16-元大环内酯衍生物及其制备方法

专利名称：16-元大环内酯衍生物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及对革兰阳性菌和其他细菌有效的新的16-元大环内酯衍生物以及制备它们的新的方法。
由于可被口服给药以及具有低毒性，对例如革兰阳性菌，支原体和衣原体，有效的大环内酯抗菌素被看作临床上重要的抗菌药物。为了提高其临床疗效，各国的研究小组肯定都在对16-元大环内酯衍生物抗菌素进行研究。为了提高其体外抗菌活性和/或药物动力学指数，已通过在特殊位置上的羟基酰化而合成出数种16-元大环内酯的衍生物。特别地，由于与天然化合物相比其杰出的药物动力学特性和较小的苦味，麦迪霉素酯[JournalofAntibiotics，29(5)，536(1976)和JapaneseJournalofAntibiotics，35(6)，1462(1982)]已作为半合成16-元大环内酯抗菌素经常用于临床，主要是儿科领域。近来其衍生物的开发研究主要指向将取代氨基引入16-元大环内酯的内酯环[JournalofAntibiotics44(4)，448(1991)]，特殊羟基的脱氧[JournalofAntibiotics45(1)，144(1992)]或在药物动力学方面有意义的羟基的烷基化。16-元大环内酯抗菌素的优点在于(1)这类抗菌素很少产生抗药性;(2)它们与其他药物很少产生相互作用;(3)它们对肠道的影响很小;以及(4)它们在口服给药时的刺激作用小。由于这些特性，本发明已选择16-元大环内酯抗菌素作为研究课题并将研究工作指向通过合成化学和生物化学的方法筛选对各种革兰阳性菌有杰出的效果的化合物。
首先，本发明人已发现一种在16-元大环内酯3″-位叔碳羟基上引入甲基的方法，该方法可提高其体外抗菌活性，该方法取决于作为红霉素结构内糖L-二脱氧甲基已糖(Chladinose)的化学结构。Tatsuta等已报导了一种由与本发明人所提供的方法不同的糖基化方法制备的其他的3″-位羟基甲基化了的16-元大环内酯的合成[Chemistry Letters，769(1977)]。根据该报导，3″-O-甲基碳霉素B对于某些细菌，例如，耐酸细菌种，较碳霉素B显示出更高的抗菌活性。该报导所述的衍生物，其中3″-位羟基甲基化，在9-位具有一个羰基，一个sp2碳。到此为止未有报导涉及具有9-位sp3碳以及3″-位甲基化的叔碳羟基的16-元大环内酯衍生物。
第二，关于将16-元大环内酯9-位羰基还原为具有天然构型的羟基的微生物转化作用，其应用实例及因此所得的效果已由本发明者报导(EP-A-0595303)。为了弄清16-元大环内酯化合物结构间的相互关系，研究这些化合物的生物合成并分析其结构，存在着通过合成化学的方法[Journal of Organic Chemistry，39(16)，2474(1974);Journal of Antibiotics 34(12)，1577(1981)和ibid.，39(12)，1784(1986)]以及通过生物化学的方法[JP-A-50-126880;Journal of Antibiotics 32(7)，777(1979)，JP-A-54-8793;和Journal ofAntibiotics33(8)，911(1980)]将16-元大环内酯化合物9-位羰基还原为羟基的已知方法(这里使用的术语“JP-A”表示“未审查的公开了的日本专利申请”)。
第三，关于将连接于16-元大环内酯内酯环3-位羟基上的酰基特异性地裂解掉，形成游离羟基的微生物转化作用，本发明者已对其详细报导，其中包括对该转化反应的基质特异性的研究[EP-A-526，906(1993)，U.S.专利5，219，736(1993)及JP-A-6-16691]。另一方面，由枯草杆菌产生的相似的生化反应，或由此产生的酶，也已被报导[JournalofFermentationTechnology，57(6)，519(1979)和JP-A-54-28892]。
第四，为了提高其体内作用，对一种天然存在的16-元大环内酯抗菌素，麦迪霉素衍生物(midecamycin A1)[Journal of Antibiotics，24(7)，452(1971)]，进行了研究。其结果是获得了数种出色的麦迪霉素衍生物，包括其中中性糖部分3″-位羟基被转化成甲硫甲基(-CH2SCH3)的16-元大环内酯衍生物，它被用作本发明关键的中间体。该衍生物的合成方法报导于Journal of Antibiotics，33(1)，61(1980)。在糖化学领域，从1960年已知引入仲碳羟基的甲硫甲基可还原成甲氧基[Carbohydrate Research，7，474(1968)]。
第五，本发明者已提供一种合成方法，其中将在内酯环3-位具有游离羟基的16-元大环内酯抗菌素作为原料，并将烷基交替引入中性糖部分的4″-位和3″-位羟基上(EP-A-0595303)。
第六，关于16-元大环内酯衍生物内酯环3-位羟基的保护，已有用具有不对称碳原子的缩醛基取代基保护螺旋霉素和泰乐霉素内酯环3-位羟基的报导。但是，除了螺旋霉素，再无具普拉特霉素内酯(Platenolide)骨架(柱晶白霉素内酯环)的合成中间化合物，其中内酯环3-位羟基被具不对称碳原子的缩醛基取代。
已有报导虽然16-元大环内酯抗菌药副作用小但与14-元对应物比其体外抗菌活性通常较弱[AntimicrobialAgentsandChemotherapy，32(11)，1710(1988)]。因此，人们已将极大的关注首先指向开发优良的16-元大环内酯抗菌素衍生物，它对临床上重要的上呼吸道传染的主要致病菌之一的链球菌属以及对MRSA复合感染(The461thSpecialMemberMeetingofJapanAntibioticsResearchAssociation，February22，1991)的致病菌之一的粪链球菌的抗菌活性被提高到14-元新大环内酯的水平，同时保持16-元大环内酯的副作用和药物相互作用小的优良特性。
另一方面，制备这样的衍生物所需用的费用和时间并不总是令人满意，这是由于在制备这些衍生物的过程中必须完成由为引入中性糖而进行的多步区域-和立体-选择性糖基化和随后的两步微生物转化组成的化学反应。此外，活化剂，具有危险性必须小心操作，应该化学计量地用于上述糖基化反应，而且由此增加了某些问题如反应所需的相当多的天数。因此，需要建立一种通过不用任何糖基化的步骤较少的纯化学合成而制备16-元大环内酯衍生物的方法，其中本发明的中性糖部分的3″-位羟基是被甲基化的。
本发明的一个目的是提供具有优良抗菌活性的16-元大环内酯衍生物。
本发明的另一个目的是提供有效制备这些衍生物的方法。
为了实现上述目的，本发明的发明者进行了一系列合成化学和生物化学的研究。首先，利用具有各种适当转化功能的微生物，对具有改性成分由苷键连接的红霉素糖，L-二脱氧甲基已糖(L-Chladinose)，的16-元大环内酯衍生物3″-O-甲基麦迪霉素A3进行生化反应，作为结果，本发明者成功地制备了各种16-元大环内酯衍生物，其中9-位为sp3碳，同时3″-位叔碳上羟基被甲基化。此后，通过这些衍生物，与14-元新大环内酯相似的，对临床上重要的革兰阳性菌，特别是链球菌，粪链球菌和某些红霉素抵抗株强生长抑制活性的发现完成了本发明的第一方面。
接着，本发明者成功地建立了制备一种由上述发明得到的16-元大环内酯衍生物的有效方法，该衍生物中内酯环3-位羟基被酰化，中性糖部分3″-位叔碳上羟基被甲基化而4″-位羟基被酰化，该法未使用糖基化反应，而使用内酯环3-位羟基上具酰基的天然16-元大环内酯抗菌素作为原料，并经过了3″-位甲硫甲基化的合成中间体。这样，完成了本发明的第二方面。另外，在本发明的研究过程中，发现了一个用于16-元大环内酯衍生物内酯环9-位羟基保护和去保护的好方法。
而且，由于成功地制备了内酯环3-位和9-位都为游离羟基，中性糖部分3″-位叔碳上羟基被甲基化，4″-位羟基被酰化的柱晶自霉素衍生物，从而完成了本发明的第三方面，该衍生物也是按上述发明第一方面制备的16-元大环内酯衍生物之一，该制备是以纯合成化学方式并且未用糖基化反应，而使用天然存在的柱晶白霉素Fr组如柱晶白霉素A5[Journal of Antibiotics，Ser.A.20(4)，234(1967)]作为原料，并经过了其内酯环3-位羟基被具有不对称碳的缩醛基取代基保护而其3″-位羟基被甲硫甲基化的合成中间体而进行的。
另外，由于成功地开发了使用，例如，柱晶白霉素A7[Journal of Antibiotics，Ser.A.20(4)，234(1967)]作为原料，并经过其中丙酯环9-，3-和18-位被甲硅烷基等保护而3″-位羟基被甲硫甲基化的合成中间体，制备其中内酯环3-和9-位都为游离羟基，中性糖部分3″-位叔碳上羟基被甲基化而4″-位羟基被酰化的上述柱晶白霉素衍生物的合成方法，从而完成了本发明的第四方面。该方法具有高度的自由度，以致于任何有用的酰基侧链都可被引入4″-位而不依赖于原料(天然的或合成的)的中性糖部分4″-位酰基侧链的结构。这样，完成了16-元大环内酯衍生物二脱氧甲基已糖(Chladinose)类似物的筛选研究。
本发明主要涉及由式(Ⅰ)所示的新化合物或其药学上可接受的盐和制备其的方法 其中R1表示氢原子或修饰羟基的取代基;R2表示氢原子或修饰羟基的取代基;R3表示氢原子或具有2到4个碳原子的直链脂肪酰基;而R4表示氢原子或具有1到10个碳原子的直链或支链脂族或芳族酰基。
本发明第一方面的要点在于由上述式(Ⅰ)表示的化合物。在式(Ⅰ)中，由R1和R2表示的修饰(保护)羟基的取代基优选具有2到4个碳原子的脂族酰基。R1优选氢原子，乙酰基，丙酰基和1-乙氧乙基。R2优选氢原子，乙酰基，丙酰基，丁酰基和1-乙氧乙基。R3优选氢原子和具有2到3个碳原子的脂族酰基如乙酰基和丙酰基。R4优选氢原子和具有2到7个碳原子的脂族或芳族酰基如乙酰基，丙酰基，正丁酰基，异丁酰基，正戊酰基，异戊酰基和苯甲酰基。
本发明第二方面的要点在于作为式(Ⅰ)化合物之一的式(Ⅸ)所示的新化合物或其药学上可接受的盐 其中R1表示氢原子或具有2到4个碳原子的直链脂族酰基;R2表示氢原子或修饰羟基的取代基;R3表示氢原子或具有2到4个碳原子的直链脂族酰基;而R4表示氢原子或具有1到10个碳原子的直链或支链脂族或芳族酰基。
式(Ⅸ)化合物可通过使式(Ⅹ)所示的化合物或其盐
其中R1表示具有2到4个碳原子的直链脂族酰基而R4表示具有1到10个碳原子的直链或支链脂族或芳族酰基，经过使用单一微生物或连续使用多种微生物的生化转化，并且，如果需要，再经过9-和/或2′-位羟基的选择性合成化学反应而被制备。
式(Ⅹ)所示化合物可由糖部分的引入反应，即糖基化反应制备。更具体地，它可使用其中16-元内酯环的5-位羟基通过β-苷键与D-碳霉糖连接的被保护的合成中间体作为糖部分受体(糖基受体)与由L-二脱氧甲基已糖等衍生的糖部分给体(糖基给体)进行糖基化，接着进行合成化学反应而制备。即，式(Ⅹ)所示化合物既可通过经糖基化影响的并使用硫代-糖的制备方法制备也可通过包括使用烯糖的糖基化[Chemistry Letters，769(1977)]的已知合成方法制备。按前一方法，可制备3″-O-甲基麦迪霉素A3(其中R1表示丙酰基和R4表示丙酰基的式(Ⅹ)化合物等，而后一方法可制备3″-O-甲基碳霉素B(其中R1表示乙酰基而R4表示异戊酰基的式(Ⅹ)化合物)等。另外，在利用这些方法制备式(Ⅹ)化合物的两种情形中，通过在糖基化反应的同时在糖部分受体3-位和糖部分给体4-位(糖基化后4″-位)适当地选择各自的酰基侧链，任何所需的酰基都可被引入到化合物(Ⅹ)的3-位侧链R1和4″-位侧链R4中(关于3-位侧链R1要求使用天然类型的酰基)。
下面的反应路线1显示通过微生物转化从原料式(Ⅹ)化合物制备作为式(Ⅸ)所示化合物的主要化合物的式(Ⅺ)到(ⅩⅣ)所示的4个化合物的具体反应路线。
反应路线1
首先，将生米卡链霉菌SF2772菌株，它是一种放线菌，公开于本发明人的EP-A-0595303，引发的微生物转化选作由式(Ⅹ)所示的化合物及其盐制备式(Ⅺ)所示的新化合物及其盐的方法。
其中R1表示具有2到4个碳原子的直链脂族酰基而R4表示具有1到10个碳原子的直链或支链脂族或芳族酰基。即，式(Ⅺ)所示化合物可通过将式(Ⅹ)化合物用SF2772菌株微生物转化从而使原料9-位羰基还原成具有天然构型的羟基而被有效地制备。例如，3″-O-甲基麦迪霉素A3(R1表示丙酰基而R4表示丙酰基的式(Ⅹ)化合物)通过用菌株SF2772进行的微生物转化而变成3″-O-甲基麦迪霉素A1(R1表示丙酰基而R4表示丙酰基的式(Ⅺ)化合物。这个例子中，用于16-元大环内酯转化的通过生化反应将9-位羰基还原为羟基的方法本身是已知的(例如参见JP-A-54-8793中的“现有技术”)以上微生物转化过程将在后面实施例中被详细描述。具有这种转化作用的生化反应不限于SF2772微生物转化，并且不仅除菌株SF2772的其他微生物的转化反应可被使用，而且利用非微生物转化作用的生化反应也可被使用。生来卡链霉菌SF2772已由本发明人按照布达佩斯条约以登记号FERMBP-4465于1992年10月28日在国家生物科学和人类技术研究院，工业科学和技术机构保藏。
从式(Ⅹ)化合物制备式(Ⅺ)所示新化合物的方法不只限于如微生物转化，使用由活有机体制得的酶的反应等的生物化学方法，它也可通过包括18-位醛基保护和去保护步骤的合成化学方式制备[Journal of Organic Chemistry 39(16)，2474(1974)]。但是，考虑到反应的立体选择性和上述保护和去保护步骤的产率(特别是在18-位引入缩醛基的步骤)，通过合成化学方法将9-位羰基还原成具有天然构型的羟基的结果可能不总是令人满意。因此本发明的发明人继续通过生物化学方法制备用于9-位还原反应的新的衍生物。
接下来，通过使用由本发明人公开的[欧洲专利526，906(1993)，U.S.专利5，219，736(1993)和JP-A-6-16691]，属于瓶霉属的霉菌菌株的，菌株PF1083进行已知的微生物转化，从式(Ⅺ)化合物或其盐制备了式(Ⅻ)所示新化合物或其盐。

其中R4表示具有1到10个碳原子的直链或支链脂族或芳族酰基。即，式(Ⅻ)所示的化合物可通过将式(Ⅺ)化合物用菌株PF1083进行微生物转化，使连接于原料内酯环3-位羟基上的酰基特别地裂解从而形成游离羟基而被有效地制备。例如3″-O-甲基麦迪霉素A1(R1表示丙酰基而R4表示丙酰基的式(Ⅺ)化合物(1)通过用菌株PF1083进行微生物转化而变成3″-O-甲基柱晶白霉素A7，(R4表示丙酰基的式(Ⅻ)化合物(2))。
以上微生物转化过程将在后面实施例中被详细描述。具有这种转化作用的生化反应不限于PF1083的微生物转化，并且不但除菌株PF1083以外的其他微生物的转化反应可被使用，而且利用非微生物转化作用的生化反应也可被使用。但是，关于连接于16-元大环内酯化合物内酯环3-位羟基上的酰基的特殊裂解的生化反应知之甚少。瓶霉属SP.PF1083已由本发明人按照布达佩斯条约以登记号FERMBP-3960于1991年5月28日在国家生物科学和人类技术研究工业科学和技术机构保藏。
从式(Ⅺ)化合物制备式(Ⅻ)所示新化合物的方法不只限于上述生物化学方法，但除具有太乐菌素内酯(tylonolide)骨架的化合物的去酰化外，未见具有高产率的连接于16-元大环内酯化合物内酯环3-位羟基上的酰基的特殊裂解的合成化学方法的报导。
接下来，利用已知的生化反应(JP-B-48-29148;这里使用的术语“JP-B”指“被审查的公开了的日本专利申请)分别由式(Ⅺ)化合物或其盐和式(Ⅻ)化合物或其盐制备式(Ⅻ)所示的新化合物或其盐。
其中R1表示具有2到4个碳原子的直链脂族酰基，和另一个式(ⅩⅣ)所示的新化合物或其盐。
即，式(ⅩⅢ)和(ⅩⅣ)所示的化合物可通过分别将式(Ⅺ)和(Ⅻ)化合物用例如属于接合菌亚门毛霉菌目毛霉菌属的菌株进行微生物转化，从而使连接于各原料的4″-位(中性糖4-位)羟基上的酰基特别地裂解形成游离羟基而被有效地制备。例如，3″-O-甲基麦迪霉素A1(R1表示丙酰基，R4表示丙酰基的式(Ⅺ)化合物(1)和3″-O-甲基柱晶白霉素A7(R4表示丙酰基的式(Ⅻ)化合物(2)通过毛霉菌属的菌株的微生物转化而分别成为3″-O-甲基麦迪霉素M1(R1表示丙酰基的式(ⅩⅢ)化合物(3))和3″-O-甲基柱晶白霉素V(式(ⅩⅣ)化合物(4))。该菌株的一个例子为刺状毛霉菌(Mucor spinescens)IAM6071(JP-A-48-72389)。上述微生物转化过程将在后面实施例中被详细描述。
现已有许多关于连接于16-元大环内酯中性糖4-位(4″-位)羟基上的酰基的裂解的生物化学反应的报导[Hakko to kogyo，37(8)，1749(1979)]。麦迪霉素A1[medemycin;Journal of Antibiotics，24(7)，452(1971)]中的这种转化反应已被研究了很长时间(JP-B-48-29148)，并且已有报导说，天然存在的微生物种，特别是霉菌，中的相当不同的类型都具有去酰基活性。
另一方面，关于3″-位叔碳上羟基被甲基化的16-元大环内酯衍生物的4″-位的生物化学去酰基化却一无所知。据此，本发明进一步证实通过使用多种霉菌菌株可取得所需转化反应的有效进展。在这一点上，具有这种转化功能的生化反应不限于由属于毛霉菌属等的菌株微生物转化，不仅除霉菌以外的其他微生物转化反应可被使用，而且利用非微生物转化作用的生化反应也可被使用。
如前所述，式(Ⅺ)到(ⅩⅣ)所示化合物或其盐可按照反应路线1所示的反应路线使用式(Ⅹ)化合物或其盐作为原料而被制备。在这一点上，当具有所需转化功能的多种微生物以连续的方式被使用时，转化反应的次序不总限于反应路线1所示反应路线而可相对自由地安排，尽管存在受到某种限制如底物特异性等的可能性。例如，既可通过式(Ⅻ)化合物的转化，也可通过使用式(ⅩⅢ)作为转化底物而制备式(ⅩⅣ)所示化合物。
在上述方法中，式(Ⅺ)到(ⅩⅣ)所示化合物通过使用单一微生物或连续使用多种微生物而使式(Ⅹ)化合物进行生物反应而被有效地制备。如此获得的SP3碳被定位于9-位而同时甲基被引入3″-位叔碳上羟基上的16-元大环内酯衍生物可进行大部分适用于9-位为SP3碳的16-元大环内酯衍生物的选择性或非选择性合成化学反应(除了在3″-位上的反应)。
例如，根据本发明新的有用的化合物可通过式(Ⅺ)到(ⅩⅣ)所示的化合物或其盐的9-或2′-位羟基按已知方法[[Hakko to Kogyo，37(12)，1171(1979)]选择性酰化，通过在稀酸存在下按已知方法[Chemical and Pharmaceutical Bulletin，18(8)，1501(1970);Scientific Report of Meiji Seika Kaisha，12，85(1972);和Journal of Antibiotics，35(11)，1521(1982)]将化合物9-位羟基进行烯丙位重排而成11-或13-位，或者通过按已知方法[Journal of Antibiotics，24(8)，526(1971)]选择性地氧化9-位羟基而被制备。作为一个实例。化合物(5)(R1为丙酰基，R2为乙酰基，R3为氢原子而R4为丙酰基的式(Ⅰ)化合物)和化合物(6)(R1为氢原子，R2为乙酰基，R3为氢原子而R4为丙酰基的式(Ⅰ)化合物)可按已知方法(JP-A-48-13380)由化合物(1)和(2)内酯环9-位羟基的选择性酰化而合成。
由于通过使用属于链霉菌属，瓶霉属或毛霉菌属的微生物而进行的16-元大环内酯化合物9-位上的还原，3-位上的去酰基化和4″-位上的去酰基化被本发明证实为是有用的，因而本发明化合物的各种制备方法可根据这些生物化学技术来设计。另一方面，制备本发明化合物的各种其他方法也可使用不同类型的生化方法如直接发酵或本发明未描述的其他类型的生化转化反应来设计。另外，制备本发明化合物(1)到(6)等的各种方法也可使用合成化学技术来设计。因此，本发明并不限制于这些发明实施例，它不仅包括实施例的变换而且包括所有按已知技术基于本发明式(Ⅰ)所示的化合物(1)、(2)、(3)、(4)、(5)和(6)的性质进行的合成，制备，萃取和纯化过程。
本发明第三方面的要点在于经过3″-位具有甲硫甲基醚的合成中间体，由式(Ⅱ)所示化合物 其中R1表示具有2到4个碳原子的直链脂族酰基而R4表示具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基，或其盐作为原料有效地制备式(Ⅲ)所示化合物
其中R1表示具有2到4个碳原子的直链脂族酰基;R2表示氢原子或修饰(或保护)羟基的取代基;而R4表示具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基，或其盐的新的化学合成方法。式(Ⅲ)所示的本发明化合物可按下面反应路线2所示的步骤而被制备(在反应路线2中，式(Ⅲ)化合物由式(ⅪⅩ)或(ⅩⅩ)表示。
反应路线2-1
反应路线2-2
首先，描述一种将甲基间接地引入到其内酯环3-位羟基和中性糖部分4″-位羟基都被酰化的化合物的中性糖部分3″-位叔碳羟基上的方法。在描述合成方法之前，简要地描述一下关于16-元大环内酯衍生物内酯环9-位羟基的结构，体外抗菌活性和药物动力学之间的关系，当上述衍生物9-位羟基被选择性地酰化，或乙酰化时，所得化合物显示与原衍生物相同或略低的抗菌活性，而几乎没有关于活性显著增强的报导。另一方面，当使用小动物如小鼠进行体内实验时，某些9-位羟基被选择性地乙酰化的化合物在群体或传染治疗效果方面显示了改善的药物动力学效果，而其他的则没有。因此，9-位不同结构对体内效果的影响与16-元大环内酯衍生物本身相应的结构有很大的关系。
因此，在设计用于有效地制备16-元大环内酯衍生物的合成方法时，需要建立一条可分别制备9-位羟基被某种取代基修饰的化合物和其9-位羟基为游离状态的化合物的制备路线。
在这一点上，从保护步骤反应条件的观点，到使用酰基如乙酰基作为9-位羟基保护基团的制备方法的设计，都可能是相对方便的。但是，在涉及16-元大环内酯衍生物的化学合成中，关于完全抑制其他副反应，以高产率通过除去与9-位羟基连接的酰基从而再生游离羟基的技术知之甚少。尽管已报导一种通过使用放线菌菌株的微生物转化除去连接于16-元大环内酯衍生物内酯环9-位羟基上的乙酰基的方法[Journal of Fermentation and Bioengineering，71(5)，370(1991)]，但其转化率似乎有待提高。
除在尽量温和的条件下将甲基引入16-元大环内酯衍生物中性糖部分3″-位叔碳羟基的合成方法外，本发明人还发现了一种定量地保护和去保护16-元大环内酯衍生物内酯环9-位羟基的方法。下面根据反应路线2详细描述该方法。尽管内酯环9-位具有sp3碳的天然16-元大环内酯抗菌素在反应路线2中被用作原料，但当9-位具有羰基的化合物用作原料时，运用同样的技术在3″-位叔碳羟基上有效并间接地引入甲基是可能的。
首先，通过在式(Ⅱ)所示化合物的3″-位以外的两个游离羟基，即9-和2′-位羟基上引入取代基而得到式(ⅩⅥ)所示化合物。第一步骤将式(Ⅱ)化合物(该式中，R1为具有2到4个碳原子的直链脂族酰基而R4为具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基)内酯环9-位上的羟基用合适的取代基修饰(或保护)得到式(ⅩⅤ)所示的化合物(该式中，R1为具有2到4个碳原子的直链酰基，R2为修饰(或保护)羟基的取代基而R4为具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基)。
R2取代的实施例不仅包括低级脂族酰基[Hakko to Kogyo，37(12)，1171(1979)]也包括可被用于常规羟基修饰的其他取代基，如甲氧甲基，乙氧乙基等。另外，当计划将取代基R2用作16-元大环内酯衍生物羟基的保护基时，使用具有不对称碳的缩醛基取代基，如1-乙氧乙基、四氢呋喃基、四氢吡喃基等可能是合适的。
9-位羟基的保护可在20到40℃下在酸催化剂如p-甲苯磺酸或p-甲苯磺酸吡啶鎓(PPTS)的存在下在二氯甲烷中(20至30v/w)通过式(Ⅱ)化合物与1到2当量的反应剂如二氢吡喃、二氢呋喃或乙基乙烯基醚反应1到24小时而完成。
例如，化合物(12)(R1为丙酰基，R2为1-乙氧乙基而R4为丙酰基的式(ⅩⅤ)化合物)通过在p-甲苯磺酸吡啶鎓(PPTS)存在下在无水二氯甲烷中使麦迪霉素(R1为丙酰基，R4为丙酰基的式(Ⅱ)化合物)与乙基乙烯基醚进行反应而以高产率被制备。在这种情况下，该步骤使用的取代基的种类和引入取代时的反应条件不限于这里所述的那些，不仅通常用作羟基保护基的取代基(Theodora W.Greene and Peter G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2nd ed.，WileyNew York，1991)，而且可能很少用作保护基的其它取代基，以及引入它们的反应条件，都包括在本发明的范围内。
在这一点上，当具有不对称碳的缩醛基保护基，如1-乙氧乙基等，被引入内酯环9-位羟基时，该衍生物以由该取代基引入的二种非对映异体的混合物形式存在。但是，这些异构体可被分离或不被分离。也就是说，当上述取代基被看作是内酯环9-位羟基的修饰基团时这些异构体可被分离或可不被分离。
接着，将式(ⅩⅤ)化合物碳霉糖(氨基糖)部分2′-位羟基用乙酰基保护得到式(ⅩⅥ)所示化合物(该式中，R1为具有2到4个碳原子的直链脂族酰基，R2为修饰(或保护)羟基的取代基而R4为具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基)。例如，化合物(13)(R1为丙酰基，R2为1-乙氧乙基而R4为丙酰基的式(ⅩⅥ)化合物)通过化合物(12)在无水乙腈中与乙酸酐进行反应而被定量地得到。在这种情况下，R2为乙酰基的式(ⅩⅥ)化合物可通过一个步骤由(Ⅱ)化合物制备。另外，式(ⅩⅥ)化合物也可通过将式(Ⅱ)化合物碳霉糖部分2′-位羟基进行选择性乙酰化，然后在内酯环9-位羟基上引入取代基而被容易地制备。2′-位上的酰化反应可通过使式(ⅩⅤ)化合物在大约20℃下，在无碱的存在下，与1至2当量的酸酐，在非质子传递溶剂如乙腈中反应大约24小时来进行。
第二、描述了被用作关键化合物的甲硫基甲基醚合成中间体的制备方法。第一步，将甲硫基甲基基团引入到中性糖部分3″-位的叔羟基上。自60年代以来，已知当使二甲亚砜(DMSO)与乙酸酐反应而将仲羟基氧化成羰基时，作为副产物得到了甲硫基甲基醚[Journal of American Chemical Society，89(10)，2416(1967)]。70年代的中期日本的研究机构报导了甲硫基甲基基团是合成天然有机化合物时叔羟基的最适宜的保护基团[Tetrahedron，Letters，65(1976)]。70年代的后半叶，曾报导了关于向反应体系加入乙酸对甲硫基甲基化的促进优先于氧化的影响的理论解释[Australian Journal of Chemistry，31，1031(1978)]。
作为第一步，按照本发明人研究机构所报导的方法[Journal of Antibiotics，33(1)，61(1980)]将式(ⅩⅥ)化合物3″-位上的羟基甲硫基甲基化，得到式(ⅩⅦ)表示的化合物(在该式中，R1表示具有2至4个碳原子的直链脂肪酰基，R2是取代基，其修饰(或保护)羟基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)，产率大约60～70%，该反应可以通过使式(ⅩⅦ)化合物在20～40℃下，在有3～15v/w的乙酸酐存在下，与20～30v/w的DMSO反应24小时来进行。举一实例，使化合物(13)与DMSO和乙酸酐反应合成化合物(14)(一个其中R1是丙酰基，R2是1-乙氧基乙基，R4是丙酰基的式(ⅩⅦ)化合物)。由于存在多种关于将甲硫基甲基基团引入羟基基团的已知方法(Theodora W.Greene and Peter G.M.Wuts，Protective Groups inOrganic Synthesis，2nd ed.，WileyNew York，1991)，因此本发明制备方法并不限制于上述的引入甲硫基甲基基团的方法，所有与该引入方法相关的已知方法均包括在本发明范围内。
接着，将连接于式(ⅩⅦ)化合物2′-位羟基上乙酰基团脱保护，以定量的产率得到式(ⅩⅧ)表示的关键化合物(在该式中，R1是具有2至4个碳原子的直链脂肪酰基，R2是取代基，其修饰(或保护)羟基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)，即甲硫基甲基醚合成中间体。例如，在大约20℃下使化合物(14)在质子溶剂如甲醇(20-50v/w)中反应大约24小时得到化合物(15)(其中的R1是丙酰基，R2是1-乙氧基乙基，R4是丙酰基的式(ⅩⅧ)化合物)。
第三、将引入到式(ⅩⅧ)表示的关键中间体的中性糖部分3″-位的叔羟基上的甲硫基甲基基团选择性还原，由此实现其中的3″-位上的叔羟基被甲基化了的16-元大环内酯衍生物的有效合成。由糖化学领域一份关于通过用Raney镍还原将甲硫基甲基化的仲羟基化学转化为甲氧基的报告[Carbohydrate Research，7，474 1968)]引发，类似的反应也已被报导[Tetrahedron Letters，43(1969);和Carbohydrate Research，15，101(1970)]。新近，曾有报导当使用游离基还原等方法时，引入了代替甲硫基甲基基团作为取代基的芳硫基甲基基团的伯和仲羟基被化学转化为甲氧基[Journal of Organic Chemistry，54(25)，5998(1989)]。
如上所述，将甲硫基甲基化的羟基还原成甲氧基的工艺本身不是新的，但大多数的还原反应都用于仲羟基基团。另外，到目前为止所报导的大多数反应作用物都不具有对催化还原显示活性的功能基团，如双键，游离醛基等。
本发明人发现了一种实用的制备方法，其中使用其活性被控制在适当水平的Raney镍，通过将式(ⅩⅧ)表示的化合物3″-位上被甲硫基甲基化的叔羟基化学转化为甲氧基而不引起双键和游离醛的还原，选择性地合成了式(ⅩⅨ)表示的化合物(在该式中，R1是具有2至4个碳原子的直链脂肪酰基，R2是取代基，其修饰(或保护)羟基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)。该还原反应可在大约20℃下，在溶剂如乙醇或二噁烷(20-30v/w)中，且在有10～30v/w的Raney镍存在下进行大约1小时，并伴随剧烈搅拌。例如，将化合物(15)在乙醇中与其活性被控制在适当水平的Raney镍一起于室温下搅拌短时间选择性地合成了化合物(16)(一种其中的R1是丙酰基，R2是1-乙氧基乙基，R4是丙酰基的式(ⅩⅨ)化合物。当R2用非缩醛基基团的取代基时，例如化合物(7)(一种其中的R1是丙酰基，R2是乙酰基，R4是丙酰基的式(ⅩⅧ)化合物)中的乙酰基修饰(或保护)时(参看实施例7)，该选择性还原反应也可有效地进行。
该选择性还原反应的条件，如Raney镍活性的控制，反应溶剂及反应后的处理将在下文实施例7中描述，但本发明的制备方法不受这些反应条件的限制，它们的改进也包括在本发明制备方法中。
也就是说，Raney镍活性不仅可以通过本发明实施例7中描述的丙酮辅助法控制，也可以使用乙酸乙酯，热水等控制。另一方面，反应的选择性可以通过向反应体系中加入某些含有氮、硫或类似原子的有机或无机化合物来改善。并且，反应溶剂并不限于低级醇如乙醇，反应可以通过使用醚类有机溶剂如1，4-二噁烷来进行。反应后的处理也无限制，只要能将反应产物高效率地与Raney镍分离，不引起产物分解即可。
用上述方法制备的式(ⅩⅨ)化合物自身能够抑制临床上重要的革兰阳性细菌的生长，并显示了优良的体内效果。在这一点上，当R2是某些缩醛基取代基团如1-乙氧基乙基、四氢呋喃基、四氢吡喃基或类似基团时，它可以高收率脱保护。
也就是说，在适于取代基的条件下，脱去引入到式(ⅩⅨ)化合物的内酯环9-位上的羟基的取代基可以定量得到式(ⅩⅩ)表示的化合物(在该式中，R1是具有2至4个碳原子的直链脂肪酰基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)(Theodora W. Greene Peter G. M. Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2nd ed.，WileyNew York，1991)。该脱保护反应可在大约20℃下，在溶剂(20～30v/w)如低级醇(如甲醇，乙醇)，乙腈或THF中，在有酸催化剂如对-甲苯磺酸、稀盐酸或5%乙酸的存在下进行1～24小时。例如，使化合物(16)在5%乙酸水溶液乙腈(3∶1)的混合溶剂中进行反应得到了化合物(1)(一种其中R1是丙酰基，R4是丙酰基的式(ⅩⅩ)化合物)。如此得到的式(ⅩⅩ)化合物自身也能强有力地抑制临床上重要的革兰阳性细菌的生长。
在反应路线2中，当由式(ⅩⅧ)化合物合成式(ⅩⅩ)表示的化合物时，中性糖部分3″-位上的甲硫基甲基醚被还原成甲氧基，然后脱去连接在内酯环9-位上的羟基的取代基。另一方面。先通过9-位脱保护，然后3″-位还原也可以生成式(ⅩⅩ)化合物。然而，当使用式(ⅩⅧ)化合物作为作用物时，选择性还原反应的收率及选择性要更优良。
在这一情况下，根据本发明，通过用已知方法[Hakko to Kogyo，37(12)，1171(1979)]选择性地酰化式(ⅩⅩ)表示的化合物或其盐9-或2′-位上的羟基用已知方法[ChemicalandPharmaceuticalBulletin，18(8)，1501(1970);ScientificReportofMeijiSeikaKaisha，12，85(1972)1和JournalofAntibiotics，35(11)，1521(1982)]，在稀酸存在下使化合物9-位上的羟基烯丙位重排到11-或13-位上，或者用已知方法[Journal of Antibiotics，24(8)，526(1971)]，选择性地氧化9-位上的羟基可以生成新的和有用的物质。
本发明第4部分的要点是一种新的制备方法，用该方法可制备式(Ⅵ)表示的化合物或其盐 其中R1表示氢原子或修饰(或保护)羟基的取代基;R2表示氢原子或修饰(或保护)羟基的取代基;R4表示具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基，该法采用纯化学合成手段，用天然存在的式(Ⅳ)表示的16-元大环内酯抗菌素或其盐作起始物料
其中R4表示具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基，经过式(Ⅴ)表示的合成中间体或其盐 其中R1表示修饰(或保护)羟基的取代基;R2表示修饰(或保护)羟基的取代基;R3表示氢原子或保护羟基的取代基;R4表示具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基，该中间体3″-位上的的羟基被甲硫基甲基醚取代。式(Ⅵ)表示的本发明化合物可按照下列反应路线3所示的步骤制备。
反应路线3-1
反应路线3-2
根据化学反应活性的不同，不经糖基化而将烷基引入到16-元大环内酯衍生物中性糖部分的羟基上的反应大致分成两种方法。一种方法是将烷基引入到反应活性相对大些的仲羟基上，另一种方法是将其引入到活性差的叔羟基上。前一方法有两个实例，分别是通过适宜的中间体，将烷基引入到螺旋霉素衍生物(由Ohmura，Sano等报导(JP-A-60-58998;和JP-A-60-239494))和泰乐菌素衍生物(由Yoshioka等报导(JP-A-62-234093))的霉菌糖部分4″-位的仲羟基上。
后一方法本发明人已申请了专利，其实例是一种制备多种衍生物的合成方法，其包括用甲硅烷基保护3-位上具有游离羟基的起始的柱晶白霉素，除去酰基接着在适当条件下将中性糖部分的4″-位(仲羟基)和3″-位(叔羟基)烷基化，并脱保护(EP-A-O595303)。本发明的特征在于不仅可以将甲基也可以将其它烷基引入到活性差的叔羟基上，因为烷基是在强碱性条件下直接引入的。
在此被用作目的化合物的是柱晶白霉素的16-元大环内酯衍生物，在内酯环的3-和9-位上有游离的羟基(9-位的羟基可被酰化)，中性糖部分的4″-位上有被酰化的羟基，其中该衍生物3″-位的羟基己被甲基化。关于该衍生物的中性糖部分，如上所述4″-位上的羟基被酰化。从糖化学观点看，当毗连的顺式羟基中的一个被酰化(如4″-位)，另一个仍处于游离状态(如3″-位)时，将游离羟基(如3″-位)直接甲基化会产生多种副反应。因此，当把甲基引入到中性糖部分3″-位上的羟基时，作为合成该衍生物的关键反应，有必要在温和条件下进行该反应，以防止破坏4″-位上的酰基。结果是本发明制备方法中选择了一种通过甲硫基甲基醚合成中间体进行该反应的方法以避免副反应。
由于通过甲硫基甲基醚合成中间体将甲基引入到羟基上并不总是需要保护18-位上的醛基，因此本发明制备方法中内酯环3-位上羟基的保护可以通过使用含有一个不对称碳原子的缩醛基取代基来进行，该取代基便宜并可在温和条件下除去。
虽然在反应路线3中被用作起始物的是天然的内酯环9-位上具有sp3碳的16-元大环内酯抗菌素，但当使用在9-位上具有羰基的化合物作为起始物时，根据相同工艺也可以有效地引入甲基并间接地进入到3″-位的叔羟基上。
首先，通过将相同或不同的取代基引入到式(Ⅳ)化合物游离羟基中的非3″-位的三个羟基，即3-、9-和2′-位的羟基上得到式(ⅩⅫ)化合物。在第一步中，将式(Ⅳ)化合物(在该式中，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)的碳霉糖(氨基糖)部分2′-位的羟基用乙酰基保护起来得到式(ⅩⅪ)化合物(在该式中，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)。2′-位上的保护反应可按与上述反应路线2相同的方法进行。例如，通过使柱晶白霉素A5[Journal of Antibiotics，Ser.A，20(4)，234(1967);一种其中的R4是正丁酰基的式(Ⅳ)化合物]与乙酸酐在无水乙腈中进行反应，定量得到了化合物(28)[Journal of Medicinal Chemistry，20(5)，732(1977);一种其中R4是正丁酰基的式(ⅩⅪ)化合物]。
接着，将取代基引入到式(ⅩⅪ)化合物内酯环的3-位和9-位上的羟基上，得到式(ⅩⅫ)表示的化合物(在该式中，R1是修饰(或保护)羟基的取代基，R2是修饰(或保护)羟基的取代基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)。可使用反应路线2中描述的相同反应条件。例如，通过使化合物(28)与乙基·乙烯基醚在无水二氯甲烷中在有PPTS的存在下进行反应，高收率地得到了化合物(29)(一种其中的R1是1-乙氧基乙基，R2是1-乙氧基乙基，R4是正丁酰基的式(ⅩⅫ)化合物)。
在这种情况下，用于这一步骤的取代基种类及引入取代基时的反应条件并不限制于本文中所描述的那些，并且，不但通常用作羟基保护基的取代基(TheodoraW.GreeneandPeterG.M.Wuts，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，2nded.，WileyNewYork，1991)而且其它的对于所说作用物很难脱保护的取代基，以及引入它们的反应条件都包括在本发明的范围内。所有这些，从温和的脱保护条件角度看，具有一个不对称碳原子的缩醛基取代基，如1-乙氧基乙基、四氢呋喃基、四氢吡喃基或类似基团是特别优选的。
在这一点上，当将具有一个不对称碳原子的缩醛基保护基团，如1-乙氧基乙基或类似基团引入到内酯环3-位和9-位的羟基上时，在该取代基被引入的同时衍生物即以四种非对映异构体的混合物形式存在。然而这些异构体可以分离或不分离。当把该取代基当作内酯环3-位上的羟基的修饰基团时可以不分离这些异构体。
另一方面。内酯环9-位羟基上的取代基，即R2不一定与R1相同。例如，通过将相同的取代基如乙酰基引入到内酯环9-位和2′-位的羟基上，然后将具有一个不对称碳原子的缩醛基取代基如1-乙氧基乙基引入到3-位羟基可以得到式(ⅩⅫ)化合物(参看实施例34)。
虽然反应路线3中没有表示，但通过将相同的缩醛基取代基如-乙氧基乙基引入到式(Ⅳ)化合物3-、9-和2′-位的三个游离羟基上即可制备用于甲硫基甲基化的反应作用物。
第二，制备被用作关键化合物的甲硫基甲基醚合成中间体，并脱去2′-位上的乙酰基。关于合成甲硫基甲基醚的详细情况已在上文描述，因此这里不再提及。作为第一步，按照本申请人的研究机构所报导的方法[Journal of Antibiotics，33(1)，61(1980)]将式(ⅩⅫ)化合物3″-位上的羟基甲硫基甲基化，得到式(ⅩⅩⅢ)表示的化合物(在该式中，R1是修饰(或保护)羟基的取代基，R2是修饰(或保护)羟基的取代基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)，而不产生副产物。可以使用上文反应路线2中所述的相同反应条件。例如，通过使化合物(29)与DMSO和乙酸酐进行反应合成了化合物(30)(一种其中的R1是1-乙氧基乙基，R2是1-乙氧基乙基，R4是正丁酰基的式(ⅩⅩⅣ)的化合物)。
接着，按与上文反应路线2所述相同的方法脱去连接在式(ⅩⅩⅢ)化合物2′-位的羟基上的乙酰基，定量得到式(ⅩⅩⅣ)表示的关键化合物(在该式中，R1是修饰(或保护)羟基的取代基，R2是修饰(或保护)羟基的取代基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)，即甲硫基甲基醚合成中间体。例如，使化合物(30)在甲醇中进行反应得到了化合物(31)(一种其中的R1是1-乙氧基乙基，R2是1-乙氧基乙基，R4是正丁酰基的式(ⅩⅩⅣ)的化合物)。
第三，按照与上文反应路线2中所述的相同方法，将引入到式(ⅩⅩⅣ)表示的关键中间体的中性糖部分3″-位的叔羟基上的甲硫基甲基选择性还原，由此进行其3″-位叔羟基被甲基化了的16-元大环内酯衍生物的有效合成。将甲硫基甲基化的羟基催化还原成甲氧基的工艺和合成16-元大环内酯衍生物所有方法中涉及的各种问题已在上文中进行了详细描述，因此此处不再提及。类似地，在选择性还原反应中使用的金属催化剂的活性控制及相应的条件在此也不再描述。
作为第一步，使用Raney镍，其活性被控制在适当水平，通过将式(ⅩⅩⅣ)表示的化合物的3″-位上被甲硫基甲基化的叔羟基化学转化成甲氧基而不引起化合物中双键和游离醛基的还原，选择性地合成了式(ⅩⅩⅤ)表示的化合物(在该式中，R1是修饰(或保护)羟基的取代基，R2是修饰(或保护)羟基的取代基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)。
接着，在适于取代基的条件下(Theodora W.Greene and Peter G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2nd ed.， WileyNew York，1991)，分离或无需分离，如果需要，脱除式(ⅩⅩⅤ)化合物内酯环3-和/或9-位羟基上被引入的取代基，高收率地得到式(Ⅵ)表示的化合物(在该式中，R1是氢原子或修饰(或保护)羟基的取代基，R2是氢原子或修饰(或保护)羟基的取代基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)。可以使用上文反应路线2所述的相同反应条件。
例如，通过将化合物(31)在乙醇中与活性被控制在适当水平的Raney镍一起，于室温下短时间搅拌，选择性地得到了化合物(32)(一种其中的R1是1-乙氧基乙基，R2是1-乙氧基乙基，R4是正丁酰基的式(ⅩⅩⅤ)化合物)。然后，不经分离，使所得化合物在5%乙酸水溶液/乙腈(3∶1)的混合溶剂中进行反应，得到化合物(33)(一种其中的R1是氢原子，R2是氢原子，R4是正丁酰基的式(Ⅵ)化合物)。如此得到的式(Ⅵ)表示的化合物的某种衍生物自身非常强地抑制了临床上重要的革兰阳性细菌的生长，和新的14-元大环内酯不相上下。当R2用非缩醛基基团的取代基，如化合物(37)(一种其中的R1是1-乙氧基乙基，R2是乙酰基，R4是正丁酰基的式(Ⅵ)化合物)中的乙酰基或类似的酰基修饰(或保护)时，该选择性还原反应也能容易地进行(参看实施例38和39)。
反应路线3中，当由式(ⅩⅩⅣ)化合物合成式(Ⅵ)表示的化合物时，将中性糖部分3″-位上的甲硫基甲基醚还原成甲氧基，然后脱除连接在内酯环3-和/或9-位羟基上的取代基。另一方面先进行3-和/或9-位羟基上的脱保护再还原3″-位也可以制备式(Ⅵ)化合物。
尽管反应路线中没有表示，当将相同的保护基如缩醛基取代基引入到式(Ⅳ)化合物3-、9-和2′-位上的三个游离羟基上，然后将3″-位上的羟基甲硫基甲基化时，在脱除了引入到三个羟基上的取代基后选择性地将3″-位转化成甲氧基是可以的。在这种情况下，脱保护可在最后一步进行。
在这一点上，根据本发明，通过按照已知方法[Hakko to Kogyo，37(12)，1171(1979)]选择性地将式(Ⅵ)表示的化合物或其盐9-或2′-位的羟基酰化;按照已知方法[Chemical and Pharmaceutical Bulletin，18(8)，1501(1970);Scientific Report of Meiji Seika Kaisha，12，85(1972);和Journal of Antibiotics 35(11)，1521(1982)]在有稀酸存在下，将化合物9-位上的羟基烯丙位重排到11-或13-位上;或按照已知方法[JournalofAntibiotics24(8)，526(1971)]选择性地氧化9-位上的羟基，可制备新的有用的化合物。
本发明实施例中，描述了关于其中的R4，即被连接到中性糖部分4″-位羟基上的酰基侧链是正丁酰基情况下的制备方法。但是，本发明制备方法并不限于该酰基侧链，可以在具有任何其它天然类型酰基侧链的化合物的情况下进行。
实施例42中，由化合物(33)经单一步骤制备了化合物(40)(一种其中R1是氢原子，R2是丙酰基，R3是氢原子，R4是正丁酰基的式(Ⅰ)化合物)。化合物(40)也可以简单地用于制备化合物(39)(一种其中的R1是氢原子，R2是乙酰基，R3是氢原子，R4是正丁酰基的式(Ⅰ)化合物)的方法来制备。
本发明第5部分的要点是一种新的一般制备方法，用这种方法可以得到式(Ⅷ)表示的化合物或其盐 其中R2表示氢原子或修饰羟基的取代基，R4表示具有1至10个碳原子的直或支链脂肪或芳香酰基，该法经过一种式(Ⅶ)表示的合成中间体或其盐
其中R2表示羟基保护基如甲硅烷基保护基，缩醛基保护基或类似基团或修饰羟基的取代基，R3表示乙酰基或甲硅烷基保护基，R4表示具有1至10个碳原子的直或支链脂肪或芳香酰基，R5表示甲硅烷基保护基，该中间体3″-位上的羟基被甲硫基甲基化，该方法还使用式(Ⅳ)表示的天然存在的16-元大环内酯抗菌素或其盐作起始物 其中R4表示具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基。通式(Ⅷ)所示的本发明化合物可按照下面反应路线4所示的步骤制备。
反应路线4-1
反应路线4-2
反应路线4-3
16-元大环内酯化合物的中性糖部分4″-位上酰基侧链结构上的不同与其体外抗菌活性有极大的关系[JournalofAntibiotics28(6)，401(1975)]。因此需要设计一种将所关心的衍生物制成这样一种能进行4″-位上酰基侧链转化的能用体系的方法。顺便说一下，在上述通过甲硫基甲基醚合成中间体进行的方法中，实际制备的化合物的4″-位酰基侧链被限于所用起始物的侧链了，这是由于该方法使用了天然存在的16-元大环内酯化合物作起始物，并且由该物带来的酰基侧链同时被用作了4″-位羟基的保护基。另一方面，在先申请(日本专利申请5-206731)中公开的二醇合成关键中间体，其用三个甲硅烷基保护并用柱晶白霉素Fr组作起始物制备，在4″-位上有一个游离羟基，适于用化学法改良如酰化作用。因此，该合成关键中间体绝对可用于本发明制备方法以进行4″-位上酰基侧链可能的有创造性的化学改良，不但引入脂肪酰基，而且引入芳香酰基。
换句话说，本发明成功地建立了一种制备方法，该方法使用柱晶白霉素Fr组作起始物并可进行其4″-位上的酰基侧链的化学转化，通过该方法可用单一关键反应分别制备一种其9-位羟基为游离状态的化合物和另一种其9-位羟基用某种取代基修饰的化合物。
作为该制备方法的一个实例，下面详细描述了能转化4″-位酰基侧链的通用合成方法，该方法中甲硅烷基被用作9-位羟基的保护基团，乙酰基被用作2′-位羟基的保护基团，参阅反应路线4。在这种情况下，甚至通过现有技术中的合成关键中间体(日本专利申请5-206731)，其中的2′-位是甲硅烷基，即用三个甲硅烷基保护，按照相同的制备策略可以容易地制备本发明有益的化合物(参看参考实施例2和3及实施例64至66)。并且，当使用其中的9-位乙酰基保护的化合物时也可以使用该合成方法的一部分(或全部)(参看参考实施例4和实例67至71)。该瞬时制备方法也可以通过用缩醛基取代基保护9-位上的羟基来进行。
首先，下文描述了对天然存在的16-元大环内酯抗菌素柱晶白霉素Fr组[Journal of Antibiotics 28(6)，401(1975)]的游离羟基和醛基的保护。
作为第一步，式(Ⅳ)表示的化合物(在该式中，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)，即柱晶白霉素Fr组，单独或以多于一种成分的组合物或其盐的形式用作起始物，该起始物的碳霉糖(氨基糖)部分2′-位上的羟基用乙酰基保护，用上文反应路线2所述的相同方法得到式(ⅩⅩⅥ)表示的化合物(在该式中，R3是乙酰基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)。例如，通过使柱晶白霉素A7与乙酸酐在无水乙腈中进行反应定量得到了JP-B-53-30718中公开的已知化合物(41)(一种其中的R3是乙酰基，R4是丙酰基的式(ⅩⅩⅥ)化合物)。
接着，使式(ⅩⅩⅥ)化合物与必要量或过量的甲硅烷基化试剂在有碱的存在下进行反应，得到式(ⅩⅩⅧ)表示的化合物中其盐(在该式中，R2是羟基保护基如甲硅烷基保护基，缩醛基保护基或类似基团，或修饰羟基的取代基，R3是乙酰基或甲硅烷基保护基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基，R5是甲硅烷基保护基)，其中在3-和18-位上形成的半缩醛羟基和9-位上的羟基都被甲硅烷基化了。例如，使化合物(41)与叔-丁基二甲基甲硅烷基氯(TBDMSCl)在二甲基甲酰胺(DMF)中，在有咪唑的存在下进行反应，高收率地得到了化合物(42)(一种其中的R2是叔-丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)，R3是乙酰基，R4是丙酰基，R5是TBDMS基的式(ⅩⅩⅧ)化合物)，其中的3-和18-位上形成的半缩醛羟基和9-位上的羟基都被叔-丁基二甲基甲硅烷基化了。在反应路线4中所示的式(Ⅶ)、(ⅩⅩⅧ)、(ⅩⅪⅩ)、(ⅩⅩⅩ)、(ⅩⅩⅪ)、(ⅩⅩⅫ)表示的化合物的结构中，3-位羟基与18-位碳原子的键之间，及5-位羟基与1′-位碳原子的键之间的空间对应的位置关系(前后关系)尚不清楚。
如上所述，这里所示的制备方法有需要时可分别提供一种9-位上具有游离羟基的衍生物和另一种其同位上的羟基用某种取代基修饰的衍生物。因此，根据所注意的化合物的结构，通过将相同或不同的取代基引入到3-、9-和2′-位，不包括3″-位，的三个羟基上可进行合成的中间体的制备。例如，对于式(ⅩⅩⅧ)化合物，其中的R2不同于R5，是非甲硅烷基保护基的羟基保护基或修饰羟基的取代基，首先用参考实施例4和实施例67中所述的相同方法将式(ⅩⅩⅥ)化合物9-位上的羟基修饰，得到式(ⅩⅩⅦ)表示的化合物(在该式中，R2是羟基保护基如缩醛基保护基或类似基团，或修饰羟基的取代基，R3是乙酰基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基)。然后，按照上述与甲硅烷基化试剂的反应，通过将3-和18-位上形成的半缩醛羟基甲硅烷基保护基化可容易地制备式(ⅩⅩⅧ)化合物。
就此而论，其中R2是甲硅烷基保护基如TBDMS基，R3是甲硅烷基保护基如TBDMS基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基，R5是甲硅烷基保护基如TBDMS基的式(ⅩⅩⅧ)化合物，例如化合物(62)(一种其中的R2是TBDMS基，R3是TBDMS基，R4是丙酰基和R5是TBDMS基的式(ⅩⅩⅧ)化合物;EP-S-O595303)可通过单一步骤由式(Ⅳ)表示的化合物，按参考实施例2中的详细描述来制备。
关于18-位的立体化学，当3-和18-位上形成的半缩醛羟基被甲硅烷基化时，显著优先地形成了非对映异构体中的一个，18-位上另一个非对映异构体的形成是不显著的，如在螺旋霉素Ⅰ保护过程中所观察到的(JournalofAntibiotics，37(7)，750(1984)]。另一方面，根据所用的甲硅烷基保护基的种类和甲硅烷基化的条件，以及反应作用物的种类，不可否认地存在着产生18-位非对映异构体副反应的可能性。然而，在本发明制备方法的实践过程中这些异构体可以被分离或不被分离。
关于式(ⅩⅩⅧ)表示的各种化合物的合成中所使用的甲硅烷基，不但TBDMS基而且其它的甲硅烷基如异丙基二甲基甲硅烷基，乙基二甲基甲硅烷基及类似基团也可以使用，其中异丙基二甲基甲硅烷基特别适用于本发明的制备方法。至于用于TBDMS基引入的甲硅烷基化试剂，不但TBDMSCl，而且其它的通常用于将TBDMS引入羟基的试剂，如TBDMSOClO3、TBDMSOSO2CF3、TBDMSCN及类似试剂也可以使用。TBDMSCl最好可以理论量或过量使用，更好是以等当量或多于式(ⅩⅩⅥ)化合物的量使用。关于甲硅烷基化时使用的碱，不但咪唑，而且吡啶、二甲基氨基吡啶、二甲基吡啶、三乙胺及类似物可以使用。优选地是，咪唑可以两当量于或过量于甲硅烷基化试剂使用。另外DMF、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃(THF)和类似物可用作反应溶剂，但反应在DMF中进行常常会得到优良的结果。当反应在0至80℃的温度范围内，优选20至50℃，进行1小时至几天，优选几小时至24小时时，保护步骤以高收率完成。
第二，通过选择性地并用化学合成手段裂解式(ⅩⅩⅧ)化合物的一个典型实例物质的霉菌糖部分4″-位上的酰基侧链，该化合物为R2是甲硅烷基保护基，R3是乙酰基，R4是具有2至5个碳原子的直或支链脂肪酰基，R5是甲硅烷基保护基，得到了式(ⅩⅩⅨ)表示的化合物(在该式中，R2是羟基保护基如甲硅烷基保护基，缩醛基保护基或类似基团，或修饰羟基的取代基，R3是乙酰基或甲硅烷基保护基，R5是甲硅烷基保护基)。在式(ⅩⅩⅧ)表示的化合物中，将甲硅烷基引入到3-和18-位上形成的半缩醛羟基上，将醛基保护，且含有它们的7-元环部分与16-元内酯环形成了稠合环。因此，与具有3-位游离羟基和游离醛基及未形成稠合环的16-元大环内酯相比较，在强碱性条件下式(ⅩⅩⅧ)化合物内酯环自身的稳定性有了显著的提高。在式(ⅩⅩⅧ)表示的化合物中，即其中的R2是甲硅烷基保护基和R3是乙酰基的中间体具有两个酰基，2′-位上的乙酰基对于接着要进行的4″-位羟基的再酰化作用和3″-位羟基的甲硫基甲基化作用来说是不可缺少的。这样，在除去4″-位酰基时需保护2′-位的乙酰基。因此，本发明人测试了进行4″-位选择性地脱酰化作用的可能性，由于式(ⅩⅩⅧ)化合物是特殊脂溶性的，因而使用相转移催化剂，通过多相反应完成测试，本发明人成功地选择性地并定量地裂解了霉菌糖部分4″-位上的酰基。
作为该结果的一个实例，通过将化合物(42)溶于苯，并在室温下，在有四-正丁基硫酸氢铵存在下，将上述溶液与50%的氢氧化钠水溶液充分混合，有效地得到了化合物(43)(一种其中的R2是TBDMS基，R3是乙酰基，R5是TBDMS基的式(ⅩⅩⅨ)化合物)。该多相反应是通过在有相转移催化剂的存在下，剧烈搅拌由一般强度的碱性水层和其中溶有式(ⅩⅩⅧ)化合物的有机溶剂(不与水均匀混合)组成的混合物而进行的。溶于水层的强碱可以是氢氧化钠或氢氧化钾，它的浓度一般最好高些。不与水均匀混合的有机溶剂的例子包括苯、甲苯、二甲苯、正-戊烷、正-己烷、环己烷、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷及类似物，其中苯是优选的。相转移催化剂的例子包括四-正-丁基溴化铵、四-正-丁基氯化铵、苄基三乙基溴化铵、苄基三乙基氯化铵、四-正-丁基硫酸氢铵及类似物。相转移催化剂的用量为催化有效量至几当量于式(ⅩⅩⅧ)化合物，通常为1当量。该反应易于在5至40℃的温度下进行，一般在10分至几小时后完成，反应体系的有效混合会缩短反应时间并提高收率。
任何柱晶白霉素Fr组化合物都可用作本发明的起始物，但当霉菌糖部分4″-位上的酰基侧链的丙酰基(柱晶白霉素A7)而非异戊酰基(柱晶白霉素A1)时，该多相反应所需时间将被缩短且收率将稍有提高。在任何情况下，重要的脱酰化反应都可通过多相反应来完成而与作为侧链连接于4″-位羟基上的天然型酰基的种类无关。
接着，通过使式(ⅩⅩⅨ)化合物在有碱的存在下与必要量的酰化试剂反应得到了其4″-位被选择性酰化的式(ⅩⅩⅩ)表示的化合物或其盐(在该式中，R2是羟基保护基如甲硅烷基保护基，缩醛基保护基或类似基团，或修饰羟基的取代基，R3是乙酰基或甲硅烷基保护基，R4是具有1至10个碳原子的直或支链脂肪或芳香酰基，R5是甲硅烷基保护基)。例如，通过使化合物(43)与正戊酰氯在吡啶中进行反应，高收率地得到了其4″-位被选择性地正-戊酰基化了的化合物(44)(一种其中的R2是TBDMS基，R3是乙酰基，R4是正戊酰基，R5是TBDMS基的式(ⅩⅩⅩ)化合物)。
作为在该步中被用来将酰基引入到4″-位羟基的酰基化试剂，任何通常用作羟基酰基化的试剂，例如饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、芳香脂肪酸的酰卤化物或其酸酐都可以使用。优选地，可以使用1当量或过量的酰卤化物。酰化时使用的碱，除了吡啶外还可以使用二甲基氨基吡啶、二甲基吡啶、三乙胺和类似物。关于反应溶剂，任何通常用于羟基酰化的溶剂，如吡啶、DMF、氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯或类似物都可以使用，其中由于吡啶也可用作碱，因而它是特别优选的。该反应在15至60℃的温度下进行几分钟至24小时，可高收率完成。
在这种情况下，当霉菌糖部分4″-位上的酰基侧链的化学转化不需要时，上述一系列的制备式(ⅩⅩⅨ)和(ⅩⅩⅩ)表示的合成中间体的步骤即可省略。
第三，制备用作关键化合物的甲硫基甲基醚中间体。作为第一步，按照本申请的研究机构曾报导过的方法[Journal of Antibiotics，33(1)，61(1980)]将式(ⅩⅩⅩ)化合物3″-位上的羟基甲硫基甲基化，得到式(Ⅶ)表示的其中的R2是羟基保护基如甲硅烷基保护基，缩醛基保护基或类似基团，或修饰羟基的取代基，R3是乙酰基或甲硅烷基保护基，R4是具有1至10个碳原子的直或支链脂肪或芳香酰基，R5是甲硅烷基保护基的化合物。可以使用上文反应路线2中所述的相同反应条件。例如，通过使化合物(44)与DMSO和乙酸酐反应合成了化合物(45)(一种其中的R2是TBDMS基，R3是乙酰基，R4是正戊酰基，R5是TBDMS基)。
接着，脱去连接于式(Ⅶ)化合物2′-位羟基上的乙酰基，用上文反应路线2中所述的相同方法，以定量收率得到了式(ⅩⅩⅪ)表示的关键化合物(在该式中，R2是羟基保护基如甲硅烷基保护基，缩醛基保护基或类似基团，或修饰羟基的取代基，R4是具有1至10个碳原子的直或支链脂肪或芳香酰基)，即甲硫基甲基醚合成中间体，例如，通过使化合物(45)在甲醇中反应得到了化合物(46)(一种其中的R2是TBDMS基，R4是正戊酰基，R5是TBDMS基的式(ⅩⅩⅪ)化合物)。
第四，用上文反应路线2中所述的相同方法将引入的式(ⅩⅩⅪ)表示的关键中间体中性糖部分3″-位叔羟基上的甲硫基甲基选择性地还原，由此有效地合成了其3″-位的叔羟基被甲基化了的16-元大环内酯衍生物。将甲硫基甲基化的羟基催化还原成甲氧基的工艺及合成16-元大环内酯衍生物使用的方法所涉及的各种问题已在上文中进行了详细描述，因此在此不再提及。同样，选择性还原反应中所用的金属催化剂的活性控制及类似问题在此也不再描述。
使用Raney镍，其活性控制在适当水平，通过将式(ⅩⅩⅪ)表示的化合物3″-位上的甲硫基甲基化了的叔羟基化学转化为甲氧基，不引起其中双键的还原，选择性地合成了式(ⅩⅩⅫ)表示的化合物(在该式中，R2是羟基保护基如甲硅烷基保护基，缩醛基保护基或类似基团，或修饰羟基的取代基，R4是具有1至10个碳原子的直或支链脂肪或芳香酰基，R5是甲硅烷基保护基)。例如，通过使化合物(46)在乙醇中，与其活性被控制在合适的水平的Raney镍一起，在室温上进行短时间的搅拌，选择性地合成了化合物(47)(一种其中的R2是TBDMS基，R4是正戊酰基，R5是TBDMS基的式(ⅩⅩⅫ)化合物)。当9-位上的羟基用非甲硅烷基取代基修饰时，也能有效地进行该选择性还原反应，如化合物(69)的情况(一种其中的R2是乙酰基，R4是丙酰基，R5是TBDMS基的式(ⅩⅩⅪ)化合物)(参看实施例70)。
当由化合物(65)(一种其中的R2是TBDMS基，R3是TBDMS基，R4是异戊酰基，R5是TBDMS基的式(Ⅶ)化合物)制备化合物(57)(一种其中的R2是TBDMS基，R4是异戊酰基，R5是TBDMS基的式(ⅩⅩⅫ)化合物)时，用Raney镍将化合物(65)还原，然后按照在先申请(EP-A-O 595303)中公开的方法选择性地脱除连接于霉菌糖部分2′-位羟基上的TBDMS基(参看实施例66)。
最后，下面描述了两个连接于3-和18-位形成的半缩醛羟基和9-位羟基上的甲硅烷基的脱保护。这些甲硅烷基如TBDMS基可通过其与四-正-丁基氟化铵(TBAF)试剂或某种酸或在已知的有关羟基连接的甲硅烷基醚脱保护条件下进行而全部或部分地脱除(Theodora W. Greene and Peter G. M. Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2nd ed.，WileyNew York，1991)。用式(ⅩⅩⅫ)化合物作为反应作用物对各种脱甲硅烷基化反应试剂有效性的测试揭示了当用TBAF进行脱保护反应时可以得到好的结果。事实上，当用TBAF进行脱保护时，其R2和R5都是TBDMS基的式(ⅩⅩⅫ)化合物可化学转化为最终的式(Ⅷ)表示的重要化合物。例如，通过使化合物(47)与过量的TBAF在THF中加热条件下进行反应得到了作为主产物的化合物(48)(一种其中的R2是氢原子，R4是正戊酰基的式(Ⅷ)化合物)。
当用TBAF脱除两个甲硅烷基如TBDMS基时，通过以反应体系不与水混合的方式进行反应可以加速反应的完成并完全避免副反应。在这种情况下，由于TBAF作为强碱与游离醛基进行反应，因此必需注意反应的后处理，以便能高收率地完成脱保护步骤，这一内容将在下文实施例中详细描述。尽管当使用THF时常常会得到好的结果，但是不仅醚类溶剂而且卤素基类溶剂，氰基类溶剂及类似物可以用作TBAF辅助的脱保护反应溶剂。另外，TBAF在反应溶剂中的浓度可对该反应的完全起重要的作用。也就是说，当TBAF与反应作用物的当量比保持恒定值时，如果TBAF在反应作用物中的浓度太低(太多的反应溶剂)或太高(太少的反应溶剂)，该反应不易进行完全。一般来说，在0.5至4M，优选1至2M的浓度下该反应可有效地进行。TBAF的用量可为2至更多当量，当使用10或更多当量的TBAF时，可达到完全并快速的脱保护作用，该反应可在0至25℃下进行1至几小时。
在这种情况下，根据本发明，通过按照已知方法[Hakko to Kogyo，37(12)，1171(1979)]选择性地酰化式(Ⅷ)表示的化合物或其盐的9-或2′-位上的羟基;按照已知方法[ChemicalandPharmaceuticalBulletin，18(8)，1501(1970);ScientificReportofMeijiSeikaKaisha，12，85(1972)l和JournalofAntibiotics，35(11)，1521(1982)]，将化合物9-位上的羟基在稀酸的存在下烯丙位重排到11-或13-位上;或按照已知方法[Journal of Antibiotics，24(8)，526(1971)]，选择性地氧化9-位上的羟基可以制备出新的并有用的物质。例如，通过按照已知方法(JP-A-48-13380)选择性地丙酰基化化合物(2)(一种其中的R2的氢原子，R4是丙酰基的式(Ⅷ)化合物)9-位上的羟基合成了化合物(71)(一种其中的R1是氢原子，R2是丙酰基，R3是氢原子，R4是丙酰基的式(Ⅰ)化合物)(参看实施例72)。化合物(71)也可以按照实施例67至71中所示的合成方法制备，其中使用了9-0-酰基中间体。本发明化合物可以是药学上可接受的无机或有机盐形式。盐的例子包括无机酸如盐酸、硫酸、硝酸、磷酸的盐和有机酸如乙酸、硬脂酸、苹果酸和琥珀酸的盐。
本发明第一方面的意义在于制备了一种新的和有用的16-元大环内酯衍生物。本发明这些化合物的抗微生物活性通过测定最小抑制浓度(MIC)来确定。最小抑制浓度按下列方式通过琼脂盘稀释法来确定。
将受试菌株用敏感性试验肉汤(STB Nissui药品)进行接种培养，而将属于链球菌属，莫拉氏菌属和嗜血杆菌属的菌株在血液琼脂盘上进行培养。将约含106CFU/ml的5μl受试菌株的细胞悬浮液接种到含有5%马血的敏感性盘的琼脂(SDA，Nissui药品)上并在37℃下孵育20小时。然后，测定MIC。在本发明得到的式(Ⅰ)化合物中，如化合物(1)，(2)，(3)和(4)本身既具有很强的对临床上重要的革兰氏阳性细菌和支原体的抗微生物活性化合物(1)和(2)的体外抗微生物活性如表1所示，而化合物(3)和(4)的体外抗微生物活性如表3所示。其中9-位是一个SP3碳同时3″-位的叔羟基被甲基化而4″-位的羟基被酰化的每一个化合物(1)和(2)其抗大多数受试菌株的体外抗微生物活性是3″-位的叔羟基是游离形式的相应化合物即麦迪霉素A1(麦迪霉素MDM)和柱晶白霉素A7(LM-A7)的两倍[Journal of Antibiotics，Ser，A，20(4)，234(1967)]。特别地，化合物(1)和(2)具有显著提高的抗肺炎链球菌的抗微生物活性，而肺炎链球菌是一种能导致上呼吸道感染的临床上重要的细菌。
为了比较本发明得到的化合物与极好的大环内酯抗微生物剂的体外抗微生物活性，在表2中给出了rokitamycin(RKM)[JournalofAntibiotics，34(8)，1001(1981)]和Clarithromycin(CAM)的抗微生物活性(与化合物(2)同时测定)。即使与商业上可得到的16-元大环内酯抗生素(药物制剂)中具有最强的体外抗微生物活性的rokitamycin相比，本发明化合物(2)的MIC值除了一种革兰氏阴性细菌(卡他布兰汉氏球菌)(Branhamellacatarrhalis)外通常是极好的。当与一种新的14-元大环内酯Clarithromycin比较时，化合物(2)对药物耐受性葡萄球菌属菌株显示出明显强的体外抗微生物活性，同时显示出类似的或略强的抗粪便肠球菌和流感嗜血杆菌的活性，虽然它对卡他布兰汉氏球菌的活性低于Clarithromyocin。因此，可以确信本发明化合物(2)属于一组具有极好的抗革兰氏阳性菌的抗微生物活性的大环内酯衍生物。
由式(ⅩⅨ)和(ⅩⅩ)代表的本发明其它化合物也具有极好的抗革兰氏阳性菌的抗微生物活性。在式(ⅩⅨ)代表的化合物中，9-位的羟基被酰基化的化合物(5)和(11)每一个其体外抗微生物活性与极好的16-元大环内酯抗微生物剂，麦迪霉素酯(miokamycin)(MOM)[[Journal of Antibiotics，29(5)，536(1976)]类似或比它高。化合物(11)的抗卡他布兰汉氏球菌的抗微生物活性略强于化合物(5)。另外，内酯环9-位的羟基被1-乙氧乙基化了的化合物(16H)和(16L)具有抗微生物活性，虽然它比内酯环9-位的相应羟基是游离形式的化合物(1)的活性要低。
式(Ⅵ)代表的本发明化合物中的一些衍生物也具有极好的抗临床上重要的革兰氏阳性菌等细菌的抗微生物活性。作为式(Ⅵ)代表的化合物中一个具有说明性的例子，其中3-及9-位的羟基是游离形式而4″-位的羟基被一个正丁酰基取代的化合物(33)的抗微生物活性与rokitamycin和clarithromycin的活性同时加以测定，结果显示在表4中。与rokiatmycin比，从柱晶白霉素A5化学衍生出的化合物(33)具有极好的体外抗微生物活性。此外，该化合物与具有较强抗微生物活性的最好的柱晶白霉素衍生物之一的化合物(2)相比通常显示出增强的抗微生物活性，它的突出的抗微生物活性与在新的大环内酯抗生素中具有最强抗微生物活性的clarithromycin的活性完全类似。到目前为止对具有clarithromycin相同水平抗微生物活性的16-元大环内酯衍生物实际知道的很少。
式(Ⅷ)代表的化合物(48)，(53)和(58)每一个都具有很强的抗临床上重要的革兰氏阳性菌等细菌的抗微生物活性。这三个发明化合物和作为比较的rokitamycin和麦迪霉素酯的同时被测定的抗微生物活性如表5中所示。从表中清楚地看到，这些化合物，特别是(48)和(53)，与rokitamycin相比具有极好的抗微生物活性。到目前为止，还没有关于柱晶白霉素衍生物的任何信息，该衍生物的结构与化合物(48)相似，其中非天然类型的酰基侧链被引入到霉菌糖部分4″-位的羟基上并且3″-位的羟基被甲基化，结果，通过研究其生化价值，这些新化合物的开发过程不仅导致了具有很强活性新物质的发明也为阐述16-元大环内酯衍生物的构效关系和其结构与药物动力学的关系提供了重要信息。实际上具有非天然酰基侧链的化合物(48)和不用本发明生产方法几乎不能通过化学合成得到的化合物(53)比具有天然类型酰基侧链的化合物(58)具有略强抗微生物活性。
其次，化合物(3)和(4)的抗微生物活性列于表3中并列出了麦迪霉素M1(MDM-M1)[Journal of Bacteriology，174(15)，5141(1992);和JP-A-48-10288]和柱晶白霉素V(LM-V)[Journal of Antibiotics 28(6)，401(1975)]的活性作为比较。其中9-位是一个SP3碳并且同时3″-位的叔羟基被甲基化及4″-位的羟基是游离形式的化合物(3)和(4)每个具有强的抗微生物活性，与其中3″-位的叔羟基是游离形式的相应化合物即麦迪霉素M1和柱晶白霉素V相比它们的抗大多数受试菌株的MIC值提高了2至3倍。
当然，为了获得口服抗微生物剂的极好的临床结果，它不仅应该具备较高的体外抗微生物活性而且也应具备较高的药物的ADME，它的实际的药物动力学等应对临床效果产生不小的影响。在这一点上已经有报导指出虽然代谢的方式因活体种类而有所不同，但是活体在口服一种药物后复合物的代谢开始进行并且所服药物的中性糖中的酰基随着时间而被消除，因而药物本身的抗微生物活性逐渐降低，即使对临床治疗作用比相应的天然化合物[YakugakuZasshi，102(8)，781(1982);及SymposiumonnoveldrugsIV，TMS-19-Q，P.109，31stGeneralMeetingoftheSocietyofJapanChemotherapy]强的16-元大环内酯抗微物剂的麦迪霉素和rokitamycin也是如此。
假设与4″-位的羟基所连接的酰基在式(Ⅺ)和(Ⅻ)代表的化合物的代谢过程中类似于麦迪霉素酯和rokitamycin那样而被消除，可以推测式(ⅩⅢ)和(ⅩⅣ)所代表的化合物将分别作为它们的代谢物而被形成，虽然还没有关于其3″-位的叔羟基被甲基化并同时其4″-位的羟基被酰基化的16-元大环内酯衍生物的代谢方面的报导。换句话说当假设化合物(2)的中性糖部分在类似于其中16-元大环内酯衍生物的代谢过程中被在4-位去酰基时，未代谢的化合物(2)的体外抗微生物活性略强于rokitamycin的活性，并且被假设为是化合物(2)中性糖部分最终代谢物的化合物(4)的抗微生物活性是柱晶白霉素V的4至8倍，而柱晶白霉素V是rokitamycin的最终代谢物。这一点简要说明了化合物(2)的突出的感染的治疗作用。即使化合物(2)不进行这样的一种代谢，它的极好的抗微生物活性在体内持续一段相对延长的时间而不存在任何特殊的问题。
表1抗微生物活性(MIC:μg/ml)化合物化合物比较受试菌株 (1) (2) MDM LM-A7金黄色葡萄球菌209P JC-10.200.100.390.10金黄色葡萄球菌M1330.390.200.780.39金黄色葡萄球菌M126>100>100>100>100金黄色葡萄球菌>100>100>100>100MS15009/PMS99金黄色葡萄球菌MS15026>100>100>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS980.200.200.390.20金黄色葡萄球菌MS150270.390.200.780.39表皮葡萄球菌ATCC149900.780.200.780.39藤黄小球菌ATCC93410.05<0.0250.050.05粪便肠杆菌W-731.560.393.130.78大肠杆菌NIHJ JC-2>100>100>100>100肺炎杆菌PCI602>100>100>100>100肺炎链球菌IP6920.10<0.0250.390.101型肺炎链球菌0.100.050.390.20酿脓葡萄球菌0.100.050.200.10B.catarrhalis W-05000.780.393.130.78B.catarrhalis W-05060.780.783.130.78流感嗜血杆菌93341.560.786.250.78b型流感嗜血杆菌12.56.25256.25
表2抗微生物活性(MIC:μg/ml)比较受试菌株RKMCAM金黄色葡萄球菌209P JC-10.100.10金黄色葡萄球菌M1330.391.56金黄色葡萄球菌M126>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS99>100>100金黄色葡萄球菌MS15026>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS980.39>100金黄色葡萄球菌MS150270.781.56表皮葡萄球菌ATCC149900.780.10藤黄小球菌ATCC93410.05<0.025粪便肠杆菌W-730.390.78大肠杆菌NIHJ JC-2>100=100肺炎杆菌PCI602>100=100肺炎链球菌IP6920.10<0.0251型肺炎链球菌0.10<0.025酿脓葡萄球菌0.05<0.025B.catarrhalis W-05000.200.20B.catarrhalis W-05060.200.20流感嗜血杆菌93341.561.56b型流感嗜血杆菌6.256.25
表3抗微生物活性(MIC:μg/ml)化合物化合物比较受试菌株 (3) (4) MDM-M1LM-A7金黄色葡萄球菌209P JC-10.390.396.251.56金黄色葡萄球菌M1331.560.7812.56.25金黄色葡萄球菌M126>100>100>100>100金黄色葡萄球菌>100>100>100>100MS15009/PMS99金黄色葡萄球菌MS15026>100>100>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS980.780.396.253.13金黄色葡萄球菌MS150270.780.786.253.13表皮葡萄球菌ATCC149901.560.7812.53.13藤黄小球菌ATCC93410.100.050.390.20粪便肠杆菌W-730.780.7812.56.25大肠杆菌NIHJ JC-2>100>100>100>100肺炎杆菌PCI602>100>100>100>100肺炎链球菌IP6920.100.100.780.391型肺炎链球菌0.100.050.780.39酿脓葡萄球菌0.200.101.560.39B.catarrhalis W-05003.131.562512.5B.catarrhalis W-05063.131.562512.5流感嗜血杆菌933412.51.56=10012.5b型流感嗜血杆菌5012.5>10050
表4抗微生物活性(MIC:μg/ml)化合物比较受试菌株(33)RKMCAM金黄色葡萄球菌209P JC-10.050.200.05金黄色葡萄球菌M1330.200.78>100金黄色葡萄球菌M126>100>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS99>100>100>100金黄色葡萄球菌MS15026>100>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS980.100.78>100金黄色葡萄球菌MS150270.200.78>100表皮葡萄球菌ATCC149900.200.780.10藤黄小球菌ATCC9341<0.0250.05<0.025粪便肠杆菌W-730.781.560.78大肠杆菌NIHJJC-2>100>10050肺炎杆菌PCI602=100>10050肺炎链球菌IP692<0.0250.20<0.0251型肺炎链球菌<0.0250.20<0.025酿脓葡萄球菌<0.0250.20<0.025B.catarrhalis W-05000.100.390.10B.catarrhalis W-05060.200.780.10流感嗜血杆菌93340.206.251.56b型流感嗜血杆菌1.5612.56.25
表5抗微生物活性(MIC:μg/ml)化合物化合物化合物受试菌株(48)(53)(58)金黄色葡萄球菌209P JC-10.050.050.05金黄色葡萄球菌M1330.200.200.39金黄色葡萄球菌M126>100>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS99>100>100>100金黄色葡萄球菌MS15026>100>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS980.200.200.20金黄色葡萄球菌MS150270.200.200.20表皮葡萄球菌ATCC149900.200.200.20藤黄小球菌ATCC9341<0.025<0.025<0.025粪便肠杆菌W-730.780.780.78大肠杆菌NIHJ JC-2>100>100>100肺炎杆菌PCI602>100>100>100肺炎链球菌IP692<0.025<0.0250.051型肺炎链球菌<0.025<0.0250.05酿脓葡萄球菌<0.025<0.0250.05B.catarhalis W-05000.100.200.20B.catarrhalis W-05060.200.200.20流感嗜血杆菌93340.780.390.78b型流感嗜血杆菌6.256.256.25
表5(续)抗微生物活性(MIC:μg/ml)比较受试菌株MOMRKM金黄色葡萄球菌209P JC-10.390.20金黄色葡萄球菌M1330.780.78金黄色葡萄球菌M126>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS99>100>100金黄色葡萄球菌MS15026>100>100金黄色葡萄球菌MS15009/PMS980.780.78金黄色葡萄球菌MS150270.780.78表皮葡萄球菌ATCC149900.780.78藤黄小球菌ATCC93410.100.05粪便肠杆菌W-736.251.56大肠杆菌NIHJ JC-2>100>100肺炎杆菌PCI602>100>100肺炎链球菌IP6920.200.201型肺炎链球菌0.200.20酿脓葡萄球菌0.200.10B.catarrhalis W-05001.560.78B.catarrhalis W-05061.560.39流感嗜血杆菌93346.256.25b型流感嗜血杆菌5012.5
与目前已知的16-元大环内酯抗微生物剂相比式(Ⅰ)代表的化合物在小鼠的感染治疗试验中产生了极好的体内作用。例如，在其中使用了肺炎球菌株肺炎链球菌DP-1Ⅰ型的小鼠感染治疗试验中，作为式(Ⅰ)化合物之一的化合(5)显示了与1/4或更少量Miokamycin及1/8或更少量rokitamycin的协同的感染治疗作用。这种优异的作用与3″-位的叔羟基结合一个酰基而成的酯无关，但却与甲基结合的醚直接有关。换句话说，与作为一种麦迪霉素酯相应物质的麦迪霉素M1[Journal of Bacteriology，174(15)，5141(1992);及JP-A-48-10288]的活性相比，化合物(5)的一种假设的体内代谢物即3″-O-甲基麦迪霉素M1(3″-O-甲基-3-O-丙酰基柱晶白霉素V)的较高的抗微生物活性似乎是这种突出的体内作用的一个因素。在这一点上，已经有报导指出当与丙酰基相比较时，与4″-位上的羟基相连的异戊酰基在小鼠血浆中不容易消除[Yakugaku Zasshi 102(8)，781(1982)]。因此，可以预测当化合物(11)或本发明其它化合物进行小鼠感染治疗试验时，其体内作用与化合物(5)的类似或更高。
另一方面，从化合物(1)，(2)和(33)分别通过酰化内酯环9-位上的每一个羟基而得到的化合物(5)，(6)和(39)以及从化合物(33)通过相同部位丙酰化而得到的化合物(40)自身都具有很强的抗微生物活性，虽然它们的活性略低于其起始物质(1)，(2)和(3)的活性。
如上面已经描述的，第一次揭出麦迪霉素和柱晶白霉素16-元大环内酯衍生物抗各种细菌特别是抗肺炎链球菌的体外抗微生物活性能通过甲基化3″-位的叔羟基而得到增强。也就是说，具有极好抗微生物活性的式(Ⅰ)代表的各种衍生物可通过开发一个衍生物合成计划来制备，该计划基于L-Chladinose(红霉素的一种构成成份糖)的化学结构以从16-元大环内酯化合物的构效关系得到的信息为基础。
本发明第二方面的意义在于一种新的生产方法，通过这种方法式(Ⅲ)代表的化合物可用一种已知的式(Ⅱ)代表的天然产物16-元大环内酯抗生素作起始物质经3″-O-甲硫甲基合成中间体不进行糖基反应通过4至6步而有效地得到。例如，当本发明化合物(5)用麦迪霉素A3和红霉素作起始物质来制备时，该方法需要包括糖基化和1个微生物转化步骤在内的9步化学的反应，但从麦迪霉素A3得到的总产率最高不超过5%。相反，以麦迪霉素作为起始物本发明新的生产方法使得化合物(5)可以约20%的总产率合成。
此外，提供一种通用的方法，该方法适用于在温和的反应条件下将甲基间接地引入具有很差化学稳定性的化合物中的叔羟基上。用于将甲硫甲基醚化羟基转化为甲氧基的反应如前面所述已经是已知的[CarbohydrateResearch，7，474(1968)]，但是关于该化学转化反应对叔羟基的应用知道的很少。此外，关于该反应对含有在催化还原条件下显示高反应活性的官能团如双键，游离醛基等的化合物的应用实际上报导得很少。
也提供了一种保护基，它可用于16-元大环内酯抗生素衍生物的研究以有效地保护内酯环9-位的羟基。当一个极好的衍生物用一种天然产物作起始物质通过化学反应来生产时，通常有必要保护特殊的官能团如氨基，羟基等。对于在16-元大环内酯化合物的合成化学研究中用于9-位羟基的有效保护基实际上知道的非常少。本发明已确证一些具有不对称碳原子的乙缩醛结构保护基特别是1-乙氧乙基具有作为保护基的足够的特征。
本发明的第三个方面的意义在于一种新的生产方法，通过该方法其内酯环3-位上羟基是游离形式的本发明化合物即其中R1是氢原子的式(Ⅵ)代表的化合物或其类似物可以用一种式(Ⅳ)代表的已知的天然产物16-元大环内酯抗生素作起始物质经3″-O-甲硫甲基合成中间体通过6步或更少步骤来得到，而不需使用糖基化反应和3，18-半缩醛基-18-O-甲硅烷基合成中间体。其中内酯环3-位羟基是游离形式而同时中性糖部分3″-位的羟基被甲基化的16-元大环内酯衍生物使用本发明的生产方法第一次可通过纯的合成化学方法来制备。
在其中SP3碳位于内酯环9-位的柱晶白霉素衍生物(不包括螺旋霉素)的研究中也提供了一种保护基，它可用于有效地保护内酯环3-位的羟基。当使用一种天然产物作起始物质通过化学反应来生产一种极好的衍生物时，通常有必要保护特殊的官能团如氨基，羟基等。在16-元大环内酯化合物的衍生物的合成化学研究中，具有不对称碳原子的缩醛结构的取代基被仅用于泰乐菌素和螺旋霉素作为3-位羟基保护基。该取代基作为保护基的应用性是有限的，其原因是由于烯丙基位(9-位)羟基的存在，当所说的保护基在酸催化剂的存在下被引入到内酯环3-位的羟基上时，其中内酯环9-位的羟基是游离形式的化合物发生分子的异构化。本发明已经确证一些具有不对称碳原子的乙缩醛结构的保护基特别是1-乙氧乙基具有足够的特性作为其内酯环9-位羟基是游离形式的16-元大环内酯化合物的内酯环3-位羟基的保护基。
本发明第四个方面的意义在于提供了一种新的生产方法，在该方法中使用式(Ⅳ)代表的一种已知的天然16-元大环内酯抗生素作起始物质不采用糖基化反应而通过纯的合成化学的方法来获得一种新的式(Ⅷ)所代表的16-元大环内酯衍生物。该新生产方法能够在温和的反应条件下将甲基间接引入存在于具有很差化学稳定性的化合物中的叔羟基上，同时生产出在4″-位含有任何所需的天然或非天然类型酰基侧链的所述新的16-元大环内酯衍生物。换句话说，这种新的生产方法不仅提供了将甲基引入到霉菌糖部分的叔羟基上的方法也提供了一种剧烈的化学转化方法，在该方法中中性糖部分中4″-位的羟基可以在选择性去酰基化反应之后被酰基化。结果，其霉菌糖部分4″-位的羟基被改性的一种全新结构的新的16-元大环内酯衍生物通过使用这种新的生产方法而被制备出来。
16-元大环内酯衍生物可以与已知的药物上可接受的载体一起被配制成抗微生物的药物组合物。
下列实施例和参考实施例用于进一步详细说明本发明，但对本发明的范围不构成限制。
实施例1化合物(1)的生产方法[式(Ⅰ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表氢原子，R3代表氢原子而R4代表丙酰基](3″-O-甲基麦迪霉素A1)。
在使用前将含有2.0%葡萄糖，1.0%聚胨，0.05%磷酸氢二钾，0.05%硫酸镁七水合物和0.3%氯化钠的介质调至PH7.0并灭菌。将上面提到的介质以100ml每份移液至40个500ml-Erlenmeyer氏烧瓶中并在120℃灭菌30分钟。将每个烧瓶中的介质用2.0ml细胞密度为10-15%的Streptomyces mycarofaciens SF 2772菌株的冷冻菌种接种，然后将其振摇下在28℃孵育24小时。其次，将60ml含472mg式(Ⅹ)代表的化合物(其中R1代表丙酰基且R4代表丙酰基)(3″-O-甲基麦迪霉素A3)的甲醇溶液以1.5ml每份加到每个烧瓶中并在振摇下在28℃继续孵育20小时，孵育完成后，将培养物在3000rpm下离心10分钟。这样得到3.5升透明的培养物上清液，同时除去包括细胞在内的固体物质。向固体物质中加入2.0升水并将混合物在搅拌后离心。将如此得到的洗液与上述透明的培养物上清液合并。将混合物调至PH9后，将转化的产物先后用5.5升乙酸乙酯和2.8升乙酸乙酯萃取两次。将乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，然后过滤。将滤液在减压下浓缩并将如此得到的残余物经制备性TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇(10∶1)]。这样得到321mg粗化合物(1)。该粗产物通过交联葡聚糖凝胶LH-20柱色谱法纯化(柱床体积1.0升，甲醇)得到223mg化合物(1)。
化合物(1)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C42H69NO15(3)质谱(SIMS)m/z828(M H) (4)比旋率[α]15D-65℃(C1.0，CH3OH)(5)m.p.没有一个确切的熔点大约在116-120℃熔化。
(6)1H NMR谱 (400MHz，CDCl3)δ(ppm)2.24(br d，2-H)，2.76(dd，2-H)，5.14(br d，3-H)，3.26(br d，4-H)，3.57(s，4-OCH3)，3.88(br d，5-H)，0.92(br ddd，7-H)，1.54(br dt，7-H)，1.89(m，8-H)，4.07(dd，9-H)，5.61(dd，10-H)，6.67(dd，11-H)，6.08(br dd，12-H)，5.79(ddd，13-H)，2.15(dt，14-H)，5.03(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.32(br dd，17-H)，2.86(br dd，17-H)，9.63(br s，18-H)，0.98(d，19-H3)，2.51(dq，3-OCOCH2CH3)，2.64(dq，3-OCOCH2CH3)，1.22(t，3-OCOCH2CH3)，4.52(d，1′-H)，3.22(dd，2′-H)，2.42(t，3′-H)，3.44(t，4′-H)，3.29(dq，5′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.66(dd，2″-Hax)，2.29(d，2″-Heq)，4.72(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.07(d，6″-H3)，1.10(s，7″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.42(明显的q，4″-OCOCH2CH3)，2.43(明显的q，4″-OCOCH2CH3)，1.17(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例2化合物(2)的生产方法(1)[式(Ⅰ)代表的化合物，其中R1代表氢原子，R2代表氢原子，R3代表氢原子而R4代表丙酰基][3″-O-甲基柱晶白霉素A7]作为预培养介质，采用含2.0%淀粉，1.0%葡萄糖，0.6%麦胚，0.5%聚胨，0.3%粉末状酵母提取物，0.2%大豆粉和0.2%碳酸钙的介质。作为转化介质，采用含3.0%葡萄糖，1.5%淀粉，1.25%大豆粉，0.8%麦胚，0.125%氯化钠和0.15%碳酸钙的介质。使用前将这些介质调至PH7.0，然后灭菌。将上面提到的预培养介质以20ml每份移液至5个100ml的Erlenmeyer烧瓶中并在120℃下灭菌30分钟。然后将预培养介质用一白金圈的瓶霉属(Phialophora)SP.PF1083菌株(FERM BP-3960)接种，该瓶霉属SP.PF1083菌株已经由含0.2%酵母提取物，1.0%淀粉和2.0%琼脂粉的斜面琼脂培养基(PH7.0)在26℃下静止孵育了4-6天，随后在振摇下在26℃孵育2天。这样得到了预培养液。其次，将上述转化介质以100ml每份移液至15个500ml的Erlenmeyer烧瓶中并在120℃下灭菌30分钟。然后将22.5ml含393mg式(Ⅺ)代表的化合物(1)(其中R1代表丙酰基并且R4代表丙酰基)(3″-O-甲基麦迪霉素A1)的甲醇溶液以1.5ml每份加到每个烧瓶中并将每个烧瓶中的转化介质用5ml种培养液接种，随后在振摇下在26℃孵育10天。孵育完成后，将培养液在3000rpm下离心10分钟。这样得到1.1升透明培养物上清液，同时除去包括细胞在内的固体物质。向固体物质中加入900ml水并将所得混合物在搅拌后离心。将如此得到的洗液与上述透明的培养物上清液合并，将混合物调至PH9后，将转化产物先后用1.5升乙酸乙酯和1.0升乙酸乙酯萃取两次。将乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，然后过滤。将滤液减压浓缩并将如此得到的残余物经制备性TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(400∶40∶1)]得到102mg化合物(2)。同时，回收63mg化合物(1)。
化合物(2)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C39H65NO14
(3)质谱(EIMS)m/z771(M) (4)比旋率[α]17D-79°(C1.0，CH3OH)(5)m.p.没有一个确切的熔点，在约111-113℃熔化。
(6)1H NMR谱 (400MHz，CDCl3)δ(ppm)2.22(d，2-H)，2.70(dd，2-H)，3.79(br d，3-H)，3.09(br d，4-H)，3.54(s，4-OCH3)，4.11(br d，5-H)，0.95(br ddd，7-H)，1.60(br dt，7-H)，1.90(m，8-H)，4.10(dd，9-H)，5.68(dd，10-H)，6.26(dd，11-H)，6.03(br dd，12-H)，5.61(ddd，13-H)，2.12(dt，14-H)，2.51(br dt，14-H)，5.29(ddq，15-H)，1.30(d，16-H3)，2.34(br dd，17-H)，2.87(br dd，17-H)，9.80(br s，18-H)，0.99(d，19-H3)，4.58(d，1′-H)，3.22(dd，2′-H)，2.42(t，3′-H)，3.45(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，1.19(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.66(dd，2″-Hax)，2.29(d，2″-Heq)，4.72(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.07(d，6″-H3)，1.10(s，7″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.42(明显的q，4″-OCOCH2CH3)，2.43(明显的q，4″-OCOCH2CH3)，1.17(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例3化合物(3)的生产方法[式(Ⅰ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表氢原子，R3代表氢原子且R4代表氢原子](3″-O-甲基麦迪霉素M1)作为预培养介质，采用含2.0%淀粉，1.0%葡萄糖，0.5%聚胨，0.6%麦胚，0.3%酵母提取物，0.2%大豆饼和0.2%碳酸钙的介质。使用前将介质调至PH7.0然后灭菌。将该介质以20ml每份移液至3个100ml Erlenmeyer烧瓶中并在120℃下灭菌30分钟。然后将预培养介质用1.0ml Mucor Spinescens IAM6071菌株的冷冻菌种接种并在振摇下在26℃孵育24小时得到预培养液。作为转化介质，采用含1.8%葡萄糖，0.9%淀粉，1.25%大豆饼，0.8%麦胚，0.125%氯化钠和0.15%碳酸钙的介质。使用前将该介质调至PH7.0然后灭菌。将转化介质以100ml每份移液至7个500ml Erlenmeyer烧瓶中并在120℃灭菌30分钟。然后将10.5ml含88mg式(Ⅺ)代表的化合物(1)(其中R1代表丙酰基且R4代表丙酰基)(3″-O-甲基麦迪霉素A1)的甲醇溶液以1.5ml每份的量加到每个烧瓶中并将每个烧瓶中的转化介质用5.0ml IAM6071菌株预培养液接种，随后在振摇下在26℃孵育8天以利于微生物的转化，孵化完成后，将培养液调至PH9然后向其中加入600ml乙酸乙酯，将所得混合物剧烈振摇，随后在3500rpm下离心10分钟。将两个乙酸乙酯层合并，用无水硫酸钠干燥然后过滤。将滤液减压浓缩并将如此得到的残余物经制备性TLC纯化(展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(100∶10∶1)]得到32mg化合物(3)。同时回收到24mg化合物(1)。
化合物(3)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C39H65NO14(3)质谱(EIMS)m/z771(M)
(4)比旋率[α]17D-56(C1.0，CH3OH)(5)m.p.未显示一个确切的熔点在约120-122℃下熔化。
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.24(br d，2-H)，2.76(dd，2-H)，5.14(br d，3-H)，3.26(br d，4-H)，3.58(s，4-OCH3)，3.88(br d，5-H)，0.92(br ddd，7-H)，1.54(br dt，7-H)，1.89(m，8-H)，4.07(dd，9-H)，5.61(dd，10-H)，6.67(dd，11-H)，6.08(br dd，12-H)，5.79(ddd，13-H)，2.15(dt，14-H)，2.46(br dt，14-H)，5.03(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.32(br dd，17-H)，2.86(br dd，17-H)，9.63(br s，18-H)，0.98(d，19-H3)，2.51(dq，3-OCOCH2CH3)，2.65(dq，3-OCOCH2CH3)，1.22(t，3-OCOCH2CH3)4.51(d，1′-H)，3.21(dd，2′-H)，2.39(t，3′-H)，3.44(t，4′-H)，3.27(dq，5′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.55(s，3′-N(CH3)2)，4.88(d，1″-H)，1.57(dd，2″-Hax)，2.23(d，2″-Heq)，3.01(br t，4″-H)，4.18(dq，5″-H)，1.23(d，6″-H3)，1.22(s，7″-H3)，3.22(s，3″-OCH3).
实施例4化合物(4)的生产方法[式(Ⅰ)代表的化合物，其中R1代表氢原子，R2代表氢原子，R3代表氢原子且R4代表氢原子](3″-O-甲基柱晶白霉素V)使用前将实施例3中所用的相同的预培养介质调至PH7.0，然后灭菌。MucorSpinescensIAM6071菌株的预培养液按实施例3的相同方式制备。同样，使用前将与实施例3所用的相同的转化介质调至PH7.0，然后灭菌。将转化介质以100ml每份移液至7个500ml Erlenmeyer烧瓶中并在120℃灭菌30分钟。然后，将10.5ml含82mg式(Ⅻ)代表的化合物(2)(其中R4代表丙酰基)(3″-O-甲基麦迪霉素A7)的甲醇溶液以1.5ml每份加到每个烧瓶中并将每个烧瓶中的转化介质用5.0ml IAM6071菌株预培养液接种，随后在振摇下在26℃孵育9天以利于微生物的转化。孵育完成后，将培养液调至PH9，然后向其中加入600ml乙酸乙酯。将所得的混合物剧烈振摇并在3500rpm下离心10分钟以分离乙酸乙酯层。向包含细胞的固体物质和水层中加入600ml乙酸乙酯并将所得混合物剧烈振摇，随后在3500rpm下离心10分钟。将两个乙酸乙酯层合并，用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩并将如此得到的残余物经制备性TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(100∶10∶1)]得到17mg化合物(4)。同时，加收14mg化合物(2)。
化合物(4)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C39H65NO14(3)质谱(EIMS)m/z715(M) (4)比旋率[α]17D-74°(C1.0，CH3OH)(5)m.p.未显示一个确切的熔点，在约117至122℃熔化。
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.23(d，2-H)，2.70(dd，2-H)，3.80(br d，3-H)，3.10(br d，4-H)，3.55(s，4-OCH3)，4.11(br d，5-H)，0.95(br ddd，7-H)，1.60(br dt，7-H)，1.91(m，8-H)，4.11(dd，9-H)，5.69(dd，10-H)，6.27(dd，11-H)，6.04(br dd，12-H)，5.61(ddd，13-H)，2.12(dt，14-H)，2.51(br dt，14-H)，5.29(ddq，15-H)，1.31(d，16-H3)，2.34(br dd，17-H)，2.88(br dd，17-H)，9.80(br s，18-H)，0.99(d，19-H3)，4.58(d，1′-H)，3.23(dd，2′-H)，2.40(t，3′-H)，3.44(t，4′-H)，3.26(dq，5′-H)，1.19(d，6′-H3)，2.56(s，3′-N(CH3)2)，4.89(d，1″-H)，1.57(dd，2″-Hax)，2.24(d，2″-Heq)，3.01(br t，4″-H)，4.18(dq，5″-H)，1.23(d，6″-H3)，1.22(s，7″-H3)，3.22(s，3″-OCH3).
实施例5化合物(5)的生产方法(1)[式(Ⅰ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表乙酰基，R3代表氢原子和R4代表丙酰基](9-O-乙酰基-3″-O-甲基麦迪霉素A1)将13μl无水吡啶和11μl乙酰氯连续地加到1.5ml无水甲苯溶液中，该溶液溶解了30mg其中R1代表丙酰基且R4代表丙酰基的式(Ⅺ)代表的化合物(1)(3″-O-甲基麦迪霉素A1)，随后在室温下搅拌1小时。加入19μl～三乙胺后，加入15ml乙酸乙酯进行萃取。将乙酸乙酯层用15ml水洗涤两次，用无水硫酸钠干燥，然后过滤将滤液减压下浓缩并将如此得到的残余物经制备性TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇(12∶1)]。这样得到18mg化合物(5)。
化合物(5)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C44H71NO16(3)质谱(EIMS)m/z869(M) (比旋率[α]24D-60°(C1.0，CH3OH)
(5)m.p.未显示一个确切的熔点，在约118-121℃熔化(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.26(br d，2-H)，2.74(dd，2-H)，5.12(br d，3-H)，3.25(br d，4-H)，3.57(s，4-OCH3)，3.93(br d，5-H)，0.93(br ddd，7-H)，1.57(br dt，7-H)，5.08(dd，9-H)，5.57(dd，10-H)，6.74(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.88(ddd，13-H)，2.17(dt，14-H)，4.98(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.58(br dd，17-H)，2.83(br dd，17-H)，9.65(br，s，18-H)，0.96(d，19-H3)，2.51(dq，3-OCOCH2CH3)，2.67(dq，3-OCOCH2CH3)，1.21(t，3-OCOCH2CH3)，2.02(s，9-OCOCH3)，4.51(d，1′-H)，3.20(dd，2′-H)，2.41(t，3′-H)，3.45(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.67(dd，2″-Hax)，2.30(d，2″-Heq)，4.72(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，1.10(s，7″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.43(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.44(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，1.18(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例6化合物(6)的生产方法(1)[式(Ⅰ)代表的化合物，其中R1代表氢原子，R2代表乙酰基，R3代表氢原子和R4代表丙酰基](9-O-乙酰基-3″-O-甲基麦迪霉素A7)将12μl无水吡啶和9.1μl乙酰氯连续地加到1.4ml无水甲苯溶液中，该溶液中已溶解了28mg其中R4代表丙酰基的式(Ⅻ)代表的化合物(2)(3″-O-甲基柱晶白霉素A1)，随后在室温下搅拌2小时。加入17μl三乙胺后，加入10ml乙酸乙酯进行萃取。将乙酸乙酯层用10ml水洗涤两次，用无水硫酸钠干燥，然后过滤。将滤液减压下浓缩并将如此得到的残余物经制备性TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(240∶20∶1)]。这样得到15mg化合物(6)。
化合物(6)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C41H67NO15(3)质谱(EIMS)m/z813(M) (4)比旋率[α]25D-68°(C1.0，CH3OH)(5)m.p.未显示一个确切的熔点，在约110-113℃熔化(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.22(d，2-H)，2.71(dd，2-H)，3.79(br d，3-H)，3.09(br d，4-H)，3.54(s，4-OCH3)，4.14(br d，5-H)，0.98(br ddd，7-H)，1.62(br dt，7-H)，5.18(dd，9-H)，5.60(dd，10-H)，6.40(dd，11-H)，6.03(br dd，12-H)，5.66(ddd，13-H)，2.12(dt，14-H)，2.51(br dt，14-H)，5.29(ddq，15-H)，1.31(d，16-H3)，2.46(br dd，17-H)，2.83(br dd，17-H)，9.81(br s，18-H)，0.99(d，19-H3)，2.00(s，9-OCOCH3)，4.57(d，1′-H)，3.21(dd，2′-H)，2.42(t，3′-H)，3.45(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，1.20(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.66(dd，2″-Hax)，2.30(d，2″-Heq)，4.72(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，1.10(s，7″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.43(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.44(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，1.18(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例7化合物(5)的生产方法(2)[式(Ⅰ)代表的化合物其中R1代表丙酰基，R2代表乙酰基，R3代表氢原子且R4代表丙酰基](9-O-丙酰基-3″-O-甲基麦迪霉素A1)首先，控制阮内镍的活性，即将6ml阮内镍先后分别用10ml水洗两次，用10ml丙酮洗三次，同时抑制热量的产生以适当地控制其活性。然后，将其进一步用10ml乙醇洗两次。在20ml乙醇中溶解227mg其中R1是丙酰基，R2是乙酰基和R4是丙酰基的式(ⅩⅧ)代表的化合物(7)[Journal of Antibiotics，33(1)，61(1980)]。向其中加入上面制备的阮内镍和5ml乙醇，随后在室温下剧烈搅拌20分钟。滤除不溶物并用20ml含1%(v/v)浓氨水的乙醇洗涤两次，将滤液和洗液合并并在减压下浓缩。然后，将290mg所得残余物经制备性TLC纯化[展开系统苯/丙酮(3∶1)]，得到79mg化合物(5)。
实施例8化合物(9)的生产方法[式(ⅩⅦ)代表的化合物其中R1代表乙酰基，R2代表乙酰基，R4代表异戊酰基]在63ml二甲亚砜(DMSO)和6.3ml无水乙酸的混合溶液中溶解2.0g式(ⅩⅥ)代表的化合物(8)，该化合物中R1是乙酰基，R2代表乙酰基且R4代表异戊酰基[Tetrahedron letters，609(1967)]。将反应混合物在33℃反应3天。加入2.0升甲苯后，将反应混合物用2.0升水洗四次，将甲苯层用无水硫酸钠干燥并过滤。然后将滤液减压浓缩并将如此得到的3.0g残余物经硅胶柱色谱法纯化[300g∶己烷/乙酸乙酯(3∶1)→(1∶1)]。这样得到1.4g化合物(9)。
化合物(9)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C48H77NO17S(3)质谱(SIMS)m/z 972(M H) (4)比旋率[α]24D-85°(C1.0，CH3Cl)(5)m.p.未显示一个确切的熔点，在约118-122℃熔化(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.25(br d，2-H)，2.72(dd，2-H)，5.09(br d，3-H)，3.16(br d，4-H)，3.50(s，4-OCH3)，3.94(br d，5-H)，0.85(br ddd，7-H)，1.46(br dt，7-H)，5.05(dd，9-H)，5.56(dd，10-H)，6.70(dd，11-H)，6.05(br dd，12-H)，5.85(ddd，13-H)，2.45(br dt，14-H)，4.99(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.55(br dd，17-H)，2.81(br dd，17-H)，9.63(br s，18-H)，0.96(d，19-H3)，2.30(s，3-OCOCH3)，2.00(s，9-OCOCH3)，4.59(d，1′-H)，4.91(dd，2′-H)，2.68(t，3′-H)，3.16(t，4′-H)，3.26(dq，5′-H)，1.14(d，6′-H3)，2.00(s，2′-OCOCH3)，2.42(s，3′-N(CH3)2)，4.81(d，1″-H)，1.68(dd，2″-Hax)，1.18(s，3″-CH3)，4.63(d，4″-H)，4.56(dq，5″-H)，1.05(d，6″-H3)，4.50(d，3″-OCH2SCH3)，4.64(d，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，0.98(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例9化合物(10)的生产方法[式(ⅩⅧ)代表的化合物其中R1代表乙酰基，R2代表乙酰基且R4代表异戊酰基]
在39ml甲醇中加入1.30g化合物(9)，随后在33℃反应16小时。将反应混合物减压浓缩并将如此获得的1.29g残余物经硅胶柱色谱法纯化[125g∶己烷/乙酸乙酯(1∶1)]。这样得到964mg化合物(10)。
化合物(10)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C46H75NO16S(3)质谱(SIMS)m/z 930(M H) (4)比旋率[α]24D-77°(C1.0，CH3OH)(5)m.p.未显示一个确切的熔点，在约115-118℃熔化(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.27(br d，2-H)，2.75(dd，2-H)，5.00(br d，3-H)，3.25(br d，4-H)，3.57(s，4-OCH3)，3.96(br d，5-H)，0.93(br ddd，7-H)，1.57(br dt，7-H)，4.97(dd，9-H)，5.57(dd，10-H)，6.71(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.86(ddd，13-H)，2.47(br dt，14-H)，5.00(ddq，15-H)，1.27(d，16-H3)，2.59(br dd，17-H)，2.84(br dd，17-H)，9.66(br s，18-H)，0.96(d，19-H3)，2.29(s，3-OCOCH3)，2.01(s，9-OCOCH3)，4.50(d，1′-H)，3.21(dd，2′-H)，2.42(t，3′-H)，3.42(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，1.15(d，6′-H3)，2.58(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.74(dd，2″-Hax)，1.20(s，3″-CH3)，4.66(d，4″-H)，4.56(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.65(d，3″-OCH2SCH3)，2.18(s，3″-OCH2SCH3)，0.98(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例10化合物(11)的生产方法[式(Ⅰ)代表的化合物，其中R1代表乙酰基，R2代表乙酰基，R3代表氢原子且R4代表异戊酰基](9-O-乙酰基-3″-O-甲基交沙霉素)将300mg化合物(10)溶解在7.0mg乙醇中。按实施例7相同的方式处理15ml阮内镍以控制其活性并将其和7.5ml乙醇一起加入到上述溶液中。将所得混合物在室温下剧烈搅拌20分钟。滤除不溶物并用30ml含1%(v/v)浓氨水的乙醇洗涤两次，合并滤液和洗液并减压浓缩。然后，将297mg所得残余物经制备性TLC纯化[展开系统苯/丙酮(3∶1)]，得到81mg化合物(11)。
化合物(11)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C45H73NO16(3)质谱(SIMS)m/z 884(M H) (4)比旋率[α]26D-74°(Cl.0，CH3OH)(5)m.p.未显示一个确切的熔点，在约115-119℃熔化(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.75(dd，2-H)，5.12(br d，3-H)，3.25(br d，4-H)，3.57(s，4-OCH3)，3.96(br d，5-H)，0.92(br ddd，7-H)，1.58(br dt，7-H)，5.06(dd，9-H)，5.57(dd，10-H)，6.71(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.86(ddd，13-H)，4.99(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.59(br dd，17-H)，2.84(br dd，17-H)，9.66(br s，18-H)，0.96(d，19-H3)，2.29(s，3-OCOCH3)，2.01(s，9-OCOCH3)，4.51(d，1′-H)，3.19(dd，2′-H)，2.42(t，3′-H)，3.46(t，4′-H)，3.29(dq，5′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.58(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.67(dd，2″-Hax)，1.11(s，3″-CH3)，4.72(d，4″-H)，5.54(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，0.97(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例11化合物(12)的生产方法[式(ⅩⅤ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表1-乙氧乙基且R4代表丙酰基]将20g麦迪霉素溶解在600ml二氯甲烷和22ml乙基乙烯基醚的混合溶液中。向其加入0.4gPPTS后，将所得混合物在室温下反应16小时。将反应混合物以缓慢的速度加到2.0升饱和碳酸氢钠溶液中，随后用1.8升氯仿萃取。将氯仿层随后用2.0升5%硫酸氢钾溶液，2.0升饱和碳酸氢钠溶液和2.0升饱和氯化钠溶液洗涤。将氯仿层用无水硫酸钠干燥并过滤，然后减压下浓缩滤液并将如此获得的23g残余物经硅胶柱色谱法纯化[1.0kg∶氯仿/甲醇(50∶1)]。这样得到20g化合物(12)。
化合物(12)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C45H75NO16(3)质谱(EIMS)m/z 885(M) (4)比旋率[α]21D-61°(Cl.0，CH3OH)(5)m.p.未显示一个确切的熔点，在约100-103℃熔化
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.28(br d，2-H)，2.73(dd，2-H)，2.74(dd，2-H)，5.13(br d，3-H)，3.24(br d，4-H)，3.53(s，4-OCH3)，3.87(br d，5-H)，1.44(br dt，7-H)，1.90(m，8-H)，3.78(dd，9-H)，3.92(dd，9-H)，5.47(dd，10-H)，5.56(dd，10-H)，6.57(dd，11-H)，6.61(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.78(br ddd，13-H)，5.82(br ddd，13-H)，2.15(br dt，14-H)，5.02(ddq，15-H)，2.82(br dd，17-H)，2.83(br dd，17-H)，9.64(br s，18-H)，9.65(br s，18-H)，0.99(d，19-H3)，1.00(d，19-H3)，2.63(br dq，3-OCOCH2CH3)，4.64(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.66(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.44(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.63(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.41(d，1′-H)，2.51(s，3′-N(CH3)2)，5.07(d，1″-H)，1.85(dd，2″-Hax)，2.01(d，2″-Heq)，1.12(s，3″-CH3)，4.62(d，4″-H)，4.46(dq，5″-H)，1.13(d，6″-H3)，2.44(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.46(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，1.18(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例12化合物(13)的生产方法[式(ⅩⅥ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表1-乙氧乙基且R4代表丙酰基]向370ml乙腈中加12.0g化合物(12)。向其中加入2.7ml乙酸酐后，将混合物在40℃反应16小时。然后，向反应混合物中滴加42ml1N氨水并将混合物放置10分钟。将反应混合物减压下浓缩，将所得残余物溶解在1.0升氯仿中并连续地用1.0升饱和碳酸氢钠水溶液和1.2升饱和氯化钠水溶液洗涤。将氯仿层用无水硫酸钠干燥并过滤，将滤液减压下浓缩得到13.0g化合物(13)。
化合物(13)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C47H77NO17(3)质谱(SIMS)m/z 928(M H) (4)比旋率[α]21D-64°(Cl.0，CH3Cl3)(5)m.p.没有一个确切的熔点，在约104-107℃熔化(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.24(br d，2-H)，2.70(dd，2-H)，5.11(br d，3-H)，3.17(br d，4-H)，3.47(s，4-OCH3)，3.89(br d，5-H)，1.42(br t，7-H)，3.75(dd，9-H)，3.88(dd，9-H)，5.45(dd，10-H)，5.54(dd，10-H)，6.57(dd，11-H)，6.61(dd，11-H)，6.05(br dd，12-H)，5.79(ddd，13-H)，5.83(ddd，13-H)，2.15(br dt，14-H)，2.26(br dd，17-H)，2.81(br dd，17-H)，9.62(br s，18-H)，9.63(br s，18-H)，0.98(d，19-H3)，0.99(d，19-H3)，2.65(dq，3-OCOCH2CH3)，4.64(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.65(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.35(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.43(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.49(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.62(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.61(d，1′-H)，4.98(dd，2′-H)，2.02(s，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，5.06(d，1″-H)，1.84(dd，2″-Hax)，2.00(d，2″-Heq)，1.12(br s，3″-CH3)，4.62(d，4″-H)，4.37(dq，5″-H)，2.43(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.44(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，1.18(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例13化合物(14H)[式(ⅩⅦ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表1-乙氧乙基且R4代表丙酰基，该化合物是使用下列展开系统进行TLC得到较高Rf值的异构体]和化合物(14L)[式(ⅩⅦ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2是1-乙氧乙基而R4是丙酰基，该化合物是使用下列展开系统进行TLC得到较低Rf值的异构体]的生产方法将305mg化合物(13)溶解在9.1mlDMSO和0.91ml乙酸酐的混合溶液中后，将所得混合物在30℃下反应16小时。将反应混合物缓慢地加到60ml甲苯中并用60ml水洗涤三次，将甲苯层用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压下浓缩并将如此得到的300mg残余物经硅胶柱色谱法纯化[30g己烷/乙酸乙酯(1∶1)]这样得到195mg化合物(14)。然后，将如此得到的106mg化合物进一步经制备性TLC纯化[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶1)]得到56mg化合物(14H)和39mg化合物(14L)。
化合物(14H)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C49H81NO17S(3)质谱(FDMS)m/z 988(M H) (4)TLC上的Rf值0.50[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶1)](5)比旋率[α]19D-71°(Cl.0，CH3Cl3)(6)熔点没有一个确切的熔点，在约94-96℃熔化
(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.24(br d，2-H)，2.72(dd，2-H)，5.11(br d，3-H)，3.17(br d，4-H)，3.49(s，4-OCH3)，3.87(br d，5-H)，0.85(br dt，7-H)，1.41(br dt，7-H)，1.87(m，8-H)，3.88(dd，9-H)，5.45(dd，10-H)，6.61(dd，11-H)，6.06(br dd，12-H)，5.82(ddd，13-H)，2.15(dt，14-H)，4.99(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.83(br dd，17-H)，9.62(br s，18-H)，0.98(d，19-H3)，2.50(dq，3-OCOCH2CH3)，2.65(dq，3-OCOCH2CH3)，1.21(t，3-OCOCH2CH3)，3.42(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.50(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.14(t，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.22(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.60(d，1′-H)，4.92(dd，2′-H)，2.68(t，3′-H)，3.16(t，4′-H)，3.26(dq，5′-H)，1.14(d，6′-H3)，2.01(s，2′-OCOCH3)，2.43(s，3′-N(CH3)2)，4.81(d，1″-H)，1.68(dd，2″-Hax)，2.25(d，2″-Heq)，1.17(s，3″-CH3)，4.56(dq，5″-H)，1.05(d，6″-H3)，4.51(d，3″-OCH2SCH3)，4.64，4.65(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，2.42(q，4″-OCOCH2CH3)，1.18(t，4″-OCOCH2CH3).
化合物(14L)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C49H81NO17S(3)质谱(FDMS)m/z 988(M H) (4)TLC上的Rf值0.46[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶1)](5)比旋率[α]19D-87°(Cl.0，CH3Cl3)
(6)熔点没有一个确切的熔点，在约90-94℃熔化(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.25(br d，2-H)，2.72(dd，2-H)，5.11(br d，3-H)，3.18(br d，4-H)，3.49(s，4-OCH3)，3.87(br d，5-H)，0.87(br dt，7-H)，1.43(br dt，7-H)，1.86(m，8-H)，3.74(dd，9-H)，5.54(dd，10-H)，6.58(dd，11-H)，6.06(br dd，12-H)，5.80(ddd，13-H)，2.15(dt，14-H)，5.00(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.84(br dd，17-H)，9.63(br s，18-H)，0.98(d，19-H3)，2.52(dq，3-OCOCH2CH3)，2.65(dq，3-OCOCH2CH3)，1.23(t，3-OCOCH2CH3)，4.65(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.35(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.63(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.14(t，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.25(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.60(d，1′-H)，4.92(dd，2′-H)，2.68(t，3′-H)，3.16(t，4′-H)，3.26(dq，5′-H)，1.14(d，6′-H3)，2.01(s，2′-OCOCH3)，2.43(s，3′-N(CH3)2)，4.81(d，1″-H)，1.69(dd，2″-Hax)，2.26(d，2″-Heq)，1.17(s，3″-CH3)，4.57(dq，5″-H)，1.05(d，6″-H3)，4.51(d，3″-OCH2SCH3)，4.64，4.65(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，2.42(q，4″-OCOCH2CH3)，1.18(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例14化合物(15H)的生产方法[式(ⅩⅧ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表1-乙氧乙基且R4代表丙酰基，它是化合物(14H)衍生的异构体]将50mg化合物(14H)溶解在1.5ml甲醇中并将得所的混合物在30℃下反应16小时，将反应混合物减压下浓缩并将如此得到的47mg残余物经制备性TLC纯化[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶1)]这样得到36mg化合物(15H)。
化合物(15H)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C47H79NO16S(3)质谱(SIMS)m/z 946(M H) (4)TLC上的Rf值0.24[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶1)](5)比旋率[α]19D-55°(Cl.0，CH3OH)(6)未显示出一个确切的熔点，在约95-98℃熔化(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.26(br d，2-H)，2.75(dd，2-H)，5.13(br d，3-H)，3.26(br d，4-H)，3.57(s，4-OCH3)，3.88(br d，5-H)，0.93(br ddd，7-H)，1.53(br dt，7-H)，1.89(m，8-H)，3.90(dd，9-H)，5.46(dd，10-H)，6.62(dd，11-H)，6.10(br dd，12-H)，5.83(ddd，13-H)，5.01(ddq，15-H)，2.85(br dd，17-H)，9.63(br s，18-H)，0.98(d，19-H3)，2.51(dq，3-OCOCH2CH3)，2.64(dq，3-OCOCH2CH3)，4.64(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.43(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.50(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.51(d，1′-H)，3.41(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，2.58(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.75(dd，2″-Hax)，2.28(d，2″-Heq)，4.56(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.65，4.66(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.19(s，3″-OCH2SCH3)，2.42(q，4″-OCOCH2CH3).
实施例15化合物(15L)的生产方法[式(ⅩⅧ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表1-乙氧乙基和R4代表丙酰基，它是化合物(14L)衍生的异构体]向6.8ml甲醇中溶解230mg化合物(14L)，随后在30℃下反应16小时。将反应混合物减压浓缩并将如此得到的204mg残余物经制备性TLC纯化[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶1)]这样得到150mg化合物(15L)。
化合物(15L)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C47H79NO16S(3)质谱(SIMS)m/z 946(M H) (4)TLC上的Rf值0.16[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶1)](5)比旋率[α]19D-73°(Cl.0，CH3OH)(6)未显示出一个确切的熔点，在约91-93℃熔化(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.26(br d，2-H)，2.75(dd，2-H)，5.13(br d，3-H)，3.26(br d，4-H)，3.57(s，4-OCH3)，3.88(br d，5-H)，0.94(br ddd，7-H)，1.53(br dt，7-H)，1.88(m，8-H)，3.76(dd，9-H)，5.55(dd，10-H)，6.59(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.80(ddd，13-H)，5.02(ddq，15-H)，2.25(br dd，17-H)，2.85(br dd，17-H)，9.64(br s，18-H)，2.52(dq，3-OCOCH2CH3)，2.65(dq，3-OCOCH2CH3)，3.36(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.63(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.51(d，1′-H)，3.41(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，2.59(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.75(dd，2″-Hax)，2.28(d，2″-Heq)，4.56(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.65，4.66(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.19(s，3″-OCH2SCH3)，2.42(q，4″-OCOCH2CH3).
实施例16化合物(16H)的生产方法[式(ⅩⅨ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表1-乙氧乙基和R4代表丙酰基，该化合物是化合物(15H)衍生出的异构体]将30mg化合物(15H)溶解在0.35ml乙醇中，按实施例7的相同方式控制0.75ml阮内镍的活性并将其和0.40ml乙醇一起加入上述混合物中，将所得混合物在室温下剧烈搅20分钟后，过滤不溶物并用1.5ml含1%(v/v)浓氨水的乙醇洗涤两次。合并滤液和洗液并减压浓缩。然后，将如此得到的28mg残余物经制备性TLC纯化[展开系统甲苯/丙酮(2∶1)]得到10mg化合物(16H)。
化合物(16H)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C46H77NO16(3)质谱(SIMS)m/z 900(M H) (4)TLC上的Rf值0.32[展开系统甲苯/丙酮(3∶1)](5)比旋率[α]19D-43°(Cl.0，CH3OH)(6)未显示出一个确切的熔点，在约90-93℃熔化
(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.26(br d，2-H)，2.74(dd，2-H)，5.13(br d，3-H)，3.26(br d，4-H)，3.57(s，4-OCH3)，3.88(br d，5-H)，2.13(br t，6-H)，0.93(br ddd，7-H)，1.54(br dt，7-H)，1.89(m，8-H)，3.90(dd，9-H)，5.46(dd，10-H)，6.62(dd，11-H)，6.10(br dd，12-H)，5.83(ddd，13-H)，2.17(dt，14-H)，5.00(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.28(br dd，17-H)，2.85(br dd，17-H)，9.64(br s，18-H)，0.98(d，19-H3)，2.50(dq，3-OCOCH2CH3)，2.64(dq，3-OCOCH2CH3)，1.23(t，3-OCOCH2CH3)，4.64(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.43(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.50(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.14(t，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.22(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.53(d，1′-H)，3.46(t，4′-H)，3.29(dq，5′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.60(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.67(dd，2″-Hax)，2.29(d，2″-Heq)，1.11(s，3″-CH3)，4.73(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.43(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.44(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，1.20(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例17化合物(16L)的生产方法[式(ⅩⅨ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表1-乙氧乙基和R4代表丙酰基，该化合物是化合物(15L)衍生到的异构体]在2.0ml乙醇中溶解150mg化合物(15L)，按实施例7相同的方式控制3.8ml阮内镍的活性并将其和1.8ml乙醇一起加入上述混合物中。将所得混合物在室温下剧烈搅20分钟后，过滤不溶物并用4.0ml含1%(v/v)浓氨水的乙醇洗涤两次。将滤液和洗液合并并在减压下浓缩。然后，将如此得到的145mg残余物经制备性TLC纯化[展开系统甲苯/丙酮(2∶1)]得到32mg化合物(16L)。
化合物(16L)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C46H77NO16(3)质谱(SIMS)m/z 900(M H) (4)TLC上的Rf值0.32[展开系统甲苯/丙酮(3∶1)](5)比旋率[α]19D-65°(Cl.0，CH3OH)(6)未显示出一个确切的熔点，在约87-90℃熔化(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.26(br d，2-H)，2.75(dd，2-H)，5.13(br d，3-H)，3.26(br d，4-H)，3.57(s，4-OCH3)，3.88(br d，5-H)，2.13(br t，6-H)，0.94(br ddd，7-H)，1.55(br dt，7-H)，1.88(m，8-H)，3.75(dd，9-H)，5.55(dd，10-H)，6.59(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.80(ddd，13-H)，2.16(dt，14-H)，5.01(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.25(br dd，17-H)，2.86(br dd，17-H)，9.64(br s，18-H)，2.52(dq，3-OCOCH2CH3)，2.64(dq，3-OCOCH2CH3)，1.23(t，3-OCOCH2CH3)，3.36(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.63(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.14(t，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.25(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.52(d，1′-H)，3.21(dd，2′-H)，2.42(t，3′-H)，3.45(t，4′-H)，3.29(dq，5′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.67(dd，2″-Hax)，2.29(d，2″-Heq)，1.10(s，3″-CH3)，4.72(d，4″-H)，4.55(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.43(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.44(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，1.18(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例18化合物(1)的生产方法(2)[式(Ⅰ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表氢原子，R3代表氢原子和R4代表丙酰基](3″-O-甲基麦迪霉素A1)将60mg化合物(16H)溶解在4.5ml5%乙酸溶液和1.5ml乙腈的混合溶液中并将混合物在室温下反应16小时，将反应混合物减压浓缩后，将所得残余物溶解在10ml氯仿中，用10ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤三次并用10ml饱和氯化钠溶液洗涤，将氯仿层用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩并将如此得到的56mg残余物经制备性TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇(10∶1)]。这样得到50mg化合物(1)。
实施例19化合物(1)的生产方法(3)[式(Ⅰ)代表的化合物，其中R1代表丙酰基，R2代表氢原子，R3代表氢原子和R4代表丙酰基](3″-O-甲基麦迪霉素A1)将30mg化合物(16L)溶解在2.4ml5%乙酸溶液和0.8ml乙腈的混合溶液中并将混合物在室温下反应16小时，将反应混合物进行减压浓缩后，将所得残余物溶解在5.0ml氯仿中，用5.0ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤三次并用5.0ml饱和氯化钠溶液洗涤，将氯仿层用无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩并将如此得到的28mg残余物经制备性TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇(10∶1)]。这样得到24mg化合物(1)。
实施例20化合物(17)的生产方法[式(ⅩⅤ)代表的化合物，其中R1代表乙酰基，R2代表1-乙氧乙基和R4代表异戊酰基]将10g交沙霉素溶解在300ml二氯甲烷和16ml乙基乙烯醚的混合溶液中。向其中加入5.4g PPTS后，将所得混合物在室温下反应4天，将反应混合物缓慢加到1.0升饱和碳酸氢钠溶液中，随后用0.8升氯仿萃取。随后将氯仿层用1.0升5%硫酸氢钾溶液，1.0升饱合氯化钠溶液洗涤，将氯仿层用无水硫酸钠干燥并过滤。然后将滤液减压浓缩并将如此得到的12g残余物经硅胶柱色谱法纯化[600g氯仿/甲醇(50∶1)]。这样得到8.4g化合物(17)化合物(17)的理化性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C46H77NO16(3)质谱(EIMS)m/z 899(M) (4)比旋率[α]16D-68°(Cl.0，CH3OH)(5)m.p.没有一个确切的熔点，在约105-108℃熔化(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.73(dd，2-H)，2.75(dd，2-H)，5.12(br d，3-H)，3.24(br d，4-H)，3.54(s，4-OCH3)，3.90(br d，5-H)，1.45(br dt，7-H)，1.90(m，8-H)，3.75(dd，9-H)，3.89(dd，9-H)，5.46(dd，10-H)，5.55(dd，10-H)，6.56(dd，11-H)，6.58(dd，11-H)，6.08(br dd，12-H)，5.76(ddd，13-H)，5.81(ddd，13-H)，5.04(ddq，15-H)，1.27(d，16-H3)，2.84(br dd，17-H)，2.85(br dd，17-H)，9.64(s，18-H)，9.65(s，18-H)，0.98(d，19-H3)，0.99(d，19-H3)，4.63(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.64(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.35(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.42(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.63(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.14(t，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.23(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.25(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.43(d，1′-H)，3.28(t，4′-H)，1.19(d，6′-H3)，2.52(s，3′-N(CH3)2)，5.07(d，1″-H)，1.85(dd，2″-Hax)，2.02(d，2″-Heq)，1.12(s，3″-CH3)，4.63(d，4″-H)，4.46(dq，5″-H)，1.14(d，6″-H3)，0.98(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例21制备化合物(18)[式(ⅩⅥ)所示化合物，其中R1表示乙酰基，R2表示1-乙氧乙基和R4表示异戊酰基]的方法将7.7g化合物(17)溶于231ml乙腈中并向其中加入1.6ml乙酸酐，接着在40℃反应16小时。然后向反应混合物中滴加25ml1N氨水并于室温静置10分钟。减压浓缩反应混合物后，将所得残留物溶于800ml氯仿中并顺序用800ml饱和碳酸氢钠水溶液和800ml饱和氯化钠水溶液洗涤。然后用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液，这样得到的7.9g残留物采用硅胶柱色谱法纯化[700g己烷/乙酸乙酯(1∶1)]，从而得到5.1g化合物(18)。
化合物(18)的物理化学性质
(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C48H79NO17(3)质谱(FDMS)m/z 942(M H) (4)旋光率[α]19D-70°(Cl.0，CHCl3)(5)在110-113℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.25(br d，2-H)，2.72(dd，2-H)，5.10(br d，3-H)，3.18(br d，4-H)，3.49(s，4-OCH3)，3.91(br d，5-H)，0.86(br ddd，7-H)，1.43(br dt，7-H)，3.72(dd，9-H)，3.86(dd，9-H)，5.46(dd，10-H)，5.54(dd，10-H)，6.55(dd，11-H)，6.58(dd，11-H)，6.05(br dd，12-H)，5.76(ddd，13-H)，5.81(ddd，13-H)，2.12(dt，14-H)，2.45(br dt，14-H)，5.01(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.83(br dd，17-H)，9.63(s，18-H)，9.64(s，18-H)，2.29(s，3-OCOCH3)，3.34(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.41(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.63(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.14(t，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.22(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.24(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.99(dd，2′-H)，2.69(t，3′-H)，1.18(d，6′-H3)，2.02(s，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，5.06(d，1″-H)，1.84(dd，2″-Hax)，2.01(d，2″-Heq)，1.12(s，3″-CH3)，4.38(dq，5″-H)，1.13(d，6″-H3)，0.98(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例22制备化合物(19)[式(ⅩⅦ)所示化合物，其中R1表示乙酰基，R2表示1-乙氧乙基和R4表示异戊酰基]的方法
将5.00g化合物(18)溶于150ml DMSO和15ml乙酸酐的混合溶液中并使混合物于30℃反应40小时。然后将反应混合物缓慢滴入1.0升甲苯中并用1.0升水洗涤3次。用无水硫酸钠干燥甲苯层并过滤。减压浓缩滤液，这样得到的6.41g残留物采用硅胶柱色谱法纯化[500g己烷/乙酸乙酯(1∶1)]，从而得到2.25g化合物(19)。
化合物(19)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C50H83NO17S(3)质谱(FDMS)m/z 1002(M H) (4)旋光率[α]16D-87°(Cl.0，CHCl3)(5)在102-105℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.25(br d，2-H)，2.72(dd，2-H)，2.73(dd，2-H)，5.10(br d，3-H)，3.18(br d，4-H)，3.50(s，4-OCH3)，3.51(s，4-OCH3)，3.89(br d，5-H)，0.85(br ddd，7-H)，1.43(br dt，7-H)，1.87(m，8-H)，3.73(dd，9-H)，3.86(dd，9-H)，5.45(dd，10-H)，5.54(dd，10-H)，6.54(dd，11-H)，6.58(dd，11-H)，6.05(br dd，12-H)，5.76(ddd，13-H)，5.82(ddd，13-H)，2.15(dt，14-H)，2.45(br dt，14-H)，5.01(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.85(br dd，17-H)，9.63(s，18-H)，9.64(s，18-H)，0.99(d，19-H3)，3.35(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.41(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.63(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.14(br t，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.22(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.24(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，5.10(d，1′-H)，4.93(dd，2′-H)，2.68(t，3′-H)，3.16(t，4′-H)，3.27(dq，5′-H)，1.14(d，6′-H3)，2.01(s，2′-OCOCH3)，2.42(s，3′-N(CH3)2)，4.81(d，1″-H)，1.68(dd，2″-Hax)，1.18(s，3″-CH3)，4.57(dq，5″-H)，1.05(d，6″-H3)，4.50(d，3″-OCH2SCH3)，4.64，4.65(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，0.98(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例23制备化合物(20)[式(ⅩⅧ)所示化合物，其中R1表示乙酰基，R2表示1-乙氧乙基和R4表示异戊酰基]的方法将2.2g化合物(19)溶于65ml甲醇中并使所得混合物于室温反应40小时。减压浓缩反应混合物得到2.1g化合物(20)。
化合物(20)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C48H81NO16S(3)质谱(FDMS)m/z 959(M) (4)旋光率[α]18D-75°(Cl.0，CH3OH)(5)在105-107℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.26(br d，2-H)，2.75(dd，2-H)，2.76(dd，2-H)，5.11(br d，3-H)，3.58(s，4-OCH3)，3.91(br d，5-H)，0.92(br ddd，7-H)，1.54(br dt，7-H)，1.89(m，8-H)，3.73(dd，9-H)，3.88(dd，9-H)，5.46(dd，10-H)，5.55(dd，10-H)，6.56(dd，11-H)，6.60(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.77(ddd，13-H)，5.82(ddd，13-H)，2.13(dt，14-H)，2.46(br dt，14-H)，5.03(ddq，15-H)，1.27(d，16-H3)，2.88(br dd，17-H)，9.64(s，18-H)，9.65(s，18-H)，2.28(s，3-OCOCH3)，3.35(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.41(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.49(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.63(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.14(br t，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.22(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.24(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.51(d，1′-H)，1.15(d，6′-H3)，2.57(s，3″-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.74(dd，2″-Hax)，1.20(s，3″-CH3)，4.56(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.65，4.66(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，0.98(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例24制备化合物(21)[式(ⅩⅨ)所示化合物，其中R1表示乙酰基，R2表示1-乙氧乙基和R4表示异戊酰基]的方法将1.00g化合物(20)溶于25ml乙醇中，按实施例7同样的方式控制25mlRaney镍的活性并将它与25ml乙醇一起加到上述混合物中。所得混合物于室温剧烈搅拌20分钟后，过滤不溶物并用50ml含1%(v/v)浓氨水的乙醇洗涤2次。合并滤液和洗涤液并减压浓缩。然后，这样得到的930mg残留物采用硅胶柱色谱法纯化[100g甲苯/丙酮(1∶1)]，得到614mg粗品化合物(21)。采用硅胶柱色谱将之进一步纯化[100g已烷/乙酸乙酯(1∶1)]得到360mg化合物(21)。
化合物(21)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C47H79NO16
(3)质谱(SIMS)m/z 914(M H) (4)旋光率[α]16D-62°(Cl.0，CH3OH)(5)在98-101℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.75(dd，2-H)，2.76(dd，2-H)，5.12(br d，3-H)，3.58(s，4-OCH3)，3.91(br d，5-H)，1.55(br dt，7-H)，1.89(m，8-H)，3.73(dd，9-H)，3.88(dd，9-H)，5.46(dd，10-H)，5.55(dd，10-H)，6.57(dd，11-H)，6.59(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.77(ddd，13-H)，5.82(ddd，13-H)，2.13(dt，14-H)，2.46(br dt，14-H)，5.03(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.88(br dd，17-H)，9.64(s，18-H)，9.66(s，18-H)，2.28(s，3-OCOCH3)，4.63(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.64(q，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.35(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.42(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.50(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.63(dq，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.14(br t，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.22(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.24(d，9-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.52(d，1′-H)，3.46(t，4′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.58(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.10(s，3″-CH3)，4.73(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，0.97(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例25制备化合物(22)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1表示乙酰基，R2表示氢原子，R3表示氢原子和R4表示异戊酰基](3″-O-甲基交沙霉素)的方法将190mg化合物(21)溶于15ml5%乙酸溶液和5.0ml乙腈的混合溶液中并使混合物于室温反应16小时。减压浓缩反应混合物，将所得残留物溶于20ml氯仿中，并顺序用20ml饱和碳酸氢钠水溶液洗涤三次和用20ml饱和氯化钠水溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥氯仿层并过滤。减压浓缩滤液，这样得到的192mg残留物通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(30∶1∶0.1)]，这样得到135mg化合物(22)。
化合物(22)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C43H71NO15(3)质谱(SIMS)m/z 842(M H) (4)旋光率[α]17D-65°(Cl.0，CH3OH)(5)在115-117℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.74(dd，2-H)，5.12(br d，3-H)，3.26(br d，4-H)，3.58(s，4-OCH3)，3.90(br d，5-H)，0.92(br ddd，7-H)，1.58(br dt，7-H)，1.89(m，8-H)，4.05(dd，9-H)，5.62(dd，10-H)，6.64(dd，11-H)，6.08(br dd，12-H)，5.76(ddd，13-H)，2.46(br dt，14-H)，5.04(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.33(br dd，17-H)，2.88(br dd，17-H)，9.64(s，18-H)，0.98(d，19-H3)，2.28(s，3-OCOCH3)，4.52(d，1′-H)，3.21(dd，2′-H)，2.41(t，3′-H)，3.46(t，4′-H)，3.29(dq，5′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.93(br d，1″-H)，1.66(dd，2″-Hax)，1.10(s，3″-CH3)，4.72(d，4″-H)，5.54(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，3.25(s，3″-OCH3)，0.97(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例26制备化合物(24)[式(ⅩⅦ)所示化合物，其中R1为乙酰基，R2为丙酰基和R4为异戊酰基]的方法将22.0g化合物(23)[式(ⅩⅥ)所示化合物，其中R1为乙酰基，R2为丙酰基和R4为异戊酰基](JP-A-49-10515)溶于500ml DMSO和50ml乙酸的混合溶液中，使所得混合物于36℃反应16小时。将反应混合物缓慢加到5.0升甲苯中并用5.0升水洗涤3次。用无水硫酸钠干燥甲苯层并过滤。减压浓缩滤液。接着，如此得到的30.0g残留物通过硅胶柱色谱法纯化[1.0kg甲苯/丙酮(8∶1)→(7∶1)]得到9.00g化合物(24)。
化合物(24)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C49H79NO17S(3)质谱(SIMS)m/z 986(M H) (4)旋光率[α]16D-90°(Cl.0，CHCl3)(5)在114-116℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.25(br d，2-H)，2.71(dd，2-H)，5.09(br d，3-H)，3.16(br d，4-H)，3.49(s，4-OCH3)，3.94(br d，5-H)，0.85(br dt，7-H)，1.46(br dt，7-H)，5.05(dd，9-H)，5.57(dd，10-H)，6.69(dd，11-H)，6.05(br dd，12-H)，5.85(ddd，13-H)，2.45(br dt，14-H)，4.98(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.58(br dd，17-H)，2.82(br dd，17-H)，9.64(s，18-H)，0.95(d，19-H3)，2.30(s，3-OCOCH3)，1.10(t，9-OCOCH2CH3)，4.59(d，1′-H)，4.90(dd，2′-H)，2.67(t，3′-H)，3.16(t，4′-H)，3.26(dq，5′-H)，1.14(d，6′-H3)，2.01(s，2′-OCOCH3)，2.42(s，3′-N(CH3)2)，4.81(d，1″-H)，1.68(dd，2″-Hax)，1.18(s，3″-CH3)，4.56(dq，5″-H)，1.05(d，6″-H3)，4.50(d，3″-OCH2SCH3)，4.63，4.64(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，0.98(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例27制备化合物(25)[式(ⅩⅧ)所示化合物，其中R1表示乙酰基，R2表示丙酰基和R4表示异戊酰基]的方法将8.90g化合物(24)溶于445ml甲醇中并使得到的混合物于36℃反应16小时。减压浓缩反应混合物得到7.80g化合物(25)。
化合物(25)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C47H77NO16S(3)质谱(SIMS)m/z 944(M H) (4)旋光率[α]16D-58°(Cl.0，CH3OH)(5)在113-116℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.26(br d，2-H)，2.75(dd，2-H)，5.10(br d，3-H)，3.25(br d，4-H)，3.57(s，4-OCH3)，3.96(br d，5-H)，0.92(br dt，7-H)，1.57(br dt，7-H)，2.03(m，8-H)，5.07(dd，9-H)，5.58(dd，10-H)，6.71(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.86(ddd，13-H)，2.46(br dt，14-H)，5.00(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.62(brdd，17-H)，2.84(br dd，17-H)，9.66(s，18-H)，0.95(d，19-H3)，2.29(s，3-OCOCH3)，1.10(t，9-OCOCH2CH3)，4.49(d，1′-H)，3.21(dd，2′-H)，2.42(t，3′-H)，3.42(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，1.15(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.74(dd，2″-Hax)，1.20(s，3″-CH3)，4.55(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.64，4.66(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.19(s，3″-OCH2SCH3)，0.98(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例28制备化合物(26)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为乙酰基，R2为丙酰基，R3为氢原子和R4为异戊酰基](9-O-丙酰基-3″-O-甲基交沙霉素)的方法将1.50g化合物(25)溶于35ml乙醇中。按实施例7同样的方式控制38mlRaney镍的活性并将它与40ml乙醇一起加到上述混合物中。将所得混合物于室温剧烈搅拌20分钟后，滤除不溶物并用50ml含1%(v/v)浓氨水的乙醇洗2次，合并滤液和洗涤液并减压浓缩。随后，如此得到的1.00g残留物通过硅胶柱色谱法纯化[100g己烷/乙酸乙酯(1∶1)]得到220mg化合物(26)。
化合物(26)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C46H75NO16(3)质谱(SIMS)m/z 898(M H) (4)旋光率[α]15D-61°(Cl.0，CH3OH)
(5)在115-118℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.26(br d，2-H)，2.75(dd，2-H)，5.11(br d，3-H)，3.24(br d，4-H)，3.58(s，4-OCH3)，3.96(br d，5-H)，0.92(br dt，7-H)，1.58(br dt，7-H)，2.03(m，8-H)，5.07(dd，9-H)，5.58(dd，10-H)，6.71(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.86(ddd，13-H)，2.17(dt，14-H)，2.46(br dt，14-H)，5.00(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.62(br dd，17-H)，2.85(br dd，17-H)，9.66(s，18-H)，0.95(d，19-H3)，2.29(s，3-OCOCH3)，1.11(t，9-OCOCH2CH3)，4.51(d，1′-H)，3.19(dd，2′-H)，2.41(t，3′-H)，3.45(t，4′-H)，3.29(dq，5′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.67(dd，2″-Hax)，1.11(s，3″-CH3)，4.73(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，0.97(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例29制备化合物(27)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为丙酰基，R2为丙酰基，R3为氢原子和R4为丙酰基](9-O-丙酰基-3″-O-甲基麦迪霉素A1)的方法将20mg化合物(1)加到1.0ml无水甲苯中使其溶解并向其中加入8.4μl无水吡啶，接着室温搅拌20分钟。向反应混合物中加入10ml乙酸乙酯和7.8μl三乙胺用于萃取。乙酸乙酯层用10ml水洗涤两次，用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的残留物28mg通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(30∶1∶0.1)]，从而得到13mg化合物(27)。
化合物(27)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C45H73NO16(3)质谱(EIMS)m/z 883(M) (4)旋光率[α]22D-72°(Cl.0，CH3OH)(5)在114-117℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.26(br d，2-H)，2.74(dd，2-H)，5.12(br d，3-H)，3.24(br d，4-H)，3.56(s，4-OCH3)，3.94(br d，5-H)，0.90(br ddd，7-H)，1.57(br dt，7-H)，2.02(m，8-H)，5.09(dd，9-H)，5.58(dd，10-H)，6.74(dd，11-H)，6.09(br dd，12-H)，5.88(ddd，13-H)，2.17(dt，14-H)，4.98(ddq，15-H)，1.26(d，16-H3)，2.60(br dd，17-H)，2.83(br dd，17-H)，9.65(br s，18-H)，0.96(d，19-H3)，2.51(dq，3-OCOCH2CH3)，2.68(dq，3-OCOCH2CH3)，1.21(t，3-OCOCH2CH3)，2.30(q，9-OCOCH2CH3)，1.11(t，9-OCOCH2CH3)，4.51(d，1′-H)，3.21(dd，2′-H)，3.45(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，1.16(d，6′-H3)，2.58(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.67(dd，2″-Hax)，2.29(d，2″-Heq)，1.10(s，3″-CH3)，4.72(d，4″-H)，4.53(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.43(明显的 q，3-OCOCH2CH3)，2.44(明显的 q，3-OCOCH2CH3)，1.17(t，3-OCOCH2CH3).
实施例30制备化合物(29)[式(ⅩⅫ)所示化合物，其中R1表示1-乙氧乙基，R2表示1-乙氧乙基和R4表示正丁酰基]的方法
将1.20g化合物(28)[式(ⅩⅪ)所示化合物，其中R4为正丁酰基][Journal of Medicinal Chemistry，20(5)，732(1977)]溶于36ml二氯甲烷和1.3ml乙基乙烯基醚的混合溶液中，加入488mg PPTS后，使混合物于30℃反应16小时。将反应混合物缓慢加入150ml饱和碳酸氢钠溶液中，随后用150ml二氯甲烷萃取。二氯甲烷层顺序用150ml 5%硫酸氢钾水溶液，150ml饱和碳酸氢钠水溶液和150ml饱和氯化钠水溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥二氯甲烷层并过滤。减压浓缩滤液，这样所得到的残留物1.70g通过硅胶柱色谱法纯化[120g∶己烷/乙酸乙酯(1∶1)→(2∶3)]。从而得到740mg化合物(29)。
化合物(29)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C49H83NO17(3)质谱(SIMS)m/z 958(M H) (4)旋光率[α]13D-90°(Cl.0，CHCl3)(5)在72-75℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)3.87(m，3-H)，2.88(br d，4-H)，3.38(s，4-OCH3)，3.43(s，4-OCH3)，4.15(br d，5-H)，3.90(dd，9-H)，4.01(dd，9-H)，6.13(dd，11-H)，6.17(dd，11-H)，6.19(dd，11-H)，6.03(br dd，12-H)，6.04(br dd，12-H)，5.15(m，15-H)，5.23(m，15-H)，9.76(s，18-H)，9.77(s，18-H)，9.87(s，18-H)，4.82(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.87(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.67(d，1′-H)，4.99(dd，2′-H)，2.05(s，2′-OCOCH3)，2.39(s，3′-N(CH3)2)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，5.06(br d，1″-H)，1.84(br dd，2″-Hax)，2.00(d，2″-Heq)，1.12(s，3″-CH3)，4.62(d，4″-H)，4.37(dq，5″-H)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.97(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例31制备化合物(30)[式(ⅩⅩⅢ)所示化合物，其中R1表示1-乙氧乙基，R2表示1-乙氧乙基和R4表示正丁酰基]的方法将575mg化合物(29)溶于17ml DMSO和1.7ml乙酸酐的混合溶液中，随后于30℃反应24小时。将反应混合物缓慢加入500ml甲苯并用500ml水洗涤3次。用无水硫酸钠干燥甲苯层。减压浓缩滤液，如此得到的残留物750mg通过硅胶柱色谱法纯化[65g己烷/乙酸乙酯(1∶1)]。从而得到325mg化合物(30)。同时回收135mg化合物(29)。
化合物(30)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C51H87NO17S(3)质谱(SIMS)m/z 1018(M H) (4)旋光率[α]13D-100°(Cl.0，CHCl3)(5)在59-61℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)3.86(m，3-H)，2.90(br d，4-H)，3.38(s，4-OCH3)，3.44(s，4-OCH3)，4.18(br d，5-H)，3.90(dd，9-H)，4.01(dd，9-H)，6.14(dd，11-H)，6.19(dd，11-H)，6.03(br dd，12-H)，6.04(br dd，12-H)，5.14(m，15-H)，5.20(m，15-H)，9.76(s，18-H)，9.78(s，18-H)，9.88(s，18-H)，4.94(dd，2′-H)，3.17(t，4′-H)，2.03(s，2′-OCOCH3)，2.42(s，3′-N(CH3)2)，4.83(br d，1″-H)，2.26(br d，2″-Heq)，1.18(s，3″-CH3)，1.05(br d，6″-H)，4.51(d，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.97(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例32制备化合物(31)[式(ⅩⅩⅣ)所示化合物，其中R1表示1-乙氧乙基，R2表示1-乙氧乙基和R4表示正丁酰基]的方法将37mg化合物(30)溶于1.2ml甲醇并使混合物于30℃反应16小时。减压浓缩反应混合物，并将如此得到的残留物36mg通过制备TLC纯化[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶1)]。从而得到27mg化合物(31)。
化合物(31)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C49H85NO16S(3)质谱(EIMS)m/z 975(M) (4)旋光率[α]17D-118°(Cl.0，CH3OH)(5)在63-66℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.82(dd，2-H)，3.48(s，4-OCH3)，3.54(s，4-OCH3)，1.86(m，8-H)，3.95(dd，9-H)，4.05(dd，9-H)，6.18(dd，11-H)，6.19(dd，11-H)，5.16(m，15-H)，5.24(m，15-H)，9.76(s，18-H)，9.77(s，18-H)，9.88(s，18-H)，0.99(d，19-H3)，4.80(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，2.54(s，3′-N(CH3)2)，1.71(dd，2″-Hax)，1.19(s，3″-CH3)，4.65(d，4″-H)，1.07(d，6″-H)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.65(d，3″-OCH2SCH3)，2.18(s，3″-OCH2SCH3)，2.21(s，3″-OCH2SCH3)，2.37(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.97(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例33制备化合物(33)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子和R4为正丁酰基](3″-O-甲基柱晶白霉素A5)的方法将50mg化合物(31)溶于1.3ml乙醇中。按实施例7同样的方式控制1.3ml Raney镍的活性并将它与1.3ml乙醇一起加到上述混合物中。将所得混合物室温剧烈搅拌20分钟后，滤除不溶物并用5.0ml含1%(v/v)浓氨水的乙醇洗涤2次，合并滤液和洗涤液并减压浓缩。接着，将这样得到的57mg粗品化合物(32)[式(ⅩⅩⅤ)化合物，其中R1为1-乙氧乙基，R2为1-乙氧乙基和R4为正丁酰基]溶于3.8ml 5%乙酸溶液和1.3ml乙腈的混合溶液中并使所得混合物室温反应16小时。减压浓缩反应混合物后，如此得到的残留物溶于10ml氯仿中，并顺序用10ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用10ml饱和氯化钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥氯仿层并过滤，减压浓缩滤液，并将如此得到的33mg残留物通过制备TLC纯化[展开系统甲苯/乙酸酯(1∶1)]得到8.0mg化合物(33)。
化合物(33)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C40H67NO14
(3)质谱(FDMS)m/z 786(M H) (4)旋光率[α]15D-76°(Cl.0，CH3OH)(5)在100-104℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.22(br d，2-H)，2.70(dd，2-H)，3.79(br d，3-H)，3.10(br d，4-H)，3.54(s，4-OCH3)，4.11(br d，5-H)，1.60(br dt，7-H)，1.91(m，8-H)，4.10(dd，9-H)，5.69(dd，10-H)，6.26(dd，11-H)，6.04(br dd，12-H)，5.61(ddd，13-H)，2.12(dt，14-H)，5.29(ddq，15-H)，1.31(d，16-H3)，2.34(br dd，17-H)，2.87(br dd，17-H)，9.80(s，18-H)，0.99(d，19-H3)，4.59(d，1′-H)，3.23(dd，2′-H)，3.46(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，1.20(d，6′-H3)，2.58(s，3′-N(CH3)2)，4.94(d，1″-H)，1.67(dd，2″-Hax)，2.29(d，2″-Heq)，1.11(s，3″-CH3)，4.72(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.39(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.96(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例34制备化合物(35)[式(ⅩⅫ)所示化合物，其中R1为1-乙氧乙基，R2为乙酰基和R4为正丁酰基]的方法将2.10g化合物(34)[式(ⅩⅫ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为乙酰基和R4为正丁酰基][Journal of Medicinal Chemistry，20(5)，732(1977)]溶于63ml二氯甲烷和1.2ml乙基乙烯基醚的混合溶液中，加入923mg PPTS后，使混合物于30℃反应16小时。将反应混合物缓慢加入250ml饱和碳酸氢钠溶液中，然后用250ml二氯甲烷萃取。二氯甲烷层顺序用250ml5%硫酸氢钾水溶液，250ml饱和碳酸氢钠水溶液和250ml饱和氯化钠水溶液洗涤。减压浓缩二氯甲烷层。并将如此得到的残留物2.20g通过硅胶柱色谱法纯化[200g己烷/乙酸乙酯(2∶3)]。从而得到1.2g化合物(35)。
化合物(35)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C47H77NO17(3)质谱(FDMS)m/z 928(M H) (4)旋光率[α]19D-90°(Cl.0，CHCl3)(5)在80-85℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)3.88(m，3-H)，2.87(br d，4-H)，3.36(s，4-OCH3)，3.43(s，4-OCH3)，4.18(br d，5-H)，1.43(br dt，7-H)，1.92(m，8-H)，5.23(dd，9-H)，5.55(dd，10-H)，5.58(dd，10-H)，6.23(dd，11-H)，6.34(dd，11-H)，6.02(br dd，12-H)，5.65(ddd，13-H)，5.69(ddd，13-H)，2.13(br dt，14-H)，5.15(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，9.77(br s，18-H)，9.88(s，18-H)，0.99(d，19-H3)，1.01(d，19-H3)，4.83(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.89(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.50(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.60(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.16(t，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.23(t，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.27(d，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.28(d，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.66(d，1′-H)，4.99(dd，2′-H)，3.28(t，4′-H)，1.24(d，6′-H3)，2.02，2.04，2.05，2.07(4xs，9-OCOCH3，2′-OCOCH3)，2.39(s，3′-N(CH3)2)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，5.06(d，1″-H)，1.84(dd，2″-Hax)，2.01(dd，2″-Heq)，1.12(s，3″-CH3)，4.62(d，4″-H)，1.13(d，6″-H3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.97(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例35制备化合物(36H)[式(ⅩⅩⅢ)所示化合物，其中R1为1-乙氧乙基，R2为乙酰基和R4为正丁酰基，它为采用下述展开系统的TLC具有较大Rf值的一个异构体]和化合物(36L)[式(ⅩⅩⅢ)所示化合物，其中R1为1-乙氧乙基，R2为乙酰基和R4为正丁酰基，它为采用下述展开系统的TLC具有较小的Rf值的一个异构体]的方法将200mg化合物(35)溶于6.0mlDMSO和0.6ml乙酸酐的混合溶液中，使所得混合物于30℃反应40小时。将反应混合物缓慢加入50ml甲苯中并用50ml水洗涤3次。用无水硫酸钠干燥甲苯层并过滤。减压浓缩滤液，如此得到的残留物215mg通过制备TLC纯化[展开系统己烷/乙酸酯(1∶1)]从而得到32mg化合物(36H)和29mg化合物(36L)。
化合物(36H)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C49H81NO17S(3)质谱(SIMS)m/z 988(M H) (4)TLC上的Rf值0.58[己烷/乙酸乙酯(1∶1)]。
(5)旋光率[α]15D-102°(Cl.0，CHCl3)(6)在68-73℃熔化无确定熔点
(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)3.87(m，3-H)，2.88(br d，4-H)，3.44(s，4-OCH3)，4.20(br d，5-H)，1.44(br dt，7-H)，1.90(m，8-H)，5.23(dd，9-H)，5.58(dd，10-H)，6.34(dd，11-H)，6.02(br dd，12-H)，5.65(ddd，13-H)，2.13(dt，14-H)，5.15(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，9.88(br s，18-H)，1.00(d，19-H3)，4.84(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.50(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.60(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.23(t，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.28(d，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.65(d，1′-H)，4.93(dd，2′-H)，2.71(t，3′-H)，3.16(t，4′-H)，3.29(dq，5′-H)，1.19(d，6′-H3)，2.02，2.03，(2xs，9-OCOCH3，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，4.81(d，1″-H)，1.68(dd，2″-Hax)，2.25(d，2″-Heq)，1.17(s，3″-CH3)，4.55(dq，5″-H)，1.04(d，6″-H3)，4.51(d，3″-OCH2SCH3)，4.63，4.64(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.19(s，3″-OCH2SCH3)，2.37(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.97(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
化合物(36L)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C49H81NO17S(3)质谱(SIMS)m/z 988(M H) (4)TLC上的Rf值0.50[己烷/乙酸乙酯(1∶1)]。
(5)旋光率[α]14D-92°(Cl.0，CHCl3)(6)在70-74℃熔化无确定熔点
(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)1.84(m，8-H)，5.56(dd，10-H)，6.24(dd，11-H)，6.01(br dd，12-H)，5.69(ddd，13-H)，2.13(dt，14-H)，1.28(d，16-H3)，2.89(br dd，17-H)，9.76(s，18-H)，0.99(d，19-H3)，4.90(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.48(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.62(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.15(t，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.27(d，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，4.54(d，1′-H)，4.95(dd，2′-H)，2.74(t，3′-H)，3.17(t，4′-H)，1.19(d，6′-H3)，2.03，2.05(2xs，9-OCOCH3，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，4.82(d，1″-H)，1.68(dd，2″-Hax)，2.24(dd，2″-Heq)，1.17(s，3″-CH3)，4.56(dq，5″-H)，1.04(d，6″-H3)，4.51(d，3″-OCH2SCH3)，4.63，4.64(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，2.37(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.97(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例36制备化合物(37H)[式(ⅩⅩⅣ)所示化合物，其中R1为1-乙氧乙基，R2为乙酰基和R4为正丁酰基，它是从化合物(36H)衍生的一个异构体]的方法将19mg化合物(36H)溶于1.9ml甲醇中并使得混合物于30℃反应16小时。减压浓缩反应混合物，并将如此得的18mg残留物通过制备TLC纯化[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶2)]。从而得到14mg化合物(37H)。
化合物(37H)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体
(2)分子式C47H79NO16S(3)质谱(SIMS)m/z 946(M H) (4)TLC上的Rf值0.33[氯仿/甲醇(30∶1)]。
(5)旋光率[α]16D-90°(Cl.0，CH3OH)(6)在72-75℃熔化无确定熔点(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.69(dd，2-H)，3.93(m，3-H)，2.95(br d，4-H)，3.55(s，4-OCH3)，4.07(br d，5-H)，1.48(br dt，7-H)，1.93(m，8-H)，5.26(dd，9-H)，5.59(dd，10-H)，6.33(dd，11-H)，6.03(br dd，12-H)，5.66(ddd，13-H)，2.15(dt，14-H)，5.16(ddq，15-H)，1.28(d，16-H3)，2.73(br dd，17-H)，9.89(br s，18-H)，1.00(d，19-H3)，4.82(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.50(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.60(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.23(t，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.29(d，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，2.03(s，9-OCOCH3)，4.56(d，1′-H)，3.36(dd，2′-H)，2.47(t，3′-H)，1.21(d，6′-H3)，2.53(s，3′-N(CH3)2)，4.88(d，1″-H)，1.71(dd，2″-Hax)，2.27(d，2″-Heq)，1.19(s，3″-CH3)，4.58(dq，5″-H)，1.06(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.64，4.65(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.19(s，3″-OCH2SCH3)，2.37(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.97(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例37制备化合物(37L)[式(ⅩⅩⅣ)所示化合物，其中R1为1-乙氧乙基，R2为乙酰基和R4为正丁酰基，它是自化合物(36L)衍生的一个异构体]的方法
将20mg化合物(36L)溶于2.0ml甲醇中随后于30℃反应16小时。减压浓缩反应混合物，并将如此得到的残留物19mg通过制备TLC纯化[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶2)]。从而得到15mg化合物(37L)。
化合物(37L)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C47H79NO16S(3)质谱(SIMS)m/z 946(M H) (4)TLC上的Rf值0.24[氯仿/甲醇(30∶1)]。
(5)旋光率[α]16D-77°(C0.5，CH3OH)(6)在70-72℃熔化无确定熔点(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.83(dd，2-H)，3.47(s，4-OCH3)，1.86(m，8-H)，5.29(dd，9-H)，5.55(dd，10-H)，6.21(dd，11-H)，6.02(br dd，12-H)，5.66(ddd，13-H)，2.13(dt，14-H)，5.25(ddq，15-H)，1.28(d，16-H3)，2.98(br dd，17-H)，9.77(s，18-H)，0.98(d，19-H3)，4.92(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.49(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.59(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.16(t，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.29(d，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，2.04(s，9-OCOCH3)，4.42(d，1′-H)，3.25(t，4′-H)，1.24(d，6′-H3)，2.53(s，3′-N(CH3)2)，4.87(d，1″-H)，1.70(dd，2″-Hax)，2.26(d，2″-Heq)，1.19(s，3″-CH3)，4.60(dq，5″-H)，1.06(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.65，4.66(2xd，4″-H，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，2.37(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.97(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例38制备化合物(38H)[式(ⅩⅩⅤ)所示化合物，其中R1为1-乙氧乙基，R2为乙酰基和R4为正丁酰基，它是从化合物(37H)衍生的一个异构体]的方法将34mg化合物(37H)溶于0.90ml乙醇中。按实施例7同样的方式控制0.9mlRaney镍的活性并将它与0.9ml乙醇一起加到上述混合物中。将所得混合物室温剧烈搅拌40分钟后，滤除不溶物并用4.0ml每份的含1%(Ⅴ/Ⅴ)浓氨水的乙醇洗2次。合并滤液和洗涤液并减压浓缩。随后，将这样得到的31mg残留物通过制备TLC纯化[展开系统甲苯/乙酸酯(2∶1)]得到3.3mg化合物(38H)化合物(38H)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C46H77NO16(3)质谱(SIMS)m/z 900(M H) (4)TLC上的Rf值0.17[氯仿/甲醇(30∶1)]。
(5)旋光率[α]17D-73°(C0.3，CH3OH)(6)在74-77℃熔化无确定熔点(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.71(dd，2-H)，3.92(m，3-H)，2.97(br d，4-H)，3.56(s，4-OCH3)，4.10(br d，5-H)，1.50(br dt，7-H)，1.93(m，8-H)，5.26(dd，9-H)，5.59(dd，10-H)，6.33(dd，11-H)，6.03(br dd，12-H)，5.65(ddd，13-H)，2.15(dt，14-H)，5.15(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，2.72(br dd，17-H)，9.90(br s，18-H)，1.00(d，19-H3)，4.83(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.50(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.59(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.23(t，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.28(d，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，2.02(s，9-OCOCH3)，4.57(d，1′-H)，2.47(t，3′-H)，2.53(s，3′-N(CH3)2)，4.89(d，1″-H)，1.64(dd，2″-Hax)，2.27(d，2″-Heq)，1.09(s，3″-CH3)，4.71(d，4″-H)，1.06(d，6″-H3)，3.25(s，3″-OCH3)，2.38(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.68(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.95(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例39制备化合物(38L)[式(ⅩⅩⅤ)所示化合物，其中R1为1-乙氧乙基，R2为乙酰基和R4为正丁酰基，它是从化合物(37L)衍生的一个异构体]的方法将18mg化合物(37L)溶于0.4ml乙醇中。按实施例7同样的方式控制0.5mlRaney镍的活性并将它与0.5ml乙醇一起加到上述混合物中。将所得混合物室温剧烈搅拌40分钟后，滤除不溶物并用2.0ml含1%(Ⅴ/Ⅴ)浓氨水的乙醇洗2次。合并滤液和洗涤液并减压浓缩。随后，将这样得到的16mg残留物通过制备TLC纯化[展开系统甲苯/乙酸酯(2∶1)]得到1.7mg化合物(38L)。
化合物(38L)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C46H77NO16(3)质谱(SIMS)m/z 900(M H) (4)TLC上的Rf值0.10[氯仿/甲醇(30∶1)]。
(5)旋光率[α]20D-100°(C0.2，CH3OH)
(6)在69-72℃熔化无确定熔点(7)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.83(dd，2-H)，3.48(s，4-OCH3)，1.85(m，8-H)，5.28(dd，9-H)，5.55(dd，10-H)，6.22(dd，11-H)，6.02(br dd，12-H)，5.67(ddd，13-H)，2.14(dt，14-H)，5.24(ddq，15-H)，2.98(br dd，17-H)，9.78(br s，18-H)，0.99(d，19-H3)，4.92(q，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.49(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，3.60(dq，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.16(t，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，1.28(d，3-OCH(OCH2CH3)CH3)，2.04(s，9-OCOCH3)，4.44(d，1′-H)，2.54(s，3′-N(CH3)2)，4.89(d，1″-H)，1.63(dd，2″-Hax)，2.27(d，2″-Heq)，1.09(s，3″-CH3)，4.70(d，4″-H)，1.06(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.38(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.96(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例40制备化合物(39)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为乙酰基，R3为氢原子和R4为正丁酰基](9-O-乙酰基-3″-O-甲基柱晶白霉素A5)的方法(1)将4.0mg化合物(38H)溶于3.0ml5%乙酸溶液和1.0ml乙腈的混合溶液中并使混合物室温反应16小时。减压浓缩反应混合物后，将这样得到的残留物加到10ml氯仿中并顺序用10ml饱合碳酸氢钠溶液洗涤3次和10ml饱合氯化钠水溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥氯仿层并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的4.5mg残留物通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇(10∶1)]。从而得到3.0mg化合物(39)。
化合物(39)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C42H69NO15(3)质谱(EIMS)m/z 828(M H) (4)旋光率[α]17D-75°(C0.6，CH3OH)(5)在102-105℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.22(br d，2-H)，2.71(dd，2-H)，3.79(br d，3-H)，3.09(br d，4-H)，3.54(s，4-OCH3)，4.14(br d，5-H)，1.62(br dt，7-H)，1.99(m，8-H)，5.17(dd，9-H)，5.60(dd，10-H)，6.40(dd，11-H)，6.03(br dd，12-H)，5.65(ddd，13-H)，2.12(dt，14-H)，2.50(br dt，14-H)，5.29(ddq，15-H)，1.30(d，16-H3)，2.46(br dd，17-H)，2.82(br dd，17-H)，9.80(s，18-H)，0.98(d，19-H3)，2.00(s，9-OCOCH3)，4.57(d，1′-H)，3.20(dd，2′-H)，2.42(t，3′-H)，3.45(t，4′-H)，3.27(dq，5′-H)，1.20(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.67(dd，2″-Hax)，2.30(d，2″-Heq)，1.10(s，3″-CH3)，4.72(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.39(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.68(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.96(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
实施例41制备化合物(39)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为乙酰基，R3为氢原子和R4为正丁酰基](9-O-乙酰基-3″-O-甲基柱晶白霉素A5)的方法(2)将1.6mg化合物(38L)溶于1.2ml5%乙酸溶液和0.3ml乙腈的混合溶液中并使混合物于室温反应16小时。减压浓缩反应混合物后，将这样得到的残留物加到5ml氯仿中并顺序用5.0ml饱合碳酸氢钠溶液洗涤3次和5ml饱合氯化钠水溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥氯仿层并过滤。减压浓缩滤液，从而得到1.2mg化合物(39)。
实施例42制备化合物(40)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为丙酰基，R3为氢原子和R4为正丁酰基](9-O-丙酰基-3″-O-甲基柱晶白霉素A5)的方法将10mg化合物(33)溶于0.5ml无水甲苯中并顺序加入4.4μl无水吡啶和4.8μl～丙酰氯，随后室温搅拌20分钟。向反应混合物中加入10ml乙酸乙酯和4.1μl三乙胺用于萃取。乙酸乙酯层用10ml水洗2次。用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的残留物10mg通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(10∶1∶0.1)]，从而得到4.0mg化合物(40)。
化合物(40)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C43H71NO15(3)质谱(FDMS)m/z 841(M) (4)旋光率[α]19D-73°(C0.3，CH3OH)(5)在99-103℃熔化无确定熔点
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.22(br d，2-H)，2.70(dd，2-H)，3.79(br d，3-H)，3.09(br d，4-H)，3.54(s，4-OCH3)，4.14(br d，5-H)，1.62(br dt，7-H)，2.00(m，8-H)，5.18(dd，9-H)，5.61(dd，10-H)，6.40(dd，11-H)，6.03(br dd，12-H)，5.65(ddd，13-H)，2.12(dt，14-H)，2.51(br dt，14-H)，5.29(ddq，15-H)，1.30(d，16-H3)，2.47(br dd，17-H)，2.82(br dd，17-H)，9.80(s，18-H)，0.98(d，19-H3)，2.39(q，9-OCOCH2CH3)，1.09(t，9-OCOCH2CH3)，4.57(d，1′-H)，3.21(dd，2′-H)，3.45(t，4′-H)，3.28(dq，5′-H)，1.20(d，6′-H3)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.93(d，1″-H)，1.67(dd，2″-Hax)，2.28(d，2″-Heq)，1.09(s，3″-CH3)，4.72(d，4″-H)，4.54(dq，5″-H)，1.07(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.39(m，4″-OCOCH2CH2CH3)，1.69(tq，4″-OCOCH2CH2CH3)，0.96(t，4″-OCOCH2CH2CH3).
参考实施例制备化合物(41)[式(ⅩⅩⅥ)所示化合物，其中R3为乙酰基和R4为丙酰基](JP-B-53-30718)的方法将300ml乙腈加到10g柱晶白霉素A7中使之溶解并加入2.7g无水乙酸，随后室温搅拌24小时。向反应混合物中缓慢加入500ml饱合碳酸氢钠水溶液。所得混合物于室温搅拌30分钟并用500ml二氯甲烷萃取二次，用500ml饱合氯化钠溶液洗涤有机层2次。用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液得到10.55g粗晶化合物(41)。
实施例43制备化合物(42)[式(ⅩⅩⅧ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为乙酰基，R4为丙酰基和R5为TBDMS基]的方法将100ml无水DMF加到10.55g粗品化合物(41)中使之溶解并向其中加入5.97gTBDMSCl和5.39g咪唑，随后于45℃搅拌24小时。向反应混合物中缓慢加入500ml饱合碳酸氢钠水溶液。所得的混合物于室温搅拌30分钟并用500ml二氯甲烷萃取2次。有机层用500ml饱合氯化钠溶液洗涤2次，用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液得到13.2g粗品化合物(42)。50mg的化合物通过制备TLC纯化[展开系统己烷/乙酸乙酯(1∶1)]得到28mg化合物(42)。
化合物(42)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C52H93NO15Si2(3)质谱(SIMS)m/z 1028(M H) (4)旋光率[α]14D-24°(C1.0，CHCl3)(5)在103-107℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.67(dd，2-H)，4.13(br dd，3-H)，2.94(br s，4-H)，3.40(s，4-OCH3)，3.30(br d，5-H)，2.28(m，6-H)，0.40(br dd，7-H)，1.52(m，8-H)，4.17(m，9-H)，5.95(m，10-H)，5.95(m，11-H)，6.31(br dd，12-H)，5.47(ddd，13-H)，4.64(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，1.46(br d，17-H)，1.62(dt，17-H)，4.53(br d，18-H)，0.91(d，19-H3)，4.26(d，1′-H)，5.10(dd，2′-H)，2.74(t，3′-H)，3.30(t，4′-H)，3.30(dq，5′-H)，1.29(d，6′-H3)，2.11(s，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，5.09(d，1″-H)，1.85(dd，2″-Hax)，2.00(d，2″-Heq)，1.11(s，3″-CH3)，4.62(d，4″-H)，4.37(dq，5″-H)，1.14(d，6″-H3)，2.43(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.44(apparent q，4″-OCOCH2CH3)，1.17(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例44制备化合物(43)[式(ⅩⅩⅨ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为乙酰基和R5为TBDMS基]的方法向6.68g粗品化合物(42)中加334ml苯使之溶解并向其中加入167ml50%氢氧化钠水溶液和2.19g四-正丁基硫酸氢铵，随后室温搅拌1小时。分离苯层，顺序用500ml净化水洗涤2次和同样体积饱和氯化钠溶液洗涤2次，用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液得到5.33g粗品化合物(43)。50mg的化合物通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇(20∶1))得到25mg化合物(43)。
化合物(43)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C49H89NO14Si2(3)质谱(SIMS)m/z 972(M H) (4)旋光率[α]14D-24°(C1.0，CHCl3)(5)在102-106℃熔化无确定熔点
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.66(dd，2-H)，4.18(br dd，3-H)，2.94(br s，4-H)，3.40(s，4-OCH3)，3.42(m，5-H)，2.28(m，6-H)，0.40(br dd，7-H)，1.52(m，8-H)，4.18(m，9-H)，5.95(m，10-H)，5.95(m，11-H)，6.31(br dd，12-H)，5.47(ddd，13-H)，4.64(ddq，15-H)，1.45(br d，17-H)，1.62(dt，17-H)，4.52(br d，18-H)，0.91(d，19-H3)，4.26(d，1′-H)，5.08(dd，2′-H)，2.73(t，3′-H)，3.29(t，4′-H)，3.29(dq，5′-H)，2.11(s，2′-OCOCH3)，2.39(s，3′-N(CH3)2)，5.10(d，1″-H)，1.77(dd，2″-Hax)，2.02(d，2″-Heq)，1.23(s，3″-CH3)，2.94(d，4″-H)，3.98(dq，5″-H).
实施例45制备化合物(44)[式(ⅩⅩⅩ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为乙酰基，R4为正戊酰基和R5为TBDMS基]的方法向500mg粗品化合物(43)中加5.0ml无水吡啶使之溶解并向其中加入185mg正戊酰氯，随后室温搅拌55分钟。向反应混合物中加入50ml饱合碳酸氢钠水溶液并用50ml的氯仿萃取2次。氯仿层用50ml饱和氯化钠溶液洗2次。用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并干燥得到670mg粗品化合物(44)。40mg的化合物通过制备TLC纯化(展开系统氯仿/甲醇(40∶1))得到15mg化合物(44)。
化合物(44)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C54H97NO15Si2
(3)质谱(SIMS)m/z 1056(M H) (4)旋光率[α]13D-23°(C1.0，CHCl3)(5)在80-83℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.67(dd，2-H)，4.12(br dd，3-H)，2.94(br s，4-H)，3.40(s，4-OCH3)，3.30(br d，5-H)，2.28(m，6-H)，0.40(br dd，7-H)，1.52(m，8-H)，4.18(m，9-H)，5.94(m，10-H)，5.94(m，11-H)，6.30(br dd，12-H)，5.47(ddd，13-H)，4.64(ddq，15-H)，1.28(d，16-H3)，1.45(br d，17-H)，1.62(dt，17-H)，4.53(br d，18-H)，0.91(d，19-H3)，4.26(d，1′-H)，5.10(dd，2′-H)，2.74(t，3′-H)，3.30(t，4′-H)，3.30(dq，5′-H)，1.28(d，6′-H3)，2.10(s，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，5.09(d，1″-H)，1.85(dd，2″-Hax)，2.00(d，2″-Heq)，1.11(s，3″-CH3)，4.62(d，4″-H)，4.37(dq，5″-H)，1.14(d，6″-H3)，2.39(明显的t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，2.40(明显的 t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.62(m，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.36(tq，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，0.91(t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3).
实施例46制备化合物(45)[式(Ⅶ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为乙酰基，R4为正戊酰基和R5为TBDMS基]的方法将630mg粗品化合物(44)加到19ml无水DMSO和1.9ml乙酸酐的混合溶液中并使混合物于45℃反应5天。向其中加入200ml苯后，所得混合物顺序用200ml份的净化水洗涤2次和用同样体积的饱和氯化钠溶液洗涤2次。用无水硫酸钠干燥有机层并过滤。减压浓缩滤液，将这样得到的650mg残留物通过硅胶柱色谱纯化(50g己烷/乙酸乙酯(2∶1))得到105mg化合物(45)。
化合物(45)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C56H101NO15Si2(3)质谱(SIMS)m/z 1116(M H) (4)旋光率[α]18D-36°(C1.0，CHCl3)(5)在65-68℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.66(dd，2-H)，4.12(br dd，3-H)，2.94(br s，4-H)，3.40(s，4-OCH3)，3.28(br d，5-H)，0.40(br dd，7-H)，1.50(m，8-H)，4.17(br dd，9-H)，5.94(m，10-H)，5.94(m，11-H)，6.30(br dd，12-H)，5.45(ddd，13-H)，4.62(ddq，15-H)，1.28(d，16-H3)，1.43(br d，17-H)，4.52(br d，18-H)，0.90(d，19-H3)，4.24(d，1′-H)，5.05(dd，2′-H)，2.74(t，3′-H)，3.15(t，4′-H)，3.26(dq，5′-H)，1.23(d，6′-H3)，2.09(s，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，4.82(d，1″-H)，1.68(dd，2″-Hax)，2.24(d，2″-Heq)，1.17(s，3″-CH3)，4.67(d，4″-H)，4.58(dq，5″-H)，1.04(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.63(d，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，2.37(明显的t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，2.39(明显的 t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.62(m，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.35(tq，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，0.90(t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3).
实施例47制备化合物(46)[式(ⅩⅩⅪ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R4为正戊酰基和R5为TBDMS基]的方法在10ml甲醇中溶解105mg化合物(45)并使混合物于40℃反应2天。减压浓缩所得混合物得到100mg化合物(46)。
化合物(46)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C54H99NO14Si2(3)质谱(SIMS)m/z 1074(M H) (4)旋光率[α]15D-17°(C1.0，CH3OH)(5)在63-66℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)4.03(br dd，3-H)，3.24(br s，4-H)，3.44(s，4-OCH3)，3.48(br d，5-H)，2.16(m，6-H)，0.42(br dd，7-H)，1.60(m，8-H)，4.18(br dd，9-H)，5.70(br dd，10-H)，6.09(m，11-H)，6.09(m，12-H)，5.61(dt，13-H)，2.28(m，14-H)，4.82(ddq，15-H)，1.30(d，16-H3)，1.44(br d，17-H)，1.66(dt，17-H)，4.56(br d，18-H)，0.89(d，19-H3)，4.27(d，1′-H)，3.42(dd，2′-H)，3.24(t，4′-H)，3.24(dq，5′-H)，1.20(d，6′-H3)，2.54(s，3′-N(CH3)2)，4.87(d，1″-H)，1.70(dd，2″-Hax)，2.25(d，2″-Heq)，1.17(s，3″-CH3)，4.67(d，4″-H)，4.60(dq，5″-H)，1.06(d，6″-H3)，4.51(d，3″-OCH2SCH3)，4.64(d，3″-OCH2SCH3)，2.18(s，3″-OCH2SCH3)，2.38(明显的t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，2.39(明显的 t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.63(m，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.35(tq，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，0.91(t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3).
实施例48制备化合物(47)[式(ⅩⅩⅫ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R4为正戊酰基和R5为TBDMS基]的方法将95mg化合物(46)溶于2.0ml乙醇中。按实施例7同样的方式控制6.0mlRaney镍的活性并将它与2.0ml乙醇一起加到上述混合物中。所得混合物于室温剧烈搅拌40分钟后，滤除不溶物并减压浓缩滤液。随后，这样得到的95mg残留物通过制备TLC纯化(展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(300∶10∶1))得到36mg化合物(47)。
化合物(47)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C53H97NO14Si2(3)质谱(SIMS)m/z 1028(M H) (4)旋光率[α]15D-16°(C1.0，CH3OH)(5)在70-72℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)4.04(br dd，3-H)，3.44(s，4-OCH3)，3.47(br d，5-H)，2.17(m，6-H)，0.42(br dd，7-H)，4.18(br dd，9-H)，5.71(br dd，10-H)，6.10(m，11-H)，6.10(m，12-H)，5.62(dt，13-H)，2.30(m，14-H)，4.82(ddq，15-H)，1.30(d，16-H3)，1.42(br d，17-H)，1.67(dt，17-H)，4.56(br d，18-H)，0.92(d，19-H3)，4.29(d，1′-H)，3.38(dd，2′-H)，3.31(t，4′-H)，1.22(d，6′-H3)，2.54(s，3′-N(CH3)2)，4.90(d，1″-H)，2.27(d，2″-Heq)，1.08(s，3″-CH3)，4.70(d，4″-H)，4.58(dq，5″-H)，1.06(d，6″-H3)，3.25(s，3″-OCH3)，2.39(明显的 t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，2.40(明显的 t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.63(m，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.35(tq，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，0.89(t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3).
实施例49制备化合物(48)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子和R4为正戊酰基](3″-O-甲基-4″-O正戊酰基柱晶白霉素V)的方法将35mg化合物(47)溶于255μl2MTBAF/THF溶液中并使所得混合物于45℃反应1小时。反应混合物冷至室温后，向其中滴加1.0ml5%硫酸氢钾并用10ml氯仿萃取2次，合并氯仿层并顺序用20ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和20ml饱和氯化钠溶液洗涤2次。用无水硫酸钠干燥混合物并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的残留物通过制备TLC纯化(展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(400∶20∶1))从而得到7.0mg化合物(48)。
化合物(48)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C41H69NO14(3)质谱(EIMS)m/z 799(M) (4)旋光率[α]17D-68°(C0.5，CH3OH)(5)在98-102℃熔化无确定熔点
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.21(d，2-H)，2.69(dd，2-H)，3.78(br d，3-H)，3.08(br d，4-H)，3.53(s，4-OCH3)，4.10(br d，5-H)，1.58(br dt，7-H)，1.90(m，8-H)，4.09(dd，9-H)，5.67(dd，10-H)，6.25(dd，11-H)，6.02(br dd，12-H)，5.60(ddd，13-H)，2.10(dt，14-H)，2.49(br dt，14-H)，5.28(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，2.33(br dd，17-H)，2.86(br dd，17-H)，9.79(br s，18-H)，0.98(d，19-H3)，4.57(d，1′-H)，3.21(dd，2′-H)，3.43(t，4′-H)，3.27(dq，5′-H)，1.18(d，6′-H3)，2.55(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.65(dd，2″-Hax)，2.28(d，2″-Heq)，1.09(s，3″-CH3)，4.70(d，4″-H)，4.52(dq，5″-H)，1.06(d，6″-H3)，3.24(s，3″-OCH3)，2.39(明显的 t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，2.40(明显的 t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.62(m，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，1.34(tq，4″-OCOCH2CH2CH2CH3)，0.90(t，4″-OCOCH2CH2CH2CH3).
实施例50制备化合物(49)[式(ⅩⅩⅩ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为乙酰基，R4为异丁酰基和R5为TBDMS基]的方法向500mg化合物(43)中加5.0ml无水吡啶使之溶解并向其中加入164mg异丁酰氯，随后室温搅拌15分钟。向其中加入50ml饱合碳酸氢钠溶液并用50ml的氯仿萃取2次。氯仿层用50ml饱和氯化钠溶液洗涤2次。用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并干燥得到544mg化合物(49)粗品。如此得到的40mg的残留物通过制备TLC纯化(展开系统氯仿/甲醇(40∶1))从而得到21mg化合物(49)。
化合物(49)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C53H95NO15Si2(3)质谱(SIMS)m/z 1042(M H) (4)旋光率[α]13D-20°(C1.0，CHCl3)(5)在103-106℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.67(dd，2-H)，4.12(br dd，3-H)，2.94(br s，4-H)，3.40(s，4-OCH3)，3.30(br d，5-H)，2.28(m，6-H)，0.40(br dd，7-H)，1.52(m，8-H)，4.18(m，9-H)，5.95(m，10-H)，5.95(m，11-H)，6.31(br dd，12-H)，5.47(ddd，13-H)，4.64(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，1.45(br d，17-H)，1.62(dt，17-H)，4.52(br d，18-H)，0.91(d，19-H3)，4.26(d，1′-H)，5.10(dd，2′-H)，2.74(t，3′-H)，3.30(t，4′-H)，3.30(dq，5′-H)，1.29(d，6′-H3)，2.10(s，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，5.09(d，1″-H)，1.84(dd，2″-Hax)，1.99(d，2″-Heq)，1.10(s，3″-CH3)，4.60(d，4″-H)，4.38(dq，5″-H)，1.13(d，6″-H3)，2.68(septet，4″-OCOCH(CH3)2)，1.19(d，4″-OCOCH(CH3)2)，1.20(d，4″-OCOCH(CH3)2).
实施例51制备化合物(50)[式(Ⅶ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为乙酰基，R4为异丁酰基和R5为TBDMS基]的方法
向15.0ml无水DMSO和1.5ml乙酸酐的混合溶液中加505mg化合物(49)粗品并使混合物于45℃反应5天。向其中加入200ml苯后，顺序用200ml的净化水洗所得混合物2次和用同样体积饱和氯化钠溶液洗2次。用无水硫酸钠干燥有机层并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的500mg残留物通过硅胶柱色谱纯化(50g己烷/乙酸乙酯(2∶1))得到54mg化合物(50)。
化合物(50)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C55H99NO15SSi2(3)质谱(SIMS)m/z 1102(M H) (4)旋光率[α]16D-42°(C1.0，CHCl3)(5)在71-73℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.67(dd，2-H)，4.13(br dd，3-H)，2.95(br s，4-H)，3.41(s，4-OCH3)，3.28(br d，5-H)，0.40(br dd，7-H)，1.51(m，8-H)，4.17(m，9-H)，5.94(m，10-H)，5.94(m，11-H)，6.30(br dd，12-H)，5.46(ddd，13-H)，4.63(ddq，15-H)，1.28(d，16-H3)，1.44(br d，17-H)，4.52(br d，18-H)，4.25(d，1′-H)，5.05(dd，2′-H)，2.75(t，3′-H)，3.16(t，4′-H)，3.26(dq，5′-H)，1.24(d，6′-H3)，2.10(s，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，4.83(d，1″-H)，1.69(dd，2″-Hax)，2.23(d，2″-Heq)，1.18(s，3″-CH3)，4.67(d，4″-H)，4.59(dq，5″-H)，1.04(d，6″-H3)，4.51(d，3″-OCH2SCH3)，4.62(d，3″-OCH2SCH3)，2.21(s，3″-OCH2SCH3)，2.65(septet，4″-OCOCH(CH3)2).
实施例52制备化合物(51)[式(ⅩⅩⅪ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R4为异丁酰基和R5为TBDMS基]的方法在6.0ml甲醇中溶解54mg化合物(50)并使混合物于40℃反应2天。减压浓缩所得混合物得到50mg化合物(51)。
化合物(51)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C53H97NO14SSi2(3)质谱(SIMS)m/z 1060(M H) (4)旋光率[α]15D-30°(C1.0，CH3OH)(5)在70-72℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)4.04(br dd，3-H)，3.25(br s，4-H)，3.44(s，4-OCH3)，3.48(br d，5-H)，2.16(m，6-H)，0.42(br dd，7-H)，1.60(m，8-H)，4.19(br dd，9-H)，5.71(br dd，10-H)，6.10(m，11-H)，6.10(m，12-H)，5.62(dt，13-H)，2.29(m，14-H)，4.82(ddq，15-H)，1.30(d，16-H3)，1.43(br d，17-H)，1.67(dt，17-H)，4.57(br d，18-H)，0.92(d，19-H3)，4.28(d，1′-H)，3.42(dd，2′-H)，3.25(t，4′-H)，3.25(dq，5′-H)，2.55(s，3′-N(CH3)2)，4.89(d，1″-H)，1.71(dd，2″-Hax)，2.24(d，2″-Heq)，1.17(s，3″-CH3)，4.65(d，4″-H)，4.61(dq，5″-H)，1.06(d，6″-H3)，4.50(d，3″-OCH2SCH3)，4.63(d，3″-OCH2SCH3)，2.18(s，3″-OCH2SCH3)，2.64(m，4″-OCOCH(CH3)2)，1.19(d，4″-OCOCH(CH3)2).
实施例53制备化合物(52)[式(ⅩⅩⅫ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R4为异丁酰基和R5为TBDMS基]的方法将115mg化合物(51)溶于2.4ml乙醇。按实施例7同样的方式控制7.3mlRaney镍的活性并将它与2.4ml乙醇一起加到上述混合物中。将所得混合物于室温剧烈搅拌35分钟后，滤除不溶物并减压浓缩滤液。然后，将这样得到的110mg残留物通过制备TLC纯化(展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(300∶10∶1))得到45mg化合物(52)。
化合物(52)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C52H95NO14Si2(3)质谱(SIMS)m/z 1014(M H) (4)旋光率[α]15D-20°(C1.0，CH3OH)(5)在82-85℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)4.04(br dd，3-H)，3.44(s，4-OCH3)，3.48(br d，5-H)，2.17(m，6-H)，0.42(br dd，7-H)，1.61(m，8-H)，4.19(br dd，9-H)，5.71(br dd，10-H)，6.10(m，11-H)，6.10(m，12-H)，5.62(dt，13-H)，2.30(m，14-H)，4.82(ddq，15-H)，1.31(d，16-H3)，1.43(br d，17-H)，1.68(dt，17-H)，4.57(br d，18-H)，0.94(d，19-H3)，4.30(d，1′-H)，3.38(dd，2′-H)，3.32(t，4′-H)，1.22(d，6′-H3)，2.55(s，3′-N(CH3)2)，4.90(d，1″-H)，1.65(dd，2″-Hax)，1.08(s，3″-CH3)，4.69(d，4″-H)，4.59(dq，5″-H)，1.07(d，6″-H3)，3.25(s，3″-OCH3)，2.67(七重峰，4″-OCOCH(CH3)2)，1.19(d，4″-OCOCH(CH3)2)，1.20(d，4″-OCOCH(CH3)2).
实施例54制备化合物(53)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子和R4为异丁酰基](4″-O-异丁酰基-3″-O-甲基柱晶白霉素V)的方法将45mg化合物(52)溶于333μl2MTBAF/THF溶液中并使所得混合物于45℃反应50分钟。反应混合物冷至室温后，向其中滴加1.0ml5%硫酸氢钾并用10ml的氯仿萃取2次，合并氯仿层并顺序用20ml的饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和20ml的饱和氯化钠溶液洗涤2次。用无水硫酸钠干燥混合物并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的残留物通过制备TLC纯化(展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(400∶20∶1))从而得到9.0mg化合物(53)。
化合物(53)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C40H67NO14(3)质谱(EIMS)m/z 785(M) (4)旋光率[α]17D-71°(C0.5，CH3OH)(5)在98-102℃熔化无确定熔点
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.20(d，2-H)，2.69(dd，2-H)，3.77(br dd，3-H)，3.08(br d，4-H)，3.53(s，4-OCH3)，4.09(br d，5-H)，0.93(br ddd，7-H)，1.58(br dt，7-H)，1.89(m，8-H)，4.08(dd，9-H)，5.67(dd，10-H)，6.25(dd，11-H)，6.02(br dd，12-H)，5.59(ddd，13-H)，2.10(dt，14-H)，2.49(br dt，14-H)，5.28(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，2.32(br dd，17-H)，2.86(br dd，17-H)，9.79(br s，18-H)，0.97(d，19-H3)，4.57(d，1′-H)，3.22(dd，2′-H)，2.47(t，3′-H)，3.44(t，4′-H)，3.27(dq，5′-H)，2.57(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.66(dd，2″-Hax)，2.26(d，2″-Heq)，1.08(s，3″-CH3)，4.69(d，4″-H)，4.52(dq，5″-H)，1.05(d，6″-H3)，3.24(s，3″-OCH3)，2.67(七重峰，4″-OCOCH(CH3)2)，1.18(d，4″-OCOCH(CH3)2)，1.19(d，4″-OCOCH(CH3)2).
实施例55制备化合物(54)[式(ⅩⅩⅩ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为乙酰基，R4为异戊酰基和R5为TBDMS基]的方法向500mg化合物(43)中加5.0ml无水吡啶使之溶解并向其中加入185mg异戊酰氯，随后室温搅拌25分钟。向其中加入50ml饱合碳酸氢钠溶液并用50ml的氯仿萃取2次。用50ml饱和氯化钠溶液洗涤氯仿层2次。用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并干燥得到650mg化合物(54)粗品。30mg这样得到的残留物通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇(40∶1)]从而得到17mg化合物(54)。
化合物(54)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C54H97NO15Si2(3)质谱(SIMS)m/z 1056(M H) (4)旋光率[α]14D-19°(C1.0，CHCl3)(5)在101-105℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.65(dd，2-H)，4.12(br dd，3-H)，2.94(br s，4-H)，3.39(s，4-OCH3)，3.29(br d，5-H)，0.40(br dd，7-H)，1.51(m，8-H)，4.17(m，9-H)，5.94(m，10-H)，5.94(m，11-H)，6.30(br dd，12-H)，5.46(ddd，13-H)，4.63(ddq，15-H)，1.28(d，16-H3)，1.44(br d，17-H)，1.61(dt，17-H)，4.52(br d，18-H)，0.90(d，19-H3)，4.26(d，1′-H)，5.09(dd，2′-H)，2.73(t，3′-H)，3.29(t，4′-H)，3.29(dq，5′-H)，1.28(d，6′-H3)，2.01(s，2′-OCOCH3)，2.40(s，3′-N(CH3)2)，5.08(d，1″-H)，1.84(dd，2″-Hax)，1.98(d，2″-Heq)，1.10(s，3″-CH3)，4.61(d，4″-H)，4.37(dq，5″-H)，1.14(d，6″-H3)，2.28(dd，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，2.13(m，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，0.96(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例56制备化合物(55)[式(Ⅶ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为乙酰基，R4为异戊酰基和R5为TBDMS基]的方法将650mg化合物(54)粗品溶于20ml无水DMSO和2.0ml乙酸酐的混合溶液中后，使混合物于45℃反应5天。向其中加入200ml苯，所得混合物顺序用200ml的净化水洗2次和用同样体积的饱和氯化钠溶液洗2次。用无水硫酸钠干燥有机层并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的655mg残留物通过硅胶柱色谱纯化(50g己烷/乙酸乙酯(2∶1))得到170mg化合物(55)。
化合物(55)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C56H101NO15SSi2(3)质谱(SIMS)m/z 1116(M H) (4)旋光率[α]13D-39°(C1.0，CHCl3)(5)在80-82℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.67(dd，2-H)，4.13(br dd，3-H)，2.95(br s，4-H)，3.42(s，4-OCH3)，3.29(br d，5-H)，0.41(br dd，7-H)，1.51(m，8-H)，4.18(m，9-H)，5.95(m，10-H)，5.95(m，11-H)，6.31(br dd，12-H)，5.46(ddd，13-H)，4.64(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，1.45(br d，17-H)，1.62(dt，17-H)，4.52(br d，18-H)，0.91(d，19-H3)，4.25(d，1′-H)，5.05(dd，2′-H)，2.75(t，3′-H)，3.15(t，4′-H)，3.27(dq，5′-H)，1.24(d，6′-H3)，2.10(s，2′-OCOCH3)，2.42(s，3′-N(CH3)2)，4.83(d，1″-H)，1.69(dd，2″-Hax)，1.18(s，3″-CH3)，4.68(d，4″-H)，4.59(dq，5″-H)，1.06(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.64(s，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，2.27(dd，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，2.14(m，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，0.97(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例57制备化合物(56)[式(ⅩⅩⅪ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R4为异戊酰基和R5为TBDMS基]的方法在20ml甲醇中溶解170mg化合物(55)并使混合物于40℃反应2天。减压浓缩反应混合物得到160mg化合物(56)。
化合物(56)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C54H99NO14SSi2(3)质谱(SIMS)m/z 1074(M H) (4)旋光率[α]18D-21°(C1.0，CH3OH)(5)在72-75℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)4.04(br dd，3-H)，3.24(br s，4-H)，3.45(s，4-OCH3)，3.49(br d，5-H)，2.14(m，6-H)，0.43(br dd，7-H)，1.61(m，8-H)，4.19(br dd，9-H)，5.72(br dd，10-H)，6.10(m，11-H)，6.10(m，12-H)，5.62(dt，13-H)，2.29(m，14-H)，4.83(ddq，15-H)，1.31(d，16-H3)，1.44(br d，17-H)，1.67(dt，17-H)，4.57(br d，18-H)，0.93(d，19-H3)，4.28(d，1′-H)，3.42(dd，2′-H)，3.24(t，4′-H)，3.24(dq，5′-H)，1.22(d，6′-H3)，2.54(s，3′-N(CH3)2)，4.88(d，1″-H)，1.72(dd，2″-Hax)，2.26(d，2″-Heq)，1.18(s，3″-CH3)，4.67(d，4″-H)，4.61(dq，5″-H)，1.07(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.65(d，3″-OCH2SCH3)，2.18(s，3″-OCH2SCH3)，2.27(dd，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，2.15(m，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，0.97(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例58制备化合物(57)[式(ⅩⅩⅫ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R4为异戊酰基和R5为TBDMS基]的方法(1)将160mg化合物(56)溶于3.4ml乙醇中。按实施例7同样的方式控制10mlRaney镍的活性并将它与3.4ml乙醇一起加到上述混合物中。将所得混合物室温剧烈搅拌30分钟后，滤除不溶物并减压浓缩滤液。然后，这样得到的150mg残留物通过制备TLC纯化(展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(300∶10∶1))得到41mg化合物(57)。
化合物(57)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C53H97NO14Si2(3)质谱(SIMS)m/z 1028(M H) (4)旋光率[α]16D-24°(C1.0，CH3OH)(5)在75-78℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)4.04(br dd，3-H)，3.44(s，4-OCH3)，3.48(br d，5-H)，2.17(m，6-H)，0.42(br dd，7-H)，1.60(m，8-H)，4.19(br dd，9-H)，5.71(br dd，10-H)，6.10(m，11-H)，6.10(m，12-H)，5.62(dt，13-H)，4.82(ddq，15-H)，1.30(d，16-H3)，1.42(br d，17-H)，1.67(dt，17-H)，4.57(br d，18-H)，4.30(d，1′-H)，3.39(dd，2′-H)，3.31(t，4′-H)，1.22(d，6′-H3)，2.54(s，3′-N(CH3)2)，4.90(d，1″-H)，1.63(dd，2″-Hax)，2.27(d，2″-Heq)，1.09(s，3″-CH3)，4.71(d，4″-H)，4.59(dq，5″-H)，1.07(d，6″-H3)，3.25(s，3″-OCH3)，2.28(dd，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例59制备化合物(58)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子和R4为异戊酰基](3″-O-甲基柱晶白霉素A1)的方法将41mg化合物(57)溶于300μl2MTBAF/THF溶液中并使所得混合物于45℃反应50分钟。反应混合物冷至室温后，滴加入1.0ml5%硫酸氢钾溶液并用10ml的氯仿萃取2次，合并氯仿层并顺序用20ml的饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用20ml的饱和氯化钠溶液洗2次。用无水硫酸钠干燥混合物并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的残留物通过制备TLC纯化(展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(400∶20∶1))从而得到9.0mg化合物(58)。
化合物(58)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C41H69NO14(3)质谱(EIMS)m/z 799(M) (4)旋光率[α]18D-66°(C0.5，CH3OH)(5)在100-104℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.20(d，2-H)，2.69(dd，2-H)，3.78(br d，3-H)，3.08(br d，4-H)，3.53(s，4-OCH3)，4.10(br d，5-H)，0.98(br ddd，7-H)，1.58(br dt，7-H)，1.99(m，8-H)，4.08(dd，9-H)，5.67(dd，10-H)，6.25(dd，11-H)，6.02(br dd，12-H)，5.59(ddd，13-H)，2.10(dt，14-H)，2.50(br dt，14-H)，5.28(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，2.32(br dd，17-H)，2.86(br dd，17-H)，9.79(br s，18-H)，0.97(d，19-H3)，4.57(d，1′-H)，3.22(dd，2′-H)，2.42(t，3′-H)，3.44(t，4′-H)，3.27(dq，5′-H)，1.18(d，6′-H3)，2.56(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.65(dd，2″-Hax)，2.27(d，2″-Heq)，1.09(s，3″-CH3)，4.71(d，4″-H)，4.53(dq，5″-H)，1.07(d，6″-H3)，3.24(s，3″-OCH3)，2.28(dd，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，2.13(m，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，0.95(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例60制备化合物(59)[式(Ⅶ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为乙酰基，R4为丙酰基和R5为TBDMS基]的方法将1.0g化合物(42)粗品溶于30ml无水DMSO和3.0ml乙酸酐的混合溶液中后，使混合物于45℃反应5天。向其中加入400ml苯后，所得混合物顺序用400ml的净化水洗2次和用同样体积的饱和氯化钠溶液洗2次。用无水硫酸钠干燥有机层并过滤。减压浓缩滤液，并将1.1g这样得到的残留物通过硅胶柱色谱纯化(100g己烷/乙酸乙酯(2∶1))得到612mg化合物(59)。
化合物(59)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C54H97NO15SSi2(3)质谱(FDMS)m/z 1088(M H) (4)旋光率[α]21D-28°(C1.0，CHCl3)(5)在96-100℃熔化无确定熔点
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.66(dd，2-H)，4.13(br dd，3-H)，2.95(br s，4-H)，3.41(s，4-OCH3)，3.28(br d，5-H)，0.40(br dd，7-H)，1.51(m，8-H)，4.17(br dd，9-H)，5.94(m，10-H)，5.94(m，11-H)，6.30(br dd，12-H)，5.46(ddd，13-H)，4.64(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，1.44(br d，17-H)，1.63(dt，17-H)，4.52(br d，18-H)，0.91(d，19-H3)，4.25(d，1′-H)，5.05(dd，2′-H)，2.75(t，3′-H)，3.15(t，4′-H)，3.26(dq，5′-H)，1.24(d，6′-H3)，2.09(s，2′-OCOCH3)，2.42(s，3′-N(CH3)2)，4.83(d，1″-H)，1.70(dd，2″-Hax)，1.17(s，3″-CH3)，4.67(d，4″-H)，4.58(dq，5″-H)，1.05(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.64(s，3″-OCH2SCH3)，2.21(s，3″-OCH2SCH3)，2.41(dq，4″-OCOCH2CH3)，1.17(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例61制备化合物(60)[式(ⅩⅩⅪ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R4为丙酰基和R5为TBDMS基]的方法在60ml甲醇中溶解580mg化合物(59)并使混合物于40℃反应2天。减压浓缩反应混合物得到550mg化合物(60)。
化合物(60)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C52H95NO14SSi2(3)质谱(SIMS)m/z 1046(M H) (4)旋光率[α]21D-170°(C1.0，CH3OH)(5)在75-78℃熔化无确定熔点
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)4.02(br dd，3-H)，3.23(br s，4-H)，3.43(s，4-OCH3)，3.47(br d，5-H)，2.15(m，6-H)，0.41(br dd，7-H)，1.59(m，8-H)，4.18(br dd，9-H)，5.70(br dd，10-H)，6.08(m，11-H)，6.08(m，12-H)，5.60(dt，13-H)，2.27(m，14-H)，4.81(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，1.42(br d，17-H)，1.65(dt，17-H)，4.55(br d，18-H)，0.91(d，19-H3)，4.26(d，1′-H)，3.41(dd，2′-H)，3.23(t，4′-H)，3.23(dq，5′-H)，1.20(d，6′-H3)，2.53(s，3′-N(CH3)2)，4.87(d，1″-H)，1.70(dd，2″-Hax)，2.24(d，2″-Heq)，1.17(s，3″-CH3)，4.65(d，4″-H)，4.59(dq，5″-H)，1.05(d，6″-H3)，4.50(d，3″-OCH2SCH3)，4.63(d，3″-OCH2SCH3)，2.17(s，3″-OCH2SCH3)，2.40(dq，4″-OCOCH2CH3)，1.16(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例62制备化合物(61)[式(ⅩⅩⅫ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R4为丙酰基和R5为TBDMS基]的方法将550mg化合物(60)溶于12.5ml乙醇后。按实施例7同样的方式控制25.0mlRaney镍的活性并将它与12.5ml乙醇一起加到上述的混合物中。将所得混合物室温剧烈搅拌90分钟后，滤除不溶物并减压浓缩滤液。之后，这样得到的540mg残留物通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(300∶10∶1)]得到166mg化合物(61)。
化合物(61)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体
(2)分子式C51H93NO14Si2(3)质谱(SIMS)m/z 1000(M H) (4)旋光率[α]21D-4°(C1.0，CH3OH)(5)在68-70℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)4.04(br dd，3-H)，3.44(s，4-OCH3)，3.48(br d，5-H)，2.17(m，6-H)，0.42(br dd，7-H)，1.60(m，8-H)，4.19(br dd，9-H)，5.71(br dd，10-H)，6.10(m，11-H)，6.10(m，12-H)，5.62(dt，13-H)，2.30(m，14-H)，4.82(ddq，15-H)，1.30(d，16-H3)，1.43(br d，17-H)，1.67(dt，17-H)，4.57(br d，18-H)，0.92(d，19-H3)，4.30(d，1′-H)，3.38(dd，2′-H)，2.47(t，3′-H)，3.31(t，4′-H)，1.22(d，6′-H3)，2.54(s，3′-N(CH3)2)，4.90(d，1″-H)，1.64(dd，2″-Hax)，2.27(d，2″-Heq)，1.09(s，3″-CH3)，4.71(d，4″-H)，4.59(dq，5″-H)，1.07(d，6″-H3)，3.26(s，3″-OCH3)，2.42(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.43(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，1.16(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例63制备化合物(2)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子和R4为丙酰基](3″-O-甲基柱晶白霉素A7)的方法(2)向163mg化合物(61)中加入1.22ml2MTBAF/THF溶液并使所得混合物于45℃反应1小时。反应混合物冷至室温后，向其中滴加入4.0ml5%硫酸氢钾溶液并用40ml的氯仿萃取2次，合并氯仿层并顺序用80ml的饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用80ml的饱和氯化钠溶液洗涤2次。用无水硫酸钠干燥混合物并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的残留物通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(400∶20∶1)]从而得到50mg化合物(2)。
参考实施例2制备化合物(62)[式(ⅩⅩⅧ)所示化合物，其中R2TBDMS基，R3为TBDMS基，R4为丙酰基和R5为TBDMS基](日本专利申请NO.Hei-5-206731)的方法向1.00g柱晶白霉素A7中加12ml无水DMF使之溶解并加入1.18g TBDMSCl和1.08g咪唑，随后于50℃搅拌24小时。反应混合物冷至室温后，向其中加入50ml甲醇，所得混合物室温搅拌30分钟并随后减压浓缩。这样得到的残留物用500ml的苯萃取并顺序用500ml的饱和碳酸氢钠溶液洗涤苯层2次和用500ml的饱和氯化钠溶液洗涤2次。用无水硫酸钠干燥有机层并过滤，减压浓缩滤液得到1.22g化合物(62)。
参考实施例3制备化合物(63)[式(ⅩⅩⅨ)所示化合物，其中R2、R3和R5各自为TBDMS基，](日本专利申请NO.Hei-5-206731)的方法向1.16g化合物(62)粗品中加130ml苯使之溶解并向其中加入65ml25%氢氧化钠水溶液和358mg四-正丁基硫酸氢铵随后室温搅拌2小时。分离苯层，顺序用150ml的饱和氯化钠溶液洗2次。用无水硫酸钠干燥并过滤，减压浓缩滤液并将这样得到残留物通过硅胶柱色谱法纯化(200g氯仿/甲醇(30∶1))得到795ml化合物(63)。
实施例64制备化合物(64)[式(ⅩⅩⅩ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为TBDMS基，R4为异戊酰基和R5为TBDMS基]的方法向430mg化合物(63)中加4.3ml无水吡啶使之溶解并向其中加入248mg异戊酰氯，随后室温搅拌10分钟。向其中加入50ml饱合碳酸氢钠溶液并用50ml的氯仿萃取2次。氯仿层用50ml的饱和氯化钠溶液洗2次。用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并干燥，然后，这样得到650mg残留物通过制备TLC纯化[展开系统己烷/乙酸乙酯(2∶1)]从而得到326mg化合物(64)。
化合物(64)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C58H109NO14Si3(3)质谱(SIMS)m/z 1128(M H) (4)旋光率[α]14D-17°(C1.0，CH3OH)(5)在78-81℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.38(dd，2-H)，2.61(dd，2-H)，4.22(m，3-H)，3.14(br s，4-H)，3.38(s，4-OCH3)，3.42(br dd，5-H)，0.41(br dd，7-H)，1.70(m，8-H)，4.23(m，9-H)，5.74(br dd，10-H)，6.11(m，11-H)，6.11(m，12-H)，5.62(dt，13-H)，2.45(m，14-H)，4.84(ddq，15-H)，1.30(d，16-H3)，1.38(dt，17-H)，1.65(br d，17-H)，4.63(br dd，18-H)，0.93(d，19-H3)，4.20(d，1′-H)，3.53(dd，2′-H)，2.55(t，3′-H)，3.34(t，4′-H)，3.30(dq，5′-H)，1.25(d，6′-H3)，2.53(s，3′-N(CH3)2)，5.10(d，1″-H)，1.85(dd，2″-Hax)，2.00(d，2″-Heq)，1.10(s，3″-CH3)，4.62(d，4″-H)，4.37(dq，5″-H)，1.14(d，6″-H3)，2.29(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，2.13(m，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，0.97(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例65制备化合物(65)[式(Ⅶ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R3为TBDMS基，R4为异戊酰基和R5为TBDMS基]的方法将326mg化合物(64)溶于9.8ml无水DMSO和0.98ml乙酸酐的混合溶液中后，使混合物于45℃反应5天。向其中加入100ml苯，所得混合物顺序用100ml的净化水洗2次和用同样体积的饱和氯化钠溶液洗2次。有机层用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并将这样得到的残留物通过制备TLC纯化(展开系统己烷/乙酸乙酯(4∶1))得到95mg化合物(65)。
化合物(65)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C60H113NO14SSi3(3)质谱(SIMS)m/z 1188(M H) (4)旋光率[α]14D-22°(C1.0，CH3OH)(5)在90-92℃熔化无确定熔点
(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.42(dd，2-H)，2.60(dd，2-H)，4.19(m，3-H)，3.14(br s，4-H)，3.40(s，4-OCH3)，0.38(br dd，7-H)，1.66(m，8-H)，4.21(m，9-H)，5.74(dd，10-H)，6.11(m，11-H)，6.11(m，12-H)，5.61(dt，13-H)，4.80(ddq，15-H)，1.31(d，16-H3)，1.41(dt，17-H)，1.62(br d，17-H)，4.60(br dd，18-H)，0.92(d，19-H3)，4.17(d，1′-H)，2.48(t，3′-H)，1.22(d，6′-H3)，2.50(s，3′-N(CH3)2)，4.98(d，1″-H)，1.74(dd，2″-Hax)，2.25(d，2″-Heq)，1.20(s，3″-CH3)，4.71(d，4″-H)，4.55(dq，5″-H)，1.08(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.65(d，3″-OCH2SCH3)，2.18(s，3″-OCH2SCH3)，2.27(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，2.13(m，4″-OCOCH2CH(CH3)2)，0.97(d，4″-OCOCH2CH(CH3)2).
实施例66制备化合物(57)[式(ⅩⅩⅫ)所示化合物，其中R2为TBDMS基，R4为异戊酰基和R5为TBDMS基]的方法(2)将160mg化合物(65)溶于3.4ml乙醇后。按实施例7同样的方式控制10mlRaney镍的活性并将它与3.4ml乙醇一起加到上述的混合物中。将所得混合物室温剧烈搅拌30分钟后，滤除不溶物并减压浓缩滤液。然后，将150mg这样得到的残留物溶于5.7ml氯仿中并加入26mg间氯过苯甲酸随后室温搅拌5分钟。将反应混合物滴加入30ml10%硫代硫酸钠溶液中并用60ml氯仿萃取。氯仿层顺序用60ml的饱和碳酸氢钠溶液洗2次和用60ml的饱和氯化钠溶液洗2次，用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液，并将这样得到的残留物通过制备TLC使之静置3天。然后，通过展开进行纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(300∶10∶1)]得到41mg化合物(57)。
参考实施例4制备化合物(66)[式(ⅩⅩⅦ)所示化合物，其中R2为乙酰基，R3为乙酰基和R4为丙酰基](Pharmazie 39(6)，414，JP-B-53-30718)的方法向5.0mg柱晶白霉素A7中加100ml无水吡啶使之溶解并向其中加入2.7g乙酸酐随后室温搅拌2天。缓慢加入500ml饱和碳酸氢钠溶液后，将混合物室温搅拌30分钟并用500ml的二氯甲烷萃取2次。有机层用500ml的饱和氯化钠溶液洗2次，用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并将这样得到的残留物通过硅胶柱色谱法纯化[300g己烷/乙酸乙酯(1∶3)]，从而得到3.3g化合物(66)。
实施例67制备化合物(67)[式(ⅩⅩⅧ)所示化合物，其中R2乙酰基R3为乙酰基，R4为丙酰基和R5为TBDMS基]将3.05g化合物(66)溶到30ml无水DMF中并加入1.10g TBDMSCl和989mg咪唑，随后于45℃搅拌24小时。使所得混合物冷至室温，并减压浓缩。向所得残留物中加300ml二氯甲烷使之溶解并进一步加入，300ml的饱和碳酸氢钠溶液随后室温搅拌30分钟。分离有机层，用300ml的饱和氯化钠溶液洗涤2次。用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并将这样得到残留物通过硅胶柱色谱法纯化(300g己烷/乙酸乙酯(2∶1))得到1.85g化合物(67)。
化合物(67)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C48H81NO16Si(3)质谱(FDMS)m/z 955(M) (4)旋光率[α]17D-35°(C1.0，CHCl3)(5)在100-102℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.60(dd，2-H)，3.99(br dd，3-H)，3.04(br d，4-H)，3.40(s，4-OCH3)，3.32(br d，5-H)，0.55(br dd，7-H)，2.18(m，7-H)，1.74(m，8-H)，5.35(br d，9-H)，2.14(s，9-OCOCH3)，5.70(dd，10-H)，6.16(br dd，11-H)，6.04(br dd，12-H)，5.56(dt，13-H)，4.77(ddq，15-H)，1.28(d，16-H3)，1.54(m，17-H)，4.54(br d，18-H)，0.92(d，19-H3)，4.37(d，1′-H)，5.06(dd，2′-H)，2.74(t，3′-H)，3.32(t，4′-H)，3.32(dq，5′-H)，1.29(d，6′-H3)，2.08(s，2′-OCOCH3)，2.41(s，3′-N(CH3)2)，5.08(d，1″-H)，1.84(dd，2″-Hax)，1.99(d，2″-Heq)，1.10(s，3″-CH3)，4.61(d，4″-H)，4.41(dq，5″-H)，1.12(d，6″-H3)，1.16(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例68制备化合物(68)[式(Ⅶ)所示化合物，其中R2为乙酰基R3为乙酰基，R4为丙酰基和R5为TBDMS基]的方法将1.80g化合物(67)溶于54ml无水DMSO和5.4ml乙酸酐的混合溶液中后，使混合物45℃反应3天。向其中加入300ml苯，所得混合物顺序用300ml的净化水洗2次和用同样体积的饱和氯化钠溶液洗2次。有机层用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并将这样得到的残留物通过硅胶柱色谱纯化(180g己烷/乙酸乙酯(2∶1))得到440mg化合物(68)。
化合物(68)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C50H85NO16SSi(3)质谱(FDMS)m/z 1015(M) (4)旋光率[α]17D-44°(C1.0，CHCl3)(5)在77-81℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.61(dd，2-H)，4.02(br dd，3-H)，3.04(br d，4-H)，3.42(s，4-OCH3)，3.39(br d，5-H)，0.55(br dd，7-H)，1.74(m，8-H)，5.35(br d，9-H)，2.13(s，9-OCOCH3)，5.72(dd，10-H)，6.18(dd，11-H)，6.03(br dd，12-H)，5.56(dt，13-H)，4.75(ddq，15-H)，1.28(d，16-H3)，4.55(br d，18-H)，0.91(d，19-H3)，4.35(d，1′-H)，5.02(dd，2′-H)，2.75(t，3′-H)，3.20(t，4′-H)，3.27(dq，5′-H)，1.25(d，6′-H3)，2.07(s，2′-OCOCH3)，2.42(s，3′-N(CH3)2)，4.84(d，1″-H)，1.69(dd，2″-Hax)，2.24(d，2″-Heq)，1.16(s，3″-CH3)，4.67(d，4″-H)，4.59(dq，5″-H)，1.04(d，6″-H3)，4.52(d，3″-OCH2SCH3)，4.63(d，3″-OCH2SCH3)，2.20(s，3″-OCH2SCH3)，1.16(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例69制备化合物(69)[式(ⅩⅩⅪ)所示化合物，其中R2为乙酰基R4为丙酰基和R5为TBDMS基]的方法
在42ml甲醇中溶解420mg化合物(68)并使混合物于40℃反应2天。减压浓缩反应混合物得到400mg化合物(69)。
化合物(69)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C48H83NO15SSi(3)质谱(FDMS)m/z 973(M) (4)旋光率[α]17D-21°(C1.0，CH3OH)(5)在75-78℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.67(dd，2-H)，3.99(br dd，3-H)，3.28(br s，4-H)，3.47(s，4-OCH3)，3.59(br d，5-H)，0.67(br dd，7-H)，1.86(m，8-H)，5.40(br d，9-H)，2.13(s，9-OCOCH3)，5.61(dd，10-H)，6.06(m，11-H)，6.06(m，12-H)，5.67(dt，13-H)，4.87(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，1.40(br dt，17-H)，1.79(br dd，17-H)，4.58(br d，18-H)，0.93(d，19-H3)，4.32(d，1′-H)，3.39(dd，2′-H)，2.48(t，3′-H)，3.37(t，4′-H)，3.27(dq，5′-H)，1.23(d，6′-H3)，2.55(s，3′-N(CH3)2)，4.91(d，1″-H)，1.72(dd，2″-Hax)，2.26(d，2″-Heq)，1.18(s，3″-CH3)，4.66(d，4″-H)，4.59(dq，5″-H)，1.06(d，6″-H3)，4.51(d，3″-OCH2SCH3)，4.64(d，3″-OCH2SCH3)，2.17(s，3″-OCH2SCH3)，1.17(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例70制备化合物(70)[式(ⅩⅩⅫ)所示化合物，其中R2为乙酰基，R4为丙酰基和R5为TBDMS基]的方法将400mg化合物(69)溶于10ml乙醇后。按实施例7同样的方式控制10mlRaney镍的活性并将它与10ml乙醇一起加到上述的混合物中。所得混合物室温剧烈搅拌45分钟后，滤除不溶物并减压浓缩滤液。然后，这样得到的360mg残留物通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(300∶10∶1)]得到150mg化合物(70)。
化合物(70)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体(2)分子式C47H81NO15Si(3)质谱(FDMS)m/z 927(M) (4)旋光率[α]17D-14°(C1.0，CH3OH)(5)在80-83℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.66(dd，2-H)，4.00(br dd，3-H)，3.28(br d，4-H)，3.47(s，4-OCH3)，3.58(br d，5-H)，0.67(br dd，7-H)，1.85(m，8-H)，5.39(br d，9-H)，2.12(s，9-OCOCH3)，5.61(dd，10-H)，6.06(m，11-H)，6.06(m，12-H)，5.67(dt，13-H)，4.86(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，1.39(br dt，17-H)，1.78(br dd，17-H)，4.58(br d，18-H)，0.92(d，19-H3)，4.35(d，1′-H)，3.35(dd，2′-H)，3.42(t，4′-H)，1.24(d，6′-H3)，2.55(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.64(dd，2″-Hax)，2.27(d，2″-Heq)，1.08(s，3″-CH3)，4.70(d，4″-H)，4.60(dq，5″-H)，1.05(d，6″-H3)，3.25(s，3″-OCH3)，2.41(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.42(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，1.15(t，4″-OCOCH2CH3).
实施例71制备化合物(6)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为乙酰基，R3为氢原子和R4为丙酰基](9-O-乙酰基-3″-O-甲基柱晶白霉素A7)的方法(2)向127mg化合物(70)中加入685μl2MTBAF/THF溶液并使所得混合物于45℃反应35分钟。反应混合物冷至室温后，向其中滴加入3.0ml5%硫酸氢钾溶液并用30ml的氯仿萃取2次，合并氯仿层并顺序用50ml的饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用50ml的饱和氯化钠溶液洗涤2次。混合物用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并将这样得到的残留物通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(400∶20∶1)]从而得到68mg化合物(6)。
实施例72制备化合物(71)[式(Ⅰ)所示化合物，其中R1为氢原子，R2为丙酰基，R3为氢原子和R4为丙酰基](3″-O-甲基-9-O-丙酰基柱晶白霉素A7)的方法向15mg化合物(2)中加1.3ml甲苯使之溶解并向其中加入14μl无水吡啶和14μl丙酰氯随后室温搅拌1小时。向其中加入20ml饱和碳酸氢钠溶液并用20ml氯仿萃取2次。氯仿层用40ml的饱和氯化钠溶液洗2次。用无水硫酸钠干燥并过滤。减压浓缩滤液并将这样得到的残留物通过制备TLC纯化[展开系统氯仿/甲醇/浓氨水(400∶20∶1)]从而得到15mg化合物(71)。
化合物(71)的物理化学性质(1)颜色和外观无色固体
(2)分子式C42H69NO15(3)质谱(EIMS)m/z 827(M) (4)旋光率[α]18D-50°(C1.0，CH3OH)(5)在128-132℃熔化无确定熔点(6)1H NMR谱 (400 MHz，CDCl3)δ(ppm)2.20(d，2-H)，2.69(dd，2-H)，3.77(br d，3-H)，3.07(br d，4-H)，3.52(s，4-OCH3)，4.12(br d，5-H)，0.96(br ddd，7-H)，1.61(br dt，7-H)，1.98(m，8-H)，5.16(dd，9-H)，2.26(q，9-OCOCH2CH3)，1.09(t，9-OCOCH2CH3)，5.59(dd，10-H)，6.38(dd，11-H)，6.02(br dd，12-H)，5.63(ddd，13-H)，2.11(dt，14-H)，2.49(br dt，14-H)，5.27(ddq，15-H)，1.29(d，16-H3)，2.81(br dd，17-H)，9.78(br s，18-H)，0.96(d，19-H3)，4.55(d，1′-H)，3.19(dd，2′-H)，3.43(t，4′-H)，3.26(dq，5′-H)，1.18(d，6′-H3)，2.56(s，3′-N(CH3)2)，4.92(d，1″-H)，1.65(dd，2″-Hax)，2.28(d，2″-Heq)，1.09(s，3″-CH3)，4.70(d，4″-H)，4.52(dq，5″-H)，1.06(d，6″-H3)，3.24(s，3″-OCH3)，2.41(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，2.42(明显的 q，4″-OCOCH2CH3)，1.16(t，4″-OCOCH2CH3).
这里详细叙述了有关本发明的特定内容，其可在不脱离其实质内容和范围情况下进行各种变化和变型对本领域熟练技术人员来说是显而易见的。
权利要求
1.一种如式(Ⅰ)所示的化合物或其药学上可接受的盐 其中R1表示氢原子或保护羟基的取代基；R2表示氢原子或保护羟基的取代基；R3表示氢原子或具有2到4个碳原子的直链脂族酰基；而R4表示氢原子或具有1到10个碳原子的直链脂族或芳族酰基。
2.根据权利要求1的化合物，其中保护羟基的取代基为具有2到4个碳原子的脂族酰基。
3.根据权利要求1的化合物，其中R3表示氢原子或具有2到3个碳原子的直链脂族酰基。
4.根据权利要求1的化合物，其中R4表示氢原子或具有2到7个碳原子的直链脂族或芳族酰基。
5.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子、乙酰基、丙酰基或1-乙氧乙基，R2为氢原子、乙酰基、丙酰基、丁酰基或1-乙氧乙基，R3为氢原子、乙酰基或丙酰基而R4为氢原子、乙酰基、丙酰基、正丁酰基、异丁酰基、正戊酰基、异戊酰基或苯甲酰基。
6.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为丙酰基，R2为氢原子，R3为氢原子而R4为丙酰基。
7.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子而R4为丙酰基。
8.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为丙酰基，R2为氢原子，R3为氢原子而R4为氢原子。
9.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子而R4为氢原子。
10.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为丙酰基，R2为乙酰基，R3为氢原子，R4为丙酰基。
11.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为乙酰基，R3为氢原子，R4为丙酰基。
12.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为乙酰基，R2为乙酰基，R3为氢原子，R4为异戊酰基。
13.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为丙酰基，R2为1-乙氧乙基，R3为氢原子而R4为丙酰基。
14.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为乙酰基，R2为1-乙氧乙基，R3为氢原子而R4为异戊酰基。
15.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为乙酰基，R2为氢原子，R3为氢原子，R4为异戊酰基。
16.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为乙酰基，R2为丙酰基，R3为氢原子，R4为异戊酰基。
17.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为丙酰基，R2为丙酰基，R3为氢原子，R4为丙酰基。
18.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子，R4为正丁酰基。
19.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为乙酰基，R3为氢原子，R4为正丁酰基。
20.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为丙酰基，R3为氢原子，R4为正丁酰基。
21.根据权利要求1的化合物或其异构体或其药学上可接受的盐，其中R1为1-乙氧乙基，R2为乙酰基，R3为氢原子，R4为正丁酰基。
22.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子，R4为正戊酰基。
23.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子，R4为异丁酰基。
24.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为氢原子，R3为氢原子，R4为异戊酰基。
25.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中R1为氢原子，R2为丙酰基，R3为氢原子，R4为丙酰基。
26.一种由式(Ⅱ)所示的化合物或其盐 其中R1表示具有2到4个碳原子的直链脂族酰基，R4表示具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基;制备式(Ⅲ)所示的化合物或其盐的方法 其中R1表示具有2到4个碳原子的直链脂族酰基，R2表示氢原子或保护羟基的取代基，R4表示具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基。
27.根据权利要求26的方法，其中包括步骤(1)保护式(Ⅱ)化合物内酯环9-位羟基;(2)乙酰化2′-位羟基;(3)甲硫甲基化3″-位羟基;(4)将2′-位乙酰基去保护;(5)将3″-位甲硫甲基还原成甲氧基。
28.一种16-元大环内酯衍生物的化学合成方法，其中内酯环上9-位羟基被选自1-乙氧乙基、四氢呋喃基和四氢吡喃基的具有不对称碳的缩醛基取代基保护。
29.一种由式(Ⅳ)所示的天然存在的16-元大环内酯抗菌素或其盐 其中R4表示具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基;经式(Ⅴ)所示的化合物或其盐 其中R1表示保护羟基的取代基;R2表示保护羟基的取代基;R3表示氢原子或保护羟基的取代基;R4表示具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基;制备式(Ⅵ)化合物或其盐的方法 其中R1表示氢原子或保护羟基的取代基;R2表示氢原子或保护羟基的取代基;R4表示具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基;
30.根据权利要求29的方法，其中包括步骤(1)将式(Ⅳ)化合物2′-位羟基乙酰化;(2)用保护基保护3-和9-位羟基;(3)甲硫甲基化3″-位羟基得到式(Ⅴ)化合物;(4)将2′-位乙酰基去保护;(5)将3″-位甲硫甲基还原成甲氧基;(6)将3-和9-位保护基去保护。
31.一种化学合成16-元大环内酯衍生物的方法，其中将柱晶白霉素衍生物内酯环3-位羟基用选自1-乙氧乙基、四氢呋喃基和四氢吡喃基的具有不对称碳的缩醛基取代基保护。
32.一种由式(Ⅳ)所示的天然存在的16-元大环内酯抗菌素或其盐 其中R4表示具有2到5个碳原子的直链或支链脂族酰基;经式(Ⅶ)所示的化合物或其盐 其中R2表示选自甲硅烷基保护基和缩醛基保护基的羟基保护基;R3表示乙酰基或甲硅烷基保护基;R4表示具有1到10个碳原子的直链或支链脂族或芳基酰基;R5表示甲硅烷基保护基;制备式(Ⅷ)所示的化合物或其盐的方法 其中R2表示氢原子或修饰羟基的取代基，R4表示具有1到10个碳原子的直链或支链脂族或芳族酰基;
33.根据权利要求32的方法，包括步骤(1)将式(Ⅳ)化合物2′-位羟基乙酰化;(2)将在3-和18-位形成的半缩醛羟基和9-位羟基甲硅烷基化;(3)除去4″-位酰基;(4)将4″-位羟基酰化;(5)将3″-位羟基甲硫甲基化得到式(Ⅶ)化合物;(6)将2′-位乙酰基去保护;(7)将3″-位甲硫甲基还原成甲氧基;(8)将引入到3-位和18-位上形成的羟基和9-位羟基上的甲硅烷基去保护。
34.一种抗菌组合物，包括式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐 其中R1表示氢原子或保护羟基的取代基;R2表示氢原子或保护羟基的取代基，R3表示氢原子或具有2到4个碳原子的直链脂族酰基;R4表示氢原子或具有1到10个碳原子的直链脂族或芳族酰基;
全文摘要
本发明公开了式(I)所示的16-元大环内酯衍生物或其药学上可接受的盐其中R
文档编号C07H17/08GK1106818SQ9411598
公开日1995年8月16日 申请日期1994年7月8日 优先权日1993年7月8日
发明者味户庆一, 原修, 栗原健一, 菊地伸江, 荒明美奈子, 清水明, 小此木恒夫, 井上重治, 柴原圣至 申请人:明治制菓株式会社