22初级或二级烷基苯磺酰盐、C8-C24烯属磺酸盐、通过例如英国专利说明书No1082179所述的磺化碱土金属柠檬酸盐的热解产物制得的磺化聚羧酸，烷基甘油磺酸盐、脂酰基甘油磺酸盐、脂肪油甘油硫酸盐、烷基酚环氧乙烷醚硫酸盐、石蜡磺酸盐、烷基磷酸盐、异硫代硫酸盐、如酰基异硫代硫酸盐、N-酰基牛磺酸盐、甲基牛磺酰的脂肪酸酰胺、烷基琥珀酰胺酸盐和磺基琥珀酸盐、磺酸琥珀酸盐的单酯(特别是饱和的和不饱和的C12-C18单酯)、磺基琥珀酸盐的二酯(特别是饱和的和不饱和的C6-C14二酯)、N-酰基肌氨酸盐、烷基多糖类的硫酸盐，如烷基聚葡糖苷的硫酸盐(非离子型未硫酸盐化的化合物，下面描述)、支链伯烷基硫酸盐、烷基聚乙氧基羧酸盐、如分子式RO(CH2CH2O)kCOO-M 的那些化合物，其中R为C8-C22烷基，K为0-10的整数，M为可溶性成盐阳离子，以及用羟乙磺酸酯化和用氢氧化钠中和的脂肪酸。树脂酸和氢化的树脂酸也适用，如松香、氢化松香、以及在妥尔油中存在或衍生的树脂酸和氢化树脂酸。在“Surface Active Agents and Detergents”(Vol.Ⅰ and Ⅱ by Schwartz，Perry andBerch)中给出了另外的实例。1975年12月30日颁发给Laughlin等人的美国专利3929678，在23栏58行直至29栏23行(本文结合参照)中也概要地公开了多种这些表面活性剂。
非离子洗涤剂表面活性剂在结合本文供参考的1975年12月30日颁发的Laughlin等人的美国专利3929678 13栏14行直至16栏6行中概要地公开了合适的非离子洗涤剂表面活性剂。下面列出了典型的、非限定种类的有用非离子表面活性剂。
1.烷基酚的聚环氧乙烷、聚环氧丙烷和聚环氧丁烷缩合物。通常，较佳的是聚环氧乙烷缩合物。这些化合物包括在与烯化氧的直链或支链结构型中具有含约6-约12个碳原子烷基的烷基酚的缩合产物。在较佳的实施例方案中，环氧乙烷存在的量相当于每摩尔烷基酚形成约5-约25摩尔环氧乙烷。市场上可购得的这一类型非离子表面活性剂包括GAF公司出售的Igepal
CO-630;以及全部由Rohml Haas公司出售的Triton
X-45.X-114.X-100和X-102。这些化合物通常称为烷基酚烷氧基化物(例如烷基酚乙氧基化物)。
2.具有约1-约25摩尔环氧乙烷的脂族醇缩合产物。脂族醇的烷基链可以是直链或支链，伯或仲醇，通常含有约8-约22个碳原子。特别优选的醇缩合产物是每摩尔醇含有约2-约18摩尔环氧乙烷与含约10-约20个碳原子烷基的缩合产物。市场上可购得的这一类型表面活性剂的例子包括Tergitol
15-S-9(含9摩尔环氧乙烷的C11-C15直链仲醇的缩合产物)，Tergitol
24-L-6NMWC含有以窄分子量分布的6摩尔环氧乙烷的C12-C14伯醇的缩合产物)两者均由Vnion Carbide公司出售;Shell Chemical<p>
式中R’是H或C1-4烃基、2-羟乙基、2-羟丙基或其混合物，R2是C5-C31烃基;而且Z是具有其上直接连有至少三个羟基的直烃链的多羟基烃基或其烷氧化物洗生物。优选的情况是R1是甲基，R2是直链C11-C15烷基或链烯基链(如椰子烷基)或其混合物，而是Z是由葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖与还原糖类在还原性胺化反应中衍生将得到。本发明的组合物还可以含助洗剂体系。任何传统的助洗剂均适于本发明使用，其中包括硅铝酸盐、硅酸盐、多羧盐酯和脂肪酸，以及乙二胺四乙酸之类物质及氨基聚磷酸等金属离子螯合剂，尤其是乙二胺四亚甲基磷酸和二亚乙基三胺五亚甲基磷酸。磷酸盐助洗剂虽然由于明显的环境上原因而不优选使用，但是也可以在本发明中使用。
适用的助洗剂可以是无机离子交换材料，通常是无机水合的硅铝酸盐材料，更优选水合的合成沸石，如水合的沸石A、X、B或HB。
另一类适用的无机助洗剂是层状硅酸盐，如SKS-6(Hoechst)。SKS-6是由硅酸钠(Na2Si2O5)组成的结晶层状硅酸盐。
适于本发明使用的多羧酸酯助洗剂包括柠檬酸(优选呈水溶性盐形)，式R-CH(COOH)CH2(COOH)的丁二酸衍生物，其中R为C10-20烷基或链烯基、(优选有C12-C16的)或者R或以被羟基、磺基、亚磺基或砜基取代。具体实例包括月桂基丁二酸酯、十四烷基丁二酸酯、十六烷基丁二酸酯、2-十二烯基丁二酸酯、2-十四烯基丁二酸酯。丁二酸酯助洗剂优选使用其水-约18个碳原子的一个烷基部分由部分选自含有约1-约3个碳原子的烷基和羟烷基的水溶性氧膦;以及含有约10-约18个碳原子的一个烷基部分和选自含有约1至约3个碳原子的烷基和羟烷基部分的水溶性亚砜。
半极性非离子表面活性剂包括下式的氧化胺表面活性剂
其中，R3是一个含有约8-约22个碳原子的烷基，羟烷基、或烷基苯基或其混合物;R4是一个含有约2-约3个碳原子的亚烷基或羟亚烷基或其混合物;x为0-约3;每个R5为含约1-约3个碳原子的一个烷基或羟烷基或含约1-约3个环氧乙烷基团的聚环氧乙烷基。R5的基团可彼此结合，例如通过一个氧或氧原子连接，以形成环结构。
这些氧化胺表面活性剂特别包括C10-C18烷基氧化二甲胺和C8-C12烷氧乙基氧化二羟乙胺。
6.1968年1月21日授予Llenado的美国专利4565647中所公开的烷基多糖类，具有一个含约6-约30个碳原子的疏水基团，较佳的为约10-约16个碳原子以及一个多糖，例如一个聚糖苷、含有约1.3-约10，较佳为约1.3-约3，最佳为约1.3-约2.7糖单元的疏水基。可使用任何含5-6个碳原子的还原糖，例如葡萄糖，半乳糖并且半乳糖基部分可取代葡糖基部分。(任选地疏水基团可在2-，3-，4-等位置结合，从而对照葡糖苷或半乳糖苷得到葡萄糖或半乳糖)。糖之间的链可在例如补充糖单元的一个位置和在先前糖单元上的2-，4-和/或6位之间。
任选地，并且较不受欢迎的，可以存在结合疏水部分和多糖部分的聚环氧乙烷链。较佳的烯化氧为环氧乙烷。通常的疏水基团包括含有约8-约18，较佳为约10-约16个碳原子的饱和的或不饱和的，支链或非支链的烷基。较佳的是，烷基为直链饱和烷基。烷基可含有最高达约3个羟基和/或聚烯化氧部分。合适的烷基多糖为辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基和十八烷基的二-、三-、四-、五-、和六-葡糖苷、半乳糖苷、葡萄糖，果糖苷、果糖和/或半乳糖。合适的混合物包括椰子烷基二、三、四和五葡糖苷以及牛脂烷基四、五和六葡萄苷。
较佳的烷基聚苷通式如下R2O(CnH2nO)t(葡糖基)x其中R2选自烷基、烷基-苯基、羟烷基、羟烷基苯基、及其混合物，其中烷基含有约0-约18，较佳为约12-约14个碳原子;n为2或3，较佳为2;t为0-约10，较佳为0;x为约1.3-约10，较佳为约1.3-约3，最佳为约1.3-约2.7。糖基较佳的是来自葡萄糖。为了制备这些化合物，首先形成醇或烷基聚乙氧基醇，然后与葡萄糖或葡糖源反应生成葡糖苷(在其1-位)。之后，补充的糖基单元可以结合在它们的1-位与先前糖基单元的2-，3-，4-和/或6-位之间，优选占主要地位的2-位之间。
7.具有如下通式的脂肪酸酰胺表面活性剂
其中R6为含有约7-约21(较佳为约9-约17)个碳原子的烷基，每个R7选自H，C1-C10烷基，C1-C9羟烷基和-(C2H4O)xH，其中x从1至约3变化。
较佳的酰胺为C8-C20氨酰胺、单乙醇酰胺、二乙醇酰胺和异丙醇酰胺。
阳离子表面活性剂在本发明的洗涤剂组合物中也可包括阳离子洗涤表面活性剂。阳离子活性剂包括铵表面活性剂，如卤化烷基二甲铵，以及具有如下通式的那些表面活性剂
其中R2是一个在烷基链中具有约8-约18个碳原子的烷基或烷基苯基，各个R3选自-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-、-CH2CH-(CH2OH)-、-CH2CH2CH2-、及其混合物;各个R4选自C1-C4烷基、C1-C4羟烷基、苯基、结合两个R4基团形成的环结构、-CH2CHOH-CHOHCOR6CHOHCH2OH，其中R6为任何己糖或分子量小于约1000的己糖聚合物、并且当Y不是0时为氢;R5与R4相同或是一个烷基链，其中R2加R5碳原子的总数不大于约18;各个Y为0-约10，Y值的总数为0-约15;X为任何可混溶的阴离子。
在结合入本文参考的1980年10月14日授予Cambre的美国专利4228044也描述了本文有用的其它阳离子表面活性剂。
其它表面活性剂两性表面活性剂也可被掺入本发明的洗涤剂组合物中。这些表面活性剂可概括地称作仲和叔胺的脂族衍生物，或脂族基可为直链或支链的杂环仲和叔胺的脂族衍生物。脂族取代基中的一种至少含有约8个碳原子，通常为约8-约18个碳原子，以及至少一种含有一个阴离子水溶性基团，例如羟基、磺酸根、硫酸根。参见1975年12月30日授予Laughlin等人的美国专利No3929678 19栏18-35行(结合八本文参考)两性表面活性剂的实例。
两性离子表面活性剂也可被掺入本发明的洗涤剂组合物中。这些表面活性剂可概括地称作仲和叔胺的衍生物、杂环仲和叔胺的衍生物、或季胺、季磷鎓或叔锍化合物的衍生物。参见1975年12月30日授予Laughlin等人的美国专利No3929678第19栏38行至22栏48行(结合八本文参考)两性离子表面活性剂的实例。
两性和两性离子表面活性剂通常与一种或多种阴离子和/或非离子表面活性剂结合作用。
多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂本发明的液体洗涤剂组合物也可含有一种“增强酶性能量”的多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂。“增强酶”是指组合物的配方可选择一定量的欲掺入组合物中的多羟基脂肪酸酰胺，掺入的量会改进洗涤剂组合物的清洗性能。通常，对常规的酶含量，掺入约1%(重量)多羟基脂肪酰胺将增强酶的性能。
本发明的洗涤剂组合物通常含有至少1%(重量)多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂，较佳的是至少约3%-约50%，最佳是约3%-30%多羟基脂肪酸酰胺。
多羟基脂肪酸酰胺表面活性剂组分包括如下结构式的化合物
其中R1是H、C1-C4烃基、2-羟乙基、2-羟丙基、或其混合物、较佳为C1-C4烷基，更佳为C1或C2烷基，最佳为C1烷基(即甲基);R2是C5-C31烃基，较佳是直链C7-C19烷基或烯烃基，更佳为直链C9-C17烷基或烯烃基，最佳为直链C11-C15烷基或烯烃基，或其混合物;Z是具有含至少3个直接连在链上羟基的直链烃链的多羟基烃基，或其烷氧化衍生物(较佳的是乙氧化的或丙氧化的)。Z较佳的是由还原胺化反应中还原糖得到的。更佳的是Z为糖基。合适的还原糖包括葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、牛乳糖、甘露糖和木糖。除了上面列出的各种糖外还可使用高右旋糖玉米糖浆、高果糖玉米糖浆、和高麦芽糖玉米糖浆作为原料。这些玉米糖浆可以产生Z的混合糖组分。应该理解到，这不是意味要排除其它合适的原料。Z较佳的是选自-CH2-(CHOH)n-CH2O-CH(CH2OH)-(CHOH)n-1-CH2OH、-CH2-(CHOH)2(CHOR’)(CHOH)-CH2OH，及其烷氧化衍生物，其中n是3-5的整数，而R1是H或环状或脂族单糖。最佳的是n为4的糖基，特别是-CH2-(CHOH)4-CH2OH。
在式(Ⅰ)中，R′可以是，例如N-甲基，N-乙基、N-丙基、N-异丙基、N-丁基、N-2-羟乙基、或N-2-羟丙基。
R2-CO-N＜可以是，例如柯卡酰胺(Cocamide)、硬脂酰胺、油酰胺、月桂酰胺、肉豆蔻酰胺、癸酰胺、棕榈酰胺、牛脂酰胺等。
Z可以是1-脱氧葡糖基，2-脱氧果糖基、1-脱氧麦芽糖基、1-脱氧乳糖基、1-脱氧半乳糖基、1-脱氧甘露糖基、1-脱氧木糖基等。
制备多羟基脂肪酸酰胺的方法在本领域中是已知的。通常，它们可通过在还原胺化反应中使一种烷基胺与还原糖反应，生成相应的N-烷基多羟基胺，然后在缩合/酰胺化步骤中使N-烷基多羟基胺与脂族酯或甘油三酯反应，生成N-烷基、N-多羟基脂肪酰胺产物而制得。在例如Thomas Hedley & CO，Ltd的1958年2月18日公布的英国专利说明书809060，1960年12月20日授予E.R.Wilson的美国专利2965576，和1955年3月8日授予Anthony M.Schwartz的美国专利2703798，以及1934年12月25日授予Piggott的美国专利1985424(各专利均结合入本文参考)中公开了制备含多羟基脂肪酸酰胺的组合物的方法。
D.第二种酶本发明较佳的组合物还包含增强性能量的洗涤剂可混溶的第二种酶。“洗涤剂可混溶”是指与其他液体洗涤剂组合物的成分，如洗涤表面活性剂和洗涤助剂的可混性。这些第二种酶较佳的是选自脂酶，淀粉酶，纤维素酶，及其混合物。术语“第二种酶”包括上述的蛋白酶，故每种组合物含至少两种酶，包括至少一种蛋白酶。组合物中所用第二种酶的量根据酶的类型变化。通常较佳的使用约0.0001-0.3%，更佳的为0.001%-0.1%(重量)这些第二种酶。可以使用相同种类的酶(例如脂酶)或二种以上(例如纤维素酶和脂酶)的混合物。可以使用纯化的或非纯化形式的酶。
在这些组合物中可使用适用于液体洗涤剂组合物的任何解脂酶。适于本发明使用的脂酶包括细菌和真菌来源的那些酶。
合适的细菌脂酶包括由假单胞菌属(Pseudomonas)的衍生物，如结合在本文参考的英国专利1372034中所公开的Pseudomonas Stutzeri ATCC 19.154所制得的那些脂酶。合适的脂酶包括那些显示出与由微生物Pseudomonas fluorescens IAM 1057制得的脂酶抗体阳性免疫交叉反应的脂酶。在1978年2月24日公开的日本专利申请53-20487中已经公开了这一脂酶及其提纯的方法。这一脂酶可从Amano Pharmaceutical Co Ltd.Nagoya，Japan购得，商品名为Lipase“Amano”，本文下面称作“Amano-P”。使用Ouchlerlony(Acta.Med.Scan.133，Pages76-79(1950))的标准和公知的免疫扩散操作，这些脂酶会显示出与Amano-P抗体的阳性免疫交叉反应。在1987年11月17日授予Thom等人的美国专利4707291(结合入本文参考)中也公开了这些脂酶及它们与Amano-P免疫交叉反应的方法。其典型的实例是Amano-P脂酶.脂酶ex Pseudomonas fnagi FERM P1339可以商品名Amano-B购得)脂酶ex Pseudomonas nitroreducens var.lipolyticum FERM P1338(可以商品名Amano-CES购得)、脂酶ex Chromobacter Viscosum，例如Chromobacter Viscosum Var.lipolyticum NRRLB 3673，市场上可由Toyo Jozo Co，Tagata，Japan购得);还有从U.S.Biochemical Corp，U.S.A和Disoynth Co，The Nethelands购得的Chromobacter Viscosum脂酶，和脂酶ex Pseudomonas gladioli。
合适的真菌脂酶包括能通过Humicola lanuginosa和ThermomycesLanuginosa产生的那些脂酶。最佳的是欧洲专利申请0258068(NovoInduetri A/S)中所述的通过克隆来自Humicola lanuginosa的基因并在Aspergillus oryzae中表达该基因而得到的脂酶，市场上可以NovoNordisk A/S以商品名Lipolase
购得。
在这些组合物中可使用约10-18000，较佳的60-6000脂酶单位/g(LU/g)的脂酶。1脂酶单位是在PH为9.0，温度为30℃时在恒PH槽中产生1μmol可滴定脂肪酸/每分钟的脂酶量，基体是在5μmol/lTris缓冲剂中有13μmol/lCa 和20μmol/lNaCl存在下3.3%(重量)橄榄油和3.3%阿拉伯树胶的乳液。
在这些组合物中可以使用适用于液体洗涤剂组合物的任何纤维素酶。适于本发明使用的纤维素酶包括由细菌和真菌来源得到的那些酶。它们的最佳PH为5和9.5之间。可使用约0.0001-1%(重量)的纤维素酶。
结合在本文参考的，1984年3月6日授予Barbesgaard等人的美国专利4435307中公开了合适的纤维素酶，该专利描述了由Humicola insolens产出的真菌纤维素酶。GB-A-2075028，GB-A- 2095275和DE-OS-2247832中也公开了合适的纤维素酶。
这些纤维素酶的实例是由Humicola insoens(Humicola griseavor.thermoidea)的菌株，特别是Humicola菌株DSM 1800产生的纤维素酶，和由Bacillus N或属于Aeromonas属的产生脂酶212真菌所产生的脂酶，以及由海生软体动物的肝胰腺(Dolabella Auricula Solander)提取的纤维素酶。
在这些组合物中可使用适用于液体洗涤剂组合物的任何淀粉酶。这些淀粉酶包括例如，由英国专利说明书No1296839(Novo)中详细描述的B.licheniformis的特殊菌株所得到的淀粉酶。淀粉分解蛋白质包括例如，Rapidase
(Intenational Bio-Synthetics Inc.)和Termamyl
(Novo Industries)。
可使用约0.0001%-0.55，较佳为0.0005-0.1%(重量)的淀粉酶。
E.任选成分在本发明的组合物中可任选地包括洗涤助洗剂。本发明可使用0-约50%(重量)的洗涤助洗剂。可使用有机以及无机助洗剂。当存在助洗剂时，这些组合物通常含有至少1%助洗剂。液体配方较佳的是含有以重量计的约3%-30%，更佳约5-20%洗涤助洗剂。
无机洗涤助洗剂包括，但不限于，多磷酸(以三磷酸、焦磷酸、和玻璃状聚偏磷酸为例)、膦酸、肌醇六磷酸、硅酸、碳酸(包括重碳酸和倍半碳酸)、硫酸、硅铝酸的碱金属、铵和链烷醇铵盐。也可使用硼酸盐助洗剂，以及在洗涤剂贮存和洗涤条件下能产生硼酸盐的硼酸盐生成材料(在下文中总称“硼酸盐助洗剂”)。欲在洗涤条件低于约50℃，特别是低于约40℃下使用的本发明的组合物中，较佳的是使用非硼酸盐助洗剂。
硅酸盐助洗剂的实例是碱金属硅酸盐，特别是SiO2∶Na2O比例范围为1.6∶1-3.2∶1的那些硅酸盐和多层硅酸盐，如结合入参考的1987年5月12日颁布的美国专利4664839中所述的多层硅酸钠。然而，其他硅酸盐也可使用，例如硅酸镁，它可作为颗粒配方中的轮廓加重剂，作为氧漂白的稳定剂，以及作为泡沫控制系统的组分。
碳酸盐助洗剂的实例是碱土金属和碱金属碳酸盐，包括如结合入本文参考的1973年11月15日公开的德国专利申请No.2321001中所述的碳酸和倍半碳酸钠及其与超细碳酸钙的混合物。
硅铝酸盐助洗剂对本发明有用。硅铝酸盐助洗剂在市场上最广泛的重垢型颗粒洗涤剂组合物中有重要意义，并也可是液体洗涤剂配方中重要的助洗剂成分。硅铝酸盐助洗剂包括如下经验式的那些助洗剂
其中M是钠、钾、铵或取代的铵，Z为约0.5-约2;而y是1;这一物质的镁离子交换能力至少为约50毫克当量CaCO3硬度/克无水硅铝酸盐。较佳的硅铝酸盐为具有如下通式的沸石助洗剂
其中Z和Y为至少6的整数，Z与Y的摩尔比范围为1.0-约0.5，而X为一个约15-约264的整数。
有用的硅铝酸盐离子交换材料市场上可购得。这些硅铝酸盐可以是结晶的或非晶态结构并可以是天然存在的硅铝酸盐或合成得到的。结合入本文参考的1976年10月12日授予Krummel等人的美国专利3985669中公开了制备硅铝酸盐离子交换材料的方法。本发明有用的较佳合成结晶硅铝酸盐离子交换材料可以牌号Zeolite A、Zeolite P(B)和Zeolite X购得。在一个特定的较佳实施方案中，结晶硅铝酸盐离子交换材料具有如下通式
其中X为约20-约30，特别是约27。这一材料称作Zeolite A。较佳的是，硅铝酸盐的粒度为直径约0.1-10微米。
多磷酸盐的特定实例为碱金属三磷酸盐、焦磷酸钠、钾和铵、正磷酸钠如钾、聚偏磷酸钠、其中聚合度范围为约6-约21，以及肌醇六磷酸盐。
膦酸盐助洗剂的实例为乙烷1-羟基-1，1-二膦酸的水溶性盐，特别是钠和钾盐，亚甲基二膦酸的水溶性盐，例如三钠和三钾盐以及取代的亚甲基二膦酸水溶性盐，如亚乙基、异亚丙基苯基亚甲基和卤代亚甲基膦酸三钠和三钾。结合入本文参考的1964年12月1日和1965年10月19日授予Diehl的美国专利Nos 3159581和3213030，1969年1月14日授予Roy的美国专利No3422021，以及1968年9月3日和1969年1月14日授予Ouimby的美国专利Nos3400148和3422137中公开了上述类型的膦酸盐助洗剂。
对本发明较佳的有机洗涤助洗剂包括广泛种类的多元羧酸盐化合物。本文所用的“多羧酸盐”是指含有多个羧酸盐的化合物，较佳的至少3个羧酸盐。
多羧酸盐助洗剂通常可以酸形式加入组合物中，但也可以中性盐形式添加。当以盐形式使用时，较佳的是碱金属，如钠、钾和锂，或链烷醇铵盐。
在多羧酸盐助洗剂中包括有多种类型的有用物质。一种重要的多羧酸盐助洗剂包括多羧酸醚盐。已公开了一系列多羧酸醚盐用作洗涤助洗剂。有用的多羧酸醚盐的实例包括结合入本文参考的1964年4月7日颁布的Berg的美国专利3128287和1972年1月18日颁布的Lamberti等人的美国专利3635830中公开的氧联二丁二酸氢盐。
本发明中用作助洗剂的特定类型多羧酸醚盐也包括如下通式的那些化合物
其中A是H或OHB是H或-O-CH(COOX)-CH2(COOX);X是H或一个成盐阳离子。例如，当上述通式A和B均为H时，则该化合物为氧联二丁二酸及其水溶性盐。如A为OH而B为H时，则该化合物为单丁二酸酒石酸盐(TMS)及其水溶性盐。当A是H而B是-O-CH(COOX)-CH2(COOX)时，则该化合物为二丁二酸酒石酸盐(TDS)及其水溶性盐。对本发明使用特别优选的是这些助洗剂的混合物。TMS与TDS的重量比为约97∶3-约20∶80的TMS和TDS混合物特别优选。在1987年5月5日授予Bush等人的美国专利4663071中公开了这些助洗剂。
合适的多羧盐醚盐也包括环状化合物，特别是脂环化合物，如结合入本文参考的美国专利3923679;3835163;4158635;4120874和4102903中所公开的那些化合物。
其它有用的洗涤助洗剂包括如下结构式所表示的羟基多羧酸醚盐
其中M是氢或一个其中生成的盐是水溶性的阳离子，较佳是一个碱金属、铵或取代的铵阳离子，n是约2-15(较佳的n是约2-约10，更佳的是n平均为约2-约4)以及每个R相同或不同并选自氢、C1-4烷基或C1-4取代的烷基(较佳的R为氢)。
其它多羧酸醚盐还包括马来酐与亚乙基或乙烯基甲基醚、1，3，5-三羟基苯-2，4，6-三磺酸和羧基甲氧基丁二酸的共聚物。
有机多羧酸盐助洗剂也包括各种不同的多乙酸的碱金属、铵和取代的铵盐。实例包括乙二胺四乙酸、和次氮基三乙酸的钠、钾、锂、铵和取代的铵盐。
多羧酸盐也包括如马来酸、丁二酸、氧联二丁二酸、多马来酸、苯1，3，5-三羧酸、羧甲氧基丁二酸、及其可溶性盐。
酒石酸盐助洗剂，例如酒石酸及其可溶性盐(特别是钠盐)是重垢型液体洗涤剂的特别重要的多羧酸盐助洗剂，但也能用于颗粒组合物中。
其他羧酸盐助洗剂包括结合在本文参考的1973年3月28日授予Diehl的美国专利3723322中公开的羧化的碳水化合物。
结合入本文参考的1986年1月28日授予Bush的美国专利4566984中公开的3，3-二羧基-4-氧杂-1，6-己二酸盐和相关的化合物也适用于本发明的洗涤剂组合物。有用的丁二酸助洗剂包括C5-C20烷基丁二酸及其盐。这一类型的一种特别优选的化合物是十二碳烯基丁二酸。烷基丁二酸通常是如上述专利所述的通式R-CH(COOH)CH2(COOH)，即丁二酸的衍生物，其中R为烃，例如C10-C20烷基或链烯基，较佳的是C12-C16或其中R可以用羟基、磺基、氧硫基或砜取代基所取代。
丁二酸盐助洗剂较佳的是以其水溶性盐的形式使用，包括钠、钾、铵和链烷醇铵盐。
丁二酸助洗剂的特定例子包括月桂基丁二酸盐、肉豆蔻基丁二酸盐、棕榈基丁二酸盐、2-十二烷基丁二酸盐(较佳)，2-十五烯基丁二酸、等等。月桂基丁二酸盐是这一组的较佳助洗剂并分开在1986年11月5日出版的欧洲专利申请86200690.5/0200263中。
有用的助洗剂实例还包括钠和钾的羧甲氧基丙二酸盐、羧甲氧基丁二酸盐、顺式-环-乙烷-六羧酸盐、顺式-环丙烷-四羧酸盐、水溶性聚丙烯酸盐(分子量达约2000以上的这些聚丙烯酸盐也可有效地用作分散剂)，以及马来酐与乙烯甲醚或乙烯的共聚物。
其他合适的聚羧酸酯是结合入本文参考的1979年3月13日授予Crutchfield等人的美国专利4144226中所述的聚乙酰羧酸酯。这些聚乙酰羧酸酯可通过在聚合条件下将二羟乙酸酯和聚合引发剂放在一起而制得。而后将得到的聚乙酰羧酸酯结合在化学稳定的端基上以便该聚乙酰羧酸酯针对碱性溶液中的快速解聚保持稳定，转化成相应的盐，并加入到表面活性剂中。
结合入本文参考的1967年3月7日授予Diehl的美国专利3308067中也公开了多羧酸盐助洗剂。这些材料包括脂族类羧酸均聚和共聚物的水溶性盐，如马来酸、衣康酸和亚甲基丙二酸。
现有技术中已知的其他有机助洗剂也可使用。例如，也可使用具有长链烃基的单羧酸及其可溶性盐。这些包括通常称作“皂”的材料。通常使用C10-C20链长。烃基可以是饱和的或不饱和的。
其他任选成分包括去污剂、螯合剂、去泥污/抗再沉淀剂、聚合分散剂、漂白剂、增白剂、抑泡剂、溶剂和美化剂。
本文的洗涤剂组合物可配制成多种组合物，例如洗衣洗涤剂以及硬表面清洁剂或洗碟组合物。
通过以下实施例进一步说明本发明的组合物。
实施例A通过按所列比例的成分制得下列组合物。在后面的实施例中，肽醛为肽醛1CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH肽醛2CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH肽醛3CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH肽醛4CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH组合物1 2 3 4 5 6-直链烷基苯磺酸 8.5 15 6.5 10 12.5 4-C12-15烷基硫酸钠 1 2 1 2 0 0-C14-15烷基2.5倍乙 10 5 10.5 0 11 9氧化硫酸盐-C12葡糖酰胺 0 0 9 0 0 5-7倍乙氧化C12-15醇 3 10 4 7 2.5 0-脂肪酸 2 5 5 4 2 2-酒石酸 5 6 7 4 6 4-C12-14链烯基取代的丁二酸 0 6 0 5 0 6-氢氧化钠 2 6 2 4 1 1.5-乙醇 2 1.5 2 4 2 1.5-单乙醇胺 6 5 4 0 0 0-1,2-丙二醇 12 10 5 5 4 6-淀粉酶(143KNU/g) 0 0 0.1 0 0 0.2-LipolaseR(100KLU/g 0.5 0.2 0.5 0.5 0.4 0市售溶液)-ProtaseB(34g/L市售溶液) 0.9 0 0.5 0 1.2 0-SavinaseR(市售溶液) 0 0.3 0 0.4 0.2 0.3-CarezymeR(实验试样) 0.5 1 0.8 0 0.2 0.8-肽醛1 0.009 - - - - 0.0003-肽醛2 - - 0.001 - 0.008 --肽醛3 - 0.005 - - - --肽醛4 - - - 0.0005 - --水及次要成分 补充至100%实施例B按照流程图A(CH3O-(O)C-Phe-Gly-LeH)和B(CH3N(O)C-Phe-Gly-LeH)合成肽醛。在流程图A和B中由供应商购得某些中间体并且在流程图内注明了这些情况。按照Martin(J.Org.Chem.，1983，48，4155)的操作合成Dess-Martin Periodinane。Z-Gly-Ala-Leu-OMe(5)-在10分钟周期内向Z-Gly-Ala-OH(3)(20.0g，0.071M)和Leu-OMe.HCl(12.9g，0.71M)的250ml二氯甲烷溶液逐滴加入21.9ml(0.157M)三乙胺(TEA)。在加完后添加11.9ml(0.078M)二氰基膦酸二乙酯(DECP)。将该混合物搅拌过夜并除去溶剂。将残渣溶于乙酸乙酯中并用1NHCl、饱和NaHCO3，和盐水洗涤。用MgSO4将该溶液脱水、过滤并除去溶剂。回收的29.0g通过薄层色谱法(TLC)是均匀的。13CNMR(CDCl3)15.93，18.60，21.77，22.69，24.72，40.80，44.20，48.70，50.87，52.13，65.28，66.84，127.92，128.00，128.41，136.36，156.76，169.31，172.58，173，24。
Moc-Phe-Gly-Ala-Leu-OMe(6)……-将Z-Gly-Ala-Leu-OMe(5)(29.0g，0.071M)溶于300ml MeOH和35ML 4.0MHCl的二噁烷中。向这一溶剂混合物分批添加5.8g10% Pd/C。用吸气器将该浆料脱气并通过球形瓶引入H2。将该浆料保持在H2正压下并搅拌过夜。通过硅藻土和多孔玻璃漏斗过滤浆料并用MeOH充分洗涤。除去溶剂并用醚研制残渣。过滤浆料并在真空下干燥滤瓶。回收20.2g灰白色粉末。将粗产物和Moc-Phe-OH(15.3g，0.068M)溶于500mlCH2Cl2中并逐滴添加29.9ml TEA，随后逐滴添加11.7ml(0.072M)DECP。将该混合物搅拌过夜并除去溶剂。将残渣溶于EcOAc并用1NHCl、饱和NaHCO3和盐水洗涤。将有机相脱水(MgSO4)、过滤并除去溶剂，得到21.3g产物。13CNMR(CDCl3)16.66，16.83，20.01，22.46，23.41，25.40，40.11，41.72，43.75，49.39，51.37，52.87，56.42，65.92，77.39，77.55，77.81，78.24，127.42，128.96，129.19，130.09，137.41，157.62，169.00，172.63，173.24，174.00。
Moc-Phe-Gly-Ala-Leucinal-将Moc-Phe-Gly-Leu-OMe(21.3g，44.5mmol)溶于400mlEcOH和250mlTHF的混合物中。将该溶液冷却至0℃并添加9.88g(89.0mmol)CaCl2。将该浆料均化5分钟并在5分钟内逐滴添加6.73g(178.0mmol)NaBH4。将该溶液在0℃搅拌2小时并用1NHCl小心将该反应抑制。在真空下除去EcOH和THF并用500mlEcOAc萃取剩余的含水混合物。用饱和NaHCO3·盐水洗涤这一有机相并用MgSO4使有机相脱水。过滤并除去溶剂，得到20.2g灰白色结晶物质。在硅胶(3.5%MeOH/CH2Cl2)上色谱分离得到13.0g产物。Rf-0.3(10% MeOH/CH2Cl2)，13CNMR(CDCl3)17.50，22.23，23.12，24.84，37.22，39.76，43.96，49.88，50.93，52.48，58.22，65.27，98.46，98.54，127.04，128.68，129.10，136.62，157.85，170.71，173.85，174.45。
Moc-Phe-Gly-Leu-H(7)-将29.9g(70.0mmol)Dess-Martin Periodinane悬浮在500ml CH2Cl2中并搅拌10分钟。将Moc-Phe-Gly-Ala-Leucinol(10.6g，23.5mmol)溶于100ml CH2Cl2中并以中等速度加入到Periodinane浆料中。将该混合物搅拌1小时并倾注入150ml含有123g Na2S2O3的NaHCO3中。使该混合物搅拌15分钟并用EtOAc萃取。将有机相脱水过滤，随后除去溶剂。在硅胶上色谱分离(3.5%MeOH/CH2Cl2)得到5.1g甲氧基半缩醛和醛的混合物的纯白色固体。13CNMR(CDCl3CD3OD)17.62，17.94，21.53，21.71，22.99，23.30，23.39，24.54，37.05，37.70，37.92，38.24，42.87，49.83，51.79，52.14，56.75，57.19，98.40，99.18，127.00，128.60，129.06，136.44，157.27，169.19，169.67，172.73，173.40，200.43。
Moc-Phe-OH(2)…-将L-苯基丙氨酸(5.0g，30.2mmol)溶于30ml 1N NaOH中并冷却至0℃。逐滴添加氯甲酸甲酯(2.53ml，31.8mmol)，同时用单独的添加漏斗添加30ml 1N NaOH。在加入完毕后用200ml EtOAc洗涤该溶液并将水相酸化至pH＝2。用EtOAc(2x200ml)萃取混合物。脱水(MgSO4)，过滤并除去溶剂，得到6.0g产物。13CNMR(CDCl3)37.75，52.57，54.64，128.63，129.35，135.74，156.77，175.76。Mac-Phe-OH(9)…室温向1.00g(2.34mmol)Phe-OBn.PTSA的Et2O溶液添加0.36ml(2.57mmol)TEA。随后添加10mlMeOH，然后逐滴添加0.14ml(2.34mmol)异氰酸甲酯的4ml Et2O溶液。将该反应混合物倾入50ml水中并分相。用MgSO4将有机相脱水，过滤并除去溶剂，得到0.66g产物(产率96%)。13CNMR(CDCl3)27.05，38.47，53.45，54.64，65.90，127.43，127.85，128.48，129.28，130.27，135.23，136.22，158.17，173.08。向该粗产物(2.11mmol)的25mlMeOH溶液添加Pd/c并将浆料脱气。通过球形瓶在H2正压下将该浆料搅拌1.5小时。通过硅藻土过滤浆料并用MeOH洗涤滤瓶。除去溶剂得到0.430g产物。13CNMR26.60，37.92，54.28，126.69，128.28，129.28，136.65，159.36，175.33。
Mac-Phe-Gly-Ala-Leucinol(10)-将0.250ml TEA(1.80mmol)加入到0.200g Mac-Phe-OH(0.900mmol)和按化合物(6)概述的步骤氢化5所产生的0.253g Gly-Ala-Leu-OMe.HCl(0.818mmol)的15ml DMF溶液，随后添加0.147mlDECP(0.900mmol)。将该混合物搅拌过夜并除去溶剂。将残渣重新溶于EcOAc中并依次用0.3N HCl、饱和NaHCO3和盐水洗涤。将溶液脱水、过滤并除去溶剂，得到0.300g产物。将粗产物(0.628mmol)溶于17ml乙醇中并冷却至0℃。向这一溶液加入在4mlTHF中的0.140gCaCl2(1.25mmol)。以一批向生成的浆料加入0.095 NaBH4。45分钟后，用水急冷该溶液并用EtOAc萃取。用MgSO4使有机相脱水，过滤并除去溶剂。用4% MeOH/CH2Cl2色谱分离得到0.200g纯产物。13CNMR(CD3OD)16.84，21.05，22.60，24.51，25.66，37.41，39.73，42.67，49.65，56.63，64.33，126.63，128.32，128.96，137.12，160.01，170.45，173.60，175.03。
Mac-Phe-Gly-Ala-Leu-H(11)-向Dess-Martin Peridinane(0.565g，1.33mmol)的15ml CH2Cl2浆料中加入Mac-Phe-Gly-Ala-Leuinol(0.200g，0.445mmol)的CH2Cl2悬浮液，得到的浆料搅拌0.5小时。将该混合物倾入含有2.32g Na2S2O3的饱和NaHCO3液并将该溶液搅拌10分钟，随后用EtOAc萃取。用MgSO4将有相脱水，过滤并除去溶剂。将残渣在硅胶上色谱分离得到0.081g产物。13CNMR(10%在CDCl3中的CD3OD)17.18，17.43，21.35，21.55，23.26，23.34，24.40，24.47，26.36，26.60，37.25，37.38，38.60，42.86，42.97，51.77，51.93，54.94，56.75，57.00，98.7，99.32，126.87，128.49，128.91，136.51，159.53，159.55，169.93，170.39，173.63，173.85，174.70。
Z＝苄酯基Gly＝甘氨酸Ala＝丙氨酸Leu＝亮氨酸Phe＝苯丙氨酸OMe＝甲酯TEA＝三乙胺DECP＝氰基膦酸二乙酯TLC＝薄层色谱
MeOH＝甲醇Pd/C＝披钯活性炭EeOH＝乙醇THF＝四氢呋喃Mac＝甲氨羰基
权利要求
1.一种液体含水洗涤剂组合物，该组合物含有-1%-80%洗涤表面活性剂，-0.0001%-1.0%活性蛋白酶或其混合物，其特征在于还含有0.00001%-5%的含2-50个氨基酸的一种肽醛，或其混合物。
2.权利要求1的组合物，含有0.0001%-1%，较佳为0.0005%-0.2%(组合物重量计)的所述肽醛。
3.权利要求1的组合物，其中所述肽醛含有2-6个氨基酸。
4.权利要求1的组合物，其中所述肽醛的肽链的N-末端被氨基甲酸甲酯或甲脲基团所保护。
5.权利要求1的组合物，含有0.0005%-0.2%的活性蛋白酶或其混合物。
6.权利要求1的组合物，其中所述蛋白酶是枯草溶菌素型蛋白酶。
7.权利要求1的组合物，其中所述蛋白酶选自Alcalase 、枯草溶菌素BPN′、ProteaseA、ProteaseB，及其混合物。
8.权利要求1的组合物，其中所述肽醛选自Phe-Gly-Ala-LeuH或Phe-Gly-Ala-PheHa或其氨基甲酸甲酯或甲脲N-端保护的形式。
9.权利要求1的组合物，该组合物还含有选自脂酶、淀粉酶、纤维素酶及其混合物的性能增强量的洗涤剂可混溶的第二种酶。
10.权利要求9的组合物，其中所述第二种酶是脂酶。
11.权利要求10的组合物，其中脂酶是通过克隆来自Humicola Lanuginosa的基因并在Aspergillus Oryzae中表达该基因而得到的。
12.权利要求10的组合物，该组合物含有10-18000脂酶单位/克。
13.权利要求12的组合物，该组合物含有60-6000单位/克。
14.权利要求9的组合物，其中所述第二种酶是由Humicola Insolens衍生的纤维素酶。
15.权利要求14的组合物，该组合物含有0.0001%-0.1%(以组合物重计)的所述纤维素酶。
16.一种适用于权利要求1的组合物的肽醛，该肽醛选自CH3O-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH.CH3O-(O)-(O)C-Phe-Gly-Ala-PheH.CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-LeuH和CH3N-(O)C-Phe-Gly-Ala-PheH。
全文摘要
所公开的含水液体洗涤剂组合物含有一种蛋白酶，其中蛋白分解活性被肽醛可逆地抑制。
文档编号C07K5/087GK1085943SQ93117788
公开日1994年4月27日 申请日期1993年8月14日 优先权日1992年8月14日
发明者J·P·庄士敦, P·M·A·伦诺尔, J·M·麦克艾弗, R·拉贝克, C·A·J·K·托恩 申请人:普罗格特-甘布尔公司
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