抗Folr2抗体及抗体偶联药物及其制备方法与应用

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种抗folr2抗体及靶向folr2阳性巨噬细胞的抗体偶联药物及其制备方法与应用。

背景技术：

1、肾脏是人体代谢排泄、内环境稳态调控的核心器官，当遭受缺血再灌注、尿路梗阻、毒素刺激等急性或慢性损伤时，会触发一系列复杂的炎症、修复及病理性重构反应。其中，巨噬细胞的异常激活与极性分化，是决定肾脏损伤后组织修复或纤维化进展的核心关键环节。正常生理状态下，肾脏常驻f4/80high巨噬细胞可维持肾脏组织稳态；而肾脏发生损伤后，外周单核细胞会大量浸润肾组织，并在局部微环境信号诱导下分化为功能异质性的巨噬细胞亚群，介导炎症放大与纤维化进程。

2、叶酸受体2（folr2）选择性高表达于活化巨噬细胞，在急性肾损伤（aki）迁延进展为慢性肾脏病（ckd）进程中，folr2阳性巨噬细胞持续释放促炎、促纤维化介质，驱动肾脏持续性损伤，是干预肾脏炎症和肾脏纤维化的关键靶点。现有folr2靶向治疗策略多集中于类风湿性关节炎、肿瘤相关巨噬细胞的干预，主要采用叶酸偶联药物、叶酸修饰纳米材料载体药物等形式。但叶酸小分子无亚型特异性，可结合肾脏正常上皮细胞高表达的folr1，极易造成正常肾组织损伤，无法实现肾间质folr2阳性巨噬细胞的精准靶向干预。本发明通过单个b细胞技术筛选获得特异性结合小鼠folr2胞外区的单克隆抗体，抗体偶联药物（adc）通过抗体与细胞毒性小分子共价偶联，能够特异性识别靶细胞并诱导靶细胞凋亡，实现致病细胞的清除。deruxtecan作为高效拓扑异构酶抑制剂，可干扰细胞dna复制与转录，诱导细胞凋亡，具备优异的细胞杀伤活性。目前尚无利用该抗folr2单抗构建靶向folr2阳性巨噬细胞的deruxtecan型adc用于肾脏疾病治疗的报道。同时，缺少适配该抗体、条件温和、重复性稳定的偶联工艺。

技术实现思路

1、本发明通过单个b细胞技术筛选获得高特异性、无folr1交叉反应的抗小鼠folr2单克隆抗体，经测序获得稳定的抗体轻重链可变区序列，基于该抗folr2单克隆抗体，开发一种靶向folr2阳性巨噬细胞的folr2-deruxtecan抗体偶联药物，并建立条件温和、稳定性高、重复性好的标准化低温偶联制备工艺，可特异性杀伤致病folr2阳性巨噬细胞。

2、基于以上研究，本发明提供了一种抗folr2单克隆抗体，包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区序列如seq id no:1所示，所述轻链可变区序列如seq id no:2所示。

3、本发明还提供了上述抗folr2单克隆抗体在制备folr2阳性细胞靶向药物中的应用。

4、本发明还提供了上述抗folr2单克隆抗体在制备检测folr2中的应用。

5、本发明还提供了上述抗folr2单克隆抗体在制备检测folr2阳性细胞中的应用。

6、本发明还提供了一种folr2抗体偶联药物，包括靶向结构域和细胞杀伤结构域，所述靶向结构域含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区序列如seq id no:1所示，所述轻链可变区序列如seq id no:2所示。

7、在一个具体实施方案中，所述细胞杀伤结构域为deruxtecan。

8、本发明还提供了上述folr2抗体偶联药物在制备治疗急性肾损伤、慢性肾脏病或急性肾损伤向慢性肾脏病转归的靶向治疗药物中的应用。

9、本发明的抗folr2单克隆抗体具有优异的亲和力常数和特异性，其制备的folr2抗体偶联药物可特异性靶向并清除肾组织folr2阳性巨噬细胞，能够有效抑制肾脏炎症浸润、减少细胞外基质异常沉积、缓解肾间质纤维化、重塑肾脏局部免疫微环境，可广泛应用于制备治疗急性肾损伤、慢性肾脏病及急性肾损伤向慢性肾脏病转归的靶向治疗药物。

1.一种抗folr2单克隆抗体，其特征在于，含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区序列如seq id no:1所示，所述轻链可变区序列如seq id no:2所示。

2.权利要求1所述的抗folr2单克隆抗体在制备folr2阳性细胞靶向药物中的应用。

3.权利要求1所述的抗folr2单克隆抗体在制备检测folr2中的应用。

4.权利要求1所述的抗folr2单克隆抗体在制备检测folr2阳性细胞中的应用。

5.一种folr2抗体偶联药物，其特征在于，包括靶向结构域和细胞杀伤结构域，所述靶向结构域含有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区序列如seq id no:1所示，所述轻链可变区序列如seq id no:2所示。

6.根据权利要求5所述的folr2抗体偶联药物，其特征在于，所述细胞杀伤结构域为deruxtecan。

7.权利要求5或6所述的folr2抗体偶联药物在制备治疗急性肾损伤、慢性肾脏病或急性肾损伤向慢性肾脏病转归的靶向治疗药物中的应用。