抗体偶联多肽分子及其用途的制作方法

本技术属于生物医药，具体地，本技术涉及一种多肽分子、抗体偶联多肽分子及其用途。

背景技术：

1、代谢性疾病如糖尿病、肥胖等具有并发性和异质性的特点，发病机制复杂，单一药物、单一靶点的治疗方案疗效有限，难以满足临床多维度治疗需求，因此开发多靶点协同作用的治疗药物成为当前领域的研究热点。

2、胰高血糖素样肽-1（glp-1）是一种由小肠l细胞分泌的内源性肠促胰岛素多肽类激素，在胰岛中可发挥保护胰岛β细胞的作用，以葡萄糖依赖的方式刺激胰岛β细胞释放胰岛素，能有效控制餐后血糖，且发生低血糖的风险较低；同时，glp-1还具有抑制食欲与延缓胃排空的作用，可有效改善机体体重，基于其上述生理功能，glp-1受体激动剂（如司美格鲁肽与替尔泊肽）已广泛应用于肥胖及糖尿病的临床治疗。

3、胰高血糖素（gcg）是一种由胰脏胰岛α-细胞分泌的多肽类激素，主要响应于空腹或急性低血糖，通过刺激肝脏糖异生和糖原分解升高血糖；同时，gcg能够影响机体代谢和产热过程，研究表明，外源性给予gcg能够减少肝脏三酰甘油（tg）合成并促进脂质分解，其促脂分解代谢、机体产热及抑制摄食等作用均对肥胖患者控制体重具有积极意义。

4、葡萄糖依赖性促胰岛素分泌肽（gip）是一种由小肠k细胞分泌的多肽类激素，其生理作用包括以葡萄糖依赖方式促进胰岛素分泌、调节脂质异体贮存等；尽管gip激动剂在2型糖尿病患者中会表现出不敏感的情况，但相关研究证实，糖尿病患者在血糖水平下降后，可恢复对gip的敏感性，为其在代谢性疾病治疗中的应用提供了理论基础。

5、gdf-8（全称growth differentiation factor 8，也称myostatin或mstn）是一种主要由骨骼肌细胞表达的蛋白质，属于转化生长因子-β（tgf-β）超家族成员，其核心功能是通过抑制肌肉细胞的增殖来控制肌肉体积，导致肌肉质量减少，进而调控骨骼肌的生长，是骨骼肌生长的特异性负调节因子，其相关调控机制为肌肉生长相关疾病的治疗提供了重要靶点。

6、目前，glp-1受体激动剂（如司美格鲁肽与替尔泊肽）虽能通过抑制食欲实现显著减重效果，但在减重过程中会伴随明显的肌肉流失问题，临床数据显示，司美格鲁肽与替尔泊肽单用时，其瘦体重丢失占总丢失体重的30%左右。此外，该类药物存在明显的药物依赖性，需持续使用，且停药后体重反弹率较高，传统glp-1类药物停药后1年的反弹率可达40%-60%。更为棘手的是，肥胖常与肌少症合并发生，例如在老年患者中，肌少性肥胖的占比超过30%，传统glp-1类药物治疗易使患者陷入“减重-肌少-代谢降低-反弹”的恶性循环，无法满足肌肉与脂肪协同调控的临床治疗需求。

7、为弥补glp-1受体激动剂的上述不足，抗体药物如bimagrumab逐渐进入研究视野，该类药物通过靶向调控肌肉生长，不仅能够直接促进肌肉合成、改善胰岛素敏感性，还能与glp-1类药物联用，实现“减脂不减肌”的双重治疗效应，从而改善减重质量，降低停药后体重反弹的风险。相关临床研究也证实，mstn（即gdf-8）抑制剂与glp-1药物联用，可在增肌保肌的同时增加能量消耗、减少人体脂肪，其中apitegromab与替尔泊肽联用可多保存54.9%的瘦体重，trevogrumab与司美格鲁肽联用可将瘦体重丢失占比从34.5%控制在17%左右，进一步验证了该联用方案的有效性。

8、现有技术中，wo2022271867a1与wo2024064842a1虽已分别公开联合施用glp-1类多肽与gdf8抗体的技术方案，但该方案中两个活性成分是分开给药的，存在给药流程繁琐、两个活性成分在体内的药代动力学特性难以同步、协同作用效果难以精准调控等问题，无法充分发挥二者的协同治疗优势，仍难以满足代谢性疾病（如肥胖、糖尿病）的高效、便捷治疗需求。因此，开发一种能够将glp-1类多肽与gdf8相关活性成分整合为单一分子、可实现单次给药且能充分发挥二者协同效应的治疗分子，成为当前本领域亟待解决的技术问题。

技术实现思路

1、本技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题。为此，本技术提供了一种glp-1类受体激动剂多肽分子以及一种抗体偶联多肽分子，该分子可用于2型糖尿病、肥胖症、非酒精性肝病/非酒精性脂肪性肝炎及其他代谢紊乱类疾病的治疗。

2、本技术是基于发明人的下列发现而完成的：

3、在本技术的第一方面，本技术提供了一种glp-1类受体激动剂多肽分子，其具有式(i)所示的结构：

4、x1-aib-x3gtx6tsdysix13ldx16x17x18x19x20x21fx23x24x25lx27x28ggpssgappps(i)；

5、其中：

6、x1为y或h；

7、x3为q或e；

8、x6为αmef(2f)或f；

9、x13为l、αmel或aib；

10、x16为e、k或r；

11、x17为k、i或q；

12、x18为r或a；

13、x19为q或a；

14、x20为aib、r、k或q；

15、x21为a或e；

16、x23为i或v；

17、x24为e或q；

18、x25为y或w；

19、x27为l或i；

20、x28为a或e。

21、本技术的glp-1类受体激动剂多肽分子为glp-1单受体激动剂、glp-1/gip双受体激动剂、glp-1/gcg/gip三受体激动剂中的一种，具有良好的体内外活性。根据本技术的实施例，所述glp-1类受体激动剂多肽分子的c末端酰胺化。根据本技术的实施例，所述glp-1类受体激动剂多肽分子的c末端未酰胺化。

22、在本技术第二个方面，本技术提供一种抗体偶联多肽分子，具体如下：

23、一个方面，本技术提供一种抗体偶联多肽分子，其包括靶向抗体或其功能片段、以及glp-1类受体激动剂。

24、另一方面，本技术提供一种抗体偶联多肽分子，其包含靶向抗体或其功能片段和glp-1类受体激动剂，所述抗体或其功能片段靶向激活素2型受体（actrii）、生长分化因子（gdf-8）、瘦素受体（lepr）、pcsk9及大麻素受体（cb1）中的一种。

25、又一方面，本技术提供一种抗体偶联多肽分子，其包含latent gdf-8抗体和glp-1类受体激动剂；

26、所述的glp-1类受体激动剂选自权利要求1所述的glp-1类受体激动剂多肽分子；

27、所述latent gdf-8抗体包括：重链可变区的互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3，以及轻链可变区的互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3；

28、其中，所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2和lcdr3选自以下任一项：

29、d1）所述hcdr1、hcdr2和hcdr3的氨基酸序列依次如seq id no:1、seq id no:2、seq id no:3所示，所述lcdr1、lcdr2和lcdr3的氨基酸序列依次如seq id no:4、seq idno:5、seq id no:6所示；

30、d2）所述hcdr1、hcdr2和hcdr3的氨基酸序列依次如seq id no:7、seq id no:8、seq id no:9所示，所述lcdr1、lcdr2和lcdr3的氨基酸序列依次如seq id no:10、seq idno:11、seq id no:12所示。

31、又一方面，本技术提供一种抗体偶联多肽分子，其包含latent gdf-8抗体、连接头和glp-1类受体激动剂；所述latent gdf-8抗体和glp-1类受体激动剂具有如下任一组：

32、

33、其中，-c(o)-ch2-*表示乙酰基单元，-c(o)-ch2-*中的*端用于连接所述latentgdf-8抗体，-nh2表示与-c(o)-ch2-*相连的氨基酸k中的羧基上的羟基被-nh2取代；

34、所述latent gdf-8抗体ab1包括重链可变区的互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3，以及轻链可变区的互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3，所述hcdr1、hcdr2和hcdr3的氨基酸序列依次如seq id no:1、seq id no:2、seq id no:3所示，所述lcdr1、lcdr2和lcdr3的氨基酸序列依次如seq id no:4、seq id no:5、seq id no:6所示；

35、所述latent gdf-8抗体ab1包括重链可变区的互补决定区hcdr1、hcdr2和hcdr3，以及轻链可变区的互补决定区lcdr1、lcdr2和lcdr3，所述hcdr1、hcdr2和hcdr3的氨基酸序列依次如seq id no:7、seq id no:8、seq id no:9所示，所述lcdr1、lcdr2和lcdr3的氨基酸序列依次如seq id no:10、seq id no:11、seq id no:12所示。

36、本技术通过将glp-1类受体激动剂多肽偶联至抗体上，协同作用于多个靶点，达到减脂增肌或血脂改善等效果，还具备改善血糖、体重及肝脂肪等作用。此外，还可以改善多肽在体内的稳定性，达到月制剂给药要求。

37、在本技术的第三方面，本技术提出了一种组合物。根据本技术的实施例，组合物包括第二方面所述的抗体偶联多肽分子。本技术的组合物可有效预防或治疗代谢紊乱相关疾病，尤其是肥胖症、糖尿病、血脂异常相关疾病、脂肪肝病、代谢综合征和非酒精性脂肪性肝病等疾病。

38、在本技术的第四方面，本技术提供第二方面所述的抗体偶联多肽分子或第三方面所述的组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防代谢紊乱相关疾病。

39、本技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本技术的实践了解到。