专利名称：用于治疗爱滋病的人类免疫缺陷病毒蛋白酶抑制剂的制作方法
一种指示人类免疫缺陷病毒(HIV)的还原病毒是称之为获得性免疫缺陷综合症(爱滋病;AIDS)这一复杂疾病的致病因素，它是还原病毒中慢病毒(Lentivirus)家族中的一员。M.A.Gonda，F.Wong-Staal，R.C.Gallo，“SequenceHomologyandMorphologicalSimilarityofHTLVIIIandVisnaVirus，APathogenicLentivirus”，Science，227，173，(1985);P.Sonigo，N.Alizon，等人“NucleotideSequencsoftheVisnaLentivirusRelationshiptotheAIDSVirus”，Cell，42，369，(1985)。复杂的爱滋病包括免疫系统的进行性破坏和中枢及周围神经系统的变性。HIV病毒以前是已知的或称为LAV，HTLV-III或ARV。
还原病毒复制的共同特征是通过病毒编码的蛋白酶作用于前体多蛋白的翻译后进程以产生病毒组合和发挥作用所需的成熟的病毒蛋白。这一进程的阻断似乎是阻止了正常感染的病毒的产生。未加工的结构蛋白质也已经从病人体内分离出的非感染的HIV株克隆中观察到。该结果表明HIV蛋白酶抑制作用是一种预防或治疗爱滋病以及预防或治疗HIV感染的可行方法。
HIV基因组对称为gag和pol的结构蛋白质前体编码，该前体被加工后产生蛋白酶、逆转录酶和细胞核内酶/整合酶。该蛋白酶进一步裂解gag和gag-pol多蛋白，就得到病毒核的成熟的结构蛋白。
人们正致力于通过能加工产生还原病毒蛋白酶、逆转录酶和细胞核内酶/整合酶的结构蛋白前体来控制HIV。例如，目前所用的治疗剂AZT是病毒逆转录酶的抑制剂。H.Mitsuya，NS.Broder，“InhibitionoftheInVitroInfeetiivityinCytopathicEffectsofHTLVIII”，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，83，1911(1986)。
人们也已针对HIV蛋白酶抑制剂进行努力的研究。例如，欧洲专利申请(EPA)361341;EPA346847;EPA402646;和EPA337714公开了据说可以用作HIV蛋白酶抑制剂的化合物。
遗憾的是，许多已知的HIV蛋白酶抑制剂具有毒性，缺乏生物有效性或短的体内半衰期。
尽管已经认识到治疗的潜力与蛋白酶抑制剂有关并且为此已做了深入的研究，但至今还没有找到可行的治疗剂。
因此，本发明的主要目的是提供一种新的HIV蛋白酶抑制剂，它们可用于治疗爱滋病，并不具有如上所述的缺点。
本发明涉及式Ⅰ化合物和其药学上可接受的盐，它们可以抑制人体免疫缺陷病毒(HIV)1型(HIV-1)和2型(HIV-2)编码的蛋白酶。这些化合物可用于治疗或预防HIV感染并用于治疗或预防由此而得的免疫缺陷综合症(爱滋病)。本发明化合物，药学上可接受的盐和药用组合物可单独使用或与其它抗病毒剂、免疫调节剂、抗生素或疫苗联合使用。本发明也公开了治疗或预防爱滋病的方法，治疗或预防HIV感染的方法及抑制HIV复制的方法。
本发明涉及在HIV感染细胞中、在对HIV感染敏感的细胞中或在有些需要的灵长目动物中抑制HIV复制的方法，因此可治疗或预防HIV感染和爱滋病，该方法包括服用式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐，
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基，或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-;
q是0，1，2或3;
R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基;
X是
其中R1是芳基，环烷基，杂环基或不饱和杂环基;
R2是氢或C1-C4烷基;
R3是氨基酸侧链，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3，氰基(C1-C4)烷基，不饱和杂环(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-(CH2)s-A°-(CH2)r-R4或-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中s是1，2，3或4;
r是0，1，2或3;
A°是-O-，-NH-或-S-;
R4是C1-C6烷基，环烷基，芳基，杂环基，或不饱和杂环基;
R5是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基;
j是0，1，2，3或4;
k是0或1;并且y是-O-，-N(R2)-或-S-。
本发明也涉及式Ⅰ化合物或其药物上可接受的盐，其中X和R如上定义。
本发明进一步提供了药物制剂，它包括将式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合。
此外，本发明提供了式Ⅰa的有用中间体
或式Ⅰb的有用中间体
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基，或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-;
q是0，1，2或3;
R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基;以及J是卤化物，甲磺酸盐，苯磺酸盐，对甲苯磺酸盐，乙酸盐或三氟乙酸盐。
本发明提供了如上所述的新的式Ⅰ化合物，它们可用于治疗和/或预防HIV感染和/或爱滋病。
本文所说的所有温度是摄氏度。本文所用的所有的测量单位是重量单位，除了用体积单位的液体。
本文所用的术语“C1-C6烷基”代表直链或支链的具有1至6个碳原子的烷基。典型的C1-C6烷基包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，新戊基，己基等。术语“C1-C6烷基”包括了术语“C1-C4烷基”的定义。
“卤”代表氯，氟，溴或碘。
“卤(C1-C4)烷基”代表直链或支链的具有1至4个碳原子且有1-3个卤原子与其相连的烷基。典型的卤(C1-C4)烷基包括氯甲基，2-溴乙基，1-氯异丙基，2，3-二氟丙基，3-溴丁基，3-氯异丁基，碘叔丁基，三氟甲基等。
“氰基(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子且有一个氰基与其相连的直链或支链烷基。典型的氰基(C1-C4)烷基包括氰甲基，2-氰乙基，3-氰丙基，2-氰异丙基，4-氰丁基等。
“C1-C4烷硫基”代表与硫原子相连的具有1至4个碳原子的直链或支链烷基。典型的C1-C4烷硫基包括甲硫基，乙硫基，丙硫基，异丙硫基，丁硫基等。
“C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基”代表含有1至4个碳原子并且有一个C1-C4烷硫基与之相连的直链或支链烷基。典型的C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基包括甲硫乙基，乙硫丁基，丙硫异丙基，异丙硫甲基，丁硫乙基等。
“C1-C4烷氨基”代表与氮原子相连的具有1至4个碳原子的直链或支链烷氨基。典型的C1-C4烷氨基包括甲氨基，乙氨基，丙氨基，异丙氨基，丁氨基，仲丁氨基等。
“二(C1-C4)烷氨基”代表具有两个烷基链的直链或支链二烷氨基，其中的两个烷基链有1至4个碳原子并且与同一个氮原子相连。典型的二(C1-C4)烷氨基包括二甲氨基，乙基甲基氨基，甲基异丙基氨基，叔丁基异丙基氨基，二叔丁氨基等。
“C1-C4烷氧基”代表与氧原子相连的具有1至4个碳原子的直链或支链烷基。典型的C1-C4烷氧基包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基等。
“C1-C4烷氧羰基”代表与羰基相连的具有1至4个碳原子的直链或支链的烷氧基。典型的C1-C4烷氧羰基包括甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基，异丙氧羰基，丁氧羰基，叔丁氧羰基等。
“氨基甲酰基(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个氨基甲酰基与之相连的直链或支链烷基。典型的氨基甲酰基(C1-C4)烷基包括氨甲酰甲基，氨甲酰乙基，氨甲酰丙基，氨甲酰异丙基，氨甲酰丁基和氨甲酰叔丁基等。
“环烷基”代表含有3至8个碳原子的饱和烃环结构，它们不被取代或被1，2或3个选自下列的取代基分别取代卤，卤(C1-C4)烷基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧基羰基，氨甲酰基，C1-C4烷氨甲酰基，氨基，C1-C4烷氨基，二(C1-C4)烷氨基或具有-(CH2)a-R7结构的基团，其中a是1，2，3或4而R7是羟基，C1-C4烷氨基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氧基或二(C1-C4)烷氨基。典型的环烷基包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基和环辛基。
“环烷基(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个环烷基与之相连的直链或支链的烷基。典型的环烷基(C1-C4)烷基包括环丙甲基，2-环丁乙基，3-环戊丙基，2-环己异丙基，4-环庚丁基等。
术语“杂环”代表未取代或取代的稳定的5-至7-元单环及稳定的7-至10-元双环杂环，该杂环是饱和的并含有碳原子和1至3个选自氮，氧或硫的杂原子，其中任何氮和硫杂原子可以被任意氧化，任何氮杂原子可以被任意季铵化并且包括一个双环基，在该双环基中上面定义的任何杂环与一个苯环稠合。杂环可以在任何杂原子或提供稳定结构的碳原子上连接。杂环不被取代或被1，2或3个分别选自下列的取代基所取代卤，卤(C1-C4)烷基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨甲酰基，C1-C4烷基氨甲酰基，氨基，C1-C4烷氨基，二(C1-C4)烷氨基或具有-(CH2)a-R7结构的基团，其中a是1，2，3或4;而R7是羟基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
术语“不饱和杂环”代表未取代或取代的稳定的5-至7-元单环及稳定的7-至10-元双环杂环，它有1个或多个双键并含有碳原子和1至3个选自氮，氧或硫的杂原子，其中氮和硫杂原子可以被任意氧化，氮杂原子可以被任意季铵化并包括一个双环基，在该双环基中上面定义的任何杂环与一个苯环稠合。不饱和杂环可以在任何杂原子或提供稳定结构的碳原子上连接。不饱和杂环不被取代或被1，2或3个分别选自下列的取代基所取代卤，卤(C1-C4)烷基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨甲酰基，C1-C4烷基氨甲酰基，氨基，C1-C4烷氨基，二(C1-C4)烷氨基或具有-(CH2)a-R7结构的基团，其中a是1，2，3或4;而R7是羟基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
这些杂环和不饱和杂环的例子有哌啶基，哌嗪基，2-氧代哌嗪基，2-氧代哌啶基，2-氧代吡咯烷基，2-氧代吖庚因基，吖庚因基，吡咯基，吡咯烷基，吡唑基，吡唑烷基，咪唑基，咪唑烷基，咪唑啉基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，哒嗪基，噁唑基，噁唑烷基，异噁唑基，异噁唑烷基，吗啉基，噻唑基，噻唑烷基，异噻唑基，奎宁环基，异噻唑烷基，吲哚基，喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，噻二唑基，苯并吡喃基，苯并噻唑基，苯并吡咯基，呋喃基，四氢呋喃基，四氢吡喃基，噻吩基，苯并噻吩基，硫代吗啉基，硫代吗啉基亚砜，硫代吗啉基砜，噁二唑基，三唑基，四氢喹啉基及四氢异喹啉基。
“杂环(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个杂环与之相连的直链或支链烷基。“不饱和杂环(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个不饱和杂环与之相连的直链或支链烷基。典型的杂环(C1-C4)烷基和不饱和杂环(C1-C4)烷基包括吡咯甲基，喹啉甲基，1-吲哚乙基，2-呋喃乙基，3-噻吩-2-基丙基，1-咪唑异丙基，4-噻唑丁基等。
“芳基”代表苯基或萘基环。苯基或萘基环任意地被1，2或3个分别选自下列的取代基所取代卤，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨甲酰基，氨甲酰(C1-C4)烷基，氨基，C1-C4烷基，二(C1-C4)烷氨基或式-(CH2)a-R7的基团，其中a是1，2，3或4;而R7是羟基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
“芳基(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个芳基与之相连的直链或支链烷基。典型的芳基(C1-C4)烷基包括苯甲基，2-苯乙基，3-萘丙基，1-萘异丙基，4-萘丁基等。
术语“氨基酸侧链”代表结合到氨基酸的α-碳原子上的特定的原子或基团，在α-碳原子上已结合的还有一个羧基和一个氨基。这些侧链选自下列氨基酸中的那些侧链丙氨酸Ala精氨酸Arg天冬酰胺Asn天冬氨酸Asp半胱氨酸Cys谷氨酰胺Gln谷氨酸Glu甘氨酸Gly组氨酸His异亮氨酸Ile亮氨酸Len赖氨酸Lys甲硫氨酸Mel苯丙氨酸Phe脯氨酸Pro丝氨酸Ser苏氨酸Thr色氨酸Trp酪氨酸Tyr缬氨酸Val说明书中所用的术语“氨基保护基”是指通常用来阻断或保护氨基官能性而使化合物中其它官能团反应的氨基取代基。这些氨基保护基的例子有甲酰基、三苯甲游基、苯二甲酰亚氨基、三氯乙酰基、氯乙酰基、溴乙酰基和碘乙酰基、尿烷型阻断剂如苄氧羰基、4-苯苄氧羰基、2-甲苄氧羰基、4-甲氧苄氧羰基、4-氟苄氧羰基、4-氯苄氧羰基、3-氯苄氧羰基、2-氯苄氧羰基、2，4-二氯苄氧羰基、4-溴苄氧羰基、3-溴苄氧羰基、4-硝基苄氧羰基、4-氰基苄氧羰基、2-(4-联苯基)异丙氧羰基、1，1-联苯乙-1-基氧羰基、1，1-联苯丙-1-基氧羰基、2-苯丙-2-基氧羰基、2-(对甲苯基)丙-2-基氧羰基、环戊烷氧羰基、1-甲环戊烷氧羰基、环己烷氧羰基、1-甲环己烷氧羰基、2-甲环己烷氧羰基、2-(4-甲苯磺酰基)乙氧羰基、2-(甲磺酰基)乙氧羰基、2-(三苯膦基)乙氧羰基、芴基甲氧羰基(“FMOC”)、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基、烯丙氧羰基、1-(三甲基甲硅烷甲基)丙-1-烯氧羰基、苯异草酰甲氧羰基(benzisoxalylmethoxycarbonyl)、4-乙酰氧苄氧羰基、2，2，2-三氟乙氧羰基、2-乙炔基-2-丙氧羰基、环丙甲氧羰基、4-(癸酰氧基)苄氧羰基、异冰片氧羰基、1-哌啶氧羰基等;苯甲酰甲磺酰基、2-硝基苯亚磺酰基、二苯基氧化膦基等氨基保护基。氨基保护基的种类并不是关键，只要衍生的氨基对中间体分子中其它位置上随后的反应条件是稳定的并能在合适的条件下选择性地除去，同时对包括任何其它氨基保护基在内的分子的其余部分不发生破坏。优选的氨基保护基是叔丁氧羰基和苄氧羰基。上面术语中所指基团的进一步的例子如下列文献所述J.W.Barton，“ProtectiveGroupsinOrganicChemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，PlenumPress，NewYork，N.Y.，1973，Chapter2，和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，JohnWiley和Sons，NewYork，N.Y.，1981，Chapter7。
说明书中所用的术语“羧基保护基”是指通常使用的羧基取代基，该取代基在化合物中其它官能团反应的同时能阻断或保护羧基的功能。这些羧基保护基的例子有甲基、对硝基苄基、对甲苄基、对甲氧苄基、3，4-二甲氧苄基、2，4-二甲氧苄基、2，4，6-三甲氧苄基、2，4，6-三甲苄基、五甲苄基、3，4-亚甲二氧基苄基、二苯甲基、4，4′-二甲氧二苯甲基、2，2′，4，4′-四甲氧二苯甲基、叔丁基、叔戊基、三苯甲游基、4-甲氧三苯甲游基、4，4′-二甲氧三苯甲游基，4，4′，4″-三甲氧三苯甲游基、2-苯丙-2-基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、苯甲酰甲基、2，2，2-三氯乙基、β-(二(丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对甲苯磺酰乙基、4-硝基苄磺酰乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷甲基)丙-1-烯-3-基等基团。优选的羧基保护基是二苯甲基。这些基团的进一步的例子可以在下列文献中找到E.Haslam，“ProtectiveGroupsinOrganicChemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，PlenumPress，NewYork，N.Y.，1973，Chapter2，和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，JohnWiley和Sons，NewYork，N.Y.，1981，Chapter5。
如下式中星号所示，本发明化合物至少有四个不对称中心。
其中X是
作为这些手性中心的结果，本发明化合物存在有外消旋物，外消旋混合物和单个的对映体。所有的不对称形式，单独的异构体和其混合物形式都包括在本发明范围内。
如上所述，本发明包括式Ⅰ定义的化合物的药学上可接受的盐。虽然通常为中性，但本发明化合物也具有酸性、碱性或双功能基团并相应地与任何无机碱和无机及有机酸反应形成药学上可接受的盐。
这里所用的术语“药学上可接受的盐”是指上式化合物的盐，它基本上对生物不具有毒性。典型的药学上可接受的盐包括那些通过将本发明化合物与药学上可接受的无机或有机酸或无机碱进行反应而制得的盐。这些盐已知为酸加成和碱加成盐。
通常使用的用于形成酸加成盐的酸是无机酸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸等，有机酸如对甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、对溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、柠檬酸、苯甲酸、乙酸等。这些药学上可接受的盐的例子有硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸单氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧苯甲酸盐、对苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁炔酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、1-羟基丁炔酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、偏桃酸盐等。优选的药学上可接受的酸加成盐是那些与无机酸加盐酸和氢溴酸形成的盐，以及那些与有机酸如马来酸和甲磺酸形成的盐。
碱加成盐包括那些由无机碱衍生出的盐如铵盐或碱金属或碱土金属氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等。用于制备本发明盐的碱包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙、碳酸钙等。钾盐和钠盐是特别优选的。
应该认识到，形成本发明盐的一部分的具体抗衡离子并不重要，只要整个盐是药理上可接受的并且该抗衡离子对整个盐不产生不需要的性质就可以了。
本发明优选的化合物是下述的式Ⅰ化合物和其药学上可接受的盐，其中X是
R是芳基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中
A是-S-;
q是0;
R0是芳基;
R1是芳基或不饱和杂环;
j是0，1或2;
y是-O-或-N(R2)-;
k是1;
R2是氢或甲基;
R3是氨基酸侧链，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中r是0，1，2或3;且R5是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基。
在这些化合物中，更为优选的化合物是下述化合物及其药学上可接受的盐，其中R是苯基，苯硫基，萘基，萘硫基，苯乙基或萘乙基;
R1是苯基，萘基或喹啉基;
j是1;
R2是氢;
R3是氨基酸侧链，-CH2CH3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中r是0，1，2或3;且R5是芳基或不饱和杂环基。
最优选的化合物是下述的式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐，其中
R是苯基或苯乙基;
R1是苯基或喹啉基;且R3是-CH2CH3或-CH(CH3)2。
式Ⅰ化合物可以用领域技术人员已知的化学合成方法来制备。例如，一种用于制备式Ⅰ化合物的优选的方法包括将式Ⅰa适当取代的环氧乙烷在碱的存在下，或将式Ⅰb的环氧乙烷，与适当取代的羧酸化合物在质子惰性溶剂中在偶合剂的存在下进行反应。优选的环氧乙烷试剂是式Ⅰb。该反应用下列反应式Ⅰ表示反应式Ⅰ
其中R、X和J如上定义。
上面的反应可以在有或没有催化剂的情况下进行，但优选有催化剂。优选的催化剂是羟基苯并三唑水合物(HOBT·H2O)。偶合剂的典型例子包括碳二亚胺如N，N′-二乙基碳二亚胺、二环己基碳二亚胺(DCC);咪唑如羰基二咪唑;以及试剂如1-羟基苯并三唑甲磺酸酯、N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉(EEDQ)、苯并三唑-1-基氧三(二甲氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)、(邻-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基铀六氟磷酸盐(HBTV)和苯并三唑-1-基氨三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐(PyBOP)。
通常使用的羧酸反应物的量相对于环氧乙烷反应物为等摩尔比至过量3摩尔，优选过量2摩尔。偶合剂通常使用相对于羧酸反应物的等摩尔比至微微过量。用于该反应的典型的溶剂包括二甲基甲酰胺和四氢呋喃。溶剂的选择并不是关键，只要所用溶剂对所进行的反应呈惰性并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约-15至反应混合物的回流温度下进行时，该反应通常在约1至72小时后基本上完成。反应优选地在约0℃至30℃的温度下进行24小时至48小时。反应得到式Ⅰ化合物。
反应一旦完成，产品可以用本领域已知的方法分离，如过滤，或通过萃取，蒸发或倾析除去反应溶剂。如果需要，可以通过常用技术如结晶或在固体支持物如硅胶或铝上进行色谱分离而将产品进一步纯化。
式Ⅰa化合物
其中R和J如上定义，如上所述，可用于制备式Ⅰ化合物。式Ⅰa化合物可通过下列反应式Ⅱ来制备
其中R和J如上定义。
上面的反应式Ⅱ可以通过顺序完成反应A-G来实现。一旦反应完成，可以用本领域已知方法将中间体化合物分离，如可以将化合物结晶然后过滤收集，或通过萃取，蒸发或倾析除去反应溶剂。如果需要，可以通过柱技术如在固体支持物如硅胶或铝上结晶或色谱分离将中间体化合物进一步纯化，该纯化可以在下步反应之前进行。反应式Ⅱ在下面制备例1-5中举例说明。
在反应A中，反应通过将2，2-二甲基-4，5-二环氧乙烷-1，3-二氧戊环与亲核剂(R-Z)(其中Z是卤化镁，锂或铵，优选溴化镁)在亚惰性溶剂中进行混合来完成。通过用铜盐如碘化铜(Ⅰ)或溴化铜(Ⅰ)催化可以得到较好的结果。相对于环氧乙烷反应物，通常使用等摩尔比至约2摩尔过量的亲核剂，优选约0.5摩尔过量。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂如乙醚或四氢呋喃。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应是惰性的并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约-40℃至10℃的温度下进行时，该反应通常在约1至24小时后基本上完成。反应优选地在约-5℃至5℃下进行2至6小时。
在反应B中，反应通过将反应A分离到的化合物与甲磺酰氯在互惰性溶剂中混合来完成。通常使用约等摩尔比至约3摩尔过量的甲磺酰氯反应物，优选约2摩尔过量。可以将碱，如2，6-二甲基吡啶或三烷基胺或三乙胺或二异丙基乙基胺等任意地加入以促进该反应。用于该反应的优选碱是三烷基胺，特别是三乙胺。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂，优选质子惰性溶剂，如二氯甲烷或氯仿。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应是惰性的并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约0℃至反应混合物的回流温度下进行时，该反应通常在约15分钟至24小时后基本上完成。该反应优选地在约15℃至30℃的温度范围内进行15分钟至4小时。
在反应C中，该反应通过将从反应B中分离到的化合物与叠氮离子在互惰性溶剂中混合来完成。用于该反应的叠氮离子可以从无机盐如碱金属叠氮化物如叠氮化锂或有机盐如四甲基叠氮化鈲中得到。通常使用约等摩尔比至3摩尔过量的叠氮离子，优选约2摩尔过量，通过加入碱如2，6-二甲基吡啶可以获得提高的产率。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂如六甲基磷酸三胺(HMPA)，二甲基甲酰胺或N，N′-二甲基亚丙基脲(DMPU)。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约0℃至反应混合物的回流温度下进行时，该反应通常在约1至24小时后基本上完成。该反应优选地在约25℃至100℃的温度范围内进行约4至12小时。
在反应D中，该反应通过将从反应C中分离到的化合物与强酸在醇溶剂中混合来完成，醇溶剂如甲醇或乙醇。适用于该反应的典型的酸包括氢卤酸如盐酸或氢溴酸，硫酸等。优选的酸是氢卤酸，特别是氢氯酸。通常使用大大过量如约10摩尔过量至20摩尔过量的酸反应物。当在约0℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约1至24小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行约2至4小时。
在反应E中，反应按反应B所述基本上相同的方法，用甲磺酰氯和从反应D中分离到的化合物进行。然而，相对于甲磺酰氯反应物通常使用约等摩尔比至1摩尔过量的反应D分离到的化合物。
在反应F中，环氧乙烷环的形成通过碱催化环化，优选地通过将从反应E中分离到的化合物与烷氧离子在合适的溶剂中混合来完成。烷氧离子可以从铵或碱金属醇盐等中得到。用于该反应的优选的烷氧离子是甲醇钠和甲醇钾。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂，如甲醇或四氢呋喃。当在约0℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约1至12小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行约1至2小时。
在反应G中，叠氮基还原成相应的胺的反应优选地通过催化氢化来完成，优选的方法是将从反应F中分离到的化合物与氢气在乙酸和钯碳催化剂的存在下混合。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂如乙酸乙酯。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并能充分溶解叠氮基反应物以完成所需的反应。当在约0℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约1至24小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行约2至5小时。
另外，叠氮基还原成相应的胺的反应也可以通过将从反应F中分离到的化合物与三烷基或三芳基膦在乙酸水溶液存在下混合来完成。优选的膦反应物是三丁基膦。适用于该反应的典型的有机溶剂包括混合物如含10%水的乙酸乙酯/乙腈。当在约0℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约1至12小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行约0.5至2小时。
式X-COOH化合物(其中X如上定义)可以通过下列反应式Ⅲ来制备反应式Ⅲ
其中J-、R3、R1、j、k和y如上定义。
上面的反应式Ⅲ可以通过顺序完成反应A-D来实现。一旦反应完成，可以通过本领域的已知方法分离中间体化合物，例如可以将化合物结晶然后过滤收集，或通过萃取，蒸发或倾析除去反应溶剂。如果需要，可以在进行下一步反应式之前，将中间体化合物用常规技术进一步纯化。例如在固体支持物如硅胶或铝上结晶或色谱分离。反应式Ⅲ在下面制备例6和7中举例说明。
在反应A中，在适当取代的2-氨基羧酸化合物中的羧基用一个标准的羧基保护基来保护，例如通过将二苯基重氮甲烷与2-氨基羧酸化合物简单地混合。典型地2-氨基羧酸以盐的形式如对甲苯磺酸盐使用，这样与氨基部分有关的阴离子对进行的反应呈惰性。通常使用等摩尔比至约3摩尔过量的二苯基重氮甲烷，优选约2摩尔过量。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂如乙腈。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对正在进行的反应呈惰性并且能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约10℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约15分钟至3小时后基本完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行15分钟至4小时。
在反应B中，通过将从反应A中分离到的化合物与碱如硫酸氢盐在水中简单地混合可以将氨基转变成相应的胺。用于该反应的碳酸氢根离子可以从无机盐如碱金属碳酸氢盐如碳酸氢锂或碳酸氢钠得到。使用任何有机溶剂如二氯甲烷可以将产物从反应混合物中萃取出来。当反应在20℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约15分钟至3小时后基本上完成。反应优选地在约15℃至30℃的温度范围内进行约15分钟至2小时。
在反应C中，反应通过将从反应B中分离到的化合物与三光气在互惰性溶剂中简单地混合来完成。通常使用约等摩尔比至2摩尔过量的反应B中分离到的化合物，优选约1摩尔过量。加入一种碱，例如三烷基胺如三乙胺或二异丙基乙基胺等以促进该反应。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂如甲苯。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约25℃至反应混合物的回流温度下进行时，反应通常在约6至24小时后基本上完成。反应优选地在约80℃至反应混合物的回流温度下进行约8小时至12小时。
在反应D中，通过将从反应C中分离到的化合物与下式化合物R1-(CH1)j-(Y)k-H(其中R1，j，k和y如上定义，条件是当Y为-N(R2)-时，R2必须是氢)，在互惰性溶剂中简单地混合来完成该反应。通过用铜盐如碘化铜(Ⅰ)或氯化铜(Ⅰ)催化可以得到较好的结果。通常使用约等摩尔比至1摩尔过量的从反应C中分离到的化合物。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂如二甲基甲酰胺。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对正在进行的反应呈惰性并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约10℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约15分钟至3小时后基本上完成。反应优选地在约15℃至30℃的温度范围内进行约15分钟至2小时。
从反应D中分离到的化合物上的羧基可以通过酯水解去保护以得到相应的羧酸。反应通过将从反应D中分离到的化合物与强酸在互惰性溶剂中简单地混合来完成。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂如二噁烷。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约25℃至反应混合物的回流温度下进行时，反应通常在约15分钟至4小时后基本完成。反应优选地在约60℃至100℃的温度范围内进行约15分钟至1小时。
另外，羧基可以用催化氢化去保护，优选地通过将从反应A中分离到的化合物与甲酸铵和钯碳催化剂在醇溶剂如甲醇或乙醇中进行混合。当在约0℃至反应混合物的回流温度下进行时，反应通常在约1至4小时后基本上完成。反应优选地在回流温度下进行约2至5小时。
其中X如上定义的、特别是其中R2是C1-C4烷基的式X-COOH化合物也可以通过下列反应式Ⅳ来制备反应式Ⅳ
上面的反应式Ⅳ可以通过顺序进行反应A和B来完成。一旦反应完成，可以用本领域中的已知方法分离产品，例如将产品结晶，然后过滤收集，或通过萃取，蒸发或倾析除去溶剂。如果需要，在进行下一步反应之前，可以用常规技术如在固体支持物如硅胶或铝上结晶或色谱分离将产品进一步纯化。反应式Ⅳ在下面制备例8和9中举例说明。
在反应A中，反应通过将从反应式Ⅲ反应B中分离到的化合物与1，1′-羰基二咪唑在互惰性溶剂中混合来完成。通常使用约等摩尔比至2摩尔过量的羰基二咪唑反应物，优选地用约等摩尔比。适用于该反应的典型的溶剂包括任何标准的有机溶剂如乙腈。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约15℃至30℃的温度范围内进行时，反应通常在约15分钟至2小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至25℃的温度范围内进行约15分钟至1小时。
在反应B中，反应通过将从反应C中分离到的化合物与下式化合物进行混合来完成，-R1-(CH2)j-(Y)k-H其中R1，j，k和Y如上定义。通常使用约等摩尔比至1摩尔过量的从反应A分离到的化合物。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂如乙腈。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约10℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约30分钟至6小时后基本上完成。反应优选地在约15℃至30℃的温度范围内进行约1分钟至4小时。
从反应B中分离到的化合物上的羧基可以通过前面所述的方法去保护。
如前所述，式Ⅰ化合物的任何活性对映体都被认为是本发明的一部分。这些活性异构体可以通过前面所述的方法从它们各自的活性前体制备，或通过拆分外消旋混合物来制备。拆分可以在拆分试剂的存在下通过色谱法，重结晶或本领域技术人员已知的这些技术的混合方法来完成。关于拆分的更详细的内容见Jacques等人的“Enantiomers，RacematesandResolutions，”JohnWiley&Sons1981。
本发明化合物合成中所用的原料化合物是已知的，对于买不到的那些可以用本领域普通技术人员通常使用的标准方法容易地合成。
本发明药学上可接受的盐可通过式Ⅰ化合物与等摩尔或过量的酸或碱反应来形成。通常将反应物在互溶剂中混合，如对酸加成盐用二乙醚或苯，对碱加成盐用水或醇。通常盐在约1小时至10天内从溶液中沉淀出来，将其用过滤或其他常规方法分离。
下面制备例和实施例对本发明的具体内容作进一步说明。然而，应理解到这些实施例仅用于说明本发明，而不在任何方面限制本发明的范围。
在下面的制备例和实施例中，术语熔点、质子核磁共振谱、质谱、红外光谱、紫外光谱、元素分析、高效液相色谱、和薄层层析分别简写为“m.p.”、“NMR”、“MS”、“IR”、“VV”、“Analysis”、“HPLC”和“TLC”。此外，IR光谱中列出的最大吸收仅仅是那些有意义的并不是所有观察到的。
在NMR谱中，使用了下列简写“s”是单峰，“d”是双峰，“dd”是双峰，“t”是三重峰，“q”是四重峰，“m”是多重峰，“dm”是双多重峰，“br.s”、“br.d”、“br.t”和“br.m”分别是宽的单峰、双峰、三重峰和多重峰。“J”表示偶合常数，以赫兹(Hz)表示。除非另有说明，NMR值是指目的化合物的游离碱。
用VarianAssociatesEM-39090MHz或T-6060MHz仪、JolFX-90Q90MHz仪、BrukerCorp.270MHz仪或GeneralElectricQE-300300Hz仪测得核磁共振谱。化学位移用δ值表示(用四甲基硅烷内标，用它的百万分之几表示)。质谱在VarionMAT731分光计为用碳树枝状晶体发射体测定。红外光谱在Perkin-Elmer281仪上测得。紫外光谱在Cary118仪上测得。薄层层析在E.Merck硅胶板上进行。熔点未校正。
制备例1A.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-羟基-2-苯乙基)1，3-二氧戊环在氮气下将14.6ml(43.8mmol)苯基溴化镁的24.6ml二乙醚溶液加到冷的(-40℃)0.278g(1.46mmol)碘化铜(Ⅰ)的2ml二甲亚砜和22ml四氢呋喃溶液中。将该溶液搅拌5-10分钟后，加入2.72g(14.6mmol)1，2∶5，6-二脱水-3，4-邻异亚丙基-D-甘露糖醇的12ml四氢呋喃溶液。然后将反应混合物热至0℃并反应2小时15分钟，此时缓慢地加入饱和氯化铵溶液。将所得溶液剧烈搅拌5分钟，然后移入含二乙醚和2∶1混合物的分液漏斗中。将所得的各层分开并将有机层减压浓缩至干。然后将所得物用柱色谱法纯化(用2.5%丙酮的二氯甲烷洗脱)。将含有所需产品的组份合并并减压浓缩至干得到4.07g所需的副标题中间体油状物。
NMR(CDCl3)δ7.35(m，10);3.78(m，4);3.15(dd，2);
2.90(d，2);2.70(m，2);1.45(s，6).
MSm/e342(M′).
B.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-甲磺酰氧基-2-苯乙基)-1，3-二氧戊环将2.97ml(38.3mmol)甲磺酰氯的20ml二氯甲烷溶液加到5.47ml(39.3mmol)三乙胺和6.4g(18.7mmol)制备例1A副标题中间体的20ml二氯甲烷冷(0℃)溶液中。然后将反应混合物热至室温。当用薄层层析(TLC)检测反应完成时，将反应混合物倒入50ml0.2N盐酸和150ml二乙醚溶液中。分开所得的各层并将有机层用饱和硫酸氢钠溶液洗涤，然后减压浓缩至干。然后将所得物用柱色谱法纯化(用1∶1的二乙醚/己烷溶液洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干得到3.7g所需标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.30(m，10);4.88(m，2);4.25(d，2);
3.10(m，4);2.32(s，6);1.52(s，6).
MSm/e 499(M 1).
C.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(S)-叠氮基-2-苯乙基)-1，3-二氧戊环将0.784g(16.0mmol)叠氮化锂，4.0g(14.6mmol)18-冠醚-6和1.7ml(14.6mmol)2，6-二甲基吡啶的溶液加到3.6g(7.2mmol)制备例1B副标题中间体的25mlN，N′-二甲基亚丙基脲中。然后将反应混合物加热至95-100℃并反应约7小时。当由TLC检测反应完成时，将反应混合物倒入200ml0.1N盐酸和二乙醚的1∶1混合物中。将所得的各层分离并将有机层用硫酸钠干燥，然后减压浓缩至干得到2.8g油状物。将该油状物用柱色谱法纯化(用5-10%二氯甲烷的甲苯梯度洗脱剂洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干得到1.03g所需的副标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.30(m，10);4.12(s，2);3.22(t，2);
3.05(m，4);1.55(s，6).
D.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)，4(R)-二羟基己烷在3小时内向0.370g(0.943mmol)制备例1C的副标题中间体的4ml甲醇溶液中缓慢地加入1.26ml12M盐酸。当用TLC检测反应完成时，将反应混合物用10ml乙腈稀释并浓缩两倍。将所得物重新溶解在乙酸乙酯中并用碳酸氢钠的半饱和溶液洗涤。将所得的各层分离并将有机层以浓缩至干得到一油状物。将该油状物用柱色谱法纯化(用0-20%乙酸乙酯的二氯甲烷梯度洗脱剂洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干，然后从二乙醚和己烷溶液中重结晶得到0.309g所需的副标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.25(m，10);3.60(m，4);3.0(m，4);2.65(d，2).
MSm/e 353(M 1).
元素分析 C18H20N6O2计算值C，61.35;H，5.72;N，23.85;
实测值C，61.15;H，5.73;N，23.70.
E.1，6-二苯基-(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)-甲磺酰氧基-4(R)-羟基己烷将13.5μl(0.170mmol)甲磺酰氯的300μl二氯甲烷溶液缓慢地加到80mg(0.23mmol)制备例1D副标题中间体和32μl(0.23mmol)三乙胺的0.6ml二氯甲烷冷(0℃)溶液中。将反应混合物热至室温，使其反应15分钟，然后倒入50ml二乙醚和0.1N盐酸的3∶2混合物中。将所得各层分开，将有机层用碳酸氢钠半饱和溶液洗涤，然后减压浓缩至干得到一泡沫状物。将该泡沫状物用柱色谱法纯化(用1∶2的乙酸乙酯/二氯甲烷溶液洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干得到100mg所需副标题中间体和起始物1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)，4(R)-二羟基己烷的60∶40混合物。
F.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3，4-顺环氧己烷向60mg(0.14mmol)制备例1E的副标题中间体的1.5ml2∶1甲醇/四氢呋喃冷(0℃)溶液中加入0.325ml0.5M甲醇钠的甲醇溶液。然后将反应混合物热至室温并使其反应1小时，之后加入3ml含2滴乙酸的二乙醚。然后将所得溶液倒入25ml饱和硫酸氢钠溶液和40ml二乙醚的混合物中。将所得的各层分开，将有机层减压浓缩至干得到一油状物。将该油状物用柱色谱法纯化(用20%己烷的二氯甲烷洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干得到31mg所需的副标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.30(m，10);3.57(m，1);3.45(m，1);
3.18(m，2);2.94(m，4).
G.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-顺环氧己烷二盐酸盐向350mg5%钯碳在10ml9∶1乙酸乙酯/乙酸溶液中的悬浮液中加入0.368g(1.11mmol)上面制备1F副标题中间体。然后将混合物在氢气下快速搅拌约31/2小时。当用TLC检测反应完成时，将混合物用乙酸乙酯稀释并过滤除去5%钯碳。然后将滤液冷却过液得到0.325g1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-顺环氧己烷二乙酸盐。向0.100g(0.249mmol)二乙酸盐的4ml1∶1二氯甲烷/二己醚溶液中缓慢地加入在乙腈中的0.498ml1N盐酸得到一白色固体。将该固体离心分离得到0.090g所需副标题产品。
NMR(d6-DMSO)δ8.40(br.s，6);7.30(m，10);
3.40(m，4);3.05(m，4).
MSm/e 284(M -2Cl).
制备例2A.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-羟基-2-萘-2-基乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备例1A中所述方法制备所需的副标题中间体，使用在约58ml四氢呋喃中的27.29mmol2-萘基溴化镁，183mg碘化铜(Ⅰ)，1.30ml(17.70mmol)二甲基亚砜和1.502g(8.07mmol)1，2∶5，6-二脱水-3，4-邻异亚丙基-D-甘露糖醇得到2.81g白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.78(m，8);7.43(m，6);3.90(m，2);
3.81(m，2);3.32(dd，2);2.90(dd，2);
2.81.(br.s，2);1.53(s，6).
MSm/e 442(M ).
元素分析C29H30O4计算值C，78.71;H，6.83;
实测值C，78.44;H，7.11.
B.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-甲磺酰氧基-2-萘-2-基乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备1B所述的方法制备所需副标题中间体，使用2.40ml(31.0mmol)甲磺酰氯，2.80ml(20.1mmol)三乙胺和2.81g(6.35mmol)制备例2A副标题中间体得到3.02g白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.80(m，8);7.50(m，4);7.36(m，2);
5.00(m，2);4.35(br.s，2);3.26(m，4);
2.27(s，6);1.57(s，6).
MSm/e 598(M ).
元素分析 C31H34O8S2计算值C，62.19;H，5.72;
实测值C，62.00;H，5.70.
C.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(S)叠氮基-2-萘-2-基乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备例1C所述方法制备所需副标题中间体，使用1.999g(40.80mmol)叠氮化锂，1.175ml(10.09mmol)2，6-二甲基吡啶和3.00g(5.01mmol)制备例2B副标题中间体得到946mg含894mg所需化合物的粘性油。
NMR(CDCl3)δ7.83(m，6);7.70(br.s，2);7.52(m，4);
7.35(m，2);4.23(s，2);3.39(m，2);
3.20(m，4);1.59(s，6).
MSm/e 492(M ).
元素分析 C29H28N6O2计算值C，70.71;H，5.73;N，17.06;
实测值C，70.77;H，5.82;N，16.82.
D.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)，4(R)-二羟基己烷基本上按制备例1D所述方法使用在0.25ml2.5∶1∶6.5乙酸/水/四氢呋喃溶液中的41.9mg(0.0851mmol)制备例2C标题中间体和4滴浓盐酸制备所需的标题中间体。将反应溶液在回流下搅拌17小时得到28.7mg白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.75(m，8);7.50(m，4);7.34(m，2);
3.70(br.s，4);3.15(m，4);
2.48(br.s，2).
MSm/e 452(M ).
元素分析 C26H24N6O2计算值C，69.01;H，5.35;N，18.57;
实测值C，69.15;H，5.37;N，18.37.
E.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)-甲磺酰氯基-4(R)-羟己烷基本上按制备例1E所述方法制备所需的副标题中间体，用40μl(0.52mmol)甲磺酰氯，697mg(1.54mmol)制备例2D副标题中间体和0.212ml(1.52mmol)三乙胺得到一固体，不用进一步纯化将其直接使用。
F.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3，4-顺式-环氧己烷基本上按制备例1F所述方法制备所需副标题中间体，使用制备例2E副标题中间体和4.50ml在甲醇中的0.5M甲醇钠得到261mg白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.80(m，8);7.44(m，6);3.73(m，1);
3.62(m，1);3.34(dd，1);3.23(dd，1);
3.11(m，4).
MSm/e 434(M ).
元素分析 C26H22N6O计算值C，71.87;H，5.10;N，19.34;
实测值C，72.09;H，5.29;N，19.32.
G.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-顺环氧己烷二盐酸盐基本上按制备1G所述方法制备所需的副标题产物，通过将322mg(0.741mmol)制备例2F副标题中间体和330mg5%钯碳在氢气下混合得到95.8mg1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二氨复盐-3，4-顺环氧己烷二乙酸盐。然后用二乙酸盐和0.5ml在乙腈中的1N盐酸制备二盐酸盐得到69.2mg白色固体。
NMR(d6-DMSO)δ8.53(br.s，3);8.23(br.s，3);
3.90(m，8);7.54(m，6);
3.05-3.85(m，8).
MSm/e 383(M 1-2Cl).
元素分析 C26H28N2OCl2计算值C，68.57;H，6.20;N，6.15;
实测值C，68.48;H，6.32;N，6.32.
制备例3A.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-羟基-2-萘-2-基硫乙基)-1，3-二氧戊环向1.172g(6.29mmol)2，2-二甲基-4，5-二环氧乙烷-1，3-二氧戊环的64ml四氢呋喃溶液中加入4.075g(25.43mmol)2-萘硫醇。固体完全溶解后，加入2.20ml(12.6mmol)二异丙基乙基胺。将所得溶液热至回流并将其反应约24小时。冷却后，将溶液移至含二氯甲烷和饱和盐水溶液的分液漏斗中。将所得各层分离并将有机层减压浓缩至干。然后将所得物用柱色谱法纯化(用30%乙酸乙酯/65%己烷/5%二氯甲烷溶液洗脱)。将含有所需产物的组份合并并减压浓缩至干得到2.88g所需副标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.76(m，8);7.44(m，6);3.85(m，4);
3.72(s，2);3.60(dd，2);3.02(dd，2);
1.32(s，6).
MSm/e 506(M ).
元素分析 C29H30O4S2计算值C，68.74;H，6.90;
实测值C，69.03;H，6.09.
B.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-甲磺酰氧基-2-萘-2-基硫乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备1B所述方法制备所需副标题中间体，用1.10ml(14.2mmol)甲磺酰氯，2.12ml(15.2mmol)三乙胺和2.84g(5.60mmol)制备例3A副标题中间体得到3.02g固体。
C.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(S)-叠氮基-2-萘-2-基硫乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备例1C所述方法制备所需的副标题中间体，用602mg(12.3mmol)叠氮化锂，1.40ml(12.0mmol)2，6-二甲基吡啶和制备例3B副标题中间体得到894mg无色油状物，经计算其中含539mg所需化合物。
NMR(CDCl3)δ7.91(s，1);7.78(m，7);7.49(m，6);
4.78(s，2);3.73(m，4);3.39(m，2);
1.56(s，6).
MSm/e 556(M ).
D.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)，4(R)-二羟基己烷基本上按照制备2D所述方法使用1.24g(2.23mmol)制备例3C副标题中间体和0.5ml浓盐酸的15.2ml3∶1∶7.7乙酸/水/四氢呋喃溶液制备所需副标题中间体。将反应溶液在回流下搅拌8小时得到937mg白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.79(m，8);7.46(m，6);
4.23(br.s，2);3.72(m，2);
3.60(m，2);3.37(m，2);3.02(d，2).
MSm/e 516(M ).
元素分析 C26H24N6O2S2计算值C，60.44;H，4.68;N，16.27;
实测值C，60.39;H，4.85;N，15.97.
E.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)-甲磺酰氧基-4(R)-羟基己烷基本上按制备例1E所述方法制备所需副标题中间体，使用23.7μl(0.306mmol)甲磺酰氯，211mg(408mmol)制备例3D副标题中间体和0.60ml(0.30mmol)三乙胺得到一固体。
F.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3，4-顺-环氧己烷基本上按制备例1F所述方法制备所需副标题中间体，使用制备例3E副标题中间体和0.70ml0.5M甲醇钠甲醇溶液得到94mg无色油状物。
NMR(CDCl3)δ8.03(m，2);7.79(m，6);7.52(m，6);
3.65(m，2);3.43(m，2);3.50(dd，1);
3.20(dd，1);3.00(m，1).
MSm/e 498(M ).
元素分析 C26H22N6OS2计算值C，62.63;H，4.45;N，16.85;
实测值C，62.88;H，4.58;N，16.73.
G.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-顺-环氧己烷二乙酸盐向172mg(0.345mmol)制备例3F副标题中间体在6∶4∶1的乙酸乙酯/乙腈/水混合物中的溶液中加260μl(1.04mmol)三正丁基膦和60.0μl冰醋酸。将反应混合物在室温下反应约30分钟并减压浓缩得到一油状物。将该油状物用乙酸乙酯/己烷溶液重结晶得到12.4mg白色粉末状所需的标题中间体。
NMR(d6-DMSO)δ8.09(s，1);7.95(s，1);
7.72-7.90(m，9);7.38-7.62(m，9);
3.08-3.34(m，4);2.53-2.95(m，4);
1.86(s，6).
MSm/e 446(M -2HOAc).
元素分析 C30H34N2O5S2计算值C，63.58;H，6.05;N，4.94;S，11.32;
实测值C，63.74;H，6.17;N，4.85;S，11.10.
制备例41，8-二苯基-3(S)，6(S)-二氨基-4，5-顺-环氧辛烷盐酸盐基本上按制备1A-G所述方法制备了所需的标题产物。
NMR(d6-DMSO)δ8.35(br.s，6);7.20(m，10);
3.30(m，3);3.10(m，1);2.70(m，4);
2.0(m，4).
制备例51，10-二苯基-4(S)，7(S)-二氨基-5，6-顺-环氧癸烷盐酸盐基本上按制备例1A-G所述方法制备了所需的标题产物。
NMR(d6-DMSO)δ8.35(br.s，6);7.35(m，10);3.45(m，3);
3.35(m，1);3.05(m，4);1.8(m，8).
制备例6A.(2S)-氨基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯的对甲苯磺酸盐将二苯基重氮甲烷加到15.03g(49.54mmol)L-异亮氨酸，对甲苯磺酸盐的450ml4∶5乙腈/甲醇溶液中直至保持浅粉色(17.12g(88.16mmol)二苯基重氮甲烷)，此时加入2ml冰醋酸。将所得溶液室温下搅拌约15分钟，然后减压浓缩得到黄色固体。然后将该固体在热乙腈中重结晶以纯化得到21.64g所需的标题中间体。
NMR(CD3OD)δ7.67(d，J＝9Hz，2);7.37(m，10);
7.20(d，J＝9Hz，2);6.98(s，1);
4.13(d，J＝3Hz，1);2.34(s，3);
2.01(m，1);1.17-1.46(m，2);
0.80-0.97(m，6).
B.2(S)-氨基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯向21.64g(46.08mmol)制备例4A标题中间体的溶液中加入450ml饱和碳酸氢钠溶液，释放出气体。当反应完成时，将所得的各层分开并减压浓缩至干得到13.61g所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.19-7.45(m，10);7.93(s，1);
3.47(d，J＝3Hz，1);1.85(m，1);
1.33-1.50(m，4);0.92(d，J＝8Hz，3);
0.83(t，J＝8，3).
C.2(S)-氨基甲酰基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯将4.97g(16.7mmol)制备例4B副标题中间体和4.7ml(33.7mmol)三乙胺溶液通过套管加入2.51g(8.46mmol)三光气的90ml甲苯热(60℃)溶液中。将温度升至100℃并将溶液反应过夜。将反应混合物冷至0℃，结果形成沉淀。过滤除去该沉淀并用1∶1的乙酸乙酯/己烷溶液洗涤。将所得溶液减压浓缩至干得到5.45g所需的标题中间体，它具有足够的纯度(NMR测定约90%)以用于下一步反应。
NMR(CDCl3)δ7.23-7.47(m，10);6.98(s，1);
4.05(d，J＝3Hz，1);2.05(m，1);
1.18(quintet，J＝8Hz，2);
1.00(d，J＝8Hz，3);0.80(t，J＝8Hz，3).
D.2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3(S)甲基戊酸二苯甲酯向0.506g(3.18mmol)2-羟甲基喹啉和0.315g(3.18mmol)氯化铜(Ⅰ)的无水二甲基甲酰胺溶液中加入1.13g(3.50mmol)制备例4C副标题中间体。TLC显示反应基本上完成时，将反应混合物用乙酸乙酯稀释并用半饱和盐水溶液洗涤。将所得的各层分开并将有机层用硫酸钠干燥，减压浓缩至干得到棕色油。将该油通过柱色谱法纯化(用65%己烷的乙酸乙酯洗脱)得到1.23g所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.15(d，1);8.05(d，1);7.8(d，1);
7.70(t，1);7.55(t，1);7.45(d，1);
7.30(m，10);6.92(s，1);5.43(d，1);
5.40(s，2);4.5(m，1);2.0(m，1);
1.2(m，2);0.9(d，3);0.82(t，3).
E.2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸将上面制备例4C副标题中间体溶解在12ml含3ml浓盐酸的二噁烷中。将所得溶液热至100℃并使其反应约5分钟，然后冷至室温并搅拌直到TLC显示反应基本上完成。将所得的溶液减压浓缩至干，然后重新溶解在碳酸氢钠水溶液中。将所得溶液用100ml乙醚洗涤，然后用1N盐酸酸化至pH4。然后用10%异丙醇的二氯甲烷溶液萃取所需产品，用硫酸钠干燥并过滤。然后将溶液减压浓缩至干得到0.567g所需标题产品。
NMR(d6-DMSO)δ8.35(d，1);7.92(d，2);7.70(m，2);
7.53(m，2);5.22(s，2);3.92(m，1);
1.78(m，1);1.40(m，1);1.20(m，1);
0.90(m，6).
制备例7A.2(S)-N-[[N(甲基)-N-(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯向1.13g(3.50mmol)制备例4C副标题中间体的2ml二氯甲烷溶液中加入0.441ml(3.18mmol)N-(吡啶-2-基乙基)胺。当TLC显示反应完成时，将反应溶液倒进二氧化硅柱(用5%甲醇的乙酸乙酯洗脱)。将含有所需产品的组份合并并浓缩至干得到1.33g所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.43(d，1);7.55(t，1);7.3(m，10);
7.10(m，2);6.90(s，1);5.63(d，1);
4.60(m，1);3.65(m，2);3.02(t，2);
2.81(s，3);1.95(m，1);1.3(m，1);
1.15(m，1);0.85(m，6).
B.2-(S)-N-[[N-(甲基)-N-(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸基本上按制备例4E所述的方法制备所需的副标题产物，用1.1g(2.39mmol)制备例5A标题中间体和3ml浓盐酸得到0.527g固体。
NMR(CDCl3)δ10.00(br.s，1);8.55(d，1);
7.62(d，1);7.2(m，2);5.7(d，1);
4.35(m，1);3.70(m，2);3.06(t，2);
2.83(s，3);1.95(m，1);1.50(m，1);
1.20(m，1);0.9(m，6).
制备例8A.2(S)-N-(咪唑-1-基羰基)氨基己酸二苯甲酯将400mg(1.34mmol)2(S)-氨基己酸二苯甲酯的3ml乙腈溶液加到在2ml乙腈中的218mg(1.34mmol)1，1′-羰基二咪唑中。将所得溶液在室温下搅拌约45分钟，然后用柱色谱法纯化(用25%乙酸乙酯的二氯甲烷洗脱)得到350mg所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.15(s，1);7.35(s，10);7.08(s，1);
6.95(s，1);6.50(d，1);4.80(m，1);
2.0(m，1);1.80(m，1);1.30(m，3);
1.15(m，3);0.82(t，3).
B.2(S)-N-[[N-(甲基)-N-[(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]]氨基己酸二苯甲酯将300mg(0.766mmol)制备例6A副标题中间体的1ml乙腈溶液加到132mg(0.766)N-(甲基)-2-氨基喹啉的1ml乙腈中。当TLC显示反应完成时，将反应溶液减压浓缩至干得到一种油。将该油用柱色谱法纯化(用10-30%乙酸乙酯的二氯甲烷梯度洗脱剂)。将含有所需产品的组份减压浓缩至干得到330mg所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.15(d，1);8.0(d，1);7.80(d，1);
7.70(t，1);7.55(t，1);7.40(d，1);
7.30(s，10);6.90(s，1);
6.08(br.s，3);4.70(m，3);3.02(s，3);
1.90(m，1);1.75(m，1);1.20(m，4);
0.80(t，3).
C.2(S)-N-[[N-(甲基)-N-(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基己酸向330mg(0.666mmol)制备例6B副标题中间体的2ml甲醇溶液中加入105mg(1.66mmol)甲醇铵和83mg5%钯碳。将反应混合物在回流温度下反应约2小时。当TLC检测反应完成时，将反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释并过滤除去5%钯碳。然后将溶液与50ml水合并，分离所得的各层并将有机层减压浓缩至干得到165mg所需的标题产物。
NMR(d6-DMSO)δ8.30(d，1);7.92(d，2);7.70(t，1);
7.55(t，2);7.35(d，1);6.60(d，1);
4.62(s，2);4.03(m，1);2.85(s，3);
1.62(m，2);1.20(m，4);0.80(t，3).
制备例9A.2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基己酸二苯甲酯将40mg(0.10mmol)制备例6A标题中间体的1ml二甲基甲酰胺溶液加到在二甲基甲酰胺中的16.5mg(0.104mmol)2-羟甲基喹啉、12.5mg(0.102mmol)4-二甲氨基吡啶和0.10mmol氯化铜(Ⅰ)中。将所得的反应混合物在室温下反应约3小时，然后用柱色谱法纯化(用65%己烷的乙酸乙酯洗脱)得到37mg所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.15(d，1);8.05(d，1);7.80(d，1);
7.70(t，1);7.55(t，1);7.45(d，1);
7.30(s，10);6.90(s，1);5.45(d，1);
5.40(s，2);4.55(m，1);1.90(m，1);
1.72(m，1);1.20(m，4);0.80(t，3).
实施例11，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷制备215mg(0.818mmol)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-甲基丁酸，12mg(0.082mmol)羟基苯并三唑单水合物(HOBT·H2O)、104μl(0.818mmol)N-甲基吗啉(NMM)和362mg(0.818mol)苯并三唑-1-基氧三(二甲氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)的2ml二甲基甲酰胺溶液并使其在室温下搅拌约10分钟。同时，将80μl(0.40mmol)N，N-二环己胺加到71mg(0.20mmol)制备例1G标题中间体的6ml二甲基甲酰胺溶液中，得到一白色固体。将该固体离心除去并将溶液加到上面的溶液中。将所得反应混合物减压浓缩至体积2.0ml，使其在室温下反应约48小时。然后将反应混合物用20ml乙酸乙酯稀释并将所得的溶液加到120ml2∶1乙酸乙酯/0.1N盐酸溶液。将所得的各层分开并将有机层用1∶1的饱和碳酸氢钠/盐水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩至干得到110mg物质。然后将该物质用快速色谱法纯化(用65%甲苯的乙酸乙酯洗脱)。将含有所需产物的组份合并，减压浓缩至干得到52mg所需标题产物。
NMR(80�Cl3/20% CD3OD)δ7.35(s，10);7.18(m，10);
5.12(s，4);4.20(d，2);4.12(m，1);
3.90(d，1);3.18(m，1);2.82(m，5);
2.05(m，2);0.90(m，9);(d，3).
MSm/e 749(M 1).
元素分析 C44H52N4O7计算值C，70.57;H，7.00;N，7.48;
实测值C，70.31;H，7.11;N，7.76.
实施例21，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(苄氧羰基)氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备了标题化合物。用194mg(0.818mmol)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-丁酸，12mg(0.082mmol)HOBT·H2O、104μl(0.818mmol)NMM和370mg(0.818mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二环己胺和71mg(0.20mmol)制备例1G标题中间体，得到21mg所需化合物。
NMR(80% CDCl3/20% CD3OD)δ7.35(s，10);7.20(m，10);
5.15(s，4);4.25(d，2);4.10(m，1);
3.90(d，1);3.15(m，1);2.80(m，5);
1.45(m，4);0.8(m，6).
实施例31，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(喹啉-2-基羰基)氨基-3-氰基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备了标题化合物。用163mg(0.605mmol)2(S)-N-(喹啉-2-基羰基)氨基-3-氰基丙酸，8.1mg(0.06mmol)HOBT·H2O，67μl(0.60mmol)NMM和268mg(0.605mmol)BOP、61μl(0.30mmol)N，N-二环己基胺和53mg(0.15mmol)制备例1G副标题中间体，得到32mg非对映体混合物。用反相高效液相色谱(HPLC)分离这些非对映异构体(含0.36%乙酸的1∶1∶1乙腈/甲醇/水)得到7mg所需化合物。
NMR(80% CDCl3/20% CD3OD)δ8.20(m，6);7.75(m，6);
7.0(m，10);4.75(m，2);4.25(m，2);
3.0(m，8).
MSm/e 785(M 1).
实施例41，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备了标题化合物，用231mg(0.762mmol)2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酸，11mg(0.076mmol)HOBT·H2O、92μl(0.84mmol)NMM和337mg(0.762mmol)BOP，76μl(0.38mmol)N，N-二环己基胺和66mg(0.19mmol)制备例1G标题中间体制得70mg粗品。用反相HPLC纯化该混合物(含0.5%乙酸的35%乙腈/35%甲醇/30%水)得到7mg含92%所需标题产物的物质。
NMR(80% CDCl3/20% CD3OD)δ8.05(m，2);7.72(m，2);
7.45(m，2);7.10(m，10);5.35(s，4);
4.15(m，2);3.95(m，2);3.10(d，1);
2.80(m，5);2.0(m，2);0.8(m，12).
实施例51，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(苄氧羰基)氨基-3-氨基甲酰基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备标题化合物，用218mg(0.818mg)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-氨基甲酰基丙酸，12mg(0.082mmol)HOBT·H2O，104μl(0.818mmol)NMM和362mg(0.818mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二环己基胺和71mg(0.20mmol)制备例1G标题中间体，得到7mg含80-85%所需的标题产物的物质。
实施例61，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(苄氧羰基)氨基-3-氰基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用137mg(0.552mmol)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-氰基丙酸，8mg(0.06mmol)HOBT·H2O，6μl(0.552mmol)NMM和244mg(0.552mmol)BOP、55μl(0.28mmol)N，N-二环己胺和49mg(0.14mmol)制备例1G副标题中间体制得了标题化合物。用反相HPLC纯化所得物质(含0.2%乙酸铵的32.5%乙腈/32.5%甲醇/35%水)得到38mg所需标题产物。
NMR(90% CDCl3/10% D2O)δ7.10(m，20);5.10(s，4);
4.58(m，1);4.40(m，1);4.25(m，1);
4.10(m，2);3.22(m，1);2.80(m，8).
MSm/e 743(M 1).
元素分析 C42H42N6O7计算值C，67.91;H，5.70;N，11.31;
实测值C，68.02;H，5.84;N，11.06.
实施例71，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(苄氧羰基)氨基-3-吡唑-1-基丙酰基]氨基]-3，4-顺环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用250mg(0.901mmol)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-吡唑-1-基丙酸，12mg(0.09mmol)HOBT·H2O，100μl(0.901mmol)NMM和398mg(0.901mmol)BOP，90μl(0.45mmol)N，N-二环己基胺和80mg(0.22mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的37.5%乙腈/37.5%甲醇/25%水)得到所需的标题产物。
实施例81，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备标题化合物，用328mg(1.31mmol)2(S)-N-(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-3-甲基丁酸，17.6mg(0.13mmol)HOBT·H2O，143μl(1.30mmol)NMM和575mg(1.30mmol)BOP，124μl(0.619mmol)N，N-二环己胺和110mg(0.310mmol)制备例1G标题中间体得到195mg粗品。将该物用反相HPLC纯化(用含0.05%乙酸铵的30%乙腈/25%甲醇/45%水)得到95mg所需产品。
NMR(80% d6-DMSO/20% D2O)δ8.42(s，1);7.72(m，1);
7.25(m，2);7.05(m，10);5.02(m，4);
4.0(m，2);3.75(m，2);3.15(d，1);
2.70(m，5);1.85(m，2);0.7(m，12).
MSm/e 751(M 1).
元素分析 C42H50N6O7计算值C，67.18;H，6.71;N，11.19;
实测值C，67.39;H，6.87;N，11.92.
实施例91，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(苄氧羰基)氨基-3-咪唑-4-基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用248mg(0.856mmol)2-N-(苄氧羰基)氨基-3-咪唑-4-基丙酸，12mg(0.085mmol)HOBT·H2Ol，94μl(0.86mmol)NMM和378mg(0.856mmol)BOP，87μl(0.438mmol)N，N-二环己胺和76mg(0.214mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.3%乙酸铵的35%乙腈/35%甲醇/30%水)得到19mg所需产品。
NMR(80% d6-DMSO/20% D2O)δ7.50(s，2);7.10(m，20);
6.68(s，2);4.95(s，4);4.05(m，4);
3.20(m，1);2.60(m，8).
实施例101，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用333mg(1.154mmol)2(S)-N[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基丁酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，128μl(1.16mmol)NMM和510mg(1.15mmol)BOP，112μl(0.563mmol)N，N-二环己基胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的45%乙腈/35%甲醇/20%水)得到75mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(m，2);7.90(m，2);7.80(m，2);
7.70(m，2);7.50(m，4);7.10(m，10);
5.3(m，4);4.2(m，3);4.0(m，2);
3.22(m，1);2.80(m，4);1.65(m，2);
1.55(m，2);0.85(m，6).
MSm/e 823(M 1).
元素分析 C48H50N6O7计算值C，70.05;H，6.12;N，10.21;
实测值C，69.85;H，6.14;N，10.37.
实施例111，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(苄氧羰基)氨基-3-甲硫丙酰基]氨基]-3，4-顺环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用318mg(1.18mmol)2(S)-N(苄氧羰基)氨基-3-甲硫丙酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，132μl(1.2mmol)NMM和523mg(1.18mmol)BOP，0.112ml(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.2%乙酸铵的40%乙腈/35%甲醇/25%水)得到27mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ7.30(m，10);7.15(m，10);5.08(s，4);
4.45(m，1);4.25(m，2);4.15(m，1);
4.0(m，1);3.25(m，1);2.70(m，8);
2.02(s，6).
MSm/e 784(M ).
实施例121，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(苄氧羰基)氨基-4-氨甲酰基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用331mg(1.18mmol)2(S)-N(苄氧羰基)氨基-4-氨甲酰基丁酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，132μl(1.2mmol)NMM和523mg(1.18mmol)BOP，0.112ml(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的32.5%乙腈/32.5%甲醇/35%水)得到28mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ7.2(m，20);5.10(s，4);4.30(m，1);
4.10(m，3);3.18(d，1);2.80(m，5);
2.2(m，4);1.90(m，4).
MSm/e 807(M 1).
元素分析 C44H50N6O9计算值C，65.49;H，6.25;N，10.41;
实测值C，65.25;H，6.30;N，10.21.
实施例131，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-4-甲基戊酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用315mg(1.18mmol)2(S)-N(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-4-甲基戊酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，0.132ml(1.2mmol)NMM和523mg(1.18mmol)BOP，0.112ml(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的32.5%乙腈/32.5%甲醇/35%水)得到76mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.4(s，2);7.75(m，2);7.40(m，4);
7.25(m，4);7.10(m，10);5.10(s，4);
4.10(m，4);4.00(d，1);3.25(d，1);
2.80(m，4);1.4(m，4);0.8(m，12).
MSm/e 778(M ).
元素分析 C44H54N6O7计算值C，67.85;H，6.99;N，10.79;
实测值C，67.60;H，6.93;N，10.76.
实施例141，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(苄氧羰基)氨基-3(S)-甲基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用306mg(1.15mmol)2(S)-N(苄氧羰基)氨基-3(S)-甲基丙酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，128μl(1.16mmol)NMM和510mg(1.154mmol)BOP，112μl(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物棕色固体。将该固体用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的45%乙腈/35%甲醇/20%水)以得到46mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ7.35(m，10);7.15(s，10);5.10(s，4);
4.2(m，3);4.0(q，1);3.92(d，1);
3.22(m，1);2.80(m，4);1.75(m，2);
1.45(m，2);1.1(m，2);0.8(m，12).
MSm/e 777(M 1).
元素分析 C46H56N4O7计算值C，71.11;H，7.26;N，7.21;
实测值C，70.84;H，7.36;N，7.29.
实施例151，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基]-3(S)-甲基戊酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用365mg(1.15mmol)2(S)-N[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，0.128ml(1.16mmol)NMM和510mg(1.154mmol)BOP，112μl(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的45%乙腈/35%甲醇/20%水)得到90mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(d，2);7.95(d，2);7.85(d，2);
7.70(m，2);7.55(m，4);7.10(m，10);
5.35(m，4);4.25(m，2);4.20(d，1);
4.0(m，2);3.22(m，1);2.80(m，4);
1.8(m，2);1.5(m，1);1.3(m，1);
1.1(m，2);0.8(m，12).
MSm/e 879(M 1).
元素分析 C52H58N6O7计算值C，71.05;H，6.65;N，9.56;
实测值C，71.05;H，6.70;N，9.75.
实施例161，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N-(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用522mg(1.87mmol)2(S)-N[[N(甲基)-N(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3-甲基丁酸，16mg(0.115mmol)HOBT·H2O，0.207ml(1.88mmol)NMM和825mg(1.87mmol)BOP，183μl(0.919mmol)N，N-二环己胺和162mg(0.455mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.4%乙酸铵的45%乙腈/20%甲醇/35%水)得到42mg所需产物。
NMR(CD3OD)δ8.42(m，2);7.70(m，2);7.20(m，14);
4.22(m，3);4.0(q，1);3.85(d，1);
3.6(m，4);3.22(m，1);2.95(m，4);
2.82(s，6);2.80(m，4);1.95(m，2);
0.8(m，12).
实施例171，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[(8-氟喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用286mg(0.892mmol)2(S)-N[(8-氟喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酸，12mg(0.089mmol)HOBT·H2O，0.100ml(1.89mmol)NMM和395mg(0.892mmol)BOOP，87μl(0.44mmol)N，N-二环己胺和78mg(0.22mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/35%甲醇/30%水)得到34mg所需产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(d，2);7.60(m，4);7.45(m，4);
7.10(m，10);5.35(m，4);4.25(m，2);
4.15(d，1);4.05(m，1);3.95(m，1);
3.25(m，1);2.80(m，4);2.0(m，2);
0.85(m，12).
MSm/e 888(M 2).
实施例181，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用187mg(0.62mmol)2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰甲酰基]氨基丁酸，9mg(0.06mmol)HOBT·H2O，70μl(0.620mmol)NMM和274mg(0.620mmol)BOP，71μl(0.355mmol)N，N-二环己胺和63mg(0.18mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到50mg所需产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);7.85(m，2);
7.70(m，2);7.55(t，2);7.40(dd，2);
7.15(m，10);4.80(ABX，4);
4.35(m，2);4.15(m，2);4.0(m，1);
3.25(m，1);3.02(s，3);2.97(s，3);
2.80(m，4);1.7(m，4);0.85(m，6).
MSm/e 849(M 1).
实施例191，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用232mg(0.704mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸，10mg(0.070mmol)HOBT·H2O，78μl(0.70mmol)NMM和312mg(0.704mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二环己胺和72mg(0.201mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);7.85(d，2);
7.70(m，2);7.55(t，2);7.40(d，2);
7.15(m，10);4.75(ABX，4);
4.38(d，1);4.28(t，1);4.20(m，1);
4.0(m，2);3.25(m，1);3.02(s，6);
2.75(m，4);1.78(m，2);
1.05-1.45(m，4);0.75(m，12).
MSm/e 906(M 2).
实施例201，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(苄氧羰基)氨基]丙酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用94mg(0.42mmol)2(S)-N(苄氧羰基)氨基丙酸，6mg(0.04mmol)HOBT·H2O，46μl(0.42mmol)NMM和187mg(0.42mmol)BOP，56μl(0.28mmol)N，N-二环己胺和50mg(0.14mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到15mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ7.30(m，10);7.10(m，10);5.05(s，4);
4.30(m，1);4.20(m，1);4.1(m，2);
3.95(m，1);3.20(m，1);2.75(m，4);
1.22(m，6).
MSm/e 694(M 2).
实施例211，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基戊酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用90mg(0.28mmol)2(S)-N-[[(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基戊酸，4mg(0.03mmol)HOBT·H2O，32μl(0.28mmol)NMM和126mg(0.285mmol)BOP，41μl(0.20mmol)N，N-二环己胺和36.2mg(0.102mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到32mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);7.85(m，2);
7.70(m，2);7.52(t，2);7.40(dd，2);
7.15(m，10);4.75(ABX，4);
4.42(m，1);4.30(m，1);4.18(m，2);
3.97(m，1);3.25(m，1);3.03(s，3);
2.98(s，3);2.78(m，4);1.65(m，4);
1.25(m，4);0.85(m，6).
MSm/e 878(M 2).
实施例221，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基己酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用130mg(0.394mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基己酸，5.3mg(0.039mmol)HOBT·H2O，45μl(0.39mmol)NMM和175mg(0.394mmol)BOP，45μl(0.20mmol)N，N-二环己胺和40mg(0.11mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到45mg所需标题产物。
1H NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);
7.85(dd，2);7.70(m，2);7.55(t，2);
7.40(dd，2);7.15(m，10);
4.75(ABX，4);4.40(m，1);4.25(m，1);
4.15(m，2);3.95(m，1);3.25(m，1);
3.05(s，3);3.0(s，3);2.80(m，4);
1.60(m，4);1.20(m，8);0.82(m，6).
MSm/e 906(M 2).
实施例231，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(吡啶-3-基甲氧羰基)氨基-3，3-二甲丁酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用214.9mg(0.807mmol)2(S)-N(吡啶-3-基甲氧羰基)氨基-3，3-二甲基丁酸，11.2mg(0.0829mmol)HOBT·H2O，100μl(0.909mmol)NMM和344.0mg(0.778mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二环己胺和69.1mg(0.194mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到43.6mg白色固体，它为4种非对映异构体的混合物。
NMR(CD3OD)δ8.57(br.s，2);8.47(m，2);
7.84(d，2);7.42(m，2);
6.96-7.27(m，10);5.15(AB，4);
4.14-4.24(m，2);3.89(br.s，1);
3.25(m，1);3.07(m，2);
2.61-2.97(m，4);0.90(m，18).
MSm/e 780(M 2).
实施例241，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用142.0mg(0.508mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸，7.5mg(0.056mmol)HOBT·H2O，60μl(0.55mmol)NMM和243.8mg(0.551mmol)BOP，63μl(0.32mmol)N，N-二环己胺和52.5mg(0.148mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的40%乙腈/20%甲醇/30%水)得到10.9mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.47(br.s，2);7.76(m，2);
7.03-7.33(m，14);4.46-4.64(m，4);
4.13-4.39(m，3);4.04(q，2);
3.25(s，1);2.98(s，6);
2.67-2.98(m，4);1.88(m，2);
1.43(m，2);1.10(m，2);0.84(m，12).
MSm/e 807(M 3).
实施例251，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(吡啶)-2-基甲氧羰基)氨基]己酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用136.7mg(0.513mmol)2(S)-N(吡啶-2-基甲基羰基)氨基己酸，10.4mg(0.0770mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.55mmol)NMM和242.8mg(0.549mmol)BOP，62μl(0.311mmol)N，N-二环己胺和51.4mg(0.145mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到24.5mg所需标题产品。
NMR(CD3OD)δ8.47(m，2);7.81(m，2);
7.02-7.53(m，14);5.18(AB，4);
4.22(m，3);4.00(m，2);3.25(m，1);
2.70-2.94(m，4);1.05-1.73(m，12);
0.90(m，6).
MSm/e 780(M 2).
实施例261，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(喹啉-2-基羰基)氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用223mg(0.818mmol)2(S)-N(喹啉-2-基羰基)氨基-3-甲基丁酸，11.1mg(0.0818mmol)HOBT·H2O，0.090ml(0.82mmol)NMM和362mg(0.818mmol)BOP，73μl(0.31mmol)二异丙基乙基胺和125mg(0.200mmol)制备例1G标题化合物的二对甲苯磺酸盐制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的45%乙腈/35%甲醇/20%水)得到10mg含84%所需标题产物的物质。
NMR(CD3OD)δ8.15(m，2);7.70(m，6);7.0(m，10);
4.45(m，1);4.25(m，2);4.05(m，1);
3.2(dd，1);2.8(m，5);2.15(m，1);
2.05(m，1);0.9(m，12).
MSm/e 791(M 1).
实施例271，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3-氰基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述的方法，使用165mg(0.528mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3-氰基丁酸，10mg(0.053mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.53mmol)NMM和234mg(0.528mmol)BOP，73μl(0.37mmol)N，N-二环己胺和65mg(0.18mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到49mg含84%所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.28(d，2);8.0(d，2);7.88(t，2);
7.72(t，2);7.57(m，2);7.43(t，2);
7.18(m，10);4.70(m，5);4.20(m，3);
3.10(d，2);3.00(s，3);2.97(s，3);
2.85(m，8).
MSm/e 872(M 2).
实施例281，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用145.8mg(0.580mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，176.0mg(0.126mmol)HOBT·H2O，73.0μl(0.664mmol)NMM和281.4mg(0.636mmol)BOP，0.060ml(0.30mmol)N，N-二环己胺和99.7mg(0.281mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到6mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.50(d，2);7.67(m，2);
7.02-7.31(m，15);6.78(d，1);
6.03(m，1);5.98(m，1);
4.34-4.60(m，4);4.24(t，1);
3.95-4.19(m，3);3.74(s，1);
3.27(s，1);2.73-3.05(m，10);
1.83(m，2);1.67(m，2);0.89(t，6).
MSm/e 749(M 1).
实施例291，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(6-甲基吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-3-甲氧基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用126.2mg(0.474mmol)2(S)-N-(6-甲基吡啶-2-基甲氧羰基]氨基-3-甲基丁酸，5.4mg(0.040mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.55mmol)NMM和229.6mg(0.519mmol)BOP，95μl(0.48mmol)N，N-二环己胺和73.2mg(0.206mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到36mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ7.66(t，2);7.03-7.51(m，14);
5.12(m，4);3.86-4.21(m，5);
3.26(m，1);2.64-2.95(m，4);
2.50(s，6);2.00(m，2);
0.82(m，12).
MSm/e 780(M 2).
实施例301，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3，3-二甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用138.9mg(0.439mmol)2(S)-N-(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基]-3，3-二甲基丁酸，4.8mg(0.036mmol)HOBT·H2O，54.5μl(0.496mmol)NMM和212.0mg(0.479mmol)BOP，86μl(0.43mmol)N，N-二环己胺和71.1mg(0.200mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到50mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.28(d，2);7.98(d，2);7.89(d，2);
7.73(t，2);7.55(m，4);
6.97-7.27(m，10);5.32(m，4);
4.29(m，2);4.18(s，1);4.03(m，1);
3.91(s，1);3.29(m，1);
2.66-2.97(m，4);0.97(s，9);
0.94(s，9).
MSm/e 879(M 1).
元素分析 C52H58N6O7计算值C，71.04;H，6.65;N，9.56;
实测值C，70.84;H，6.57;N，9.39.
实施例311，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基]-3，4-顺环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用112.3mg(0.423mmol)2(S)-N-[[N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3，3-二甲基戊酸，6.5mg(0.048mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.55mmol)NMM和212.8mg(0.481mmol)BOP，85μl(0.43mmol)N，N-二环己胺和67.2mg(0.189mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用二乙醚重结晶得到69mg所需标题产物。
NMR(d6-DMSO)δ8.43(s，2);8.25(d，1);8.03(d，1);
7.72(t，2);6.94-7.31(m，14);
6.70(m，2);6.30(m，1);6.14(d，1);
4.32(m，3);3.87-4.09(m，4);
2.61-3.05(m，6);1.57(m，2);
1.21(m，2);0.91(m，2);
0.58-0.79(m，12).
MSm/e 777(M 1).
实施例321，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用129.7mg(0.430mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，5.1mg(0.038mmol)HOBT·H2O，51μl(0.47mmol)NMM和199.9mg(0.452mmol)BOP，52.0μl(0.261mmol)N，N-二环己胺和54.8mg(0.120mmol)制备例2G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到16mg所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.67(m，3);6.70-7.81(m，25);
6.33(m，2);4.03-4.70(m，8);
3.67(m，1);3.29(m，1);
2.72-3.08(m，10);1.43-1.87(m，4);
0.82(m，6).
MSm/e 948(M ).
元素分析 C58H60N8O5计算值C，73.39;H，6.37;N，11.80;
实测值C，73.15;H，6.43;N，11.60.
实施例331，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二[N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用136.8mg(0.490mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3-甲基戊酸，5.6mg(0.041mmol)HOBT·H2O，55μl(0.50mmol)NMM和237.1mg(0.536mmol)BOP，55.0μl(0.276mmol)N，N-二环己胺和57.4mg(0.126mmol)制备例2G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到40mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.46(d，2);7.10-7.87(m，21);
6.62(d，1);6.08(m，2);
4.28-4.63(m，7);4.16(s，2);
3.34(s，1);2.97(m，10);1.86(m，2);
1.39(m，2);1.10(m，2);0.85(m，12).
MSm/e 904(M ).
元素分析 C54H64N8O5计算值C，71.66;H，7.13;N，12.38;
实测值C，71.48;H，7.12;N，12.08.
实施例341，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用77.9mg(0.310mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，5.2mg(0.038mmol)HOBT·H2O，40μl(0.37mmol)NMM和152.0mg(0.344mmol)BOP，55.0μl(0.276mmol)N，N-二环己胺和57.2mg(0.126mmol)制备例2G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到13mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.49(m，2);7.01-7.79(m，20);
6.85(d，1);6.56(d，1);5.96(m，2);
3.78-4.64(m，8);3.58(s，1);
3.37(s，1);2.71-3.12(m，10);
1.43-1.89(m，4);0.84(m，6).
MSm/e 850(M 2).
实施例351，6-二萘-2-基硫-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用58.4mg(0.232mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，4.5mg(0.033mmol)HOBT·H2O，30μl(0.27mmol)NMM和111.2mg(0.251mmol)BOP，38.0μl(0.191mmol)N，N-二环己胺和49.1mg(0.0866mmol)制备例3G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到52.4mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.48(m，2);8.13(s，1);7.96(s，1);
6.55-7.83(m，20);6.28(m，1);
6.14(m，1);4.36-4.69(m，4);4.25(m，2);
3.75(m，1);3.52(m，3);3.18(m，2);
3.07(dd，1);2.98(m，7);1.87(m，2);
1.69(m，2);0.93(t，6).
MSm/e 912(M 1).
元素分析 C50H56N8O5S2计算值C，65.77;H，6.18;N，12.27;
实测值C，65.75;H，6.17;N，12.03.
实施例361，8-二苯基-3(S)，6(S)-二[N-[2(S)-N-(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基]-3-甲基丁酰基]氨基]-4，5-顺-环氧辛烷基本上按实施例1所述方法，使用262mg(1.04mmol)2(S)-N-[(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基]-3-甲基丁酸，14mg(0.10mmol)HOBT·H2O，115μl(1.04mmol)NMM和462mg(1.04mmol)BOP，103μl(0.522mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.261mmol)制备例4标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的55%乙腈/25%甲醇/20%水)得到101mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.4(s，2);7.7(t，4);7.40(m，2);
7.10(m，10);5.18(m，4);3.90(m，4);
2.95(m，2);2.60(m，4);2.05(m，4);
1.75(m，2);0.95(m，12).
MSm/e 778(M ).
元素分析 C44H54N6O7计算值C，67.85;H，6.99;N，10.79;
实测值C，68.07;H，7.05;N，10.65.
实施例371，10-二苯基-4(S)，7(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-5，6-顺-环氧癸烷基本上按实施例1所述方法，使用128mg(0.508mmol)2(S)-N-[[N-(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，7mg(0.05mmol)HOBT·H2O，60μl(0.53mmol)NMM和225mg(0.508mmol)BOP，92μl(0.46mmol)N，N-二环己胺和95mg(0.23mmol)制备例5标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到110mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.45(br.s，2);7.75(t，2);
7.25(m，4);7.13(m，10);4.55(AB，4);
4.35(m，1);4.15(m，2);3.98(m，1);
3.85(m，1);3.35(m，1);2.95(s，6);
2.55(m，4);1.80(m，4);1.60(m，8);
0.96(m，6).
MSm/e 806(M 2).
实施例381，10-二苯基-4(S)，7(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-5，6-顺-环氧癸烷基本上按实施例1所述方法，使用145mg(0.480mmol)2(S)-N-[[N-(甲基)-N-(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，6.5mg(0.048mmol)HOBT·H2O，53μl(0.48mmol)NMM和212mg(0.480mmol)BOP，87μl(0.44mmol)N，N-二环己胺和95mg(0.23mmol)制备例5的标题中间体制备了标题化合物。将所得物用柱色谱法纯化(用乙酸乙酯作洗脱剂)得到125mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.2(m，2);7.95(m，2);7.83(m，2);
7.72(t，2);7.55(t，2);7.40(d，2);
7.10(m，10);4.70(m，4);4.40(t，1);
4.15(m，2);3.98(m，1);3.85(m，1);
3.38(m，1);3.02(s，3);2.97(s，3);
2.55(m，4);1.80(m，4);1.58(m，8);
0.97(t，6).
如上所述，本发明化合物可用于抑制HIV蛋白酶，这种蛋白酶是一种与病毒组分的产生和组合有关的酶。本发明一个实例是提供了一种治疗或抑制HIV感染的方法，该方法包括给予所需的灵长类动物有效剂量的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐。本发明的另一实施例是提供一种治疗或预防爱滋病的方法，它包括给需要的灵长类动物有效量的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐。本发明再一实例是一种抑制HIV复制的方法，它包括将式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐给予HIV感染细胞或对HIV感染敏感的细胞。
这里所用术语“有效量”，指能抑制介入病毒成分的产生和组合的HIV蛋白酶的本发明化合物的量。在适当情况下，本方法预期的HIV蛋白酶的抑制作用包括治疗性或预防性处理。当然，为获得治疗性或预防性处理效果，按本发明所给化合物的具体剂量是由病例所处的具体环境决定的。例如包括所给的化合物、给药途径、治疗条件和被治疗个体。典型的日剂量为每千克体重0.01mg至50mg本发明活性化合物。通常优选的日剂量为0.05mg/kg至20mg/kg，理想的剂量为0.1mg/kg至10mg/kg。
本发明化合物可通过包括口服、直肠、皮肤、皮下、静脉、肌肉和鼻内等不同途径给药。本发明化合物在给药前最好配成制剂。因此，本发明的另一实例是提供一种药物制剂，它包括有效量的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐，以及药物上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
这种制剂中的活性成分为制剂重量的0.1%至99.9%。“药学上可接受的”载体、稀释剂或赋形剂应与制剂的其它组分相容，并对其接受者无害。
本发明的药物制剂可通过已知的方法用已知的和容易得到的组分制备。在制备本发明组合物时，活性成分通常与载体混合，或被载体稀释，或包含在胶囊、扁囊、纸或其它容器等形式的载体中。当载体用作稀释剂时，它可以是固体、半固体或液体物质，这些物质用作活性成分的载体、赋形剂或介质。于是组合物可以是片剂丸剂、粉剂、锭剂、小药囊剂、扁囊剂、酏剂、悬浮液、乳浊液、溶液、糖浆、气溶胶(作为固体或在液体介质中)、含例如重量不超过10%活性成分的软膏剂、软和硬的明胶囊、栓剂、灭菌注射液、灭菌包装的粉剂等等。
以下制剂实施例仅用于说明本发明，并不是对本发明的范围作任何限制。术语“活性成分”指式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐。
制剂1硬明胶胶囊用以下成分制备量(mg/胶囊)活性成分250干淀粉200硬脂酸镁10总量460mg制剂2由以下成分制备片剂量(mg/胶囊)活性成分250微晶纤维素400
二氧化硅微粒10硬脂酸5总量665mg将以上成分混合后压制成每片重665mg的片剂。
制剂3气溶胶溶液由以下成分制备重量活性成分0.25甲醇25.75推进剂22(氯二氟甲烷)70.00总量100.00活性化合物与乙醇混合，将混合物加入一部分推进剂22，冷至-30℃，移到一种充填装置内，将所需量装入一不锈钢容器，用剩余推进剂稀释。随后装上容器的阀装置。
制剂4含60mg活性成分的片剂制备如下活性成分60mg淀粉45mg微晶纤维素35mg聚乙烯吡咯烷酮(10%水溶液)4mg羧甲基淀粉钠4.5mg硬脂酸镁0.5mg
滑石1mg总量150mg将活性成分、淀粉及纤维素通过45目U.S.筛并充分混合。将含聚乙烯吡咯烷酮的水溶液与粉状所得物混合后，再将混合物通过14目U.S.筛。将产生的颗粒在50℃下干燥并通过18目U.S.筛。将事先通过60目U.S.筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石加到颗粒中，混合后由制片机压制成每片重150mg的片剂。
制剂5各含80mg活性成分的胶囊制备如下活性成分80mg淀粉59mg微晶纤维素59mg硬脂酸镁2mg总量200mg将活性成分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合通过45目U.S.筛，以200mg量填入硬明胶胶囊中。
制剂6各含活性成分225mg的栓剂制备如下活性成分225mg饱和脂肪酸甘油酯2，000mg总量2，225mg将活性成分通过60目U.S.筛，并悬浮在事先用所需要最少热量熔化的饱和脂肪酸甘油脂中。然后将混合物倾入标称为2g量的栓剂模具中，使之冷却。
制剂7每5ml剂量含50mg活性成分的悬浮液，其制备如下活性成分50mg羧甲基纤维素钠50mg糖浆1.25ml苯甲酸溶液0.10ml调味剂q.v.
着色剂q.v.
纯水加至总量5ml将活性成分通过45目U.S.筛与羧甲基纤维素钠及糖浆混合成均匀糊状。将苯甲酸溶液，调味剂和着色剂用部分水稀释，搅拌。随后加入足量水以达到所需体积。
制剂8静脉内制剂制备如下活性成分100mg等渗盐水1000ml以上成分的溶液通常以每分钟1ml的速度静脉注射。
进行以下实验(HIV-1蛋白酶抑制剂荧光检测)以证明本发明化合物抑制HIV蛋白酶的能力。
本文使用的缩写定义如下BSA-牛血清清蛋白BOC-叔丁氧羰基BrZ-2-溴苄氧羰基2-ClZ-2-氯苄氧羰基
OCC-二环己基碳化二亚胺DIEA-二异丙基乙基胺DTT-二硫苏糖醇EDTA-亚乙基二胺四乙酸FITC-异硫氨基甲酰基荧光素HEPES-4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸MES-4吗啉乙磺酸PAM-苯基乙酰亚胺甲基TAPS-3-[三(羟甲基)甲基]氨基-1-磺酸TRIS-三(羟甲基)氨基甲烷TOS-对甲苯磺酰基(tosyl)Ⅰ.蛋白酶和Gag部分的制备A.大肠杆菌K12L507/PHP10D的培养大肠杆菌K12L507/PHP10D的亲液胶体从NorthernRegional研究室，Peoria.Illinois61604获得，入藏登记号为NRRLB-18560(1989年11月14日存入)。将亲液胶体倾入含10mlLB介质(每升含10gBacto-胰蛋白胨，5gBacto-酵母提取物及10gNaCl;pH调至7.5，在32℃时培养过夜)的试管中。
将少部分过夜培养物置于含12.5μg/ml四环素的LB-琼脂(含15g/lBacto-琼脂的LB培养基上)板上，以得到大肠杆菌K12L507/PHP10D的单克隆分离物。将得到的单克隆接种在含四环素12.5μg/ml的10mlLB介质中，并在32℃剧烈振荡条件下培养至培养物达到中等对数(mid-log)相。
B.大肠杆菌K12L507/PHPGAG的培养大肠杆菌K12L507/PHPGAG的亲液胶体从NRRL得到，入藏登记号为NRRLB-18561(1989年11月14日存入)。基本按以上步骤A中大肠杆菌K12L507/PHP10D的方法分离出纯化的大肠杆菌K12L507/PHPGAG克隆，用作培养基的接种物使该培养物增至中等对数相。
C.蛋白酶成分的制备大肠杆菌K12L507/PHP10D培养物在含四环素12.5μg/l的LB介质中在32℃下增至中等对数相。迅速将培养温度升至40℃以诱导基因表达，允许细胞在此温度下生长2.5小时，然后迅速将培养在冰上冷却，将细胞离心，使细胞粒再悬浮于20ml(50mmol，其中含1mmolEDTA，1mmolDTT、1mmolPMSF和10%甘油醇)的MES缓冲液(pH6.0)(“缓冲液A”)中。应用FischerModel300Dismembrator和微探针通过声处理将细胞溶解。然后在27，000×9下离心，将上清液用缓冲液A稀释至总量60ml，将其装入已用缓冲液A平衡的2.0×19cm的QAE-琼脂糖柱(1ml/min，4℃)中。柱被同溶剂洗涤180分钟后，在缓冲液A中用0-1.0MNaCl梯度洗脱液洗脱120分钟。使用Margolinetal.，Biochem.Biophys.Res.Commun.，167，554-560(1990)中描述的合成肽SQNYPIV通过HPLC来测定酶的活性;同时测定P1肽(SQNY)的产生。
将活性成分合并制成1.2M硫酸铵溶液，并加入用含1.2M硫酸铵的缓冲液A平衡的2.0×18cm己基琼脂糖柱中，将样品在4℃下以1ml/min流速加入，用平衡缓冲液洗涤240分钟(1ml/min)，然后以同样流速用含1.2-0M硫酸铵的缓冲液A的反线性梯度洗脱120分钟。然后在缓冲液A中同溶剂洗涤柱120分钟。
将活性成分合并，并使用搅拌细胞的Amicon和YM-10膜浓缩至10ml，然后用于已在缓冲液A中平衡的Monos阳离子交换柱(1.0×10cm)。将样品在25℃时以1ml/min流速装入。同溶剂洗涤30分钟后，用在缓冲液A中的0-0.45MNaCl线性梯度洗脱蛋白酶40分钟以上，用含0.45MNaCl的缓冲液A同溶剂洗涤柱30分钟。
将活性成分合并，并使用搅拌细胞的Amicon和YM-10膜浓缩至200μl，然后将蛋白酶引入用含0.1MNaCl缓冲液A平衡过的SuperoseG号排阻柱。用此缓冲液以0.5ml/min流速同溶剂洗涤柱，随后将HIV蛋白酶以单峰洗脱出来。
QAE-琼脂糖和己基琼脂糖从Sigma化学公司购得，Superose6和Monos从Pharmacia购得，缓冲剂和试剂从Sigma得到。
D.Gag成分的制备以类似的方式，将大肠杆菌K 12 L 507/PHP GAG在32℃培养生长至中等对数相，然后升至40℃约4-5小时。将培养物在冰上冷却、离心，然后将细胞粒再悬浮于含5mg/ml溶解酶的8ml溶解缓冲液中。溶解缓冲液由50mM Tris-HCl(pH7.8)、5mM EDTA、1 mM DTT、100 mM NaCl、1μg/ml E 64和2μg/ml质子惰性溶剂组成。将培养物在4℃培养约30-60分钟后，在Branson 细胞破裂器中以60%功率进行简单的处理，进行三次20秒的破裂并在间歇时冷却，然后培养物以15，000×g离心。将含有未加工的Gag蛋白质的上清液在葡聚糖G-50柱上通过颗粒排阻色谱法部分纯化，并在-20℃储存在50%甘油醇和溶解缓冲液中。
Ⅱ.底物的制备Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(Na-FITC)-OH
A.Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH的制备被保护的肽树脂Na-Boc-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr(BrZ)-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(2-Clz)-OCH2-PAM-树脂在Advanced Chemtech Model 200型肽合成器中从1.5mmol规模应用标准双偶合原胶合成。用50%三氟乙酸的二氯甲烷去掉氨基端的Boc基团、用5%的二(异丙基)乙胺(DIEA)的二氯甲烷中和得到的树脂，然后将在20ml二甲亚砜中的1.1g(4.5mmol)生物素加入肽树脂中，随后加入4.5mmol二环己基碳化二亚胺(DCC)的9ml二氯甲烷溶液。用11ml二氯甲烷将所得反应混合物稀释至总体积40ml，令其反应约5小时，浓缩反应溶液，依次用二甲基亚砜，二甲基甲酰胺和二氯甲烷洗涤树脂并用5% DIEA的二氯甲烷溶液中和。重复此反应两次，每次反应时间持续12小时。树脂的茚三酮分析表明生物素与甘氨酸氨基充分反应。用二甲基甲酰胺和二氯甲烷充分洗涤最后的肽树脂并干燥得到4.3g(98%)。
B.去保护使用50ml氢氟酸/间甲苯酚溶液在0℃下反应1小时使肽去保护并与树脂分离，用真空蒸馏去除氢氟酸后，用100ml二乙醚将间甲苯酚从反应混合物中萃取出。再将肽溶解在50%乙酸水溶液中，冷冻并冷冻干燥得到2.14g。
C.纯化将Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH粗品溶于含1%三氟乙酸的5%乙腈(水)溶液200ml中，再通过0.22微米过滤器过滤。所得溶液用于以相同缓冲液平衡的2.2×25Cm十八烷基硅胶(VydacC-18)反相柱上。用7.5-25%乙腈的855等分线性梯度以2ml/分的速度洗脱肽并收集组分。使用分析性HPLC来分析这些组分，该分析是在4.6×250mmVydacC-18柱上用相似的缓冲条件进行。将含有所需物质的组分合并、冷冻，并冷冻干燥得到1.206g产物(62%)。
分离出的Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH的氨基酸分析得出以下比率Asn 1.1;Ser 0.96;Gln 1.1;Por 1.1;Gly 2.1;Val 0.80;Ile 0.78;Tyr 1.1;Lys 1.1;与理论相符。快速原子轰击质谱得出分子离子质量峰1288，与理论相符。
D.标记应用Pandex分析将纯化肽的C-末端用荧光发光剂标记，将Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH(1.206g，0.936mmol)溶解在100ml 0.1 M硼酸钠中，pH9.5。然后将3g(7.7mmol)异硫氰酸荧光素的15ml二甲基亚砜溶液在两小时内以10等分加入反应混合物中。令所得混合物在最后添加完后反应1小时。用5 N HCl将溶液调至pH3，形成沉淀物并将其离心除去。
然后使用5N氢氧化钠将肽溶液调至pH7.8，再加入0.1M乙酸铵，pH7.5，稀释到总体积200ml。所得物溶液再通过0.22微米过滤器过滤，并加到已用5%乙腈的0.1M乙酸铵(pH7.5)平衡过的2.2×25cmVydacC-18柱中，用5-25%乙腈的855等分线性梯度以2ml/分的速度将肽从柱中洗脱出来并收集组分。用分析性HPLC分析组分。将含所需产品的组分合并，冷冻并冷冻干燥得到190.2mg产物(12%)。
纯化肽的氨基酸分析得出以下比率Asn1.1;Ser1.0;Gln1.1;Por1.1;Gly2.1;Val0.8;Ile0.8;Tyr1.1;Lys1.0与理论相符。快速原子轰击质谱给出分子离子质量峰1678，与理论相符。
E.荧光HIV-1蛋白酶抑制剂的检测应用以下缓冲液和溶液进行荧光HIV-1蛋白酶抑制剂的检测MES-ALB缓冲液0.05M4-吗啉乙烷磺酸，pH5.50.02MMaCl0.002MEDTA0.001MDTT1.0mg/mlBSATBSA缓冲液0.02MTRIS0.15MNaCl1.0mg/mlBSA抗生物素蛋白涂珠的溶液0.1%荧光抗生物素蛋白颗粒的(抗生物素蛋白附于0.6-0.8微米直径的聚苯乙烯颗粒上)TBSA缓冲液溶液。
酶溶液27IU/ml纯化HIV-1蛋白酶溶于MES-ALB缓冲液中(1IU等于37℃每分钟水解1μmmol底物所需酶的量)。
向有96个圆底井板的每一井中加入20μl酶溶液，再加入10μl待测化合物的20%含水二甲亚砜溶液。按上述方法得到纯化HIV-1蛋白酶。所得溶液在室温下培养1小时后，向每井中加入20μl含底物，Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(Na-FITC)-OH和MES-ALB缓冲液的溶液(1.5μl/ml)。该溶液在室温下培养16小时后，每井用150μl MES-ALB缓冲液稀释。
向第二个96圆底井Pandex板的每一井中，加入25μl抗生物素蛋白涂珠溶液，然后向每井中加入前面制备的稀释培养液25μl，溶液完全混合后，将该板装入Pandex
仪中，洗涤，抽空并读数。通过在485nm波长处激发而检测样品，读出在535nm波长处所得的表荧光结果。
在荧光分析中得到的本发明化合物的IC50结果在下表1中列出所有值用一阳性对照标化，它是[1S-(1R＊，4R＊，5S＊)]-N-(1-(2-氨基-2-氧代乙基)-2-氧代-3-氮杂-4-苯甲基-5-羟基-6-(2-(1-叔丁氨基-1-氧代甲基)苯基)己基)-2-喹啉基甲酰胺。
表1式Ⅰ化合物的抑制活性荧光检测IC50实施例号ng/ml对照1.01 159*210.4342004 51*5n.t.
6654768108 262*969.5101.811 195*12139313224514183152416 IC32(1000)17 20.5*18 7.1*19 150*205562158223962349724131
25 IC40(1000)26 IC23(1000)2726.7288172930.5303363125.232 172*33 IC25(1000)34 IC34(1000)35 IC23(1000)36 IC26(1000)371663821.5注＊表示平均IC50n.t.表示未测定
权利要求
1.式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-；q是0，1，2或3；R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基；X是
其中R1是芳基，环烷基，杂环基或不饱和杂环基；R2是氢或C1-C4烷基；R3是氨基酸侧链，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3，氰基(C1-C4)烷基，不饱和杂环(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-(CH2)s-A°-(CH2)r-R4或-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中s是1，2，3或4；r是0，1，2或3；A°是-O-，-NH-或-S-；R4是C1-C6烷基，环烷基，芳基，杂环基，或不饱和杂环基；R5是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基；j是0，1，2，3或4；k是0或1；且Y是-O-，-N(R2)-或-S-。
2.按照权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中X是
R是芳基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-S-;q是0;R0是芳基;R1是芳基或不饱和杂环;j是0，1或2;Y是-O-或-N(R2)-;k是1;R2是氢或甲基;R3是氨基酸侧链，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中r是0，1，2或3;且R5是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基。
3.按照权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R是苯基，苯硫基，萘基，萘硫基，苯乙基或萘乙基;R1是苯基，萘基或喹啉基;j是1;R2是氢;R3是氨基酸侧链，-CH2CH3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中r是0，1，2或3;R5是芳基或不饱和杂环基。
4.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷;1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷;1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-2(S)-N[(8-氟喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷;1，10-二苯基-4(S)，7(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-5，6-顺-环氧癸烷;或它们药学上可接受的盐。
5.一种药物制剂，它包括如权利要求1至4中任一项所要求授权的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
6.权利要求1至4中任一项所要求授权的化合物，用作抗病毒剂。
7.权利要求1至中任一项所要求授权的化合物用于抑制人类免疫缺陷病毒的复制。
8.权利要求1至中任一项所要求授权的化合物用作人类免疫缺陷病毒蛋白酶抑制剂。
9.式Ⅰa化合物
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-;q是0，1，2或3;R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基;并且J是卤素，甲磺酸基，苯磺酸基，甲苯磺酸基或乙酰氧基。
10.式Ⅰb化合物
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-;q是0，1，2或3;并且R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基。
11.一种制备权利要求1至4中任一项所要求授权的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐的方法，它包括(a)将下列的式Ⅰa化合物或式Ⅰb化合物或其药学上可接受的盐
(其中R和J如上定义)，在偶合剂的存在下与下式的羧酸化合物反应
(其中R1，j，k，R2和R3如上定义);和(b)任意地将所得到的产物转化为其药学上可接受的盐。
全文摘要
本发明提供了新的HIV蛋白酶抑制剂、含有这些化合物的药物制剂及它们的使用方法。
文档编号C07D405/14GK1082035SQ9310742
公开日1994年2月16日 申请日期1993年6月19日 优先权日1992年6月19日
发明者J·E·门罗, W·J·霍恩贝克 申请人:伊莱利利公司
一种指示人类免疫缺陷病毒(HIV)的还原病毒是称之为获得性免疫缺陷综合症(爱滋病;AIDS)这一复杂疾病的致病因素，它是还原病毒中慢病毒(Lentivirus)家族中的一员。M.A.Gonda，F.Wong-Staal，R.C.Gallo，“SequenceHomologyandMorphologicalSimilarityofHTLVIIIandVisnaVirus，APathogenicLentivirus”，Science，227，173，(1985);P.Sonigo，N.Alizon，等人“NucleotideSequencsoftheVisnaLentivirusRelationshiptotheAIDSVirus”，Cell，42，369，(1985)。复杂的爱滋病包括免疫系统的进行性破坏和中枢及周围神经系统的变性。HIV病毒以前是已知的或称为LAV，HTLV-III或ARV。
还原病毒复制的共同特征是通过病毒编码的蛋白酶作用于前体多蛋白的翻译后进程以产生病毒组合和发挥作用所需的成熟的病毒蛋白。这一进程的阻断似乎是阻止了正常感染的病毒的产生。未加工的结构蛋白质也已经从病人体内分离出的非感染的HIV株克隆中观察到。该结果表明HIV蛋白酶抑制作用是一种预防或治疗爱滋病以及预防或治疗HIV感染的可行方法。
HIV基因组对称为gag和pol的结构蛋白质前体编码，该前体被加工后产生蛋白酶、逆转录酶和细胞核内酶/整合酶。该蛋白酶进一步裂解gag和gag-pol多蛋白，就得到病毒核的成熟的结构蛋白。
人们正致力于通过能加工产生还原病毒蛋白酶、逆转录酶和细胞核内酶/整合酶的结构蛋白前体来控制HIV。例如，目前所用的治疗剂AZT是病毒逆转录酶的抑制剂。H.Mitsuya，NS.Broder，“InhibitionoftheInVitroInfeetiivityinCytopathicEffectsofHTLVIII”，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，83，1911(1986)。
人们也已针对HIV蛋白酶抑制剂进行努力的研究。例如，欧洲专利申请(EPA)361341;EPA346847;EPA402646;和EPA337714公开了据说可以用作HIV蛋白酶抑制剂的化合物。
遗憾的是，许多已知的HIV蛋白酶抑制剂具有毒性，缺乏生物有效性或短的体内半衰期。
尽管已经认识到治疗的潜力与蛋白酶抑制剂有关并且为此已做了深入的研究，但至今还没有找到可行的治疗剂。
因此，本发明的主要目的是提供一种新的HIV蛋白酶抑制剂，它们可用于治疗爱滋病，并不具有如上所述的缺点。
本发明涉及式Ⅰ化合物和其药学上可接受的盐，它们可以抑制人体免疫缺陷病毒(HIV)1型(HIV-1)和2型(HIV-2)编码的蛋白酶。这些化合物可用于治疗或预防HIV感染并用于治疗或预防由此而得的免疫缺陷综合症(爱滋病)。本发明化合物，药学上可接受的盐和药用组合物可单独使用或与其它抗病毒剂、免疫调节剂、抗生素或疫苗联合使用。本发明也公开了治疗或预防爱滋病的方法，治疗或预防HIV感染的方法及抑制HIV复制的方法。
本发明涉及在HIV感染细胞中、在对HIV感染敏感的细胞中或在有些需要的灵长目动物中抑制HIV复制的方法，因此可治疗或预防HIV感染和爱滋病，该方法包括服用式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐，
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基，或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-;
q是0，1，2或3;
R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基;
X是
其中R1是芳基，环烷基，杂环基或不饱和杂环基;
R2是氢或C1-C4烷基;
R3是氨基酸侧链，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3，氰基(C1-C4)烷基，不饱和杂环(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-(CH2)s-A°-(CH2)r-R4或-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中s是1，2，3或4;
r是0，1，2或3;
A°是-O-，-NH-或-S-;
R4是C1-C6烷基，环烷基，芳基，杂环基，或不饱和杂环基;
R5是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基;
j是0，1，2，3或4;
k是0或1;并且y是-O-，-N(R2)-或-S-。
本发明也涉及式Ⅰ化合物或其药物上可接受的盐，其中X和R如上定义。
本发明进一步提供了药物制剂，它包括将式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合。
此外，本发明提供了式Ⅰa的有用中间体
或式Ⅰb的有用中间体
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基，或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-;
q是0，1，2或3;
R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基;以及J是卤化物，甲磺酸盐，苯磺酸盐，对甲苯磺酸盐，乙酸盐或三氟乙酸盐。
本发明提供了如上所述的新的式Ⅰ化合物，它们可用于治疗和/或预防HIV感染和/或爱滋病。
本文所说的所有温度是摄氏度。本文所用的所有的测量单位是重量单位，除了用体积单位的液体。
本文所用的术语“C1-C6烷基”代表直链或支链的具有1至6个碳原子的烷基。典型的C1-C6烷基包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，新戊基，己基等。术语“C1-C6烷基”包括了术语“C1-C4烷基”的定义。
“卤”代表氯，氟，溴或碘。
“卤(C1-C4)烷基”代表直链或支链的具有1至4个碳原子且有1-3个卤原子与其相连的烷基。典型的卤(C1-C4)烷基包括氯甲基，2-溴乙基，1-氯异丙基，2，3-二氟丙基，3-溴丁基，3-氯异丁基，碘叔丁基，三氟甲基等。
“氰基(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子且有一个氰基与其相连的直链或支链烷基。典型的氰基(C1-C4)烷基包括氰甲基，2-氰乙基，3-氰丙基，2-氰异丙基，4-氰丁基等。
“C1-C4烷硫基”代表与硫原子相连的具有1至4个碳原子的直链或支链烷基。典型的C1-C4烷硫基包括甲硫基，乙硫基，丙硫基，异丙硫基，丁硫基等。
“C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基”代表含有1至4个碳原子并且有一个C1-C4烷硫基与之相连的直链或支链烷基。典型的C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基包括甲硫乙基，乙硫丁基，丙硫异丙基，异丙硫甲基，丁硫乙基等。
“C1-C4烷氨基”代表与氮原子相连的具有1至4个碳原子的直链或支链烷氨基。典型的C1-C4烷氨基包括甲氨基，乙氨基，丙氨基，异丙氨基，丁氨基，仲丁氨基等。
“二(C1-C4)烷氨基”代表具有两个烷基链的直链或支链二烷氨基，其中的两个烷基链有1至4个碳原子并且与同一个氮原子相连。典型的二(C1-C4)烷氨基包括二甲氨基，乙基甲基氨基，甲基异丙基氨基，叔丁基异丙基氨基，二叔丁氨基等。
“C1-C4烷氧基”代表与氧原子相连的具有1至4个碳原子的直链或支链烷基。典型的C1-C4烷氧基包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基等。
“C1-C4烷氧羰基”代表与羰基相连的具有1至4个碳原子的直链或支链的烷氧基。典型的C1-C4烷氧羰基包括甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基，异丙氧羰基，丁氧羰基，叔丁氧羰基等。
“氨基甲酰基(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个氨基甲酰基与之相连的直链或支链烷基。典型的氨基甲酰基(C1-C4)烷基包括氨甲酰甲基，氨甲酰乙基，氨甲酰丙基，氨甲酰异丙基，氨甲酰丁基和氨甲酰叔丁基等。
“环烷基”代表含有3至8个碳原子的饱和烃环结构，它们不被取代或被1，2或3个选自下列的取代基分别取代卤，卤(C1-C4)烷基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧基羰基，氨甲酰基，C1-C4烷氨甲酰基，氨基，C1-C4烷氨基，二(C1-C4)烷氨基或具有-(CH2)a-R7结构的基团，其中a是1，2，3或4而R7是羟基，C1-C4烷氨基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氧基或二(C1-C4)烷氨基。典型的环烷基包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基和环辛基。
“环烷基(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个环烷基与之相连的直链或支链的烷基。典型的环烷基(C1-C4)烷基包括环丙甲基，2-环丁乙基，3-环戊丙基，2-环己异丙基，4-环庚丁基等。
术语“杂环”代表未取代或取代的稳定的5-至7-元单环及稳定的7-至10-元双环杂环，该杂环是饱和的并含有碳原子和1至3个选自氮，氧或硫的杂原子，其中任何氮和硫杂原子可以被任意氧化，任何氮杂原子可以被任意季铵化并且包括一个双环基，在该双环基中上面定义的任何杂环与一个苯环稠合。杂环可以在任何杂原子或提供稳定结构的碳原子上连接。杂环不被取代或被1，2或3个分别选自下列的取代基所取代卤，卤(C1-C4)烷基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨甲酰基，C1-C4烷基氨甲酰基，氨基，C1-C4烷氨基，二(C1-C4)烷氨基或具有-(CH2)a-R7结构的基团，其中a是1，2，3或4;而R7是羟基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
术语“不饱和杂环”代表未取代或取代的稳定的5-至7-元单环及稳定的7-至10-元双环杂环，它有1个或多个双键并含有碳原子和1至3个选自氮，氧或硫的杂原子，其中氮和硫杂原子可以被任意氧化，氮杂原子可以被任意季铵化并包括一个双环基，在该双环基中上面定义的任何杂环与一个苯环稠合。不饱和杂环可以在任何杂原子或提供稳定结构的碳原子上连接。不饱和杂环不被取代或被1，2或3个分别选自下列的取代基所取代卤，卤(C1-C4)烷基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨甲酰基，C1-C4烷基氨甲酰基，氨基，C1-C4烷氨基，二(C1-C4)烷氨基或具有-(CH2)a-R7结构的基团，其中a是1，2，3或4;而R7是羟基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
这些杂环和不饱和杂环的例子有哌啶基，哌嗪基，2-氧代哌嗪基，2-氧代哌啶基，2-氧代吡咯烷基，2-氧代吖庚因基，吖庚因基，吡咯基，吡咯烷基，吡唑基，吡唑烷基，咪唑基，咪唑烷基，咪唑啉基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，哒嗪基，噁唑基，噁唑烷基，异噁唑基，异噁唑烷基，吗啉基，噻唑基，噻唑烷基，异噻唑基，奎宁环基，异噻唑烷基，吲哚基，喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，噻二唑基，苯并吡喃基，苯并噻唑基，苯并吡咯基，呋喃基，四氢呋喃基，四氢吡喃基，噻吩基，苯并噻吩基，硫代吗啉基，硫代吗啉基亚砜，硫代吗啉基砜，噁二唑基，三唑基，四氢喹啉基及四氢异喹啉基。
“杂环(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个杂环与之相连的直链或支链烷基。“不饱和杂环(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个不饱和杂环与之相连的直链或支链烷基。典型的杂环(C1-C4)烷基和不饱和杂环(C1-C4)烷基包括吡咯甲基，喹啉甲基，1-吲哚乙基，2-呋喃乙基，3-噻吩-2-基丙基，1-咪唑异丙基，4-噻唑丁基等。
“芳基”代表苯基或萘基环。苯基或萘基环任意地被1，2或3个分别选自下列的取代基所取代卤，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨甲酰基，氨甲酰(C1-C4)烷基，氨基，C1-C4烷基，二(C1-C4)烷氨基或式-(CH2)a-R7的基团，其中a是1，2，3或4;而R7是羟基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
“芳基(C1-C4)烷基”代表具有1至4个碳原子并且有一个芳基与之相连的直链或支链烷基。典型的芳基(C1-C4)烷基包括苯甲基，2-苯乙基，3-萘丙基，1-萘异丙基，4-萘丁基等。
术语“氨基酸侧链”代表结合到氨基酸的α-碳原子上的特定的原子或基团，在α-碳原子上已结合的还有一个羧基和一个氨基。这些侧链选自下列氨基酸中的那些侧链丙氨酸Ala精氨酸Arg天冬酰胺Asn天冬氨酸Asp半胱氨酸Cys谷氨酰胺Gln谷氨酸Glu甘氨酸Gly组氨酸His异亮氨酸Ile亮氨酸Len赖氨酸Lys甲硫氨酸Mel苯丙氨酸Phe脯氨酸Pro丝氨酸Ser苏氨酸Thr色氨酸Trp酪氨酸Tyr缬氨酸Val说明书中所用的术语“氨基保护基”是指通常用来阻断或保护氨基官能性而使化合物中其它官能团反应的氨基取代基。这些氨基保护基的例子有甲酰基、三苯甲游基、苯二甲酰亚氨基、三氯乙酰基、氯乙酰基、溴乙酰基和碘乙酰基、尿烷型阻断剂如苄氧羰基、4-苯苄氧羰基、2-甲苄氧羰基、4-甲氧苄氧羰基、4-氟苄氧羰基、4-氯苄氧羰基、3-氯苄氧羰基、2-氯苄氧羰基、2，4-二氯苄氧羰基、4-溴苄氧羰基、3-溴苄氧羰基、4-硝基苄氧羰基、4-氰基苄氧羰基、2-(4-联苯基)异丙氧羰基、1，1-联苯乙-1-基氧羰基、1，1-联苯丙-1-基氧羰基、2-苯丙-2-基氧羰基、2-(对甲苯基)丙-2-基氧羰基、环戊烷氧羰基、1-甲环戊烷氧羰基、环己烷氧羰基、1-甲环己烷氧羰基、2-甲环己烷氧羰基、2-(4-甲苯磺酰基)乙氧羰基、2-(甲磺酰基)乙氧羰基、2-(三苯膦基)乙氧羰基、芴基甲氧羰基(“FMOC”)、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基、烯丙氧羰基、1-(三甲基甲硅烷甲基)丙-1-烯氧羰基、苯异草酰甲氧羰基(benzisoxalylmethoxycarbonyl)、4-乙酰氧苄氧羰基、2，2，2-三氟乙氧羰基、2-乙炔基-2-丙氧羰基、环丙甲氧羰基、4-(癸酰氧基)苄氧羰基、异冰片氧羰基、1-哌啶氧羰基等;苯甲酰甲磺酰基、2-硝基苯亚磺酰基、二苯基氧化膦基等氨基保护基。氨基保护基的种类并不是关键，只要衍生的氨基对中间体分子中其它位置上随后的反应条件是稳定的并能在合适的条件下选择性地除去，同时对包括任何其它氨基保护基在内的分子的其余部分不发生破坏。优选的氨基保护基是叔丁氧羰基和苄氧羰基。上面术语中所指基团的进一步的例子如下列文献所述J.W.Barton，“ProtectiveGroupsinOrganicChemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，PlenumPress，NewYork，N.Y.，1973，Chapter2，和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，JohnWiley和Sons，NewYork，N.Y.，1981，Chapter7。
说明书中所用的术语“羧基保护基”是指通常使用的羧基取代基，该取代基在化合物中其它官能团反应的同时能阻断或保护羧基的功能。这些羧基保护基的例子有甲基、对硝基苄基、对甲苄基、对甲氧苄基、3，4-二甲氧苄基、2，4-二甲氧苄基、2，4，6-三甲氧苄基、2，4，6-三甲苄基、五甲苄基、3，4-亚甲二氧基苄基、二苯甲基、4，4′-二甲氧二苯甲基、2，2′，4，4′-四甲氧二苯甲基、叔丁基、叔戊基、三苯甲游基、4-甲氧三苯甲游基、4，4′-二甲氧三苯甲游基，4，4′，4″-三甲氧三苯甲游基、2-苯丙-2-基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、苯甲酰甲基、2，2，2-三氯乙基、β-(二(丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对甲苯磺酰乙基、4-硝基苄磺酰乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷甲基)丙-1-烯-3-基等基团。优选的羧基保护基是二苯甲基。这些基团的进一步的例子可以在下列文献中找到E.Haslam，“ProtectiveGroupsinOrganicChemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，PlenumPress，NewYork，N.Y.，1973，Chapter2，和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，JohnWiley和Sons，NewYork，N.Y.，1981，Chapter5。
如下式中星号所示，本发明化合物至少有四个不对称中心。
其中X是
作为这些手性中心的结果，本发明化合物存在有外消旋物，外消旋混合物和单个的对映体。所有的不对称形式，单独的异构体和其混合物形式都包括在本发明范围内。
如上所述，本发明包括式Ⅰ定义的化合物的药学上可接受的盐。虽然通常为中性，但本发明化合物也具有酸性、碱性或双功能基团并相应地与任何无机碱和无机及有机酸反应形成药学上可接受的盐。
这里所用的术语“药学上可接受的盐”是指上式化合物的盐，它基本上对生物不具有毒性。典型的药学上可接受的盐包括那些通过将本发明化合物与药学上可接受的无机或有机酸或无机碱进行反应而制得的盐。这些盐已知为酸加成和碱加成盐。
通常使用的用于形成酸加成盐的酸是无机酸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸等，有机酸如对甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、对溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、柠檬酸、苯甲酸、乙酸等。这些药学上可接受的盐的例子有硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸单氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧苯甲酸盐、对苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁炔酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、1-羟基丁炔酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、偏桃酸盐等。优选的药学上可接受的酸加成盐是那些与无机酸加盐酸和氢溴酸形成的盐，以及那些与有机酸如马来酸和甲磺酸形成的盐。
碱加成盐包括那些由无机碱衍生出的盐如铵盐或碱金属或碱土金属氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等。用于制备本发明盐的碱包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钙、碳酸钙等。钾盐和钠盐是特别优选的。
应该认识到，形成本发明盐的一部分的具体抗衡离子并不重要，只要整个盐是药理上可接受的并且该抗衡离子对整个盐不产生不需要的性质就可以了。
本发明优选的化合物是下述的式Ⅰ化合物和其药学上可接受的盐，其中X是
R是芳基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中
A是-S-;
q是0;
R0是芳基;
R1是芳基或不饱和杂环;
j是0，1或2;
y是-O-或-N(R2)-;
k是1;
R2是氢或甲基;
R3是氨基酸侧链，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中r是0，1，2或3;且R5是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基。
在这些化合物中，更为优选的化合物是下述化合物及其药学上可接受的盐，其中R是苯基，苯硫基，萘基，萘硫基，苯乙基或萘乙基;
R1是苯基，萘基或喹啉基;
j是1;
R2是氢;
R3是氨基酸侧链，-CH2CH3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中r是0，1，2或3;且R5是芳基或不饱和杂环基。
最优选的化合物是下述的式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐，其中
R是苯基或苯乙基;
R1是苯基或喹啉基;且R3是-CH2CH3或-CH(CH3)2。
式Ⅰ化合物可以用领域技术人员已知的化学合成方法来制备。例如，一种用于制备式Ⅰ化合物的优选的方法包括将式Ⅰa适当取代的环氧乙烷在碱的存在下，或将式Ⅰb的环氧乙烷，与适当取代的羧酸化合物在质子惰性溶剂中在偶合剂的存在下进行反应。优选的环氧乙烷试剂是式Ⅰb。该反应用下列反应式Ⅰ表示反应式Ⅰ
其中R、X和J如上定义。
上面的反应可以在有或没有催化剂的情况下进行，但优选有催化剂。优选的催化剂是羟基苯并三唑水合物(HOBT·H2O)。偶合剂的典型例子包括碳二亚胺如N，N′-二乙基碳二亚胺、二环己基碳二亚胺(DCC);咪唑如羰基二咪唑;以及试剂如1-羟基苯并三唑甲磺酸酯、N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉(EEDQ)、苯并三唑-1-基氧三(二甲氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)、(邻-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基铀六氟磷酸盐(HBTV)和苯并三唑-1-基氨三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐(PyBOP)。
通常使用的羧酸反应物的量相对于环氧乙烷反应物为等摩尔比至过量3摩尔，优选过量2摩尔。偶合剂通常使用相对于羧酸反应物的等摩尔比至微微过量。用于该反应的典型的溶剂包括二甲基甲酰胺和四氢呋喃。溶剂的选择并不是关键，只要所用溶剂对所进行的反应呈惰性并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约-15至反应混合物的回流温度下进行时，该反应通常在约1至72小时后基本上完成。反应优选地在约0℃至30℃的温度下进行24小时至48小时。反应得到式Ⅰ化合物。
反应一旦完成，产品可以用本领域已知的方法分离，如过滤，或通过萃取，蒸发或倾析除去反应溶剂。如果需要，可以通过常用技术如结晶或在固体支持物如硅胶或铝上进行色谱分离而将产品进一步纯化。
式Ⅰa化合物
其中R和J如上定义，如上所述，可用于制备式Ⅰ化合物。式Ⅰa化合物可通过下列反应式Ⅱ来制备
其中R和J如上定义。
上面的反应式Ⅱ可以通过顺序完成反应A-G来实现。一旦反应完成，可以用本领域已知方法将中间体化合物分离，如可以将化合物结晶然后过滤收集，或通过萃取，蒸发或倾析除去反应溶剂。如果需要，可以通过柱技术如在固体支持物如硅胶或铝上结晶或色谱分离将中间体化合物进一步纯化，该纯化可以在下步反应之前进行。反应式Ⅱ在下面制备例1-5中举例说明。
在反应A中，反应通过将2，2-二甲基-4，5-二环氧乙烷-1，3-二氧戊环与亲核剂(R-Z)(其中Z是卤化镁，锂或铵，优选溴化镁)在亚惰性溶剂中进行混合来完成。通过用铜盐如碘化铜(Ⅰ)或溴化铜(Ⅰ)催化可以得到较好的结果。相对于环氧乙烷反应物，通常使用等摩尔比至约2摩尔过量的亲核剂，优选约0.5摩尔过量。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂如乙醚或四氢呋喃。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应是惰性的并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约-40℃至10℃的温度下进行时，该反应通常在约1至24小时后基本上完成。反应优选地在约-5℃至5℃下进行2至6小时。
在反应B中，反应通过将反应A分离到的化合物与甲磺酰氯在互惰性溶剂中混合来完成。通常使用约等摩尔比至约3摩尔过量的甲磺酰氯反应物，优选约2摩尔过量。可以将碱，如2，6-二甲基吡啶或三烷基胺或三乙胺或二异丙基乙基胺等任意地加入以促进该反应。用于该反应的优选碱是三烷基胺，特别是三乙胺。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂，优选质子惰性溶剂，如二氯甲烷或氯仿。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应是惰性的并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约0℃至反应混合物的回流温度下进行时，该反应通常在约15分钟至24小时后基本上完成。该反应优选地在约15℃至30℃的温度范围内进行15分钟至4小时。
在反应C中，该反应通过将从反应B中分离到的化合物与叠氮离子在互惰性溶剂中混合来完成。用于该反应的叠氮离子可以从无机盐如碱金属叠氮化物如叠氮化锂或有机盐如四甲基叠氮化鈲中得到。通常使用约等摩尔比至3摩尔过量的叠氮离子，优选约2摩尔过量，通过加入碱如2，6-二甲基吡啶可以获得提高的产率。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂如六甲基磷酸三胺(HMPA)，二甲基甲酰胺或N，N′-二甲基亚丙基脲(DMPU)。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约0℃至反应混合物的回流温度下进行时，该反应通常在约1至24小时后基本上完成。该反应优选地在约25℃至100℃的温度范围内进行约4至12小时。
在反应D中，该反应通过将从反应C中分离到的化合物与强酸在醇溶剂中混合来完成，醇溶剂如甲醇或乙醇。适用于该反应的典型的酸包括氢卤酸如盐酸或氢溴酸，硫酸等。优选的酸是氢卤酸，特别是氢氯酸。通常使用大大过量如约10摩尔过量至20摩尔过量的酸反应物。当在约0℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约1至24小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行约2至4小时。
在反应E中，反应按反应B所述基本上相同的方法，用甲磺酰氯和从反应D中分离到的化合物进行。然而，相对于甲磺酰氯反应物通常使用约等摩尔比至1摩尔过量的反应D分离到的化合物。
在反应F中，环氧乙烷环的形成通过碱催化环化，优选地通过将从反应E中分离到的化合物与烷氧离子在合适的溶剂中混合来完成。烷氧离子可以从铵或碱金属醇盐等中得到。用于该反应的优选的烷氧离子是甲醇钠和甲醇钾。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂，如甲醇或四氢呋喃。当在约0℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约1至12小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行约1至2小时。
在反应G中，叠氮基还原成相应的胺的反应优选地通过催化氢化来完成，优选的方法是将从反应F中分离到的化合物与氢气在乙酸和钯碳催化剂的存在下混合。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂如乙酸乙酯。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并能充分溶解叠氮基反应物以完成所需的反应。当在约0℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约1至24小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行约2至5小时。
另外，叠氮基还原成相应的胺的反应也可以通过将从反应F中分离到的化合物与三烷基或三芳基膦在乙酸水溶液存在下混合来完成。优选的膦反应物是三丁基膦。适用于该反应的典型的有机溶剂包括混合物如含10%水的乙酸乙酯/乙腈。当在约0℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约1至12小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行约0.5至2小时。
式X-COOH化合物(其中X如上定义)可以通过下列反应式Ⅲ来制备反应式Ⅲ
其中J-、R3、R1、j、k和y如上定义。
上面的反应式Ⅲ可以通过顺序完成反应A-D来实现。一旦反应完成，可以通过本领域的已知方法分离中间体化合物，例如可以将化合物结晶然后过滤收集，或通过萃取，蒸发或倾析除去反应溶剂。如果需要，可以在进行下一步反应式之前，将中间体化合物用常规技术进一步纯化。例如在固体支持物如硅胶或铝上结晶或色谱分离。反应式Ⅲ在下面制备例6和7中举例说明。
在反应A中，在适当取代的2-氨基羧酸化合物中的羧基用一个标准的羧基保护基来保护，例如通过将二苯基重氮甲烷与2-氨基羧酸化合物简单地混合。典型地2-氨基羧酸以盐的形式如对甲苯磺酸盐使用，这样与氨基部分有关的阴离子对进行的反应呈惰性。通常使用等摩尔比至约3摩尔过量的二苯基重氮甲烷，优选约2摩尔过量。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂如乙腈。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对正在进行的反应呈惰性并且能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约10℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约15分钟至3小时后基本完成。反应优选地在约20℃至30℃的温度范围内进行15分钟至4小时。
在反应B中，通过将从反应A中分离到的化合物与碱如硫酸氢盐在水中简单地混合可以将氨基转变成相应的胺。用于该反应的碳酸氢根离子可以从无机盐如碱金属碳酸氢盐如碳酸氢锂或碳酸氢钠得到。使用任何有机溶剂如二氯甲烷可以将产物从反应混合物中萃取出来。当反应在20℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约15分钟至3小时后基本上完成。反应优选地在约15℃至30℃的温度范围内进行约15分钟至2小时。
在反应C中，反应通过将从反应B中分离到的化合物与三光气在互惰性溶剂中简单地混合来完成。通常使用约等摩尔比至2摩尔过量的反应B中分离到的化合物，优选约1摩尔过量。加入一种碱，例如三烷基胺如三乙胺或二异丙基乙基胺等以促进该反应。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂如甲苯。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约25℃至反应混合物的回流温度下进行时，反应通常在约6至24小时后基本上完成。反应优选地在约80℃至反应混合物的回流温度下进行约8小时至12小时。
在反应D中，通过将从反应C中分离到的化合物与下式化合物R1-(CH1)j-(Y)k-H(其中R1，j，k和y如上定义，条件是当Y为-N(R2)-时，R2必须是氢)，在互惰性溶剂中简单地混合来完成该反应。通过用铜盐如碘化铜(Ⅰ)或氯化铜(Ⅰ)催化可以得到较好的结果。通常使用约等摩尔比至1摩尔过量的从反应C中分离到的化合物。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂如二甲基甲酰胺。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对正在进行的反应呈惰性并能充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约10℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约15分钟至3小时后基本上完成。反应优选地在约15℃至30℃的温度范围内进行约15分钟至2小时。
从反应D中分离到的化合物上的羧基可以通过酯水解去保护以得到相应的羧酸。反应通过将从反应D中分离到的化合物与强酸在互惰性溶剂中简单地混合来完成。适用于该反应的典型的溶剂包括任何有机溶剂如二噁烷。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约25℃至反应混合物的回流温度下进行时，反应通常在约15分钟至4小时后基本完成。反应优选地在约60℃至100℃的温度范围内进行约15分钟至1小时。
另外，羧基可以用催化氢化去保护，优选地通过将从反应A中分离到的化合物与甲酸铵和钯碳催化剂在醇溶剂如甲醇或乙醇中进行混合。当在约0℃至反应混合物的回流温度下进行时，反应通常在约1至4小时后基本上完成。反应优选地在回流温度下进行约2至5小时。
其中X如上定义的、特别是其中R2是C1-C4烷基的式X-COOH化合物也可以通过下列反应式Ⅳ来制备反应式Ⅳ
上面的反应式Ⅳ可以通过顺序进行反应A和B来完成。一旦反应完成，可以用本领域中的已知方法分离产品，例如将产品结晶，然后过滤收集，或通过萃取，蒸发或倾析除去溶剂。如果需要，在进行下一步反应之前，可以用常规技术如在固体支持物如硅胶或铝上结晶或色谱分离将产品进一步纯化。反应式Ⅳ在下面制备例8和9中举例说明。
在反应A中，反应通过将从反应式Ⅲ反应B中分离到的化合物与1，1′-羰基二咪唑在互惰性溶剂中混合来完成。通常使用约等摩尔比至2摩尔过量的羰基二咪唑反应物，优选地用约等摩尔比。适用于该反应的典型的溶剂包括任何标准的有机溶剂如乙腈。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约15℃至30℃的温度范围内进行时，反应通常在约15分钟至2小时后基本上完成。反应优选地在约20℃至25℃的温度范围内进行约15分钟至1小时。
在反应B中，反应通过将从反应C中分离到的化合物与下式化合物进行混合来完成，-R1-(CH2)j-(Y)k-H其中R1，j，k和Y如上定义。通常使用约等摩尔比至1摩尔过量的从反应A分离到的化合物。适用于该反应的典型溶剂包括任何有机溶剂如乙腈。溶剂的选择并不是关键，只要所用的溶剂对进行的反应呈惰性并充分溶解反应物以完成所需的反应。当在约10℃至40℃的温度范围内进行时，反应通常在约30分钟至6小时后基本上完成。反应优选地在约15℃至30℃的温度范围内进行约1分钟至4小时。
从反应B中分离到的化合物上的羧基可以通过前面所述的方法去保护。
如前所述，式Ⅰ化合物的任何活性对映体都被认为是本发明的一部分。这些活性异构体可以通过前面所述的方法从它们各自的活性前体制备，或通过拆分外消旋混合物来制备。拆分可以在拆分试剂的存在下通过色谱法，重结晶或本领域技术人员已知的这些技术的混合方法来完成。关于拆分的更详细的内容见Jacques等人的“Enantiomers，RacematesandResolutions，”JohnWiley&Sons1981。
本发明化合物合成中所用的原料化合物是已知的，对于买不到的那些可以用本领域普通技术人员通常使用的标准方法容易地合成。
本发明药学上可接受的盐可通过式Ⅰ化合物与等摩尔或过量的酸或碱反应来形成。通常将反应物在互溶剂中混合，如对酸加成盐用二乙醚或苯，对碱加成盐用水或醇。通常盐在约1小时至10天内从溶液中沉淀出来，将其用过滤或其他常规方法分离。
下面制备例和实施例对本发明的具体内容作进一步说明。然而，应理解到这些实施例仅用于说明本发明，而不在任何方面限制本发明的范围。
在下面的制备例和实施例中，术语熔点、质子核磁共振谱、质谱、红外光谱、紫外光谱、元素分析、高效液相色谱、和薄层层析分别简写为“m.p.”、“NMR”、“MS”、“IR”、“VV”、“Analysis”、“HPLC”和“TLC”。此外，IR光谱中列出的最大吸收仅仅是那些有意义的并不是所有观察到的。
在NMR谱中，使用了下列简写“s”是单峰，“d”是双峰，“dd”是双峰，“t”是三重峰，“q”是四重峰，“m”是多重峰，“dm”是双多重峰，“br.s”、“br.d”、“br.t”和“br.m”分别是宽的单峰、双峰、三重峰和多重峰。“J”表示偶合常数，以赫兹(Hz)表示。除非另有说明，NMR值是指目的化合物的游离碱。
用VarianAssociatesEM-39090MHz或T-6060MHz仪、JolFX-90Q90MHz仪、BrukerCorp.270MHz仪或GeneralElectricQE-300300Hz仪测得核磁共振谱。化学位移用δ值表示(用四甲基硅烷内标，用它的百万分之几表示)。质谱在VarionMAT731分光计为用碳树枝状晶体发射体测定。红外光谱在Perkin-Elmer281仪上测得。紫外光谱在Cary118仪上测得。薄层层析在E.Merck硅胶板上进行。熔点未校正。
制备例1A.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-羟基-2-苯乙基)1，3-二氧戊环在氮气下将14.6ml(43.8mmol)苯基溴化镁的24.6ml二乙醚溶液加到冷的(-40℃)0.278g(1.46mmol)碘化铜(Ⅰ)的2ml二甲亚砜和22ml四氢呋喃溶液中。将该溶液搅拌5-10分钟后，加入2.72g(14.6mmol)1，2∶5，6-二脱水-3，4-邻异亚丙基-D-甘露糖醇的12ml四氢呋喃溶液。然后将反应混合物热至0℃并反应2小时15分钟，此时缓慢地加入饱和氯化铵溶液。将所得溶液剧烈搅拌5分钟，然后移入含二乙醚和2∶1混合物的分液漏斗中。将所得的各层分开并将有机层减压浓缩至干。然后将所得物用柱色谱法纯化(用2.5%丙酮的二氯甲烷洗脱)。将含有所需产品的组份合并并减压浓缩至干得到4.07g所需的副标题中间体油状物。
NMR(CDCl3)δ7.35(m，10);3.78(m，4);3.15(dd，2);
2.90(d，2);2.70(m，2);1.45(s，6).
MSm/e342(M′).
B.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-甲磺酰氧基-2-苯乙基)-1，3-二氧戊环将2.97ml(38.3mmol)甲磺酰氯的20ml二氯甲烷溶液加到5.47ml(39.3mmol)三乙胺和6.4g(18.7mmol)制备例1A副标题中间体的20ml二氯甲烷冷(0℃)溶液中。然后将反应混合物热至室温。当用薄层层析(TLC)检测反应完成时，将反应混合物倒入50ml0.2N盐酸和150ml二乙醚溶液中。分开所得的各层并将有机层用饱和硫酸氢钠溶液洗涤，然后减压浓缩至干。然后将所得物用柱色谱法纯化(用1∶1的二乙醚/己烷溶液洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干得到3.7g所需标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.30(m，10);4.88(m，2);4.25(d，2);
3.10(m，4);2.32(s，6);1.52(s，6).
MSm/e 499(M 1).
C.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(S)-叠氮基-2-苯乙基)-1，3-二氧戊环将0.784g(16.0mmol)叠氮化锂，4.0g(14.6mmol)18-冠醚-6和1.7ml(14.6mmol)2，6-二甲基吡啶的溶液加到3.6g(7.2mmol)制备例1B副标题中间体的25mlN，N′-二甲基亚丙基脲中。然后将反应混合物加热至95-100℃并反应约7小时。当由TLC检测反应完成时，将反应混合物倒入200ml0.1N盐酸和二乙醚的1∶1混合物中。将所得的各层分离并将有机层用硫酸钠干燥，然后减压浓缩至干得到2.8g油状物。将该油状物用柱色谱法纯化(用5-10%二氯甲烷的甲苯梯度洗脱剂洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干得到1.03g所需的副标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.30(m，10);4.12(s，2);3.22(t，2);
3.05(m，4);1.55(s，6).
D.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)，4(R)-二羟基己烷在3小时内向0.370g(0.943mmol)制备例1C的副标题中间体的4ml甲醇溶液中缓慢地加入1.26ml12M盐酸。当用TLC检测反应完成时，将反应混合物用10ml乙腈稀释并浓缩两倍。将所得物重新溶解在乙酸乙酯中并用碳酸氢钠的半饱和溶液洗涤。将所得的各层分离并将有机层以浓缩至干得到一油状物。将该油状物用柱色谱法纯化(用0-20%乙酸乙酯的二氯甲烷梯度洗脱剂洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干，然后从二乙醚和己烷溶液中重结晶得到0.309g所需的副标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.25(m，10);3.60(m，4);3.0(m，4);2.65(d，2).
MSm/e 353(M 1).
元素分析 C18H20N6O2计算值C，61.35;H，5.72;N，23.85;
实测值C，61.15;H，5.73;N，23.70.
E.1，6-二苯基-(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)-甲磺酰氧基-4(R)-羟基己烷将13.5μl(0.170mmol)甲磺酰氯的300μl二氯甲烷溶液缓慢地加到80mg(0.23mmol)制备例1D副标题中间体和32μl(0.23mmol)三乙胺的0.6ml二氯甲烷冷(0℃)溶液中。将反应混合物热至室温，使其反应15分钟，然后倒入50ml二乙醚和0.1N盐酸的3∶2混合物中。将所得各层分开，将有机层用碳酸氢钠半饱和溶液洗涤，然后减压浓缩至干得到一泡沫状物。将该泡沫状物用柱色谱法纯化(用1∶2的乙酸乙酯/二氯甲烷溶液洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干得到100mg所需副标题中间体和起始物1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)，4(R)-二羟基己烷的60∶40混合物。
F.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3，4-顺环氧己烷向60mg(0.14mmol)制备例1E的副标题中间体的1.5ml2∶1甲醇/四氢呋喃冷(0℃)溶液中加入0.325ml0.5M甲醇钠的甲醇溶液。然后将反应混合物热至室温并使其反应1小时，之后加入3ml含2滴乙酸的二乙醚。然后将所得溶液倒入25ml饱和硫酸氢钠溶液和40ml二乙醚的混合物中。将所得的各层分开，将有机层减压浓缩至干得到一油状物。将该油状物用柱色谱法纯化(用20%己烷的二氯甲烷洗脱)。将含有所需产品的组份合并，减压浓缩至干得到31mg所需的副标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.30(m，10);3.57(m，1);3.45(m，1);
3.18(m，2);2.94(m，4).
G.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-顺环氧己烷二盐酸盐向350mg5%钯碳在10ml9∶1乙酸乙酯/乙酸溶液中的悬浮液中加入0.368g(1.11mmol)上面制备1F副标题中间体。然后将混合物在氢气下快速搅拌约31/2小时。当用TLC检测反应完成时，将混合物用乙酸乙酯稀释并过滤除去5%钯碳。然后将滤液冷却过液得到0.325g1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-顺环氧己烷二乙酸盐。向0.100g(0.249mmol)二乙酸盐的4ml1∶1二氯甲烷/二己醚溶液中缓慢地加入在乙腈中的0.498ml1N盐酸得到一白色固体。将该固体离心分离得到0.090g所需副标题产品。
NMR(d6-DMSO)δ8.40(br.s，6);7.30(m，10);
3.40(m，4);3.05(m，4).
MSm/e 284(M -2Cl).
制备例2A.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-羟基-2-萘-2-基乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备例1A中所述方法制备所需的副标题中间体，使用在约58ml四氢呋喃中的27.29mmol2-萘基溴化镁，183mg碘化铜(Ⅰ)，1.30ml(17.70mmol)二甲基亚砜和1.502g(8.07mmol)1，2∶5，6-二脱水-3，4-邻异亚丙基-D-甘露糖醇得到2.81g白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.78(m，8);7.43(m，6);3.90(m，2);
3.81(m，2);3.32(dd，2);2.90(dd，2);
2.81.(br.s，2);1.53(s，6).
MSm/e 442(M ).
元素分析C29H30O4计算值C，78.71;H，6.83;
实测值C，78.44;H，7.11.
B.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-甲磺酰氧基-2-萘-2-基乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备1B所述的方法制备所需副标题中间体，使用2.40ml(31.0mmol)甲磺酰氯，2.80ml(20.1mmol)三乙胺和2.81g(6.35mmol)制备例2A副标题中间体得到3.02g白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.80(m，8);7.50(m，4);7.36(m，2);
5.00(m，2);4.35(br.s，2);3.26(m，4);
2.27(s，6);1.57(s，6).
MSm/e 598(M ).
元素分析 C31H34O8S2计算值C，62.19;H，5.72;
实测值C，62.00;H，5.70.
C.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(S)叠氮基-2-萘-2-基乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备例1C所述方法制备所需副标题中间体，使用1.999g(40.80mmol)叠氮化锂，1.175ml(10.09mmol)2，6-二甲基吡啶和3.00g(5.01mmol)制备例2B副标题中间体得到946mg含894mg所需化合物的粘性油。
NMR(CDCl3)δ7.83(m，6);7.70(br.s，2);7.52(m，4);
7.35(m，2);4.23(s，2);3.39(m，2);
3.20(m，4);1.59(s，6).
MSm/e 492(M ).
元素分析 C29H28N6O2计算值C，70.71;H，5.73;N，17.06;
实测值C，70.77;H，5.82;N，16.82.
D.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)，4(R)-二羟基己烷基本上按制备例1D所述方法使用在0.25ml2.5∶1∶6.5乙酸/水/四氢呋喃溶液中的41.9mg(0.0851mmol)制备例2C标题中间体和4滴浓盐酸制备所需的标题中间体。将反应溶液在回流下搅拌17小时得到28.7mg白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.75(m，8);7.50(m，4);7.34(m，2);
3.70(br.s，4);3.15(m，4);
2.48(br.s，2).
MSm/e 452(M ).
元素分析 C26H24N6O2计算值C，69.01;H，5.35;N，18.57;
实测值C，69.15;H，5.37;N，18.37.
E.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)-甲磺酰氯基-4(R)-羟己烷基本上按制备例1E所述方法制备所需的副标题中间体，用40μl(0.52mmol)甲磺酰氯，697mg(1.54mmol)制备例2D副标题中间体和0.212ml(1.52mmol)三乙胺得到一固体，不用进一步纯化将其直接使用。
F.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3，4-顺式-环氧己烷基本上按制备例1F所述方法制备所需副标题中间体，使用制备例2E副标题中间体和4.50ml在甲醇中的0.5M甲醇钠得到261mg白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.80(m，8);7.44(m，6);3.73(m，1);
3.62(m，1);3.34(dd，1);3.23(dd，1);
3.11(m，4).
MSm/e 434(M ).
元素分析 C26H22N6O计算值C，71.87;H，5.10;N，19.34;
实测值C，72.09;H，5.29;N，19.32.
G.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-顺环氧己烷二盐酸盐基本上按制备1G所述方法制备所需的副标题产物，通过将322mg(0.741mmol)制备例2F副标题中间体和330mg5%钯碳在氢气下混合得到95.8mg1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二氨复盐-3，4-顺环氧己烷二乙酸盐。然后用二乙酸盐和0.5ml在乙腈中的1N盐酸制备二盐酸盐得到69.2mg白色固体。
NMR(d6-DMSO)δ8.53(br.s，3);8.23(br.s，3);
3.90(m，8);7.54(m，6);
3.05-3.85(m，8).
MSm/e 383(M 1-2Cl).
元素分析 C26H28N2OCl2计算值C，68.57;H，6.20;N，6.15;
实测值C，68.48;H，6.32;N，6.32.
制备例3A.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-羟基-2-萘-2-基硫乙基)-1，3-二氧戊环向1.172g(6.29mmol)2，2-二甲基-4，5-二环氧乙烷-1，3-二氧戊环的64ml四氢呋喃溶液中加入4.075g(25.43mmol)2-萘硫醇。固体完全溶解后，加入2.20ml(12.6mmol)二异丙基乙基胺。将所得溶液热至回流并将其反应约24小时。冷却后，将溶液移至含二氯甲烷和饱和盐水溶液的分液漏斗中。将所得各层分离并将有机层减压浓缩至干。然后将所得物用柱色谱法纯化(用30%乙酸乙酯/65%己烷/5%二氯甲烷溶液洗脱)。将含有所需产物的组份合并并减压浓缩至干得到2.88g所需副标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.76(m，8);7.44(m，6);3.85(m，4);
3.72(s，2);3.60(dd，2);3.02(dd，2);
1.32(s，6).
MSm/e 506(M ).
元素分析 C29H30O4S2计算值C，68.74;H，6.90;
实测值C，69.03;H，6.09.
B.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-甲磺酰氧基-2-萘-2-基硫乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备1B所述方法制备所需副标题中间体，用1.10ml(14.2mmol)甲磺酰氯，2.12ml(15.2mmol)三乙胺和2.84g(5.60mmol)制备例3A副标题中间体得到3.02g固体。
C.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(S)-叠氮基-2-萘-2-基硫乙基)-1，3-二氧戊环基本上按制备例1C所述方法制备所需的副标题中间体，用602mg(12.3mmol)叠氮化锂，1.40ml(12.0mmol)2，6-二甲基吡啶和制备例3B副标题中间体得到894mg无色油状物，经计算其中含539mg所需化合物。
NMR(CDCl3)δ7.91(s，1);7.78(m，7);7.49(m，6);
4.78(s，2);3.73(m，4);3.39(m，2);
1.56(s，6).
MSm/e 556(M ).
D.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)，4(R)-二羟基己烷基本上按照制备2D所述方法使用1.24g(2.23mmol)制备例3C副标题中间体和0.5ml浓盐酸的15.2ml3∶1∶7.7乙酸/水/四氢呋喃溶液制备所需副标题中间体。将反应溶液在回流下搅拌8小时得到937mg白色固体。
NMR(CDCl3)δ7.79(m，8);7.46(m，6);
4.23(br.s，2);3.72(m，2);
3.60(m，2);3.37(m，2);3.02(d，2).
MSm/e 516(M ).
元素分析 C26H24N6O2S2计算值C，60.44;H，4.68;N，16.27;
实测值C，60.39;H，4.85;N，15.97.
E.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3(R)-甲磺酰氧基-4(R)-羟基己烷基本上按制备例1E所述方法制备所需副标题中间体，使用23.7μl(0.306mmol)甲磺酰氯，211mg(408mmol)制备例3D副标题中间体和0.60ml(0.30mmol)三乙胺得到一固体。
F.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二叠氮基-3，4-顺-环氧己烷基本上按制备例1F所述方法制备所需副标题中间体，使用制备例3E副标题中间体和0.70ml0.5M甲醇钠甲醇溶液得到94mg无色油状物。
NMR(CDCl3)δ8.03(m，2);7.79(m，6);7.52(m，6);
3.65(m，2);3.43(m，2);3.50(dd，1);
3.20(dd，1);3.00(m，1).
MSm/e 498(M ).
元素分析 C26H22N6OS2计算值C，62.63;H，4.45;N，16.85;
实测值C，62.88;H，4.58;N，16.73.
G.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-顺-环氧己烷二乙酸盐向172mg(0.345mmol)制备例3F副标题中间体在6∶4∶1的乙酸乙酯/乙腈/水混合物中的溶液中加260μl(1.04mmol)三正丁基膦和60.0μl冰醋酸。将反应混合物在室温下反应约30分钟并减压浓缩得到一油状物。将该油状物用乙酸乙酯/己烷溶液重结晶得到12.4mg白色粉末状所需的标题中间体。
NMR(d6-DMSO)δ8.09(s，1);7.95(s，1);
7.72-7.90(m，9);7.38-7.62(m，9);
3.08-3.34(m，4);2.53-2.95(m，4);
1.86(s，6).
MSm/e 446(M -2HOAc).
元素分析 C30H34N2O5S2计算值C，63.58;H，6.05;N，4.94;S，11.32;
实测值C，63.74;H，6.17;N，4.85;S，11.10.
制备例41，8-二苯基-3(S)，6(S)-二氨基-4，5-顺-环氧辛烷盐酸盐基本上按制备1A-G所述方法制备了所需的标题产物。
NMR(d6-DMSO)δ8.35(br.s，6);7.20(m，10);
3.30(m，3);3.10(m，1);2.70(m，4);
2.0(m，4).
制备例51，10-二苯基-4(S)，7(S)-二氨基-5，6-顺-环氧癸烷盐酸盐基本上按制备例1A-G所述方法制备了所需的标题产物。
NMR(d6-DMSO)δ8.35(br.s，6);7.35(m，10);3.45(m，3);
3.35(m，1);3.05(m，4);1.8(m，8).
制备例6A.(2S)-氨基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯的对甲苯磺酸盐将二苯基重氮甲烷加到15.03g(49.54mmol)L-异亮氨酸，对甲苯磺酸盐的450ml4∶5乙腈/甲醇溶液中直至保持浅粉色(17.12g(88.16mmol)二苯基重氮甲烷)，此时加入2ml冰醋酸。将所得溶液室温下搅拌约15分钟，然后减压浓缩得到黄色固体。然后将该固体在热乙腈中重结晶以纯化得到21.64g所需的标题中间体。
NMR(CD3OD)δ7.67(d，J＝9Hz，2);7.37(m，10);
7.20(d，J＝9Hz，2);6.98(s，1);
4.13(d，J＝3Hz，1);2.34(s，3);
2.01(m，1);1.17-1.46(m，2);
0.80-0.97(m，6).
B.2(S)-氨基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯向21.64g(46.08mmol)制备例4A标题中间体的溶液中加入450ml饱和碳酸氢钠溶液，释放出气体。当反应完成时，将所得的各层分开并减压浓缩至干得到13.61g所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ7.19-7.45(m，10);7.93(s，1);
3.47(d，J＝3Hz，1);1.85(m，1);
1.33-1.50(m，4);0.92(d，J＝8Hz，3);
0.83(t，J＝8，3).
C.2(S)-氨基甲酰基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯将4.97g(16.7mmol)制备例4B副标题中间体和4.7ml(33.7mmol)三乙胺溶液通过套管加入2.51g(8.46mmol)三光气的90ml甲苯热(60℃)溶液中。将温度升至100℃并将溶液反应过夜。将反应混合物冷至0℃，结果形成沉淀。过滤除去该沉淀并用1∶1的乙酸乙酯/己烷溶液洗涤。将所得溶液减压浓缩至干得到5.45g所需的标题中间体，它具有足够的纯度(NMR测定约90%)以用于下一步反应。
NMR(CDCl3)δ7.23-7.47(m，10);6.98(s，1);
4.05(d，J＝3Hz，1);2.05(m，1);
1.18(quintet，J＝8Hz，2);
1.00(d，J＝8Hz，3);0.80(t，J＝8Hz，3).
D.2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3(S)甲基戊酸二苯甲酯向0.506g(3.18mmol)2-羟甲基喹啉和0.315g(3.18mmol)氯化铜(Ⅰ)的无水二甲基甲酰胺溶液中加入1.13g(3.50mmol)制备例4C副标题中间体。TLC显示反应基本上完成时，将反应混合物用乙酸乙酯稀释并用半饱和盐水溶液洗涤。将所得的各层分开并将有机层用硫酸钠干燥，减压浓缩至干得到棕色油。将该油通过柱色谱法纯化(用65%己烷的乙酸乙酯洗脱)得到1.23g所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.15(d，1);8.05(d，1);7.8(d，1);
7.70(t，1);7.55(t，1);7.45(d，1);
7.30(m，10);6.92(s，1);5.43(d，1);
5.40(s，2);4.5(m，1);2.0(m，1);
1.2(m，2);0.9(d，3);0.82(t，3).
E.2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸将上面制备例4C副标题中间体溶解在12ml含3ml浓盐酸的二噁烷中。将所得溶液热至100℃并使其反应约5分钟，然后冷至室温并搅拌直到TLC显示反应基本上完成。将所得的溶液减压浓缩至干，然后重新溶解在碳酸氢钠水溶液中。将所得溶液用100ml乙醚洗涤，然后用1N盐酸酸化至pH4。然后用10%异丙醇的二氯甲烷溶液萃取所需产品，用硫酸钠干燥并过滤。然后将溶液减压浓缩至干得到0.567g所需标题产品。
NMR(d6-DMSO)δ8.35(d，1);7.92(d，2);7.70(m，2);
7.53(m，2);5.22(s，2);3.92(m，1);
1.78(m，1);1.40(m，1);1.20(m，1);
0.90(m，6).
制备例7A.2(S)-N-[[N(甲基)-N-(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯向1.13g(3.50mmol)制备例4C副标题中间体的2ml二氯甲烷溶液中加入0.441ml(3.18mmol)N-(吡啶-2-基乙基)胺。当TLC显示反应完成时，将反应溶液倒进二氧化硅柱(用5%甲醇的乙酸乙酯洗脱)。将含有所需产品的组份合并并浓缩至干得到1.33g所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.43(d，1);7.55(t，1);7.3(m，10);
7.10(m，2);6.90(s，1);5.63(d，1);
4.60(m，1);3.65(m，2);3.02(t，2);
2.81(s，3);1.95(m，1);1.3(m，1);
1.15(m，1);0.85(m，6).
B.2-(S)-N-[[N-(甲基)-N-(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸基本上按制备例4E所述的方法制备所需的副标题产物，用1.1g(2.39mmol)制备例5A标题中间体和3ml浓盐酸得到0.527g固体。
NMR(CDCl3)δ10.00(br.s，1);8.55(d，1);
7.62(d，1);7.2(m，2);5.7(d，1);
4.35(m，1);3.70(m，2);3.06(t，2);
2.83(s，3);1.95(m，1);1.50(m，1);
1.20(m，1);0.9(m，6).
制备例8A.2(S)-N-(咪唑-1-基羰基)氨基己酸二苯甲酯将400mg(1.34mmol)2(S)-氨基己酸二苯甲酯的3ml乙腈溶液加到在2ml乙腈中的218mg(1.34mmol)1，1′-羰基二咪唑中。将所得溶液在室温下搅拌约45分钟，然后用柱色谱法纯化(用25%乙酸乙酯的二氯甲烷洗脱)得到350mg所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.15(s，1);7.35(s，10);7.08(s，1);
6.95(s，1);6.50(d，1);4.80(m，1);
2.0(m，1);1.80(m，1);1.30(m，3);
1.15(m，3);0.82(t，3).
B.2(S)-N-[[N-(甲基)-N-[(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]]氨基己酸二苯甲酯将300mg(0.766mmol)制备例6A副标题中间体的1ml乙腈溶液加到132mg(0.766)N-(甲基)-2-氨基喹啉的1ml乙腈中。当TLC显示反应完成时，将反应溶液减压浓缩至干得到一种油。将该油用柱色谱法纯化(用10-30%乙酸乙酯的二氯甲烷梯度洗脱剂)。将含有所需产品的组份减压浓缩至干得到330mg所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.15(d，1);8.0(d，1);7.80(d，1);
7.70(t，1);7.55(t，1);7.40(d，1);
7.30(s，10);6.90(s，1);
6.08(br.s，3);4.70(m，3);3.02(s，3);
1.90(m，1);1.75(m，1);1.20(m，4);
0.80(t，3).
C.2(S)-N-[[N-(甲基)-N-(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基己酸向330mg(0.666mmol)制备例6B副标题中间体的2ml甲醇溶液中加入105mg(1.66mmol)甲醇铵和83mg5%钯碳。将反应混合物在回流温度下反应约2小时。当TLC检测反应完成时，将反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释并过滤除去5%钯碳。然后将溶液与50ml水合并，分离所得的各层并将有机层减压浓缩至干得到165mg所需的标题产物。
NMR(d6-DMSO)δ8.30(d，1);7.92(d，2);7.70(t，1);
7.55(t，2);7.35(d，1);6.60(d，1);
4.62(s，2);4.03(m，1);2.85(s，3);
1.62(m，2);1.20(m，4);0.80(t，3).
制备例9A.2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基己酸二苯甲酯将40mg(0.10mmol)制备例6A标题中间体的1ml二甲基甲酰胺溶液加到在二甲基甲酰胺中的16.5mg(0.104mmol)2-羟甲基喹啉、12.5mg(0.102mmol)4-二甲氨基吡啶和0.10mmol氯化铜(Ⅰ)中。将所得的反应混合物在室温下反应约3小时，然后用柱色谱法纯化(用65%己烷的乙酸乙酯洗脱)得到37mg所需的标题中间体。
NMR(CDCl3)δ8.15(d，1);8.05(d，1);7.80(d，1);
7.70(t，1);7.55(t，1);7.45(d，1);
7.30(s，10);6.90(s，1);5.45(d，1);
5.40(s，2);4.55(m，1);1.90(m，1);
1.72(m，1);1.20(m，4);0.80(t，3).
实施例11，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷制备215mg(0.818mmol)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-甲基丁酸，12mg(0.082mmol)羟基苯并三唑单水合物(HOBT·H2O)、104μl(0.818mmol)N-甲基吗啉(NMM)和362mg(0.818mol)苯并三唑-1-基氧三(二甲氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)的2ml二甲基甲酰胺溶液并使其在室温下搅拌约10分钟。同时，将80μl(0.40mmol)N，N-二环己胺加到71mg(0.20mmol)制备例1G标题中间体的6ml二甲基甲酰胺溶液中，得到一白色固体。将该固体离心除去并将溶液加到上面的溶液中。将所得反应混合物减压浓缩至体积2.0ml，使其在室温下反应约48小时。然后将反应混合物用20ml乙酸乙酯稀释并将所得的溶液加到120ml2∶1乙酸乙酯/0.1N盐酸溶液。将所得的各层分开并将有机层用1∶1的饱和碳酸氢钠/盐水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩至干得到110mg物质。然后将该物质用快速色谱法纯化(用65%甲苯的乙酸乙酯洗脱)。将含有所需产物的组份合并，减压浓缩至干得到52mg所需标题产物。
NMR(80�Cl3/20% CD3OD)δ7.35(s，10);7.18(m，10);
5.12(s，4);4.20(d，2);4.12(m，1);
3.90(d，1);3.18(m，1);2.82(m，5);
2.05(m，2);0.90(m，9);(d，3).
MSm/e 749(M 1).
元素分析 C44H52N4O7计算值C，70.57;H，7.00;N，7.48;
实测值C，70.31;H，7.11;N，7.76.
实施例21，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(苄氧羰基)氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备了标题化合物。用194mg(0.818mmol)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-丁酸，12mg(0.082mmol)HOBT·H2O、104μl(0.818mmol)NMM和370mg(0.818mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二环己胺和71mg(0.20mmol)制备例1G标题中间体，得到21mg所需化合物。
NMR(80% CDCl3/20% CD3OD)δ7.35(s，10);7.20(m，10);
5.15(s，4);4.25(d，2);4.10(m，1);
3.90(d，1);3.15(m，1);2.80(m，5);
1.45(m，4);0.8(m，6).
实施例31，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(喹啉-2-基羰基)氨基-3-氰基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备了标题化合物。用163mg(0.605mmol)2(S)-N-(喹啉-2-基羰基)氨基-3-氰基丙酸，8.1mg(0.06mmol)HOBT·H2O，67μl(0.60mmol)NMM和268mg(0.605mmol)BOP、61μl(0.30mmol)N，N-二环己基胺和53mg(0.15mmol)制备例1G副标题中间体，得到32mg非对映体混合物。用反相高效液相色谱(HPLC)分离这些非对映异构体(含0.36%乙酸的1∶1∶1乙腈/甲醇/水)得到7mg所需化合物。
NMR(80% CDCl3/20% CD3OD)δ8.20(m，6);7.75(m，6);
7.0(m，10);4.75(m，2);4.25(m，2);
3.0(m，8).
MSm/e 785(M 1).
实施例41，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备了标题化合物，用231mg(0.762mmol)2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酸，11mg(0.076mmol)HOBT·H2O、92μl(0.84mmol)NMM和337mg(0.762mmol)BOP，76μl(0.38mmol)N，N-二环己基胺和66mg(0.19mmol)制备例1G标题中间体制得70mg粗品。用反相HPLC纯化该混合物(含0.5%乙酸的35%乙腈/35%甲醇/30%水)得到7mg含92%所需标题产物的物质。
NMR(80% CDCl3/20% CD3OD)δ8.05(m，2);7.72(m，2);
7.45(m，2);7.10(m，10);5.35(s，4);
4.15(m，2);3.95(m，2);3.10(d，1);
2.80(m，5);2.0(m，2);0.8(m，12).
实施例51，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(苄氧羰基)氨基-3-氨基甲酰基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备标题化合物，用218mg(0.818mg)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-氨基甲酰基丙酸，12mg(0.082mmol)HOBT·H2O，104μl(0.818mmol)NMM和362mg(0.818mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二环己基胺和71mg(0.20mmol)制备例1G标题中间体，得到7mg含80-85%所需的标题产物的物质。
实施例61，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(苄氧羰基)氨基-3-氰基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用137mg(0.552mmol)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-氰基丙酸，8mg(0.06mmol)HOBT·H2O，6μl(0.552mmol)NMM和244mg(0.552mmol)BOP、55μl(0.28mmol)N，N-二环己胺和49mg(0.14mmol)制备例1G副标题中间体制得了标题化合物。用反相HPLC纯化所得物质(含0.2%乙酸铵的32.5%乙腈/32.5%甲醇/35%水)得到38mg所需标题产物。
NMR(90% CDCl3/10% D2O)δ7.10(m，20);5.10(s，4);
4.58(m，1);4.40(m，1);4.25(m，1);
4.10(m，2);3.22(m，1);2.80(m，8).
MSm/e 743(M 1).
元素分析 C42H42N6O7计算值C，67.91;H，5.70;N，11.31;
实测值C，68.02;H，5.84;N，11.06.
实施例71，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(苄氧羰基)氨基-3-吡唑-1-基丙酰基]氨基]-3，4-顺环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用250mg(0.901mmol)2(S)-N-(苄氧羰基)氨基-3-吡唑-1-基丙酸，12mg(0.09mmol)HOBT·H2O，100μl(0.901mmol)NMM和398mg(0.901mmol)BOP，90μl(0.45mmol)N，N-二环己基胺和80mg(0.22mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的37.5%乙腈/37.5%甲醇/25%水)得到所需的标题产物。
实施例81，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法制备标题化合物，用328mg(1.31mmol)2(S)-N-(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-3-甲基丁酸，17.6mg(0.13mmol)HOBT·H2O，143μl(1.30mmol)NMM和575mg(1.30mmol)BOP，124μl(0.619mmol)N，N-二环己胺和110mg(0.310mmol)制备例1G标题中间体得到195mg粗品。将该物用反相HPLC纯化(用含0.05%乙酸铵的30%乙腈/25%甲醇/45%水)得到95mg所需产品。
NMR(80% d6-DMSO/20% D2O)δ8.42(s，1);7.72(m，1);
7.25(m，2);7.05(m，10);5.02(m，4);
4.0(m，2);3.75(m，2);3.15(d，1);
2.70(m，5);1.85(m，2);0.7(m，12).
MSm/e 751(M 1).
元素分析 C42H50N6O7计算值C，67.18;H，6.71;N，11.19;
实测值C，67.39;H，6.87;N，11.92.
实施例91，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(苄氧羰基)氨基-3-咪唑-4-基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用248mg(0.856mmol)2-N-(苄氧羰基)氨基-3-咪唑-4-基丙酸，12mg(0.085mmol)HOBT·H2Ol，94μl(0.86mmol)NMM和378mg(0.856mmol)BOP，87μl(0.438mmol)N，N-二环己胺和76mg(0.214mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.3%乙酸铵的35%乙腈/35%甲醇/30%水)得到19mg所需产品。
NMR(80% d6-DMSO/20% D2O)δ7.50(s，2);7.10(m，20);
6.68(s，2);4.95(s，4);4.05(m，4);
3.20(m，1);2.60(m，8).
实施例101，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用333mg(1.154mmol)2(S)-N[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基丁酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，128μl(1.16mmol)NMM和510mg(1.15mmol)BOP，112μl(0.563mmol)N，N-二环己基胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的45%乙腈/35%甲醇/20%水)得到75mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(m，2);7.90(m，2);7.80(m，2);
7.70(m，2);7.50(m，4);7.10(m，10);
5.3(m，4);4.2(m，3);4.0(m，2);
3.22(m，1);2.80(m，4);1.65(m，2);
1.55(m，2);0.85(m，6).
MSm/e 823(M 1).
元素分析 C48H50N6O7计算值C，70.05;H，6.12;N，10.21;
实测值C，69.85;H，6.14;N，10.37.
实施例111，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(苄氧羰基)氨基-3-甲硫丙酰基]氨基]-3，4-顺环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用318mg(1.18mmol)2(S)-N(苄氧羰基)氨基-3-甲硫丙酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，132μl(1.2mmol)NMM和523mg(1.18mmol)BOP，0.112ml(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.2%乙酸铵的40%乙腈/35%甲醇/25%水)得到27mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ7.30(m，10);7.15(m，10);5.08(s，4);
4.45(m，1);4.25(m，2);4.15(m，1);
4.0(m，1);3.25(m，1);2.70(m，8);
2.02(s，6).
MSm/e 784(M ).
实施例121，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(苄氧羰基)氨基-4-氨甲酰基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用331mg(1.18mmol)2(S)-N(苄氧羰基)氨基-4-氨甲酰基丁酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，132μl(1.2mmol)NMM和523mg(1.18mmol)BOP，0.112ml(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的32.5%乙腈/32.5%甲醇/35%水)得到28mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ7.2(m，20);5.10(s，4);4.30(m，1);
4.10(m，3);3.18(d，1);2.80(m，5);
2.2(m，4);1.90(m，4).
MSm/e 807(M 1).
元素分析 C44H50N6O9计算值C，65.49;H，6.25;N，10.41;
实测值C，65.25;H，6.30;N，10.21.
实施例131，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-4-甲基戊酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用315mg(1.18mmol)2(S)-N(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-4-甲基戊酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，0.132ml(1.2mmol)NMM和523mg(1.18mmol)BOP，0.112ml(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的32.5%乙腈/32.5%甲醇/35%水)得到76mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.4(s，2);7.75(m，2);7.40(m，4);
7.25(m，4);7.10(m，10);5.10(s，4);
4.10(m，4);4.00(d，1);3.25(d，1);
2.80(m，4);1.4(m，4);0.8(m，12).
MSm/e 778(M ).
元素分析 C44H54N6O7计算值C，67.85;H，6.99;N，10.79;
实测值C，67.60;H，6.93;N，10.76.
实施例141，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(苄氧羰基)氨基-3(S)-甲基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用306mg(1.15mmol)2(S)-N(苄氧羰基)氨基-3(S)-甲基丙酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，128μl(1.16mmol)NMM和510mg(1.154mmol)BOP，112μl(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物棕色固体。将该固体用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的45%乙腈/35%甲醇/20%水)以得到46mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ7.35(m，10);7.15(s，10);5.10(s，4);
4.2(m，3);4.0(q，1);3.92(d，1);
3.22(m，1);2.80(m，4);1.75(m，2);
1.45(m，2);1.1(m，2);0.8(m，12).
MSm/e 777(M 1).
元素分析 C46H56N4O7计算值C，71.11;H，7.26;N，7.21;
实测值C，70.84;H，7.36;N，7.29.
实施例151，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基]-3(S)-甲基戊酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用365mg(1.15mmol)2(S)-N[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，0.128ml(1.16mmol)NMM和510mg(1.154mmol)BOP，112μl(0.563mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.282mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的45%乙腈/35%甲醇/20%水)得到90mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(d，2);7.95(d，2);7.85(d，2);
7.70(m，2);7.55(m，4);7.10(m，10);
5.35(m，4);4.25(m，2);4.20(d，1);
4.0(m，2);3.22(m，1);2.80(m，4);
1.8(m，2);1.5(m，1);1.3(m，1);
1.1(m，2);0.8(m，12).
MSm/e 879(M 1).
元素分析 C52H58N6O7计算值C，71.05;H，6.65;N，9.56;
实测值C，71.05;H，6.70;N，9.75.
实施例161，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N-(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用522mg(1.87mmol)2(S)-N[[N(甲基)-N(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3-甲基丁酸，16mg(0.115mmol)HOBT·H2O，0.207ml(1.88mmol)NMM和825mg(1.87mmol)BOP，183μl(0.919mmol)N，N-二环己胺和162mg(0.455mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.4%乙酸铵的45%乙腈/20%甲醇/35%水)得到42mg所需产物。
NMR(CD3OD)δ8.42(m，2);7.70(m，2);7.20(m，14);
4.22(m，3);4.0(q，1);3.85(d，1);
3.6(m，4);3.22(m，1);2.95(m，4);
2.82(s，6);2.80(m，4);1.95(m，2);
0.8(m，12).
实施例171，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[(8-氟喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用286mg(0.892mmol)2(S)-N[(8-氟喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酸，12mg(0.089mmol)HOBT·H2O，0.100ml(1.89mmol)NMM和395mg(0.892mmol)BOOP，87μl(0.44mmol)N，N-二环己胺和78mg(0.22mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/35%甲醇/30%水)得到34mg所需产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(d，2);7.60(m，4);7.45(m，4);
7.10(m，10);5.35(m，4);4.25(m，2);
4.15(d，1);4.05(m，1);3.95(m，1);
3.25(m，1);2.80(m，4);2.0(m，2);
0.85(m，12).
MSm/e 888(M 2).
实施例181，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用187mg(0.62mmol)2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰甲酰基]氨基丁酸，9mg(0.06mmol)HOBT·H2O，70μl(0.620mmol)NMM和274mg(0.620mmol)BOP，71μl(0.355mmol)N，N-二环己胺和63mg(0.18mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到50mg所需产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);7.85(m，2);
7.70(m，2);7.55(t，2);7.40(dd，2);
7.15(m，10);4.80(ABX，4);
4.35(m，2);4.15(m，2);4.0(m，1);
3.25(m，1);3.02(s，3);2.97(s，3);
2.80(m，4);1.7(m，4);0.85(m，6).
MSm/e 849(M 1).
实施例191，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用232mg(0.704mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸，10mg(0.070mmol)HOBT·H2O，78μl(0.70mmol)NMM和312mg(0.704mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二环己胺和72mg(0.201mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);7.85(d，2);
7.70(m，2);7.55(t，2);7.40(d，2);
7.15(m，10);4.75(ABX，4);
4.38(d，1);4.28(t，1);4.20(m，1);
4.0(m，2);3.25(m，1);3.02(s，6);
2.75(m，4);1.78(m，2);
1.05-1.45(m，4);0.75(m，12).
MSm/e 906(M 2).
实施例201，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(苄氧羰基)氨基]丙酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用94mg(0.42mmol)2(S)-N(苄氧羰基)氨基丙酸，6mg(0.04mmol)HOBT·H2O，46μl(0.42mmol)NMM和187mg(0.42mmol)BOP，56μl(0.28mmol)N，N-二环己胺和50mg(0.14mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到15mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ7.30(m，10);7.10(m，10);5.05(s，4);
4.30(m，1);4.20(m，1);4.1(m，2);
3.95(m，1);3.20(m，1);2.75(m，4);
1.22(m，6).
MSm/e 694(M 2).
实施例211，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基戊酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用90mg(0.28mmol)2(S)-N-[[(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基戊酸，4mg(0.03mmol)HOBT·H2O，32μl(0.28mmol)NMM和126mg(0.285mmol)BOP，41μl(0.20mmol)N，N-二环己胺和36.2mg(0.102mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到32mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);7.85(m，2);
7.70(m，2);7.52(t，2);7.40(dd，2);
7.15(m，10);4.75(ABX，4);
4.42(m，1);4.30(m，1);4.18(m，2);
3.97(m，1);3.25(m，1);3.03(s，3);
2.98(s，3);2.78(m，4);1.65(m，4);
1.25(m，4);0.85(m，6).
MSm/e 878(M 2).
实施例221，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基己酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用130mg(0.394mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基己酸，5.3mg(0.039mmol)HOBT·H2O，45μl(0.39mmol)NMM和175mg(0.394mmol)BOP，45μl(0.20mmol)N，N-二环己胺和40mg(0.11mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到45mg所需标题产物。
1H NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);
7.85(dd，2);7.70(m，2);7.55(t，2);
7.40(dd，2);7.15(m，10);
4.75(ABX，4);4.40(m，1);4.25(m，1);
4.15(m，2);3.95(m，1);3.25(m，1);
3.05(s，3);3.0(s，3);2.80(m，4);
1.60(m，4);1.20(m，8);0.82(m，6).
MSm/e 906(M 2).
实施例231，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(吡啶-3-基甲氧羰基)氨基-3，3-二甲丁酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用214.9mg(0.807mmol)2(S)-N(吡啶-3-基甲氧羰基)氨基-3，3-二甲基丁酸，11.2mg(0.0829mmol)HOBT·H2O，100μl(0.909mmol)NMM和344.0mg(0.778mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二环己胺和69.1mg(0.194mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到43.6mg白色固体，它为4种非对映异构体的混合物。
NMR(CD3OD)δ8.57(br.s，2);8.47(m，2);
7.84(d，2);7.42(m，2);
6.96-7.27(m，10);5.15(AB，4);
4.14-4.24(m，2);3.89(br.s，1);
3.25(m，1);3.07(m，2);
2.61-2.97(m，4);0.90(m，18).
MSm/e 780(M 2).
实施例241，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用142.0mg(0.508mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸，7.5mg(0.056mmol)HOBT·H2O，60μl(0.55mmol)NMM和243.8mg(0.551mmol)BOP，63μl(0.32mmol)N，N-二环己胺和52.5mg(0.148mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的40%乙腈/20%甲醇/30%水)得到10.9mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.47(br.s，2);7.76(m，2);
7.03-7.33(m，14);4.46-4.64(m，4);
4.13-4.39(m，3);4.04(q，2);
3.25(s，1);2.98(s，6);
2.67-2.98(m，4);1.88(m，2);
1.43(m，2);1.10(m，2);0.84(m，12).
MSm/e 807(M 3).
实施例251，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(吡啶)-2-基甲氧羰基)氨基]己酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用136.7mg(0.513mmol)2(S)-N(吡啶-2-基甲基羰基)氨基己酸，10.4mg(0.0770mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.55mmol)NMM和242.8mg(0.549mmol)BOP，62μl(0.311mmol)N，N-二环己胺和51.4mg(0.145mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到24.5mg所需标题产品。
NMR(CD3OD)δ8.47(m，2);7.81(m，2);
7.02-7.53(m，14);5.18(AB，4);
4.22(m，3);4.00(m，2);3.25(m，1);
2.70-2.94(m，4);1.05-1.73(m，12);
0.90(m，6).
MSm/e 780(M 2).
实施例261，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(喹啉-2-基羰基)氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，用223mg(0.818mmol)2(S)-N(喹啉-2-基羰基)氨基-3-甲基丁酸，11.1mg(0.0818mmol)HOBT·H2O，0.090ml(0.82mmol)NMM和362mg(0.818mmol)BOP，73μl(0.31mmol)二异丙基乙基胺和125mg(0.200mmol)制备例1G标题化合物的二对甲苯磺酸盐制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的45%乙腈/35%甲醇/20%水)得到10mg含84%所需标题产物的物质。
NMR(CD3OD)δ8.15(m，2);7.70(m，6);7.0(m，10);
4.45(m，1);4.25(m，2);4.05(m，1);
3.2(dd，1);2.8(m，5);2.15(m，1);
2.05(m，1);0.9(m，12).
MSm/e 791(M 1).
实施例271，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3-氰基丙酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述的方法，使用165mg(0.528mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3-氰基丁酸，10mg(0.053mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.53mmol)NMM和234mg(0.528mmol)BOP，73μl(0.37mmol)N，N-二环己胺和65mg(0.18mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到49mg含84%所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.28(d，2);8.0(d，2);7.88(t，2);
7.72(t，2);7.57(m，2);7.43(t，2);
7.18(m，10);4.70(m，5);4.20(m，3);
3.10(d，2);3.00(s，3);2.97(s，3);
2.85(m，8).
MSm/e 872(M 2).
实施例281，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用145.8mg(0.580mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，176.0mg(0.126mmol)HOBT·H2O，73.0μl(0.664mmol)NMM和281.4mg(0.636mmol)BOP，0.060ml(0.30mmol)N，N-二环己胺和99.7mg(0.281mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到6mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.50(d，2);7.67(m，2);
7.02-7.31(m，15);6.78(d，1);
6.03(m，1);5.98(m，1);
4.34-4.60(m，4);4.24(t，1);
3.95-4.19(m，3);3.74(s，1);
3.27(s，1);2.73-3.05(m，10);
1.83(m，2);1.67(m，2);0.89(t，6).
MSm/e 749(M 1).
实施例291，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(6-甲基吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-3-甲氧基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用126.2mg(0.474mmol)2(S)-N-(6-甲基吡啶-2-基甲氧羰基]氨基-3-甲基丁酸，5.4mg(0.040mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.55mmol)NMM和229.6mg(0.519mmol)BOP，95μl(0.48mmol)N，N-二环己胺和73.2mg(0.206mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到36mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ7.66(t，2);7.03-7.51(m，14);
5.12(m，4);3.86-4.21(m，5);
3.26(m，1);2.64-2.95(m，4);
2.50(s，6);2.00(m，2);
0.82(m，12).
MSm/e 780(M 2).
实施例301，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3，3-二甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用138.9mg(0.439mmol)2(S)-N-(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基]-3，3-二甲基丁酸，4.8mg(0.036mmol)HOBT·H2O，54.5μl(0.496mmol)NMM和212.0mg(0.479mmol)BOP，86μl(0.43mmol)N，N-二环己胺和71.1mg(0.200mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到50mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.28(d，2);7.98(d，2);7.89(d，2);
7.73(t，2);7.55(m，4);
6.97-7.27(m，10);5.32(m，4);
4.29(m，2);4.18(s，1);4.03(m，1);
3.91(s，1);3.29(m，1);
2.66-2.97(m，4);0.97(s，9);
0.94(s，9).
MSm/e 879(M 1).
元素分析 C52H58N6O7计算值C，71.04;H，6.65;N，9.56;
实测值C，70.84;H，6.57;N，9.39.
实施例311，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基]-3，4-顺环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用112.3mg(0.423mmol)2(S)-N-[[N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3，3-二甲基戊酸，6.5mg(0.048mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.55mmol)NMM和212.8mg(0.481mmol)BOP，85μl(0.43mmol)N，N-二环己胺和67.2mg(0.189mmol)制备例1G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用二乙醚重结晶得到69mg所需标题产物。
NMR(d6-DMSO)δ8.43(s，2);8.25(d，1);8.03(d，1);
7.72(t，2);6.94-7.31(m，14);
6.70(m，2);6.30(m，1);6.14(d，1);
4.32(m，3);3.87-4.09(m，4);
2.61-3.05(m，6);1.57(m，2);
1.21(m，2);0.91(m，2);
0.58-0.79(m，12).
MSm/e 777(M 1).
实施例321，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用129.7mg(0.430mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，5.1mg(0.038mmol)HOBT·H2O，51μl(0.47mmol)NMM和199.9mg(0.452mmol)BOP，52.0μl(0.261mmol)N，N-二环己胺和54.8mg(0.120mmol)制备例2G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到16mg所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.67(m，3);6.70-7.81(m，25);
6.33(m，2);4.03-4.70(m，8);
3.67(m，1);3.29(m，1);
2.72-3.08(m，10);1.43-1.87(m，4);
0.82(m，6).
MSm/e 948(M ).
元素分析 C58H60N8O5计算值C，73.39;H，6.37;N，11.80;
实测值C，73.15;H，6.43;N，11.60.
实施例331，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二[N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用136.8mg(0.490mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3-甲基戊酸，5.6mg(0.041mmol)HOBT·H2O，55μl(0.50mmol)NMM和237.1mg(0.536mmol)BOP，55.0μl(0.276mmol)N，N-二环己胺和57.4mg(0.126mmol)制备例2G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到40mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.46(d，2);7.10-7.87(m，21);
6.62(d，1);6.08(m，2);
4.28-4.63(m，7);4.16(s，2);
3.34(s，1);2.97(m，10);1.86(m，2);
1.39(m，2);1.10(m，2);0.85(m，12).
MSm/e 904(M ).
元素分析 C54H64N8O5计算值C，71.66;H，7.13;N，12.38;
实测值C，71.48;H，7.12;N，12.08.
实施例341，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用77.9mg(0.310mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，5.2mg(0.038mmol)HOBT·H2O，40μl(0.37mmol)NMM和152.0mg(0.344mmol)BOP，55.0μl(0.276mmol)N，N-二环己胺和57.2mg(0.126mmol)制备例2G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到13mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.49(m，2);7.01-7.79(m，20);
6.85(d，1);6.56(d，1);5.96(m，2);
3.78-4.64(m，8);3.58(s，1);
3.37(s，1);2.71-3.12(m，10);
1.43-1.89(m，4);0.84(m，6).
MSm/e 850(M 2).
实施例351，6-二萘-2-基硫-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷基本上按实施例1所述方法，使用58.4mg(0.232mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，4.5mg(0.033mmol)HOBT·H2O，30μl(0.27mmol)NMM和111.2mg(0.251mmol)BOP，38.0μl(0.191mmol)N，N-二环己胺和49.1mg(0.0866mmol)制备例3G标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到52.4mg白色固体状所需标题产物。
NMR(CDCl3)δ8.48(m，2);8.13(s，1);7.96(s，1);
6.55-7.83(m，20);6.28(m，1);
6.14(m，1);4.36-4.69(m，4);4.25(m，2);
3.75(m，1);3.52(m，3);3.18(m，2);
3.07(dd，1);2.98(m，7);1.87(m，2);
1.69(m，2);0.93(t，6).
MSm/e 912(M 1).
元素分析 C50H56N8O5S2计算值C，65.77;H，6.18;N，12.27;
实测值C，65.75;H，6.17;N，12.03.
实施例361，8-二苯基-3(S)，6(S)-二[N-[2(S)-N-(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基]-3-甲基丁酰基]氨基]-4，5-顺-环氧辛烷基本上按实施例1所述方法，使用262mg(1.04mmol)2(S)-N-[(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基]-3-甲基丁酸，14mg(0.10mmol)HOBT·H2O，115μl(1.04mmol)NMM和462mg(1.04mmol)BOP，103μl(0.522mmol)N，N-二环己胺和100mg(0.261mmol)制备例4标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的55%乙腈/25%甲醇/20%水)得到101mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.4(s，2);7.7(t，4);7.40(m，2);
7.10(m，10);5.18(m，4);3.90(m，4);
2.95(m，2);2.60(m，4);2.05(m，4);
1.75(m，2);0.95(m，12).
MSm/e 778(M ).
元素分析 C44H54N6O7计算值C，67.85;H，6.99;N，10.79;
实测值C，68.07;H，7.05;N，10.65.
实施例371，10-二苯基-4(S)，7(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-5，6-顺-环氧癸烷基本上按实施例1所述方法，使用128mg(0.508mmol)2(S)-N-[[N-(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，7mg(0.05mmol)HOBT·H2O，60μl(0.53mmol)NMM和225mg(0.508mmol)BOP，92μl(0.46mmol)N，N-二环己胺和95mg(0.23mmol)制备例5标题中间体制备了标题化合物。将所得物用反相HPLC纯化(用含0.5%乙酸铵的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到110mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.45(br.s，2);7.75(t，2);
7.25(m，4);7.13(m，10);4.55(AB，4);
4.35(m，1);4.15(m，2);3.98(m，1);
3.85(m，1);3.35(m，1);2.95(s，6);
2.55(m，4);1.80(m，4);1.60(m，8);
0.96(m，6).
MSm/e 806(M 2).
实施例381，10-二苯基-4(S)，7(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-5，6-顺-环氧癸烷基本上按实施例1所述方法，使用145mg(0.480mmol)2(S)-N-[[N-(甲基)-N-(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，6.5mg(0.048mmol)HOBT·H2O，53μl(0.48mmol)NMM和212mg(0.480mmol)BOP，87μl(0.44mmol)N，N-二环己胺和95mg(0.23mmol)制备例5的标题中间体制备了标题化合物。将所得物用柱色谱法纯化(用乙酸乙酯作洗脱剂)得到125mg所需标题产物。
NMR(CD3OD)δ8.2(m，2);7.95(m，2);7.83(m，2);
7.72(t，2);7.55(t，2);7.40(d，2);
7.10(m，10);4.70(m，4);4.40(t，1);
4.15(m，2);3.98(m，1);3.85(m，1);
3.38(m，1);3.02(s，3);2.97(s，3);
2.55(m，4);1.80(m，4);1.58(m，8);
0.97(t，6).
如上所述，本发明化合物可用于抑制HIV蛋白酶，这种蛋白酶是一种与病毒组分的产生和组合有关的酶。本发明一个实例是提供了一种治疗或抑制HIV感染的方法，该方法包括给予所需的灵长类动物有效剂量的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐。本发明的另一实施例是提供一种治疗或预防爱滋病的方法，它包括给需要的灵长类动物有效量的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐。本发明再一实例是一种抑制HIV复制的方法，它包括将式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐给予HIV感染细胞或对HIV感染敏感的细胞。
这里所用术语“有效量”，指能抑制介入病毒成分的产生和组合的HIV蛋白酶的本发明化合物的量。在适当情况下，本方法预期的HIV蛋白酶的抑制作用包括治疗性或预防性处理。当然，为获得治疗性或预防性处理效果，按本发明所给化合物的具体剂量是由病例所处的具体环境决定的。例如包括所给的化合物、给药途径、治疗条件和被治疗个体。典型的日剂量为每千克体重0.01mg至50mg本发明活性化合物。通常优选的日剂量为0.05mg/kg至20mg/kg，理想的剂量为0.1mg/kg至10mg/kg。
本发明化合物可通过包括口服、直肠、皮肤、皮下、静脉、肌肉和鼻内等不同途径给药。本发明化合物在给药前最好配成制剂。因此，本发明的另一实例是提供一种药物制剂，它包括有效量的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐，以及药物上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
这种制剂中的活性成分为制剂重量的0.1%至99.9%。“药学上可接受的”载体、稀释剂或赋形剂应与制剂的其它组分相容，并对其接受者无害。
本发明的药物制剂可通过已知的方法用已知的和容易得到的组分制备。在制备本发明组合物时，活性成分通常与载体混合，或被载体稀释，或包含在胶囊、扁囊、纸或其它容器等形式的载体中。当载体用作稀释剂时，它可以是固体、半固体或液体物质，这些物质用作活性成分的载体、赋形剂或介质。于是组合物可以是片剂丸剂、粉剂、锭剂、小药囊剂、扁囊剂、酏剂、悬浮液、乳浊液、溶液、糖浆、气溶胶(作为固体或在液体介质中)、含例如重量不超过10%活性成分的软膏剂、软和硬的明胶囊、栓剂、灭菌注射液、灭菌包装的粉剂等等。
以下制剂实施例仅用于说明本发明，并不是对本发明的范围作任何限制。术语“活性成分”指式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐。
制剂1硬明胶胶囊用以下成分制备量(mg/胶囊)活性成分250干淀粉200硬脂酸镁10总量460mg制剂2由以下成分制备片剂量(mg/胶囊)活性成分250微晶纤维素400
二氧化硅微粒10硬脂酸5总量665mg将以上成分混合后压制成每片重665mg的片剂。
制剂3气溶胶溶液由以下成分制备重量活性成分0.25甲醇25.75推进剂22(氯二氟甲烷)70.00总量100.00活性化合物与乙醇混合，将混合物加入一部分推进剂22，冷至-30℃，移到一种充填装置内，将所需量装入一不锈钢容器，用剩余推进剂稀释。随后装上容器的阀装置。
制剂4含60mg活性成分的片剂制备如下活性成分60mg淀粉45mg微晶纤维素35mg聚乙烯吡咯烷酮(10%水溶液)4mg羧甲基淀粉钠4.5mg硬脂酸镁0.5mg
滑石1mg总量150mg将活性成分、淀粉及纤维素通过45目U.S.筛并充分混合。将含聚乙烯吡咯烷酮的水溶液与粉状所得物混合后，再将混合物通过14目U.S.筛。将产生的颗粒在50℃下干燥并通过18目U.S.筛。将事先通过60目U.S.筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石加到颗粒中，混合后由制片机压制成每片重150mg的片剂。
制剂5各含80mg活性成分的胶囊制备如下活性成分80mg淀粉59mg微晶纤维素59mg硬脂酸镁2mg总量200mg将活性成分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合通过45目U.S.筛，以200mg量填入硬明胶胶囊中。
制剂6各含活性成分225mg的栓剂制备如下活性成分225mg饱和脂肪酸甘油酯2，000mg总量2，225mg将活性成分通过60目U.S.筛，并悬浮在事先用所需要最少热量熔化的饱和脂肪酸甘油脂中。然后将混合物倾入标称为2g量的栓剂模具中，使之冷却。
制剂7每5ml剂量含50mg活性成分的悬浮液，其制备如下活性成分50mg羧甲基纤维素钠50mg糖浆1.25ml苯甲酸溶液0.10ml调味剂q.v.
着色剂q.v.
纯水加至总量5ml将活性成分通过45目U.S.筛与羧甲基纤维素钠及糖浆混合成均匀糊状。将苯甲酸溶液，调味剂和着色剂用部分水稀释，搅拌。随后加入足量水以达到所需体积。
制剂8静脉内制剂制备如下活性成分100mg等渗盐水1000ml以上成分的溶液通常以每分钟1ml的速度静脉注射。
进行以下实验(HIV-1蛋白酶抑制剂荧光检测)以证明本发明化合物抑制HIV蛋白酶的能力。
本文使用的缩写定义如下BSA-牛血清清蛋白BOC-叔丁氧羰基BrZ-2-溴苄氧羰基2-ClZ-2-氯苄氧羰基
OCC-二环己基碳化二亚胺DIEA-二异丙基乙基胺DTT-二硫苏糖醇EDTA-亚乙基二胺四乙酸FITC-异硫氨基甲酰基荧光素HEPES-4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸MES-4吗啉乙磺酸PAM-苯基乙酰亚胺甲基TAPS-3-[三(羟甲基)甲基]氨基-1-磺酸TRIS-三(羟甲基)氨基甲烷TOS-对甲苯磺酰基(tosyl)Ⅰ.蛋白酶和Gag部分的制备A.大肠杆菌K12L507/PHP10D的培养大肠杆菌K12L507/PHP10D的亲液胶体从NorthernRegional研究室，Peoria.Illinois61604获得，入藏登记号为NRRLB-18560(1989年11月14日存入)。将亲液胶体倾入含10mlLB介质(每升含10gBacto-胰蛋白胨，5gBacto-酵母提取物及10gNaCl;pH调至7.5，在32℃时培养过夜)的试管中。
将少部分过夜培养物置于含12.5μg/ml四环素的LB-琼脂(含15g/lBacto-琼脂的LB培养基上)板上，以得到大肠杆菌K12L507/PHP10D的单克隆分离物。将得到的单克隆接种在含四环素12.5μg/ml的10mlLB介质中，并在32℃剧烈振荡条件下培养至培养物达到中等对数(mid-log)相。
B.大肠杆菌K12L507/PHPGAG的培养大肠杆菌K12L507/PHPGAG的亲液胶体从NRRL得到，入藏登记号为NRRLB-18561(1989年11月14日存入)。基本按以上步骤A中大肠杆菌K12L507/PHP10D的方法分离出纯化的大肠杆菌K12L507/PHPGAG克隆，用作培养基的接种物使该培养物增至中等对数相。
C.蛋白酶成分的制备大肠杆菌K12L507/PHP10D培养物在含四环素12.5μg/l的LB介质中在32℃下增至中等对数相。迅速将培养温度升至40℃以诱导基因表达，允许细胞在此温度下生长2.5小时，然后迅速将培养在冰上冷却，将细胞离心，使细胞粒再悬浮于20ml(50mmol，其中含1mmolEDTA，1mmolDTT、1mmolPMSF和10%甘油醇)的MES缓冲液(pH6.0)(“缓冲液A”)中。应用FischerModel300Dismembrator和微探针通过声处理将细胞溶解。然后在27，000×9下离心，将上清液用缓冲液A稀释至总量60ml，将其装入已用缓冲液A平衡的2.0×19cm的QAE-琼脂糖柱(1ml/min，4℃)中。柱被同溶剂洗涤180分钟后，在缓冲液A中用0-1.0MNaCl梯度洗脱液洗脱120分钟。使用Margolinetal.，Biochem.Biophys.Res.Commun.，167，554-560(1990)中描述的合成肽SQNYPIV通过HPLC来测定酶的活性;同时测定P1肽(SQNY)的产生。
将活性成分合并制成1.2M硫酸铵溶液，并加入用含1.2M硫酸铵的缓冲液A平衡的2.0×18cm己基琼脂糖柱中，将样品在4℃下以1ml/min流速加入，用平衡缓冲液洗涤240分钟(1ml/min)，然后以同样流速用含1.2-0M硫酸铵的缓冲液A的反线性梯度洗脱120分钟。然后在缓冲液A中同溶剂洗涤柱120分钟。
将活性成分合并，并使用搅拌细胞的Amicon和YM-10膜浓缩至10ml，然后用于已在缓冲液A中平衡的Monos阳离子交换柱(1.0×10cm)。将样品在25℃时以1ml/min流速装入。同溶剂洗涤30分钟后，用在缓冲液A中的0-0.45MNaCl线性梯度洗脱蛋白酶40分钟以上，用含0.45MNaCl的缓冲液A同溶剂洗涤柱30分钟。
将活性成分合并，并使用搅拌细胞的Amicon和YM-10膜浓缩至200μl，然后将蛋白酶引入用含0.1MNaCl缓冲液A平衡过的SuperoseG号排阻柱。用此缓冲液以0.5ml/min流速同溶剂洗涤柱，随后将HIV蛋白酶以单峰洗脱出来。
QAE-琼脂糖和己基琼脂糖从Sigma化学公司购得，Superose6和Monos从Pharmacia购得，缓冲剂和试剂从Sigma得到。
D.Gag成分的制备以类似的方式，将大肠杆菌K 12 L 507/PHP GAG在32℃培养生长至中等对数相，然后升至40℃约4-5小时。将培养物在冰上冷却、离心，然后将细胞粒再悬浮于含5mg/ml溶解酶的8ml溶解缓冲液中。溶解缓冲液由50mM Tris-HCl(pH7.8)、5mM EDTA、1 mM DTT、100 mM NaCl、1μg/ml E 64和2μg/ml质子惰性溶剂组成。将培养物在4℃培养约30-60分钟后，在Branson 细胞破裂器中以60%功率进行简单的处理，进行三次20秒的破裂并在间歇时冷却，然后培养物以15，000×g离心。将含有未加工的Gag蛋白质的上清液在葡聚糖G-50柱上通过颗粒排阻色谱法部分纯化，并在-20℃储存在50%甘油醇和溶解缓冲液中。
Ⅱ.底物的制备Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(Na-FITC)-OH
A.Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH的制备被保护的肽树脂Na-Boc-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr(BrZ)-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(2-Clz)-OCH2-PAM-树脂在Advanced Chemtech Model 200型肽合成器中从1.5mmol规模应用标准双偶合原胶合成。用50%三氟乙酸的二氯甲烷去掉氨基端的Boc基团、用5%的二(异丙基)乙胺(DIEA)的二氯甲烷中和得到的树脂，然后将在20ml二甲亚砜中的1.1g(4.5mmol)生物素加入肽树脂中，随后加入4.5mmol二环己基碳化二亚胺(DCC)的9ml二氯甲烷溶液。用11ml二氯甲烷将所得反应混合物稀释至总体积40ml，令其反应约5小时，浓缩反应溶液，依次用二甲基亚砜，二甲基甲酰胺和二氯甲烷洗涤树脂并用5% DIEA的二氯甲烷溶液中和。重复此反应两次，每次反应时间持续12小时。树脂的茚三酮分析表明生物素与甘氨酸氨基充分反应。用二甲基甲酰胺和二氯甲烷充分洗涤最后的肽树脂并干燥得到4.3g(98%)。
B.去保护使用50ml氢氟酸/间甲苯酚溶液在0℃下反应1小时使肽去保护并与树脂分离，用真空蒸馏去除氢氟酸后，用100ml二乙醚将间甲苯酚从反应混合物中萃取出。再将肽溶解在50%乙酸水溶液中，冷冻并冷冻干燥得到2.14g。
C.纯化将Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH粗品溶于含1%三氟乙酸的5%乙腈(水)溶液200ml中，再通过0.22微米过滤器过滤。所得溶液用于以相同缓冲液平衡的2.2×25Cm十八烷基硅胶(VydacC-18)反相柱上。用7.5-25%乙腈的855等分线性梯度以2ml/分的速度洗脱肽并收集组分。使用分析性HPLC来分析这些组分，该分析是在4.6×250mmVydacC-18柱上用相似的缓冲条件进行。将含有所需物质的组分合并、冷冻，并冷冻干燥得到1.206g产物(62%)。
分离出的Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH的氨基酸分析得出以下比率Asn 1.1;Ser 0.96;Gln 1.1;Por 1.1;Gly 2.1;Val 0.80;Ile 0.78;Tyr 1.1;Lys 1.1;与理论相符。快速原子轰击质谱得出分子离子质量峰1288，与理论相符。
D.标记应用Pandex分析将纯化肽的C-末端用荧光发光剂标记，将Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH(1.206g，0.936mmol)溶解在100ml 0.1 M硼酸钠中，pH9.5。然后将3g(7.7mmol)异硫氰酸荧光素的15ml二甲基亚砜溶液在两小时内以10等分加入反应混合物中。令所得混合物在最后添加完后反应1小时。用5 N HCl将溶液调至pH3，形成沉淀物并将其离心除去。
然后使用5N氢氧化钠将肽溶液调至pH7.8，再加入0.1M乙酸铵，pH7.5，稀释到总体积200ml。所得物溶液再通过0.22微米过滤器过滤，并加到已用5%乙腈的0.1M乙酸铵(pH7.5)平衡过的2.2×25cmVydacC-18柱中，用5-25%乙腈的855等分线性梯度以2ml/分的速度将肽从柱中洗脱出来并收集组分。用分析性HPLC分析组分。将含所需产品的组分合并，冷冻并冷冻干燥得到190.2mg产物(12%)。
纯化肽的氨基酸分析得出以下比率Asn1.1;Ser1.0;Gln1.1;Por1.1;Gly2.1;Val0.8;Ile0.8;Tyr1.1;Lys1.0与理论相符。快速原子轰击质谱给出分子离子质量峰1678，与理论相符。
E.荧光HIV-1蛋白酶抑制剂的检测应用以下缓冲液和溶液进行荧光HIV-1蛋白酶抑制剂的检测MES-ALB缓冲液0.05M4-吗啉乙烷磺酸，pH5.50.02MMaCl0.002MEDTA0.001MDTT1.0mg/mlBSATBSA缓冲液0.02MTRIS0.15MNaCl1.0mg/mlBSA抗生物素蛋白涂珠的溶液0.1%荧光抗生物素蛋白颗粒的(抗生物素蛋白附于0.6-0.8微米直径的聚苯乙烯颗粒上)TBSA缓冲液溶液。
酶溶液27IU/ml纯化HIV-1蛋白酶溶于MES-ALB缓冲液中(1IU等于37℃每分钟水解1μmmol底物所需酶的量)。
向有96个圆底井板的每一井中加入20μl酶溶液，再加入10μl待测化合物的20%含水二甲亚砜溶液。按上述方法得到纯化HIV-1蛋白酶。所得溶液在室温下培养1小时后，向每井中加入20μl含底物，Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(Na-FITC)-OH和MES-ALB缓冲液的溶液(1.5μl/ml)。该溶液在室温下培养16小时后，每井用150μl MES-ALB缓冲液稀释。
向第二个96圆底井Pandex板的每一井中，加入25μl抗生物素蛋白涂珠溶液，然后向每井中加入前面制备的稀释培养液25μl，溶液完全混合后，将该板装入Pandex
仪中，洗涤，抽空并读数。通过在485nm波长处激发而检测样品，读出在535nm波长处所得的表荧光结果。
在荧光分析中得到的本发明化合物的IC50结果在下表1中列出所有值用一阳性对照标化，它是[1S-(1R＊，4R＊，5S＊)]-N-(1-(2-氨基-2-氧代乙基)-2-氧代-3-氮杂-4-苯甲基-5-羟基-6-(2-(1-叔丁氨基-1-氧代甲基)苯基)己基)-2-喹啉基甲酰胺。
表1式Ⅰ化合物的抑制活性荧光检测IC50实施例号ng/ml对照1.01 159*210.4342004 51*5n.t.
6654768108 262*969.5101.811 195*12139313224514183152416 IC32(1000)17 20.5*18 7.1*19 150*205562158223962349724131
25 IC40(1000)26 IC23(1000)2726.7288172930.5303363125.232 172*33 IC25(1000)34 IC34(1000)35 IC23(1000)36 IC26(1000)371663821.5注＊表示平均IC50n.t.表示未测定
权利要求
1.式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-；q是0，1，2或3；R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基；X是
其中R1是芳基，环烷基，杂环基或不饱和杂环基；R2是氢或C1-C4烷基；R3是氨基酸侧链，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3，氰基(C1-C4)烷基，不饱和杂环(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-(CH2)s-A°-(CH2)r-R4或-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中s是1，2，3或4；r是0，1，2或3；A°是-O-，-NH-或-S-；R4是C1-C6烷基，环烷基，芳基，杂环基，或不饱和杂环基；R5是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基；j是0，1，2，3或4；k是0或1；且Y是-O-，-N(R2)-或-S-。
2.按照权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中X是
R是芳基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-S-;q是0;R0是芳基;R1是芳基或不饱和杂环;j是0，1或2;Y是-O-或-N(R2)-;k是1;R2是氢或甲基;R3是氨基酸侧链，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中r是0，1，2或3;且R5是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基。
3.按照权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐，其中R是苯基，苯硫基，萘基，萘硫基，苯乙基或萘乙基;R1是苯基，萘基或喹啉基;j是1;R2是氢;R3是氨基酸侧链，-CH2CH3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的结构，其中r是0，1，2或3;R5是芳基或不饱和杂环基。
4.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷;1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷;1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-2(S)-N[(8-氟喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-顺-环氧己烷;1，10-二苯基-4(S)，7(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-5，6-顺-环氧癸烷;或它们药学上可接受的盐。
5.一种药物制剂，它包括如权利要求1至4中任一项所要求授权的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
6.权利要求1至4中任一项所要求授权的化合物，用作抗病毒剂。
7.权利要求1至中任一项所要求授权的化合物用于抑制人类免疫缺陷病毒的复制。
8.权利要求1至中任一项所要求授权的化合物用作人类免疫缺陷病毒蛋白酶抑制剂。
9.式Ⅰa化合物
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-;q是0，1，2或3;R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基;并且J是卤素，甲磺酸基，苯磺酸基，甲苯磺酸基或乙酰氧基。
10.式Ⅰb化合物
其中R是C1-C6烷基，环烷基，杂环基，不饱和杂环基，芳基，环烷基(C1-C4)烷基，杂环基(C1-C4)烷基，不饱和杂环基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的结构，其中A是-O-，-NH-或-S-;q是0，1，2或3;并且R0是环烷基，芳基，杂环基或不饱和杂环基。
11.一种制备权利要求1至4中任一项所要求授权的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐的方法，它包括(a)将下列的式Ⅰa化合物或式Ⅰb化合物或其药学上可接受的盐
(其中R和J如上定义)，在偶合剂的存在下与下式的羧酸化合物反应
(其中R1，j，k，R2和R3如上定义);和(b)任意地将所得到的产物转化为其药学上可接受的盐。
全文摘要
本发明提供了新的HIV蛋白酶抑制剂、含有这些化合物的药物制剂及它们的使用方法。
文档编号C07D405/14GK1082035SQ9310742
公开日1994年2月16日 申请日期1993年6月19日 优先权日1992年6月19日
发明者J·E·门罗, W·J·霍恩贝克 申请人:伊莱利利公司
再多了解一些
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