专利名称：3β－琥珀酰基－18－去氢乌索酸二钠盐的制备方法
技术领域：
本发明属于一种五环三萜类化合物3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备方法。
对3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐进行药学、药效、毒理、临床疗效评定的一系列研究，实验研究已证明其对ADP或肾上腺素诱发的血小板聚集有一定的抑制作用，对血液有一定抗凝作用及较好的抗菌作用，体内体外给药，对多种动物(人、兔、鼠)均有抑制血小板聚集和抑制5-HT释放反应的作用；还能降低病人的血清胆固醇，对血清胆固醇及甘油三酯增高者，作用更为明显。药效学实验提示具有抗血栓，改善血液高粘、高聚、高凝状态及具有一定的抗炎作用。(见文献“毛冬青化学成分、药理作用及临床应用研究进展”广东药学2001年11卷1期4-6页和“毛冬青的化学成分、药理作用研究进展”中药材2002年25卷5期371～374页)因此，3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备受到人们的重视。
目前未见有报道从18-去氢乌索酸制备3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的方法，在广东药学2001年11卷1期第4～6页中仅提到了从毛冬青根中提取纯化后的18-去氢乌索酸(18-dehydroursolic acid)经琥珀酰化所得的五环三萜类化合物，其结构为3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐，但未叙述其制备方法。
产品的含量可达95％以上，含量测定方法采用分光光度法或高效液相法，可参照文献“高效液相色谱法测定人血浆中毛冬青甲素”广州中医学院学报1987；(4)45-47中所叙述的方法。产品的旋光度(α)D25 217.8C。
18-去氢乌索酸可以是用化学合成法得到，也可以从植物提取得到，由于18-去氢乌索酸的结构较复杂，合成工艺复杂，难于工业化生产，故本发明是采用中国专利申请号为03119751.5所述的制备方法，由冬青科(Aquifoliaccae)冬青属毛冬青(Ilex Pubescens Hook.et Arn.)植物用水提取后纯化得到。
琥珀酰化反应的反应时间与反应温度有关，反应温度低，相应的反应时间长，但反应温度超过202℃副产物多，产品的纯度差，反应温度低于80℃，反应难以进行，如果在投料时加入适量的浓硫酸作催化剂，则在常压下，80-150℃搅拌下反应5-8小时即可。
琥珀酰化反应是在碱性有机溶剂为介质中进行，碱性有机溶剂可以采用吡啶、N-甲基-2-吡咯烷酮、甲基吡啶和二甲基吡啶等，以采用吡啶为佳；第二步的成盐反应是在1～4碳的脂肪醇或乙酸乙酯等酯性溶剂中进行，以采用乙醇或乙酸乙酯为佳，所得的3β-琥珀酰基-18去氢乌索酸二钠盐粗品重结晶可用乙醇、水、丙醇等亲水性溶剂，以乙醇和/或水为佳，以用水的成本为低，但由于在水中的溶解度较大，收率较低，尤以60～95％的乙醇溶液更佳。
本发明的合成工艺简单，不需要特殊的设备，产品分离纯化方便，生产成本低，适合于工业化生产。
下面结合实施例详细叙述本发明的技术方案。
具体实施例方式实施例1、取100公斤的毛冬青的根/茎切成小块，置于提取锅中，每次用95％的乙醇400立升热回流，共提取3次，合并滤液，浓缩到250立升，加入10立升的浓硫酸，回流水解3小时，冷后过滤，固体物用水洗涤至中性，近白色，得粗品。粗品用乙醇加活性炭重结晶，得白色的18-去氢乌索酸206克，含量达97％，熔点为287～289℃，将18-去氢-乌索酸投于三口烧瓶中，加吡啶1000ml，95℃加热溶解，加入琥珀酸酐120g，加入10ml浓硫酸，反应6小时后，加稀盐酸后析出沉淀，过滤，用水洗到近无吡啶味，固体溶解在乙醇中，搅拌加入50％的NaoH溶液，至酚酞试纸现红色，放在低温处待析晶完全，过滤，将粗品加活性炭用乙醇重结晶，过滤，干燥后得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐225g，其含量为98％，总收率为83.71％，以18-去氢乌索酸计。
含量测定方法采用高效液相法。
实施例2、同实施例1的方法提取18-去氢乌索酸，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，加吡啶100ml，90℃加热溶解，加入琥珀酸酐24g，加入1ml浓硫酸，继续加热搅拌进行反应，8小时后反应完全，加稀盐酸析出沉淀，过滤，用水洗涤，固体溶解在乙醇中，搅拌下加30％的NaoH溶液，待反应完全，置低温处待析晶完全，过滤，用75％的乙醇重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐21.5g，其含量为98％，收率为81.22％。
实施例3、称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸于三口瓶，加吡啶100ml，置油浴中加热溶解，加入琥珀酸酐36g，继续加热到115℃下进行反应，反应10小时后，加稀酸过滤后用水洗到中性，固体溶解在乙酸乙酯中，搅拌加入10％的NaoH溶液，待反应完，置低温处析晶，过滤，用水重结晶，置4℃以下过夜析晶。固体经抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐18.5g，其含量大于98.5％，收率为70.25％。
实施例4、同实施例1的方法，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，加吡啶100ml加热溶解，加入琥珀酸酐24g，加热回流10小时后反应完全，加稀酸过滤，用水洗涤，过滤，固体溶解在95％乙醇中，搅拌下加50％的NaoH溶液，待反应结束，置低温处析晶，过滤，95％乙醇重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐22g，其含量大于97％，收率为82.26％。
实施例5、同实施例1的方法，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，加二甲基吡啶100ml加热溶解，加入琥珀酸酐24g，加热回流12小时后反应完全，加稀酸析出沉淀，过滤，用水洗涤，固体溶解在95％乙醇中，搅拌下加50％的NaoH溶液，待反应完全，置低温处析晶，过滤，用95％乙醇重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐21g，其含量大于97％，收率为78.52％。
实施例6、
同实施例1的方法，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，用N-甲基-2-吡咯烷酮溶解，加入琥珀酸酐24g，继续加热在202℃下搅拌进行反应，5小时后反应完全，加稀酸析出沉淀，过滤，用水洗涤，同体溶解在无水乙醇中，搅拌下加30％的NaoH溶液，待反应完全，置低温处待析晶完全，过滤，重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐17.5g，其含量大于96％，收率为64.76％。
实施例7同实施例1的方法，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，加甲基吡啶100ml在125℃加热溶解，加入琥珀酸酐24g，继续加热搅拌进行反应，8小时后反应完全，加稀酸过滤，用水洗涤，固体溶解在95％乙醇中，搅拌下加40％的NaoH溶液，待反应完全，置低温处待析晶完全，过滤，重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18去氢乌索酸二钠盐20.5g，其含量大于98％，收率为77.45％。
权利要求
1.一种3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备方法，是由18-去氢乌索酸为原料经琥珀酰化制得，其特征在于制备过程分二步反应进行，第一步是酰化反应，用18-去氢乌索酸和琥珀酸酐为原料，投料重量比为2∶0.5～3，反应介质为碱性有机溶剂，在常压80-202℃搅拌下反应5-12小时，反应后加稀盐酸、滤过、水洗涤得固体物；第二步是成盐反应，将固体物溶解在1～4碳的脂肪醇或乙酸乙酯等酯性溶剂中，加5-50％的氢氧化钠水溶液至酚酞试纸呈红色，滤取粗品，粗品重结晶干燥得3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的精品。
2.根据权利要求1所述的3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备方法，其特征在于第一步酰化反应投料时加入浓硫酸作催化剂，在常压，80-150℃搅拌下反应5-8小时。
3.根据权利要求1和2所述的3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备方法，其特征在于第一步酰化反应所述的反应介质碱性有机溶剂为吡啶，第二步成盐反应所用的溶剂为乙酸乙酯或乙醇，重结晶用的溶剂为乙醇和/或水。
全文摘要
本发明所述的一种3β－琥珀酰基－18－去氢乌索酸二钠盐的制备方法，属于一种五环三萜类化合物的制备方法，其方法是用18－去氢乌索酸、琥珀酸酐为原料，碱性有机溶剂为反应介质，在常压80－202℃下，反应5－12小时，反应后加稀酸，滤过，水洗去吡啶，将反应物溶解在1～4碳的脂肪醇或乙酸乙酯中，加5－50％的氢氧化钠溶液成盐，抽滤，重结晶，干燥得3β－琥珀酰基－18－去氢乌索酸二钠盐，含量大于95.0％。本发明合成工艺简单，不需要特殊的设备，产品分离纯化方便，生产成本低，适合于工业化生产。
文档编号C07J63/00GK1446819SQ03113998
公开日2003年10月8日 申请日期2003年3月27日 优先权日2003年3月27日
发明者李漓, 钟鸣, 张素中 申请人:广州汉方现代中药研究开发有限公司
技术领域：
本发明属于一种五环三萜类化合物3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备方法。
对3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐进行药学、药效、毒理、临床疗效评定的一系列研究，实验研究已证明其对ADP或肾上腺素诱发的血小板聚集有一定的抑制作用，对血液有一定抗凝作用及较好的抗菌作用，体内体外给药，对多种动物(人、兔、鼠)均有抑制血小板聚集和抑制5-HT释放反应的作用；还能降低病人的血清胆固醇，对血清胆固醇及甘油三酯增高者，作用更为明显。药效学实验提示具有抗血栓，改善血液高粘、高聚、高凝状态及具有一定的抗炎作用。(见文献“毛冬青化学成分、药理作用及临床应用研究进展”广东药学2001年11卷1期4-6页和“毛冬青的化学成分、药理作用研究进展”中药材2002年25卷5期371～374页)因此，3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备受到人们的重视。
目前未见有报道从18-去氢乌索酸制备3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的方法，在广东药学2001年11卷1期第4～6页中仅提到了从毛冬青根中提取纯化后的18-去氢乌索酸(18-dehydroursolic acid)经琥珀酰化所得的五环三萜类化合物，其结构为3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐，但未叙述其制备方法。
产品的含量可达95％以上，含量测定方法采用分光光度法或高效液相法，可参照文献“高效液相色谱法测定人血浆中毛冬青甲素”广州中医学院学报1987；(4)45-47中所叙述的方法。产品的旋光度(α)D25 217.8C。
18-去氢乌索酸可以是用化学合成法得到，也可以从植物提取得到，由于18-去氢乌索酸的结构较复杂，合成工艺复杂，难于工业化生产，故本发明是采用中国专利申请号为03119751.5所述的制备方法，由冬青科(Aquifoliaccae)冬青属毛冬青(Ilex Pubescens Hook.et Arn.)植物用水提取后纯化得到。
琥珀酰化反应的反应时间与反应温度有关，反应温度低，相应的反应时间长，但反应温度超过202℃副产物多，产品的纯度差，反应温度低于80℃，反应难以进行，如果在投料时加入适量的浓硫酸作催化剂，则在常压下，80-150℃搅拌下反应5-8小时即可。
琥珀酰化反应是在碱性有机溶剂为介质中进行，碱性有机溶剂可以采用吡啶、N-甲基-2-吡咯烷酮、甲基吡啶和二甲基吡啶等，以采用吡啶为佳；第二步的成盐反应是在1～4碳的脂肪醇或乙酸乙酯等酯性溶剂中进行，以采用乙醇或乙酸乙酯为佳，所得的3β-琥珀酰基-18去氢乌索酸二钠盐粗品重结晶可用乙醇、水、丙醇等亲水性溶剂，以乙醇和/或水为佳，以用水的成本为低，但由于在水中的溶解度较大，收率较低，尤以60～95％的乙醇溶液更佳。
本发明的合成工艺简单，不需要特殊的设备，产品分离纯化方便，生产成本低，适合于工业化生产。
下面结合实施例详细叙述本发明的技术方案。
具体实施例方式实施例1、取100公斤的毛冬青的根/茎切成小块，置于提取锅中，每次用95％的乙醇400立升热回流，共提取3次，合并滤液，浓缩到250立升，加入10立升的浓硫酸，回流水解3小时，冷后过滤，固体物用水洗涤至中性，近白色，得粗品。粗品用乙醇加活性炭重结晶，得白色的18-去氢乌索酸206克，含量达97％，熔点为287～289℃，将18-去氢-乌索酸投于三口烧瓶中，加吡啶1000ml，95℃加热溶解，加入琥珀酸酐120g，加入10ml浓硫酸，反应6小时后，加稀盐酸后析出沉淀，过滤，用水洗到近无吡啶味，固体溶解在乙醇中，搅拌加入50％的NaoH溶液，至酚酞试纸现红色，放在低温处待析晶完全，过滤，将粗品加活性炭用乙醇重结晶，过滤，干燥后得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐225g，其含量为98％，总收率为83.71％，以18-去氢乌索酸计。
含量测定方法采用高效液相法。
实施例2、同实施例1的方法提取18-去氢乌索酸，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，加吡啶100ml，90℃加热溶解，加入琥珀酸酐24g，加入1ml浓硫酸，继续加热搅拌进行反应，8小时后反应完全，加稀盐酸析出沉淀，过滤，用水洗涤，固体溶解在乙醇中，搅拌下加30％的NaoH溶液，待反应完全，置低温处待析晶完全，过滤，用75％的乙醇重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐21.5g，其含量为98％，收率为81.22％。
实施例3、称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸于三口瓶，加吡啶100ml，置油浴中加热溶解，加入琥珀酸酐36g，继续加热到115℃下进行反应，反应10小时后，加稀酸过滤后用水洗到中性，固体溶解在乙酸乙酯中，搅拌加入10％的NaoH溶液，待反应完，置低温处析晶，过滤，用水重结晶，置4℃以下过夜析晶。固体经抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐18.5g，其含量大于98.5％，收率为70.25％。
实施例4、同实施例1的方法，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，加吡啶100ml加热溶解，加入琥珀酸酐24g，加热回流10小时后反应完全，加稀酸过滤，用水洗涤，过滤，固体溶解在95％乙醇中，搅拌下加50％的NaoH溶液，待反应结束，置低温处析晶，过滤，95％乙醇重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐22g，其含量大于97％，收率为82.26％。
实施例5、同实施例1的方法，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，加二甲基吡啶100ml加热溶解，加入琥珀酸酐24g，加热回流12小时后反应完全，加稀酸析出沉淀，过滤，用水洗涤，固体溶解在95％乙醇中，搅拌下加50％的NaoH溶液，待反应完全，置低温处析晶，过滤，用95％乙醇重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐21g，其含量大于97％，收率为78.52％。
实施例6、
同实施例1的方法，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，用N-甲基-2-吡咯烷酮溶解，加入琥珀酸酐24g，继续加热在202℃下搅拌进行反应，5小时后反应完全，加稀酸析出沉淀，过滤，用水洗涤，同体溶解在无水乙醇中，搅拌下加30％的NaoH溶液，待反应完全，置低温处待析晶完全，过滤，重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐17.5g，其含量大于96％，收率为64.76％。
实施例7同实施例1的方法，称取20g(含量为98.5％)的18-去氢乌索酸置三口烧瓶中，加甲基吡啶100ml在125℃加热溶解，加入琥珀酸酐24g，继续加热搅拌进行反应，8小时后反应完全，加稀酸过滤，用水洗涤，固体溶解在95％乙醇中，搅拌下加40％的NaoH溶液，待反应完全，置低温处待析晶完全，过滤，重结晶。抽滤、干燥得到3β-琥珀酰基-18去氢乌索酸二钠盐20.5g，其含量大于98％，收率为77.45％。
权利要求
1.一种3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备方法，是由18-去氢乌索酸为原料经琥珀酰化制得，其特征在于制备过程分二步反应进行，第一步是酰化反应，用18-去氢乌索酸和琥珀酸酐为原料，投料重量比为2∶0.5～3，反应介质为碱性有机溶剂，在常压80-202℃搅拌下反应5-12小时，反应后加稀盐酸、滤过、水洗涤得固体物；第二步是成盐反应，将固体物溶解在1～4碳的脂肪醇或乙酸乙酯等酯性溶剂中，加5-50％的氢氧化钠水溶液至酚酞试纸呈红色，滤取粗品，粗品重结晶干燥得3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的精品。
2.根据权利要求1所述的3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备方法，其特征在于第一步酰化反应投料时加入浓硫酸作催化剂，在常压，80-150℃搅拌下反应5-8小时。
3.根据权利要求1和2所述的3β-琥珀酰基-18-去氢乌索酸二钠盐的制备方法，其特征在于第一步酰化反应所述的反应介质碱性有机溶剂为吡啶，第二步成盐反应所用的溶剂为乙酸乙酯或乙醇，重结晶用的溶剂为乙醇和/或水。
全文摘要
本发明所述的一种3β－琥珀酰基－18－去氢乌索酸二钠盐的制备方法，属于一种五环三萜类化合物的制备方法，其方法是用18－去氢乌索酸、琥珀酸酐为原料，碱性有机溶剂为反应介质，在常压80－202℃下，反应5－12小时，反应后加稀酸，滤过，水洗去吡啶，将反应物溶解在1～4碳的脂肪醇或乙酸乙酯中，加5－50％的氢氧化钠溶液成盐，抽滤，重结晶，干燥得3β－琥珀酰基－18－去氢乌索酸二钠盐，含量大于95.0％。本发明合成工艺简单，不需要特殊的设备，产品分离纯化方便，生产成本低，适合于工业化生产。
文档编号C07J63/00GK1446819SQ03113998
公开日2003年10月8日 申请日期2003年3月27日 优先权日2003年3月27日
发明者李漓, 钟鸣, 张素中 申请人:广州汉方现代中药研究开发有限公司
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