专利名称：由二酮基哌嗪生产天冬氨酰苯丙氨酸甲酯的方法和新的中间体及其衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及由二酮基哌嗪(DKP)生产天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯(α-APM)的方法，以及在该方法中生成的新中间体。本发明尤其涉及用1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(1-酰基AP-DKP)或1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯(1-酰基MAP-DKP)生产α-APM的方法。利用本方法，不使用L-苯丙氨酸或其甲酯作起始物料即可生产α-APM。
α-APM是一种用作甜味剂的化合物，生产它的典型方法是使用L-苯丙氨酸或L-苯丙氨酸甲酯作为偶合起始的物料之一，在生产方法中它们是主要的成本因素。
在Mita等的美国专利4780561中曾进行过不用L-苯丙氨酸甲酯生产α-APM的尝试，该专利提出了一种通过使5-苄基-3，6-二氧代-2-哌嗪乙酸(AP-DKP)或其甲酯与盐酸反应制备α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐，然后将其中和制备α-APM的方法。该5-苄基-3，6-二氧代-2-哌嗪乙酸的制备方法是使N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸在甲醇中，在一种酸的存在下进行脱甲酰基化作用和双酯化作用生成α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯，然后在中性或弱碱性条件下处理该二甲酯，生成5-苄基-3，6-二氧代-2-哌嗪乙酸甲酯(MAP-DKP)，然后用一种碱的水溶液处理MAP-DKP，生成AP-DKP。该方法仍然需要L-苯丙氨酸作为原料，它大大增加了该方法的成本。
Shinohara等的美国专利4634790公开了一种制备α-APM或其氢卤酸盐的方法，是在甲醇和水的混合溶剂中用一种强酸使3-苄基-6-羧甲基-2，5-二酮基哌嗪(α-AP-DKP)进行部分水解。在α-APM的工业生产过程中，α-AP-DKP通常是作为副产物得到的。
日本公开申请01-100161公开了5-苄基-3，6-二氧代-2-哌嗪乙酸(AP-DKP)和其衍生物。该化合物的制备方法是使C6H5CH2CH(NH2)CONH-CH(CO2R1)CH2CO2R2(R1＝C1-C4烷基，R2＝H、C1-C4烷基)与pH值大于或等于4.5的水溶液或水-有机溶剂混合物进行反应。将AP-DKP在含有HCl的甲醇中加热，制得APM-HCl。
Hubbs在Research Disclosure 28136(1987年9月公开)中公开了不用L-苯丙氨酸或其甲酯作起始物料而合成N-乙酰基α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯的方法。该化合物转化成α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸，然后可将其转化成天冬氨酰苯丙氨酸甲酯。
Takahashi等的美国专利4897507公开了一种使3-苄基-6-羧甲基-2，5-二酮基哌嗪或其甲酯在实质上无水的甲醇溶剂中反应，以制备α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯的方法，所生成的二甲酯在酸性含水甲醇溶液中反应，转化成α-APM(盐酸盐)。
所希望的是不需要使用L-苯丙氨酸或L-苯丙氨酸甲酯作原料，而由二酮基哌嗪制备α-APM，本发明就是提出了这样一种方法。
本发明提供了新的方法来制备1-酰基AP-DKP和1-酰基MAP-DKP，它们进一步可容易地转化成α-APM。制备这些合成物在合成过程中未使用L-苯丙氨酸或其甲酯。在本发明方法的实施过程中，生成了下列新的中间体化合物和几个类别的中间体化合物1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸;
1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯;
1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸;
1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯;
5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸;
5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯;
1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-(S)-乙酸烷基酯;
1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸;
1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸烷基酯;
N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯。
根据其一实施方案，本发明提供了一种制备天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-APM)的方法，其中包括按下列顺序的几个步骤(a)向3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸中加入一种或多种酰化试剂，生成1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物;
(b)在一种碱存在下，向上述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物中加入苯甲醛，生成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物;
(c)将上述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物氢化，制得1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物;
(d)将上述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物部分水解，制得α-APM或其盐。
在上述产物和方法中，所述酰基基团是式RC(＝0)-基团，其中R表示氢或有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族有机基团。关于二酰基化合物，各个酰基基团可以相同或不同。在优选的实施方案中，酰基基团包括乙酰基。
在上述合成反应中，该3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸起始化合物可以用三步反应来制备，其中ⅰ)使1-天冬氨酸与氯乙酰氯反应，生成氯乙酰基天冬氨酸;
ⅱ)使氯乙酰基天冬氨酸与氨反应生成其二肽，即Gly.Asp;
ⅲ)将Gly.Asp环化(通过加热)，生成所要的二酮基哌嗪，即3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(环Gly.Asp)。
本发明的另一个实施方案提供了第二种制备天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-APM)的方法，其中包括按下列顺序的几个步骤(a)向一种3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中加入一种或多种酰化试剂，生成1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-(S)-乙酸烷基酯化合物;
(b)在一种碱存在下，向上述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中加入苯甲醛，生成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;
(c)将上述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物氢化，生成1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;
(d)在中性或碱性条件下，向上述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中加入醇，生成含有N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯的混合物;
(e)向上述(d)步骤生成的混合物中加入HCl和CH3OH;其中的酰基和二酰基定义如上;其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
在又一个实施方案中，不进行上述方法的步骤(d)即在中性或碱性条件下生成含有N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯的混合物，而是直接在酸性条件下，完成1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯转化成α-APM或其盐的步骤。
在特别优选的实施方案中，将上述两种方法中离析出α-APM后剩余的母液转化成5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(AP-DKP)，或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯(MAP-DKP)，然后进一步将它们部分水解，生成额外的α-APM，这样便提高了该方法的总产率。
由此可见，本发明的目的是提供新的制备α-APM的方法和制备α-APM所必需的中间体。
本发明进一步的目的是提供新的化合物，它们对于α-APM的制备是特别有用的中间体。
当参看后文对优选实施方案的详细描述后，本发明的这些以及其它目的对于本领域的专业人员来说将是显而易见的。
在描述优选的实施方案时，为明确起见将使用一些术语。这些术语是应用于所述的实施方案，以及所有那些为了相似的目的、以相似的方法操作而达到相似结果的技术等效方案。
用本发明的优选的方法制备α-APM的整个反应流程可用下图说明(Me＝甲基，Ac＝乙酰基，Ph＝苯基，Base＝碱)。
参照反应流程图，1-酰基AP-DKP化合物可按下述路线制备首先在如乙酸乙酯的溶剂中，使L-天冬氨酸与氯代乙酰氯反应，生成氯代乙酰基天冬氨酸，也可以选择其它溶剂，包括乙酸甲酯、乙酸丙酯等等。然后使氯乙酰基天冬氨酸与氨，通常是氨水进行反应，生成Gly.Asp，这是一种具有二个羧基基团和单一的伯胺基团的二肽。与氨的反应可在室温进行，但是需要进行相当长时间，即12小时或更长。为了缩短反应时间，氨化反应可在较高温度进行。温度可以在约50℃至约250℃范围内，进一步说来，相应于反应时间在大约3小时和大约1秒钟之间的反应速率。
该方法的下一步骤是借助于环化反应形成第二个肽键。Gly.Asp本身可以环化形成3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(环Gly.Asp)。另一方式，可在环化前将Gly.Asp的一个羧基(或者最好是两个羧基)在酸(例如HCl，H2SO4)或酸性树脂存在下用具有1至5个碳原子(如甲基、乙基、丙基、异丁基等)的低级烷醇酯化。甲醇是特别优选的。在此情况下，在环化前就形成了下面的中间体的酸式盐
可以选择其它起始原料进行环化引入到DKP，包括Gly.Asp的β-甲基酯。本专业领域的熟练技术人员很容易了解到，可以用作为生成DKP的前体的其它化合物。
Gly.Asp的环化通常通过加热该化合物来完成。当加热Gly.Asp以生成第一DKP(环Gly.Asp)时，将二肽在约100℃至约210℃之间加热约30分钟至约5小时。特别优选但不是必须的是使加热步骤在低级烷基羧酸，如乙酸、丙酸或新戊酸存在下进行。当在低级烷基羧酸中加热时，加热温度可降低至约100℃至约130℃之间，加热时间可缩短至约1小时至约3小时之间。另外方式，其它溶剂，如羟类、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜可用作加热介质。
用碱中和Gly.Asp的酸式盐进行Gly.Asp烷基酯的环化作用。碱可以采用有机碱、无机碱或碱性树脂的形式。
然后在环Gly.Asp或其烷基酯之中加入一种或多种酰化剂以生成新的化合物1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸和1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯。术语“酰基”表示式RC(＝0)-的基团，其中R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团。“二酰基”表示可以相同或不同的二个酰基。酰基的实例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、苯甲酰基等，特别优选的酰基包括甲酰基和乙酰基。术语“烷基”表示具有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
每一当量的DKP要加入至少2当量的酰基基团。在一优选的实施方案中，酰化剂为乙酐，因此生成了1，4-二乙酰基取代的化合物，或者酰化剂为甲乙酐(混合酸酐)，因此生成了1，4-二甲酰基取代的化合物。本技术领域公知的其它酰化剂如乙酰氯和和烯酮可用来代替乙酐或甲乙酐。还可以加入催化剂，如二甲氨基吡啶或乙酸钠。酰化剂的加入通常在加热的情况下进行，其范围在约25℃至约130℃之间。酰化反应可在任何惰性溶剂，如乙酸乙酯、甲苯、乙酸异丙酯、二甲苯、乙酸等之中进行。另外方式，过量的酰化剂可有作为反应溶剂的附加作用。使用过量的乙酸酐就是这方面的一个实例。
在环Gly.Asp的情况下，需要在酰化反应前把连接于第2个碳原子上的羧甲基上的羧基氢原子用一个保护基取代，以防止酰化反应中氢原子的干扰。保护基的实例包括三甲基甲硅烷基、叔丁基和叔丁基二甲基甲硅烷基。其它保护基团是本领域熟练技术人员所知道的。
在反应序列的下一个步骤中，在碱存在下向1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪中间体(游离酸或烷基酯)之中加入苯甲醛，生成下述种类新化合物中的前者或后者1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸类，或1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯类(1-乙酰基或者1-甲酰基化合物是特别优选的)。醇盐化合物特别适于在上述反应中用作碱。具体的实例包括叔丁醇钠、叔丁醇钾以及叔戊醇钠。苯甲醛的加入是在惰性溶剂，如四氢呋喃或叔丁醇存在下进行，并且优选在约-40℃至约100℃的温度范围内进行。
在生产1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸烷基酯时，首先生成中间体1-酰基-5-(酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)乙酸烷基酯(优选的酰基是乙酰基或甲酰基)。实际上，这个中间体不需要专门离析出来，而是将1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)乙酸烷基酯通过1-酰基-5-(酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯中间体直接转化成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯。当没有将其专门离析的情况下，确信优选的甲酰基化合物是N-甲酰基-5-(甲酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。在进行离析的情况下，在中间体中加入碱化合物，接着加热该混合物，并在其后用酸使之骤停而完成5-(酰氧苄基)的转化。上述加碱通常在例如环己烷惰性溶剂中进行。同时不需特别的检验，就能确信在亚苄基加入游离酸以后生成了5-(酰氧苄基)中间体，即生成了1-酰基-5-(酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
在游离酸中间体的情况下，如果在第2个碳原子上取代的羧甲基的羧基氢原子已被非低级烷基的保护基团所取代，应该把保护基团用氢原子或烷基基团(优选的是甲基)置换，以使DKP回到乙酸或乙酸烷基酯的形式。保护基的置换在加入苯甲醛之后进行。
在另一实施方案中，加入甲醇或其它适当的溶剂，如水，使1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸或1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物脱酰基。反应完成后就生成5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸和-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯新化合物。
上述反应的结果所形成的中间体是部分不饱和的。氢化这些中间体可形成所需要的1-酰基AP-DKP、1-酰基AP-DKP烷基酯、AP-DKP和AP-DKP烷基酯化合物，其系统命名分别是1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸、1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯、5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸、和5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸烷基酯。该转化可在氢化催化剂存在下用氢气或释放氢的物质来完成。可用的催化剂的实例包括载体上的Pd、载体的例子包括C、BaCO3、BaSO4、氧化铝、CaCO3及其类似物;载体上的Pt;Ni催化剂;Cu催化剂;Rh催化剂和可溶性金属催化剂。氢化反应通常在约-20℃至约150℃温度范围内进行。氢化反应可在多种的、氢化反应中通常使用的惰性溶剂中进行，其中，正如本领域中已知的，溶剂的选择主要决定于催化剂的选择。在优选的实施方案中，生成了1-甲酰基AP-DKP、1-甲酰基AP-DKP烷基酯、1-乙酰基AP-DKP或1-乙酰基AP-DKP烷基酯。
AP-DKP、AP-DKP烷基酯、1-酰基AP-DKP和1-酰基AP-DKP烷基酯都可以很容易地转化成α-APM，为了把上面列出的多种DKP中任何一种转化成α-APM的酸式盐，所有的都要求DKP是部分水解的，这通常包括在升高的温度向DKP中加入甲醇和酸，一般是盐酸，接着混合一段时间使其足以能形成α-APM盐酸盐。一经形成盐之后，用常规方法，如中和，将该盐酸盐转化成α-APM，然后将α-APM由残留的母液中离析出来。各种DKP的部分水解以形成α-APM在前面引用的USP 4634790和4897506中有更详细的叙述。
在另一实施方案中，不用DKP化合物的酸性水解来生成α-APM，其水解反应是在碱性或中性条件下进行的。在这个实施方案中，把含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的醇，优选的是甲醇，在碱性或中性条件下加入到1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物，优选的是N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯或N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。这些二烷基化合物中的“烷基”可以相同或不同，包括含有1至7个碳原子的直链或支链基团。这些N-酰基化合物是新的化合物。
在实践中，于温度范围为由约-20℃至约120℃，优选从约20℃至60℃，时间范围由约1分钟至约10天，优选从约15分钟至约24小时的条件下，与该醇一起加入碱使此水解反应的pH保持在约6.5至约14之间，优选在约7约8.5之间。可加入的优选的碱包括乙酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化锂、氨、有机胺碱类和钾碱类。例如，每当量的1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯中加入0.25当量的乙酸钠可得到满意的结果。
实际上，除了生成N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物之外，还生成相当量的5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯(MDKP)。在实践中，所形成的该二种化合物之比率范围由50∶50至67∶33，65∶35的比例实际上已经达到了。很高的N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物相对产率是出人意料之外的，因为酰亚胺官能团的断裂可能会发生在两个羰基中的任何一个上，结果是或者脱酰基成为MDKP，或者开环成为N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯。在酸性条件下，脱酰基作用是仅有的反应。在碱性或中性条件下观察到的选择性是出乎意料的，因为位阻理论会提出脱酰基将优先发生，基于电子效应理论可预料在二个羰基之间的差别仅仅是轻微的。
用甲醇、酸，优选的是盐酸和任选用水使这二种化合物进一步水解，以高比率的所需产物与不需要产物之比得到α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯甲基酯(MAPM，需要的)和α-L-苯丙氨酸-L-天冬氨酰基甲酯甲基酯(PAMM，不需要的)的混合物。例如，用上述工艺步骤可得到MAPM与PAMM的最终比率为90∶10。用已知技术，即将额外的甲醇、水和酸加入MAPM中，能将MAPM很容易地转化为α-APM。
以最初合成的DKP的量为基准，上述方法能得到最高达80%的α-APM。从母液中离析出α-APM以后，残留的母液含有一定量的Asp、Phe、Asp.Phe、Phe.Asp以及它们的甲基酯(和一些未离析的APM(HCl)。将这些物料转化成AP-DKP或MAP-DKP(AP-DKP的甲基酯)，这样就能合成出额外的α-APM，一般将母液的pH调至约1.5-6.0，并把母液加热至约40℃至约110℃，直至二肽及其甲基酯发生环化。通过冷却和过滤将各种DKP离析。
为了提高母液中二肽转化成AP-DKP或MAP-DKP的转化率，环化反应可以在有任选的共溶剂存在下进行。一种适用的共溶剂是乙酸，其它的共溶剂可包括甲酸、丙酸、其它羧酸和其它惰性溶剂。当使用共溶剂时，为了离析DKP，任选将共溶剂从混合物中汽提出来，并将母液冷却过滤。
一经离析之后，如上述通过部分水解和中和将AP-DKP和(或)MAP-DKP转化成α-APM。用此方法进行母液的再转化可根据需要而多次重复。结果，由母液中得到了额外的α-APM，α-APM的总产率可高达90%。
由下述非限制性实施例进一步描述本发明。
实施例1-以直接酰化使L-Asp氯乙酰基化在装有冷凝器的1升三颈圆底烧瓶中，边搅拌边将53.24g L-Asp、32ml氯代乙酰氯和400ml乙酸乙酯加热至回流，反应混合物回流24小时，形成浆液，把浆液冷却至25℃并过滤，滤饼用50ml乙酸乙酯洗涤，干燥，在40-50℃减压蒸馏除去乙酸乙酯。在固体滤饼中加入85ml水，搅拌该溶液并将其放置过夜。从溶液中去除水，析出半结晶残余物，把残余物同300ml乙醚搅拌、过滤、洗涤并干燥得到最终产物。风干后得到66.95g氯乙酰基天冬氨酸，为理论产率的80%。
实施例2-由氯乙酰基天冬氨酸生成Gly.Asp室温条件下将5.0g氯乙酰基天冬氨酸在28%的NH4OH水溶液中搅拌24小时，为一透明溶液。此后，真空加热至50℃去除NH3和H2O。加入20ml水得到透明溶液，接着加入20ml乙酸。在搅拌的同时用100ml甲醇稀释该溶液，沉淀析出Gly.Asp结晶物。经风干的产物的产率接近于定量的理论产率。其中含NH 4量为0.12%。HPLC分析确认已生成Gly.Asp。
实施例2A-用高温氨化步骤生成Gly.Asp将39.9g L-Asp于300ml乙酸异丙酯中的的浆液加热回流，加入9.6ml氯代乙酰氯。在氮气吹扫条件下将该浆液回流4小时，热过滤，将滤液减压汽提，得到19.75g白色固体物。将10g此物料溶于30ml水，搅拌2小时，并加入到170ml 28%氨水(NH4OH)中。将该溶液在压力容器中于105℃加热10分钟，立即冷却至75℃，然后排空并继续冷却至45℃。将该溶液减压浓缩，加水至总重为30g。用12N盐酸将溶液的pH调至3.0，并用30分钟的时间把该溶液加入到正在回流的甲醇中。冷却过夜后，过滤收集产物并干燥，Gly.Asp的产率按氯代乙酰氯计为57%。
实施例2B-由氯乙酰基天冬氨酸生成Gly.Asp把213g L-天冬氨酸于800ml乙酸异丙酯中的浆液加热回流，并用63ml氯代乙酰氯处理。将浆液回流3.5小时，过滤，滤液在减压下汽提。残余物用200ml乙酸异丙酯和84ml水处理，搅拌至溶解，去除含水层。将有机物层萃取4次，每次用42ml水，合并的水层用2.00升28%氨水处理。在放置过夜后，将溶液减压汽提，用12N HCl处理至pH3.45。取其约一半的物料进行结晶。用30分钟的时间将含水浓缩液滴加入1.00升甲醇中，搅拌65小时，冷却至10℃，过滤收集产物。按氯代乙酰氯计，Gly.Asp的产率为60%。
实施例3-Gly.Asp环化成环Gly.Asp用三种不同的方法环化Gly.Asp。
方法(a)将1.00g Gly.Asp和20ml丙酸回流(128℃)搅拌2小时，随之溶液成透明状。去除溶剂得到c-Gly.Asp，产率83%。
方法(b)在真空度1mm Hg，于一个管中将0.10g Gly.Asp在150-160℃加热30分钟。c-Gly.Asp的产率为57%。
方法(c)将1.00g Gly.Asp和10ml二甲亚砜在120℃加热3小时，在此期间，最初的无色溶液转变成橙色。用N2气流以及抽真空至0.1mm Hg并过夜，去除溶剂。产物为半结晶，回收的产率为90%。
实施例4-Gly.Asp二甲酯的形成于室温将0.5g Gly.Asp于10ml含10% HCl的甲醇溶液中搅拌16小时。减压汽提溶剂后基本上定量地得到Gly.Asp二甲酯的盐酸盐。
实施例5-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成用0.5g Gly.Asp制备Gly.Asp二甲酯粗制品的溶液，将粗品减压汽提，再溶于10ml甲醇，用强碱性树脂处理至pH8.4。将溶液过滤，将之于室温放置24小时，汽提后得到0.31g 3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例5A-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将75ml Dowex MSC-1树脂(用甲醇洗涤过)在200ml甲醇中的浆液用9.7g Gly.Asp处理，并加热回流。回流3小时后，将温度降低至60℃，并用28%的氨水(NH4OH)处理浆液使pH为8.5。在60℃再维持1.5小时后，将树脂滤出，洗涤，将滤液减压汽提，得到3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，产率98%。
实施例5B-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将5.0g Gly.Asp和3.1g H2SO4在100ml甲醇的溶液于60℃搅拌5.5小时。使溶液冷却至室温并通过一个75ml弱碱性树脂柱，柱子用甲醇洗涤，将洗涤液与该溶液合并，加入甲醇氨将溶液的pH调至8.5。在60℃加热5小时以后，将溶液冷却至室温并减压汽提，得到含有4.41g 3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的白色固体物，产率为90%。
实施例6-1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸的形成将172mg(1mmol)环Gly.Asp在20ml乙酸乙酯中形成浆液，将0.566ml(6mmol)乙酐和作为催化剂的4mg二甲氨基吡啶(DMAP)加入该浆液中，将混合物加热回流25小时，冷却至室温。混合物用水洗涤，用MgSO4干燥，真空浓缩得到121mg 1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸，产率为47%。
实施例7-1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将372mg(2mmol)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在10ml乙酸酐中的浆液加热到50℃以上，在此温度搅拌反应混合物直至反应完全，然后浓缩该产物，得到基本是定量产率的1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例7A 1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将100g 3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在1300ml乙酸酐中的溶液在100℃加热7小时，然后减压汽提，残余物溶于1000ml乙酸丁酯，过滤，用pH为6.3的缓冲液洗涤，用硫酸钠干燥，再次减压汽提，得到油状物1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，产率为96%。
实施例8-1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成于5℃，向2.15g 1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯和0.845g苯甲醛在20ml四氢呋喃中的溶液加入0.964g叔戊醇钠。该浆液在5℃搅拌15分钟，然后使之升温至室温并再搅拌7小时。混合物用乙酸骤停反应，倾入水中，并用二氯甲烷萃取，将有机物层干燥并浓缩，得到80%的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例8A-1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成向2.90g(100mmol)1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在15ml乙酸丁酯的溶液中加入1.06g(10mmol)苯甲醛。将反应混合物冷却至-20℃，并在-20℃加入溶于10ml环己烷的1.05g(11mmol)叔丁醇钠。在加入该碱以后，将反应混合物在-20℃搅拌1小时，然后加入0.630ml(11mmol)的乙酸。反应混合物在70℃加热10小时，冷却至室温，用水洗涤，将有机物层干燥，浓缩，得到90%的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代-2(S)-乙酸甲酯。
实施例8B-1-乙酰基-5-(乙酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成向48.64g(0.180mol)1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在250ml乙酸丁酯中的溶液加入19.10(0.180mol)苯甲醛。将反应混合物冷却至-20℃，并在7℃加入溶于200ml环己烷的19.03g(0.198mol)叔丁醇钠。加入该碱以后，再将反应混合物于-20℃搅拌1分钟，然后用11.3ml(0.198mol)乙酸骤停反应。使反应混合物升温至室温并浓缩，得到56%的1-乙酰基-5(乙酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯粗制品，硅胶色谱分析得到纯物质，玻璃状固体物。
实施例8C-由1-乙酰基-5-(乙酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯制取1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯向1.50g(4mmol)1-乙酰基-5-(乙酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在5.5ml乙酸丁酯和4.5ml环己烷的混合物中的溶液加入0.328g(4mmol)乙酸钠。将混合物在70℃加热24小时，在冷却至室温并去除溶剂后，该粗制反应混合物给出74.5%的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例9-1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成向3.16g 1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在95ml甲醇中的溶液加入1.2g的4%Pd/C，用水加湿至50%。将反应混合物置于50磅/平方英寸氢气中1小时，用硅藻土(Celite)塞滤出催化剂，浓缩得到的滤液，给出85%的1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
预期实施例10-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸的形成在室温，将pH＝8的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸的含水甲醇溶液进行搅拌，直至水解反应完成，并减压除去溶剂，得到所要的脱酰基产物。
预期实施例11-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成在室温，将pH＝8的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的含水甲醇溶液进行搅拌，直至水解完全，并减压除去溶剂，得到所要的脱酰基粗制品。
实施例12-由5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯制备α-APM(HCl)
将40ml 12N HCl和121ml甲醇的溶液加热至60℃，边搅拌边用10分钟时间加入16g MAP-DKP，将该混合物在60℃再搅拌15分钟，在此段时间里，固体物完全溶解。将该溶液在旋转蒸发器中汽提成为重33.3g的残余物。在分析HCl、甲醇和水的含量之后，将该混合物配制成如下浓度甲醇-3.0%，HCl-13.5%，水-36.5%。将该混合物在室温振荡7天，过滤收集固体APM(HCl)，所得APM(HCl)的产率为47%。
实施例13-由Ac-MDKP转化为MAPM(HCl)在室温，将2.16mg/ml Ac-MDKP在10(重量)%HCl/甲醇中的溶液搅拌60小时，然后用高效液相色谱分析形成MAPM·HCl的转化率，按最初Ac-MDKP用量计，MAPM的产率为86%。
实施例14-由母液转化成AP-DKP或MAP-DKP(a)AP-DKP转化成APM·HCl所得的母液和洗涤液合并后再转化成DKP/MDKP的混合物。在此溶液中，每克溶液含有0.577mM的肽。该混合物包含Asp、Phe、Asp.Phe、Phe.Asp以及甲酯(8种组分)。将15.4g该液体样品用4.32g 30%氨水和15ml水处理，得到pH＝4.9的溶液，将该溶液加热回流6.5小时，室温搅拌过夜，再回流4小时。将混合物冷却至15℃，过滤收集固体物。滤饼(固体物)中DKP/MDKP的产率为49%，而DKP/MDKP的总产率(存在于固体和液体中的量)为53%。
(b)将15.39g实施例6(a)所述液体用4.5ml 30%的氨水处理，成为pH＝5.2的溶液，该溶液用35ml乙酸处理并加热回流5小时。将混合物减压浓缩，于15ml水中再次形成浆液，过滤、干燥。滤饼(固体物)中DKP/MDKP的产率为51%，而DKP/MDKP的总产率(存在于固体和液体中的量)为59%。
实施例15-由1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯生成N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯用乙酸钠调节1mmol 1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在10ml甲醇中的溶液至pH＝7.5。将反应混合物在60℃加热4小时，然后冷却至室温，将混合物减压浓缩，得到N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯与MDKP之比为64∶36。
实施例16-1-乙酰基-5-(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯转化成为MAPM将2.50g 1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯于75ml甲醇中的溶液用0.163g乙酸钠处理并加热至60℃，1.5小时后将该溶液减压汽提得到白色固体物，其中含有比例为70/30的N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯/5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。将粗制的固体物溶于11.5g 12%的HCl在甲醇中溶液，回流加热6小时，再加入2.3g HCl/甲醇溶液，并且继续加热10小时，高效液相色谱分析表明MAPM与PAMM混合物中的比例为8.4/1.0。
实施例17-1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将15.0g 3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在50ml甲乙酐(混合酸酐)中的溶液在55℃加热12小时，然后减压汽提。将残余物再溶于50ml混合酸酐，并且在55℃再加热12小时，然后减压汽提，得到1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，为油状物。根据高效液相色谱知产率为50%。
实施例18-1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸甲酯的形成在-20℃，向2.42g 1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯和1.06g苯甲醛在15ml乙酸异丙酯中的溶液加入溶于10ml乙酸异丙酯的1.06g叔丁醇钠。加入该碱以后，将反应混合物于-20℃搅拌1小时并加入114μl乙酸，然后将反应混合物在70℃加热1小时，冷却至室温，用水洗涤。有机物层经干燥、浓缩，根据高效液相色谱得知，给出50%的1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例19-1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成向100mg 1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯于10ml四氢呋喃的溶液中加入35mg5%的Pd/C催化剂。将反应混合物在50磅/平方英寸氢气中放置3小时，用硅藻土(Celite)塞滤出催化剂，将得到的滤液浓缩，根据高效液相色谱得知，给出87%1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例20-由1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯生成N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯用10%的碳酸钠水溶液调节5mg1-甲酰基-5-(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯于0.5ml甲醇中的溶液至pH＝8.0，并在60℃加热3小时，将混合物减压浓缩，给出比例为1∶2.3的N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯和MDKP。
权利要求
1.1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物，其中各个酰基基团可以相同或不同，并且是式RC(=0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团。
2.根据权利要求1的化合物，该化合物是1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
3.根据权利要求1的化合物，该化合物是1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
4.一种制备1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物的方法，其中各个酰基基团可以相同或不同，并且是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，该方法包括向3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸中加入一种或多种酰化试剂的步骤，对于每当量的3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸，提供2当量的酰基基团。
5.根据权利要求4的方法，包括将所述3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸与酰化试剂混合物加热到约25℃至130℃的附加步骤。
6.根据权利要求4的方法，其中所述添加步骤是在惰性溶剂存在下进行的。
7.根据权利要求5的方法，其中所述酰化试剂包括乙酸酐，其中所述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物包括1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
8.根据权利要求4的方法，其中所述酰化试剂包括甲乙酐，其中所述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物包括1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
9.1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物，其中的酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R代表氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团。
10.根据权利要求9的化合物，该化合物是1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
11.根据权利要求9的化合物，该化合物是1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
12.1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-(2)-乙酸烷基酯化合物，其中各个酰基可以相同或不同，并且是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
13.根据权利要求12的化合物，该化合物是1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
14.根据权利要求12的化合物，该化合物是1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
15.一种制备1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，其中各个酰基可以相同或不同，并且是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，该方法包括向3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中加入一种或多种酰化试剂的步骤，对于每当量3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯，提供2当量的酰基基团。
16.根据权利要求15的方法，包括将所述3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯与酰化试剂混合物加热到约25℃至130℃的附加步骤。
17.根据权利要求15的方法，其中所述添加步骤是在惰性溶剂中进行。
18.根据权利要求16的方法，其中所述酰化试剂包括乙酸酐，所述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
19.根据权利要求15的方法，其中所述酰化试剂包括甲乙酐，所述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
20.1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
21.根据权利要求20的化合物，该化合物是1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
22.一种制备1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，该方法包括在一种碱和一种惰性溶剂存在下，将苯甲醛加入到1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中的步骤。
23.根据权利要求22的方法，包括将反应介质保持在约-40℃至约100℃温度的附加步骤。
24.根据权利要求23的方法，其中所述碱包括醇盐化合物。
25.根据权利要求23的方法，其中生成的化合物包括1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
26.1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
27.根据权利要求26的化合物，该化合物是1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
28.一种制备1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，该方法包括在惰性溶剂中将1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物氢化的步骤。
29.根据权利要求28的方法，其中所述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，所生成的化合物包括1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
30.根据权利要求28的方法，其中所述氢化步骤包括在有选自Pd、Pt、Ni、Cu、Rh和可溶性金属催化剂的氢化催化剂存在下，将所述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物与氢气或能释放氢的物质进行接触。
31.5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
32.5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物，其中的烷基包括含1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
33.1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团。
34.根据权利要求33的化合物，该化合物是1-乙酰基-5-(乙酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
35.1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
36.根据权利要求35的化合物，该化合物是1-乙酰基-5-(乙酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
37.一种制备1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，其中酰基是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，该方法包括下列步骤(a)在一种碱和一种惰性溶剂存在下，将苯甲醛加入到1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸烷基酯化合物中;(b)用酸使该化合物停止反应;(c)离析所制备的化合物。
38.根据权利要求37的方法，包括附加步骤(d)将碱加入到步骤(c)生成的产物中，制备1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物。
39.根据权利要求37的方法，其中所述碱包括醇盐化合物。
40.根据权利要求37的方法，其中所述产物包括1-乙酰基-5-(乙酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
41.根据权利要求38的方法，其中所述(d)步骤的产物包括1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
42.N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物，其中酰基是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，二烷基包括两个烷基基团，它们可以相同或不同。
43.根据权利要求42的化合物，该化合物是N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。
44.一种制备N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物的方法，该方法包括下列步骤(a)在碱性或中性条件下，将含1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的醇加入到1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯中;(b)离析步骤(a)生成的N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物;其中酰基是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团;烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团;二烷基包括两个烷基基团，它们可以相同或不同。
45.根据权利要求44的方法，其中所述的醇包括甲醇，所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯包括1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，其中所述的N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物包括N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。
46.根据权利要求45的方法，其中步骤(a)是在约20℃至约60℃的温度进行约15分钟至约24小时。
47.根据权利要求45的方法，其中步骤(a)是在约7.0至8.5范围的pH值条件下进行。
48.根据权利要求47的方法，其中步骤(a)的碱性或中性条件是通过与甲醇一起加入一种碱而得到的，该碱选自乙酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化锂、氨、有机胺碱以及钾碱。
49.根据权利要求45的方法，包括附加步骤(c)向步骤(b)的产物中加入HCl、H2O和CH3OH，生成天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-APM)或其盐。
50.一种制备天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-APM)或其盐的方法，包括按下列顺序的步骤(a)将一种或多种酰化试剂加入到3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;(b)在一种碱存在下，将苯甲醛加入到上述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;(c)将上述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物氢化，生成1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;(d)将上述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物转化成α-APM或其盐;其中各个酰基可以相同或不同，并且是式RC(＝O)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族的有机基团;其中烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
51.根据权利要求50的方法，包括下列附加步骤(e)将步骤(d)生成的母液残余物转化成5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯;(f)将上述5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪2-(S)乙酸甲酯部分水解，成为α-APM或其盐。
52.根据权利要求51的方法，其中步骤(e)包括将所述母液的pH值调到约1.5至约6.0，并将所述母液加热到约40℃至约110℃。
53.根据权利要求51的方法，其中在进行转化成5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的步骤之前，先将一种共溶剂加入到所述母液中。
54.根据权利要求53的方法，其中所述共溶剂是选自乙酸、甲酸和丙酸。
55.根据权利要求50的方法，其中所述1，4-二酰基和1-酰基取代的化合物分别包括1，4-二乙酰基和1-乙酰基取代的化合物，其中所述烷基酯包括甲酯。
56.根据权利要求50的方法，其中所述3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯是由下式化合物环化生成的，
其中R＝H或CH3。
57.根据权利要求56的方法，其中所述下式化合物
其中R＝H或CH3，是由Gly·Asp与甲醇在一种酸存在下进行反应生成的。
58.根据权利要求57的方法，其中所述Gly·Asp是通过L-天冬氨酸与氯乙酰氯反应生成氯乙酰基天冬氨酸，随后使该氯乙酰基天冬氨酸再与氨反应而制备的。
59.根据权利要求55的方法，其中所述酰基化试剂包括乙酸酐。
60.根据权利要求50的方法，其中所述1，4-二酰基和1-酰基取代的化合物分别包括1，4-二甲酰基和1-甲酰基取代的化合物，其中所述烷基酯包括甲酯。
61.根据权利要求60的方法，其中所述酰基化试剂包括甲乙酐。
62.根据权利要求50的方法，其中所述氢化步骤包括在一种惰性溶剂和一种氢化催化剂存在下将所述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物与氢气或能释放氢的物质进行接触，该催化剂选自Pd、Pt、Ni、Cu、Rh和可溶性金属催化剂。
63.根据权利要求50的方法，其中所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯化合物，并且其中步骤(d)包括将所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯化合物进行部分水解，生成α-APM或其盐。
64.根据权利要求50的方法，其中步骤(d)包括(ⅰ)在碱性或中性条件下，将含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的醇加入到所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成包括N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物的混合物;(ⅱ)向步骤(ⅰ)生成的混合物中加入HCl、H2O和CH3OH。
65.根据权利要求64的方法，其中步骤(ⅰ)是在约20℃至约60℃的温度进行约15分钟至约24小时。
66.根据权利要求65的方法，其中步骤(ⅰ)是在约7.0至约8.5范围的pH值条件下进行。
67.根据权利要求66的方法，其中步骤(d)中的碱性或中性条件是通过与所述甲醇一起加入一种碱而得到的，该碱是选自乙酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化锂、氨、有机胺碱以及钾碱。
68.一种制备1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，包括下列步骤(a)在一种碱存在下，将苯甲醛加入到1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;(b)将上述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物氢化，生成1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;其中各个酰基可以相同或不同，并且是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团;其中烷基包括含有1至5个碳原子的直链或支链烷基基团。
69.根据权利要求68的方法，其中所述1，4-二酰基取代的化合物和1-酰基取代的化合物分别包括1，4-二乙酰基和1-乙酰基化合物，其中所述烷基酯包括甲酯。
70.根据权利要求69的方法，其中所述氢化步骤包括在一种氢化催化剂存在下，将所述1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物与氢气或能释放氢的物质进行接触，该催化剂是选自Pd、Pt、Ni、Cu、Rh以及可溶性金属催化剂。
71.根据权利要求68的方法，其中所述1，4-二酰基和1-酰基取代的化合物分别包括1，4-二甲酰基和1-甲酰基取代的化合物，其中所述烷基酯包括甲酯。
72.一种制备Gly·L-Asp的方法，包括下列步骤(a)将氯乙酰氯加入到L-天冬氨酸中，生成含有氯乙酰基-L-天冬氨酸的反应混合物;(b)将氨加入到上述氯乙酰基-L-天冬氨酸中;(c)将步骤(b)生成的反应混合物在约50℃至约250℃加热并持续足以生成Gly·Asp的时间。
73.根据权利要求72的方法，其中步骤(c)中所述反应时间范围是约1秒至约3小时。
74.根据权利要求20的化合物，该化合物是1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
75.根据权利要求22的方法，其中所生成的化合物包括1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
76.根据权利要求26的化合物，该化合物是1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
77.根据权利要求28的方法，其中所述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，并且所生成的化合物包括1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
78.根据权利要求42的化合物，该化合物是N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。
79.根据权利要求44的方法，其中所述醇包括甲醇，所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，其中所述N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物包括N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。
80.根据权利要求33的化合物，该化合物是N-甲酰基-5-(甲酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
81.根据权利要求35的化合物，该化合物是N-甲酰基-5-(甲酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
82.根据权利要求37的方法，其中所生成的化合物包括N-甲酰基-5-(甲酰氧基苄基)-3，6-二酮基哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
全文摘要
本发明涉及制备α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯(α-APM)的方法，该方法使用5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(AP—DKP)或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯(MAP-DKP)或其相应的1-酰基衍生物(1-酰基AP-DKP和1-酰基MAP-DKP)作原料，本发明还涉及该方法中生成的新中间体。
文档编号C07C237/12GK1057835SQ9110247
公开日1992年1月15日 申请日期1991年3月15日 优先权日1990年3月15日
发明者J·B·希尔, 何子乐, M·R·约翰逊, G·韦伯, R·A·艾力克森, R·克利斯 申请人:纽特拉斯威特公司
技术领域：
本发明涉及由二酮基哌嗪(DKP)生产天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯(α-APM)的方法，以及在该方法中生成的新中间体。本发明尤其涉及用1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(1-酰基AP-DKP)或1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯(1-酰基MAP-DKP)生产α-APM的方法。利用本方法，不使用L-苯丙氨酸或其甲酯作起始物料即可生产α-APM。
α-APM是一种用作甜味剂的化合物，生产它的典型方法是使用L-苯丙氨酸或L-苯丙氨酸甲酯作为偶合起始的物料之一，在生产方法中它们是主要的成本因素。
在Mita等的美国专利4780561中曾进行过不用L-苯丙氨酸甲酯生产α-APM的尝试，该专利提出了一种通过使5-苄基-3，6-二氧代-2-哌嗪乙酸(AP-DKP)或其甲酯与盐酸反应制备α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐，然后将其中和制备α-APM的方法。该5-苄基-3，6-二氧代-2-哌嗪乙酸的制备方法是使N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸在甲醇中，在一种酸的存在下进行脱甲酰基化作用和双酯化作用生成α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯，然后在中性或弱碱性条件下处理该二甲酯，生成5-苄基-3，6-二氧代-2-哌嗪乙酸甲酯(MAP-DKP)，然后用一种碱的水溶液处理MAP-DKP，生成AP-DKP。该方法仍然需要L-苯丙氨酸作为原料，它大大增加了该方法的成本。
Shinohara等的美国专利4634790公开了一种制备α-APM或其氢卤酸盐的方法，是在甲醇和水的混合溶剂中用一种强酸使3-苄基-6-羧甲基-2，5-二酮基哌嗪(α-AP-DKP)进行部分水解。在α-APM的工业生产过程中，α-AP-DKP通常是作为副产物得到的。
日本公开申请01-100161公开了5-苄基-3，6-二氧代-2-哌嗪乙酸(AP-DKP)和其衍生物。该化合物的制备方法是使C6H5CH2CH(NH2)CONH-CH(CO2R1)CH2CO2R2(R1＝C1-C4烷基，R2＝H、C1-C4烷基)与pH值大于或等于4.5的水溶液或水-有机溶剂混合物进行反应。将AP-DKP在含有HCl的甲醇中加热，制得APM-HCl。
Hubbs在Research Disclosure 28136(1987年9月公开)中公开了不用L-苯丙氨酸或其甲酯作起始物料而合成N-乙酰基α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯的方法。该化合物转化成α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸，然后可将其转化成天冬氨酰苯丙氨酸甲酯。
Takahashi等的美国专利4897507公开了一种使3-苄基-6-羧甲基-2，5-二酮基哌嗪或其甲酯在实质上无水的甲醇溶剂中反应，以制备α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯的方法，所生成的二甲酯在酸性含水甲醇溶液中反应，转化成α-APM(盐酸盐)。
所希望的是不需要使用L-苯丙氨酸或L-苯丙氨酸甲酯作原料，而由二酮基哌嗪制备α-APM，本发明就是提出了这样一种方法。
本发明提供了新的方法来制备1-酰基AP-DKP和1-酰基MAP-DKP，它们进一步可容易地转化成α-APM。制备这些合成物在合成过程中未使用L-苯丙氨酸或其甲酯。在本发明方法的实施过程中，生成了下列新的中间体化合物和几个类别的中间体化合物1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸;
1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯;
1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸;
1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯;
5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸;
5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯;
1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-(S)-乙酸烷基酯;
1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸;
1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸烷基酯;
N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯。
根据其一实施方案，本发明提供了一种制备天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-APM)的方法，其中包括按下列顺序的几个步骤(a)向3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸中加入一种或多种酰化试剂，生成1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物;
(b)在一种碱存在下，向上述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物中加入苯甲醛，生成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物;
(c)将上述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物氢化，制得1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物;
(d)将上述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物部分水解，制得α-APM或其盐。
在上述产物和方法中，所述酰基基团是式RC(＝0)-基团，其中R表示氢或有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族有机基团。关于二酰基化合物，各个酰基基团可以相同或不同。在优选的实施方案中，酰基基团包括乙酰基。
在上述合成反应中，该3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸起始化合物可以用三步反应来制备，其中ⅰ)使1-天冬氨酸与氯乙酰氯反应，生成氯乙酰基天冬氨酸;
ⅱ)使氯乙酰基天冬氨酸与氨反应生成其二肽，即Gly.Asp;
ⅲ)将Gly.Asp环化(通过加热)，生成所要的二酮基哌嗪，即3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(环Gly.Asp)。
本发明的另一个实施方案提供了第二种制备天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-APM)的方法，其中包括按下列顺序的几个步骤(a)向一种3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中加入一种或多种酰化试剂，生成1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-(S)-乙酸烷基酯化合物;
(b)在一种碱存在下，向上述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中加入苯甲醛，生成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;
(c)将上述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物氢化，生成1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;
(d)在中性或碱性条件下，向上述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中加入醇，生成含有N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯的混合物;
(e)向上述(d)步骤生成的混合物中加入HCl和CH3OH;其中的酰基和二酰基定义如上;其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
在又一个实施方案中，不进行上述方法的步骤(d)即在中性或碱性条件下生成含有N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯的混合物，而是直接在酸性条件下，完成1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯转化成α-APM或其盐的步骤。
在特别优选的实施方案中，将上述两种方法中离析出α-APM后剩余的母液转化成5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(AP-DKP)，或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯(MAP-DKP)，然后进一步将它们部分水解，生成额外的α-APM，这样便提高了该方法的总产率。
由此可见，本发明的目的是提供新的制备α-APM的方法和制备α-APM所必需的中间体。
本发明进一步的目的是提供新的化合物，它们对于α-APM的制备是特别有用的中间体。
当参看后文对优选实施方案的详细描述后，本发明的这些以及其它目的对于本领域的专业人员来说将是显而易见的。
在描述优选的实施方案时，为明确起见将使用一些术语。这些术语是应用于所述的实施方案，以及所有那些为了相似的目的、以相似的方法操作而达到相似结果的技术等效方案。
用本发明的优选的方法制备α-APM的整个反应流程可用下图说明(Me＝甲基，Ac＝乙酰基，Ph＝苯基，Base＝碱)。
参照反应流程图，1-酰基AP-DKP化合物可按下述路线制备首先在如乙酸乙酯的溶剂中，使L-天冬氨酸与氯代乙酰氯反应，生成氯代乙酰基天冬氨酸，也可以选择其它溶剂，包括乙酸甲酯、乙酸丙酯等等。然后使氯乙酰基天冬氨酸与氨，通常是氨水进行反应，生成Gly.Asp，这是一种具有二个羧基基团和单一的伯胺基团的二肽。与氨的反应可在室温进行，但是需要进行相当长时间，即12小时或更长。为了缩短反应时间，氨化反应可在较高温度进行。温度可以在约50℃至约250℃范围内，进一步说来，相应于反应时间在大约3小时和大约1秒钟之间的反应速率。
该方法的下一步骤是借助于环化反应形成第二个肽键。Gly.Asp本身可以环化形成3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(环Gly.Asp)。另一方式，可在环化前将Gly.Asp的一个羧基(或者最好是两个羧基)在酸(例如HCl，H2SO4)或酸性树脂存在下用具有1至5个碳原子(如甲基、乙基、丙基、异丁基等)的低级烷醇酯化。甲醇是特别优选的。在此情况下，在环化前就形成了下面的中间体的酸式盐
可以选择其它起始原料进行环化引入到DKP，包括Gly.Asp的β-甲基酯。本专业领域的熟练技术人员很容易了解到，可以用作为生成DKP的前体的其它化合物。
Gly.Asp的环化通常通过加热该化合物来完成。当加热Gly.Asp以生成第一DKP(环Gly.Asp)时，将二肽在约100℃至约210℃之间加热约30分钟至约5小时。特别优选但不是必须的是使加热步骤在低级烷基羧酸，如乙酸、丙酸或新戊酸存在下进行。当在低级烷基羧酸中加热时，加热温度可降低至约100℃至约130℃之间，加热时间可缩短至约1小时至约3小时之间。另外方式，其它溶剂，如羟类、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜可用作加热介质。
用碱中和Gly.Asp的酸式盐进行Gly.Asp烷基酯的环化作用。碱可以采用有机碱、无机碱或碱性树脂的形式。
然后在环Gly.Asp或其烷基酯之中加入一种或多种酰化剂以生成新的化合物1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸和1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯。术语“酰基”表示式RC(＝0)-的基团，其中R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团。“二酰基”表示可以相同或不同的二个酰基。酰基的实例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、苯甲酰基等，特别优选的酰基包括甲酰基和乙酰基。术语“烷基”表示具有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
每一当量的DKP要加入至少2当量的酰基基团。在一优选的实施方案中，酰化剂为乙酐，因此生成了1，4-二乙酰基取代的化合物，或者酰化剂为甲乙酐(混合酸酐)，因此生成了1，4-二甲酰基取代的化合物。本技术领域公知的其它酰化剂如乙酰氯和和烯酮可用来代替乙酐或甲乙酐。还可以加入催化剂，如二甲氨基吡啶或乙酸钠。酰化剂的加入通常在加热的情况下进行，其范围在约25℃至约130℃之间。酰化反应可在任何惰性溶剂，如乙酸乙酯、甲苯、乙酸异丙酯、二甲苯、乙酸等之中进行。另外方式，过量的酰化剂可有作为反应溶剂的附加作用。使用过量的乙酸酐就是这方面的一个实例。
在环Gly.Asp的情况下，需要在酰化反应前把连接于第2个碳原子上的羧甲基上的羧基氢原子用一个保护基取代，以防止酰化反应中氢原子的干扰。保护基的实例包括三甲基甲硅烷基、叔丁基和叔丁基二甲基甲硅烷基。其它保护基团是本领域熟练技术人员所知道的。
在反应序列的下一个步骤中，在碱存在下向1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪中间体(游离酸或烷基酯)之中加入苯甲醛，生成下述种类新化合物中的前者或后者1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸类，或1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯类(1-乙酰基或者1-甲酰基化合物是特别优选的)。醇盐化合物特别适于在上述反应中用作碱。具体的实例包括叔丁醇钠、叔丁醇钾以及叔戊醇钠。苯甲醛的加入是在惰性溶剂，如四氢呋喃或叔丁醇存在下进行，并且优选在约-40℃至约100℃的温度范围内进行。
在生产1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸烷基酯时，首先生成中间体1-酰基-5-(酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)乙酸烷基酯(优选的酰基是乙酰基或甲酰基)。实际上，这个中间体不需要专门离析出来，而是将1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)乙酸烷基酯通过1-酰基-5-(酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯中间体直接转化成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯。当没有将其专门离析的情况下，确信优选的甲酰基化合物是N-甲酰基-5-(甲酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。在进行离析的情况下，在中间体中加入碱化合物，接着加热该混合物，并在其后用酸使之骤停而完成5-(酰氧苄基)的转化。上述加碱通常在例如环己烷惰性溶剂中进行。同时不需特别的检验，就能确信在亚苄基加入游离酸以后生成了5-(酰氧苄基)中间体，即生成了1-酰基-5-(酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
在游离酸中间体的情况下，如果在第2个碳原子上取代的羧甲基的羧基氢原子已被非低级烷基的保护基团所取代，应该把保护基团用氢原子或烷基基团(优选的是甲基)置换，以使DKP回到乙酸或乙酸烷基酯的形式。保护基的置换在加入苯甲醛之后进行。
在另一实施方案中，加入甲醇或其它适当的溶剂，如水，使1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸或1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物脱酰基。反应完成后就生成5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸和-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯新化合物。
上述反应的结果所形成的中间体是部分不饱和的。氢化这些中间体可形成所需要的1-酰基AP-DKP、1-酰基AP-DKP烷基酯、AP-DKP和AP-DKP烷基酯化合物，其系统命名分别是1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸、1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯、5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸、和5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸烷基酯。该转化可在氢化催化剂存在下用氢气或释放氢的物质来完成。可用的催化剂的实例包括载体上的Pd、载体的例子包括C、BaCO3、BaSO4、氧化铝、CaCO3及其类似物;载体上的Pt;Ni催化剂;Cu催化剂;Rh催化剂和可溶性金属催化剂。氢化反应通常在约-20℃至约150℃温度范围内进行。氢化反应可在多种的、氢化反应中通常使用的惰性溶剂中进行，其中，正如本领域中已知的，溶剂的选择主要决定于催化剂的选择。在优选的实施方案中，生成了1-甲酰基AP-DKP、1-甲酰基AP-DKP烷基酯、1-乙酰基AP-DKP或1-乙酰基AP-DKP烷基酯。
AP-DKP、AP-DKP烷基酯、1-酰基AP-DKP和1-酰基AP-DKP烷基酯都可以很容易地转化成α-APM，为了把上面列出的多种DKP中任何一种转化成α-APM的酸式盐，所有的都要求DKP是部分水解的，这通常包括在升高的温度向DKP中加入甲醇和酸，一般是盐酸，接着混合一段时间使其足以能形成α-APM盐酸盐。一经形成盐之后，用常规方法，如中和，将该盐酸盐转化成α-APM，然后将α-APM由残留的母液中离析出来。各种DKP的部分水解以形成α-APM在前面引用的USP 4634790和4897506中有更详细的叙述。
在另一实施方案中，不用DKP化合物的酸性水解来生成α-APM，其水解反应是在碱性或中性条件下进行的。在这个实施方案中，把含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的醇，优选的是甲醇，在碱性或中性条件下加入到1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物，优选的是N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯或N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。这些二烷基化合物中的“烷基”可以相同或不同，包括含有1至7个碳原子的直链或支链基团。这些N-酰基化合物是新的化合物。
在实践中，于温度范围为由约-20℃至约120℃，优选从约20℃至60℃，时间范围由约1分钟至约10天，优选从约15分钟至约24小时的条件下，与该醇一起加入碱使此水解反应的pH保持在约6.5至约14之间，优选在约7约8.5之间。可加入的优选的碱包括乙酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化锂、氨、有机胺碱类和钾碱类。例如，每当量的1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯中加入0.25当量的乙酸钠可得到满意的结果。
实际上，除了生成N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物之外，还生成相当量的5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯(MDKP)。在实践中，所形成的该二种化合物之比率范围由50∶50至67∶33，65∶35的比例实际上已经达到了。很高的N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物相对产率是出人意料之外的，因为酰亚胺官能团的断裂可能会发生在两个羰基中的任何一个上，结果是或者脱酰基成为MDKP，或者开环成为N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯。在酸性条件下，脱酰基作用是仅有的反应。在碱性或中性条件下观察到的选择性是出乎意料的，因为位阻理论会提出脱酰基将优先发生，基于电子效应理论可预料在二个羰基之间的差别仅仅是轻微的。
用甲醇、酸，优选的是盐酸和任选用水使这二种化合物进一步水解，以高比率的所需产物与不需要产物之比得到α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯甲基酯(MAPM，需要的)和α-L-苯丙氨酸-L-天冬氨酰基甲酯甲基酯(PAMM，不需要的)的混合物。例如，用上述工艺步骤可得到MAPM与PAMM的最终比率为90∶10。用已知技术，即将额外的甲醇、水和酸加入MAPM中，能将MAPM很容易地转化为α-APM。
以最初合成的DKP的量为基准，上述方法能得到最高达80%的α-APM。从母液中离析出α-APM以后，残留的母液含有一定量的Asp、Phe、Asp.Phe、Phe.Asp以及它们的甲基酯(和一些未离析的APM(HCl)。将这些物料转化成AP-DKP或MAP-DKP(AP-DKP的甲基酯)，这样就能合成出额外的α-APM，一般将母液的pH调至约1.5-6.0，并把母液加热至约40℃至约110℃，直至二肽及其甲基酯发生环化。通过冷却和过滤将各种DKP离析。
为了提高母液中二肽转化成AP-DKP或MAP-DKP的转化率，环化反应可以在有任选的共溶剂存在下进行。一种适用的共溶剂是乙酸，其它的共溶剂可包括甲酸、丙酸、其它羧酸和其它惰性溶剂。当使用共溶剂时，为了离析DKP，任选将共溶剂从混合物中汽提出来，并将母液冷却过滤。
一经离析之后，如上述通过部分水解和中和将AP-DKP和(或)MAP-DKP转化成α-APM。用此方法进行母液的再转化可根据需要而多次重复。结果，由母液中得到了额外的α-APM，α-APM的总产率可高达90%。
由下述非限制性实施例进一步描述本发明。
实施例1-以直接酰化使L-Asp氯乙酰基化在装有冷凝器的1升三颈圆底烧瓶中，边搅拌边将53.24g L-Asp、32ml氯代乙酰氯和400ml乙酸乙酯加热至回流，反应混合物回流24小时，形成浆液，把浆液冷却至25℃并过滤，滤饼用50ml乙酸乙酯洗涤，干燥，在40-50℃减压蒸馏除去乙酸乙酯。在固体滤饼中加入85ml水，搅拌该溶液并将其放置过夜。从溶液中去除水，析出半结晶残余物，把残余物同300ml乙醚搅拌、过滤、洗涤并干燥得到最终产物。风干后得到66.95g氯乙酰基天冬氨酸，为理论产率的80%。
实施例2-由氯乙酰基天冬氨酸生成Gly.Asp室温条件下将5.0g氯乙酰基天冬氨酸在28%的NH4OH水溶液中搅拌24小时，为一透明溶液。此后，真空加热至50℃去除NH3和H2O。加入20ml水得到透明溶液，接着加入20ml乙酸。在搅拌的同时用100ml甲醇稀释该溶液，沉淀析出Gly.Asp结晶物。经风干的产物的产率接近于定量的理论产率。其中含NH 4量为0.12%。HPLC分析确认已生成Gly.Asp。
实施例2A-用高温氨化步骤生成Gly.Asp将39.9g L-Asp于300ml乙酸异丙酯中的的浆液加热回流，加入9.6ml氯代乙酰氯。在氮气吹扫条件下将该浆液回流4小时，热过滤，将滤液减压汽提，得到19.75g白色固体物。将10g此物料溶于30ml水，搅拌2小时，并加入到170ml 28%氨水(NH4OH)中。将该溶液在压力容器中于105℃加热10分钟，立即冷却至75℃，然后排空并继续冷却至45℃。将该溶液减压浓缩，加水至总重为30g。用12N盐酸将溶液的pH调至3.0，并用30分钟的时间把该溶液加入到正在回流的甲醇中。冷却过夜后，过滤收集产物并干燥，Gly.Asp的产率按氯代乙酰氯计为57%。
实施例2B-由氯乙酰基天冬氨酸生成Gly.Asp把213g L-天冬氨酸于800ml乙酸异丙酯中的浆液加热回流，并用63ml氯代乙酰氯处理。将浆液回流3.5小时，过滤，滤液在减压下汽提。残余物用200ml乙酸异丙酯和84ml水处理，搅拌至溶解，去除含水层。将有机物层萃取4次，每次用42ml水，合并的水层用2.00升28%氨水处理。在放置过夜后，将溶液减压汽提，用12N HCl处理至pH3.45。取其约一半的物料进行结晶。用30分钟的时间将含水浓缩液滴加入1.00升甲醇中，搅拌65小时，冷却至10℃，过滤收集产物。按氯代乙酰氯计，Gly.Asp的产率为60%。
实施例3-Gly.Asp环化成环Gly.Asp用三种不同的方法环化Gly.Asp。
方法(a)将1.00g Gly.Asp和20ml丙酸回流(128℃)搅拌2小时，随之溶液成透明状。去除溶剂得到c-Gly.Asp，产率83%。
方法(b)在真空度1mm Hg，于一个管中将0.10g Gly.Asp在150-160℃加热30分钟。c-Gly.Asp的产率为57%。
方法(c)将1.00g Gly.Asp和10ml二甲亚砜在120℃加热3小时，在此期间，最初的无色溶液转变成橙色。用N2气流以及抽真空至0.1mm Hg并过夜，去除溶剂。产物为半结晶，回收的产率为90%。
实施例4-Gly.Asp二甲酯的形成于室温将0.5g Gly.Asp于10ml含10% HCl的甲醇溶液中搅拌16小时。减压汽提溶剂后基本上定量地得到Gly.Asp二甲酯的盐酸盐。
实施例5-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成用0.5g Gly.Asp制备Gly.Asp二甲酯粗制品的溶液，将粗品减压汽提，再溶于10ml甲醇，用强碱性树脂处理至pH8.4。将溶液过滤，将之于室温放置24小时，汽提后得到0.31g 3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例5A-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将75ml Dowex MSC-1树脂(用甲醇洗涤过)在200ml甲醇中的浆液用9.7g Gly.Asp处理，并加热回流。回流3小时后，将温度降低至60℃，并用28%的氨水(NH4OH)处理浆液使pH为8.5。在60℃再维持1.5小时后，将树脂滤出，洗涤，将滤液减压汽提，得到3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，产率98%。
实施例5B-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将5.0g Gly.Asp和3.1g H2SO4在100ml甲醇的溶液于60℃搅拌5.5小时。使溶液冷却至室温并通过一个75ml弱碱性树脂柱，柱子用甲醇洗涤，将洗涤液与该溶液合并，加入甲醇氨将溶液的pH调至8.5。在60℃加热5小时以后，将溶液冷却至室温并减压汽提，得到含有4.41g 3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的白色固体物，产率为90%。
实施例6-1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸的形成将172mg(1mmol)环Gly.Asp在20ml乙酸乙酯中形成浆液，将0.566ml(6mmol)乙酐和作为催化剂的4mg二甲氨基吡啶(DMAP)加入该浆液中，将混合物加热回流25小时，冷却至室温。混合物用水洗涤，用MgSO4干燥，真空浓缩得到121mg 1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸，产率为47%。
实施例7-1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将372mg(2mmol)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在10ml乙酸酐中的浆液加热到50℃以上，在此温度搅拌反应混合物直至反应完全，然后浓缩该产物，得到基本是定量产率的1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例7A 1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将100g 3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在1300ml乙酸酐中的溶液在100℃加热7小时，然后减压汽提，残余物溶于1000ml乙酸丁酯，过滤，用pH为6.3的缓冲液洗涤，用硫酸钠干燥，再次减压汽提，得到油状物1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，产率为96%。
实施例8-1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成于5℃，向2.15g 1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯和0.845g苯甲醛在20ml四氢呋喃中的溶液加入0.964g叔戊醇钠。该浆液在5℃搅拌15分钟，然后使之升温至室温并再搅拌7小时。混合物用乙酸骤停反应，倾入水中，并用二氯甲烷萃取，将有机物层干燥并浓缩，得到80%的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例8A-1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成向2.90g(100mmol)1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在15ml乙酸丁酯的溶液中加入1.06g(10mmol)苯甲醛。将反应混合物冷却至-20℃，并在-20℃加入溶于10ml环己烷的1.05g(11mmol)叔丁醇钠。在加入该碱以后，将反应混合物在-20℃搅拌1小时，然后加入0.630ml(11mmol)的乙酸。反应混合物在70℃加热10小时，冷却至室温，用水洗涤，将有机物层干燥，浓缩，得到90%的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代-2(S)-乙酸甲酯。
实施例8B-1-乙酰基-5-(乙酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成向48.64g(0.180mol)1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在250ml乙酸丁酯中的溶液加入19.10(0.180mol)苯甲醛。将反应混合物冷却至-20℃，并在7℃加入溶于200ml环己烷的19.03g(0.198mol)叔丁醇钠。加入该碱以后，再将反应混合物于-20℃搅拌1分钟，然后用11.3ml(0.198mol)乙酸骤停反应。使反应混合物升温至室温并浓缩，得到56%的1-乙酰基-5(乙酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯粗制品，硅胶色谱分析得到纯物质，玻璃状固体物。
实施例8C-由1-乙酰基-5-(乙酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯制取1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯向1.50g(4mmol)1-乙酰基-5-(乙酰氧苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在5.5ml乙酸丁酯和4.5ml环己烷的混合物中的溶液加入0.328g(4mmol)乙酸钠。将混合物在70℃加热24小时，在冷却至室温并去除溶剂后，该粗制反应混合物给出74.5%的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例9-1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成向3.16g 1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在95ml甲醇中的溶液加入1.2g的4%Pd/C，用水加湿至50%。将反应混合物置于50磅/平方英寸氢气中1小时，用硅藻土(Celite)塞滤出催化剂，浓缩得到的滤液，给出85%的1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
预期实施例10-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸的形成在室温，将pH＝8的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸的含水甲醇溶液进行搅拌，直至水解反应完成，并减压除去溶剂，得到所要的脱酰基产物。
预期实施例11-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成在室温，将pH＝8的1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的含水甲醇溶液进行搅拌，直至水解完全，并减压除去溶剂，得到所要的脱酰基粗制品。
实施例12-由5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯制备α-APM(HCl)
将40ml 12N HCl和121ml甲醇的溶液加热至60℃，边搅拌边用10分钟时间加入16g MAP-DKP，将该混合物在60℃再搅拌15分钟，在此段时间里，固体物完全溶解。将该溶液在旋转蒸发器中汽提成为重33.3g的残余物。在分析HCl、甲醇和水的含量之后，将该混合物配制成如下浓度甲醇-3.0%，HCl-13.5%，水-36.5%。将该混合物在室温振荡7天，过滤收集固体APM(HCl)，所得APM(HCl)的产率为47%。
实施例13-由Ac-MDKP转化为MAPM(HCl)在室温，将2.16mg/ml Ac-MDKP在10(重量)%HCl/甲醇中的溶液搅拌60小时，然后用高效液相色谱分析形成MAPM·HCl的转化率，按最初Ac-MDKP用量计，MAPM的产率为86%。
实施例14-由母液转化成AP-DKP或MAP-DKP(a)AP-DKP转化成APM·HCl所得的母液和洗涤液合并后再转化成DKP/MDKP的混合物。在此溶液中，每克溶液含有0.577mM的肽。该混合物包含Asp、Phe、Asp.Phe、Phe.Asp以及甲酯(8种组分)。将15.4g该液体样品用4.32g 30%氨水和15ml水处理，得到pH＝4.9的溶液，将该溶液加热回流6.5小时，室温搅拌过夜，再回流4小时。将混合物冷却至15℃，过滤收集固体物。滤饼(固体物)中DKP/MDKP的产率为49%，而DKP/MDKP的总产率(存在于固体和液体中的量)为53%。
(b)将15.39g实施例6(a)所述液体用4.5ml 30%的氨水处理，成为pH＝5.2的溶液，该溶液用35ml乙酸处理并加热回流5小时。将混合物减压浓缩，于15ml水中再次形成浆液，过滤、干燥。滤饼(固体物)中DKP/MDKP的产率为51%，而DKP/MDKP的总产率(存在于固体和液体中的量)为59%。
实施例15-由1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯生成N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯用乙酸钠调节1mmol 1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在10ml甲醇中的溶液至pH＝7.5。将反应混合物在60℃加热4小时，然后冷却至室温，将混合物减压浓缩，得到N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯与MDKP之比为64∶36。
实施例16-1-乙酰基-5-(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯转化成为MAPM将2.50g 1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯于75ml甲醇中的溶液用0.163g乙酸钠处理并加热至60℃，1.5小时后将该溶液减压汽提得到白色固体物，其中含有比例为70/30的N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯/5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。将粗制的固体物溶于11.5g 12%的HCl在甲醇中溶液，回流加热6小时，再加入2.3g HCl/甲醇溶液，并且继续加热10小时，高效液相色谱分析表明MAPM与PAMM混合物中的比例为8.4/1.0。
实施例17-1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成将15.0g 3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯在50ml甲乙酐(混合酸酐)中的溶液在55℃加热12小时，然后减压汽提。将残余物再溶于50ml混合酸酐，并且在55℃再加热12小时，然后减压汽提，得到1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，为油状物。根据高效液相色谱知产率为50%。
实施例18-1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸甲酯的形成在-20℃，向2.42g 1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯和1.06g苯甲醛在15ml乙酸异丙酯中的溶液加入溶于10ml乙酸异丙酯的1.06g叔丁醇钠。加入该碱以后，将反应混合物于-20℃搅拌1小时并加入114μl乙酸，然后将反应混合物在70℃加热1小时，冷却至室温，用水洗涤。有机物层经干燥、浓缩，根据高效液相色谱得知，给出50%的1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例19-1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的形成向100mg 1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯于10ml四氢呋喃的溶液中加入35mg5%的Pd/C催化剂。将反应混合物在50磅/平方英寸氢气中放置3小时，用硅藻土(Celite)塞滤出催化剂，将得到的滤液浓缩，根据高效液相色谱得知，给出87%1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
实施例20-由1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯生成N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯用10%的碳酸钠水溶液调节5mg1-甲酰基-5-(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯于0.5ml甲醇中的溶液至pH＝8.0，并在60℃加热3小时，将混合物减压浓缩，给出比例为1∶2.3的N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲基酯和MDKP。
权利要求
1.1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物，其中各个酰基基团可以相同或不同，并且是式RC(=0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团。
2.根据权利要求1的化合物，该化合物是1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
3.根据权利要求1的化合物，该化合物是1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
4.一种制备1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物的方法，其中各个酰基基团可以相同或不同，并且是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，该方法包括向3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸中加入一种或多种酰化试剂的步骤，对于每当量的3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸，提供2当量的酰基基团。
5.根据权利要求4的方法，包括将所述3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸与酰化试剂混合物加热到约25℃至130℃的附加步骤。
6.根据权利要求4的方法，其中所述添加步骤是在惰性溶剂存在下进行的。
7.根据权利要求5的方法，其中所述酰化试剂包括乙酸酐，其中所述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物包括1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
8.根据权利要求4的方法，其中所述酰化试剂包括甲乙酐，其中所述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物包括1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
9.1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物，其中的酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R代表氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团。
10.根据权利要求9的化合物，该化合物是1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
11.根据权利要求9的化合物，该化合物是1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
12.1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-(2)-乙酸烷基酯化合物，其中各个酰基可以相同或不同，并且是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
13.根据权利要求12的化合物，该化合物是1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
14.根据权利要求12的化合物，该化合物是1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
15.一种制备1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，其中各个酰基可以相同或不同，并且是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，该方法包括向3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中加入一种或多种酰化试剂的步骤，对于每当量3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯，提供2当量的酰基基团。
16.根据权利要求15的方法，包括将所述3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯与酰化试剂混合物加热到约25℃至130℃的附加步骤。
17.根据权利要求15的方法，其中所述添加步骤是在惰性溶剂中进行。
18.根据权利要求16的方法，其中所述酰化试剂包括乙酸酐，所述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1，4-二乙酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
19.根据权利要求15的方法，其中所述酰化试剂包括甲乙酐，所述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1，4-二甲酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
20.1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
21.根据权利要求20的化合物，该化合物是1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
22.一种制备1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，该方法包括在一种碱和一种惰性溶剂存在下，将苯甲醛加入到1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中的步骤。
23.根据权利要求22的方法，包括将反应介质保持在约-40℃至约100℃温度的附加步骤。
24.根据权利要求23的方法，其中所述碱包括醇盐化合物。
25.根据权利要求23的方法，其中生成的化合物包括1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
26.1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
27.根据权利要求26的化合物，该化合物是1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
28.一种制备1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，该方法包括在惰性溶剂中将1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物氢化的步骤。
29.根据权利要求28的方法，其中所述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，所生成的化合物包括1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
30.根据权利要求28的方法，其中所述氢化步骤包括在有选自Pd、Pt、Ni、Cu、Rh和可溶性金属催化剂的氢化催化剂存在下，将所述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物与氢气或能释放氢的物质进行接触。
31.5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
32.5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物，其中的烷基包括含1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
33.1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸化合物，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团。
34.根据权利要求33的化合物，该化合物是1-乙酰基-5-(乙酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
35.1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物，其中酰基是式RC(＝0)-的基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
36.根据权利要求35的化合物，该化合物是1-乙酰基-5-(乙酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
37.一种制备1-酰基-5-(酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，其中酰基是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，并且其中的烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，该方法包括下列步骤(a)在一种碱和一种惰性溶剂存在下，将苯甲醛加入到1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2-(S)-乙酸烷基酯化合物中;(b)用酸使该化合物停止反应;(c)离析所制备的化合物。
38.根据权利要求37的方法，包括附加步骤(d)将碱加入到步骤(c)生成的产物中，制备1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物。
39.根据权利要求37的方法，其中所述碱包括醇盐化合物。
40.根据权利要求37的方法，其中所述产物包括1-乙酰基-5-(乙酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
41.根据权利要求38的方法，其中所述(d)步骤的产物包括1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
42.N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物，其中酰基是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团，烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团，二烷基包括两个烷基基团，它们可以相同或不同。
43.根据权利要求42的化合物，该化合物是N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。
44.一种制备N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物的方法，该方法包括下列步骤(a)在碱性或中性条件下，将含1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的醇加入到1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯中;(b)离析步骤(a)生成的N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物;其中酰基是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团;烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团;二烷基包括两个烷基基团，它们可以相同或不同。
45.根据权利要求44的方法，其中所述的醇包括甲醇，所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯包括1-乙酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，其中所述的N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物包括N-乙酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。
46.根据权利要求45的方法，其中步骤(a)是在约20℃至约60℃的温度进行约15分钟至约24小时。
47.根据权利要求45的方法，其中步骤(a)是在约7.0至8.5范围的pH值条件下进行。
48.根据权利要求47的方法，其中步骤(a)的碱性或中性条件是通过与甲醇一起加入一种碱而得到的，该碱选自乙酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化锂、氨、有机胺碱以及钾碱。
49.根据权利要求45的方法，包括附加步骤(c)向步骤(b)的产物中加入HCl、H2O和CH3OH，生成天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-APM)或其盐。
50.一种制备天冬氨酰苯丙氨酸甲酯(α-APM)或其盐的方法，包括按下列顺序的步骤(a)将一种或多种酰化试剂加入到3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;(b)在一种碱存在下，将苯甲醛加入到上述1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;(c)将上述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物氢化，生成1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;(d)将上述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物转化成α-APM或其盐;其中各个酰基可以相同或不同，并且是式RC(＝O)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族的有机基团;其中烷基包括含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的烷基基团。
51.根据权利要求50的方法，包括下列附加步骤(e)将步骤(d)生成的母液残余物转化成5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯;(f)将上述5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪2-(S)乙酸甲酯部分水解，成为α-APM或其盐。
52.根据权利要求51的方法，其中步骤(e)包括将所述母液的pH值调到约1.5至约6.0，并将所述母液加热到约40℃至约110℃。
53.根据权利要求51的方法，其中在进行转化成5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯的步骤之前，先将一种共溶剂加入到所述母液中。
54.根据权利要求53的方法，其中所述共溶剂是选自乙酸、甲酸和丙酸。
55.根据权利要求50的方法，其中所述1，4-二酰基和1-酰基取代的化合物分别包括1，4-二乙酰基和1-乙酰基取代的化合物，其中所述烷基酯包括甲酯。
56.根据权利要求50的方法，其中所述3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯是由下式化合物环化生成的，
其中R＝H或CH3。
57.根据权利要求56的方法，其中所述下式化合物
其中R＝H或CH3，是由Gly·Asp与甲醇在一种酸存在下进行反应生成的。
58.根据权利要求57的方法，其中所述Gly·Asp是通过L-天冬氨酸与氯乙酰氯反应生成氯乙酰基天冬氨酸，随后使该氯乙酰基天冬氨酸再与氨反应而制备的。
59.根据权利要求55的方法，其中所述酰基化试剂包括乙酸酐。
60.根据权利要求50的方法，其中所述1，4-二酰基和1-酰基取代的化合物分别包括1，4-二甲酰基和1-甲酰基取代的化合物，其中所述烷基酯包括甲酯。
61.根据权利要求60的方法，其中所述酰基化试剂包括甲乙酐。
62.根据权利要求50的方法，其中所述氢化步骤包括在一种惰性溶剂和一种氢化催化剂存在下将所述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物与氢气或能释放氢的物质进行接触，该催化剂选自Pd、Pt、Ni、Cu、Rh和可溶性金属催化剂。
63.根据权利要求50的方法，其中所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯化合物，并且其中步骤(d)包括将所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯化合物进行部分水解，生成α-APM或其盐。
64.根据权利要求50的方法，其中步骤(d)包括(ⅰ)在碱性或中性条件下，将含有1至7个碳原子的直链、环状、芳族或支链的醇加入到所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成包括N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物的混合物;(ⅱ)向步骤(ⅰ)生成的混合物中加入HCl、H2O和CH3OH。
65.根据权利要求64的方法，其中步骤(ⅰ)是在约20℃至约60℃的温度进行约15分钟至约24小时。
66.根据权利要求65的方法，其中步骤(ⅰ)是在约7.0至约8.5范围的pH值条件下进行。
67.根据权利要求66的方法，其中步骤(d)中的碱性或中性条件是通过与所述甲醇一起加入一种碱而得到的，该碱是选自乙酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、氢氧化锂、氨、有机胺碱以及钾碱。
68.一种制备1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物的方法，包括下列步骤(a)在一种碱存在下，将苯甲醛加入到1，4-二酰基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物中，生成1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;(b)将上述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物氢化，生成1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物;其中各个酰基可以相同或不同，并且是式RC(＝0)-基团，其中的R表示氢、含有1至8个碳原子的直链、支链、环状或芳族基团;其中烷基包括含有1至5个碳原子的直链或支链烷基基团。
69.根据权利要求68的方法，其中所述1，4-二酰基取代的化合物和1-酰基取代的化合物分别包括1，4-二乙酰基和1-乙酰基化合物，其中所述烷基酯包括甲酯。
70.根据权利要求69的方法，其中所述氢化步骤包括在一种氢化催化剂存在下，将所述1-乙酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物与氢气或能释放氢的物质进行接触，该催化剂是选自Pd、Pt、Ni、Cu、Rh以及可溶性金属催化剂。
71.根据权利要求68的方法，其中所述1，4-二酰基和1-酰基取代的化合物分别包括1，4-二甲酰基和1-甲酰基取代的化合物，其中所述烷基酯包括甲酯。
72.一种制备Gly·L-Asp的方法，包括下列步骤(a)将氯乙酰氯加入到L-天冬氨酸中，生成含有氯乙酰基-L-天冬氨酸的反应混合物;(b)将氨加入到上述氯乙酰基-L-天冬氨酸中;(c)将步骤(b)生成的反应混合物在约50℃至约250℃加热并持续足以生成Gly·Asp的时间。
73.根据权利要求72的方法，其中步骤(c)中所述反应时间范围是约1秒至约3小时。
74.根据权利要求20的化合物，该化合物是1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
75.根据权利要求22的方法，其中所生成的化合物包括1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
76.根据权利要求26的化合物，该化合物是1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
77.根据权利要求28的方法，其中所述1-酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1-甲酰基-5-亚苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，并且所生成的化合物包括1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
78.根据权利要求42的化合物，该化合物是N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。
79.根据权利要求44的方法，其中所述醇包括甲醇，所述1-酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸烷基酯化合物包括1-甲酰基-5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯，其中所述N-酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二烷基酯化合物包括N-甲酰基-α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸二甲酯。
80.根据权利要求33的化合物，该化合物是N-甲酰基-5-(甲酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸。
81.根据权利要求35的化合物，该化合物是N-甲酰基-5-(甲酰氧基苄基)-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
82.根据权利要求37的方法，其中所生成的化合物包括N-甲酰基-5-(甲酰氧基苄基)-3，6-二酮基哌嗪-2(S)-乙酸甲酯。
全文摘要
本发明涉及制备α-L-天冬氨酰基-L-苯丙氨酸甲酯(α-APM)的方法，该方法使用5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸(AP—DKP)或5(S)-苄基-3，6-二氧代哌嗪-2(S)-乙酸甲酯(MAP-DKP)或其相应的1-酰基衍生物(1-酰基AP-DKP和1-酰基MAP-DKP)作原料，本发明还涉及该方法中生成的新中间体。
文档编号C07C237/12GK1057835SQ9110247
公开日1992年1月15日 申请日期1991年3月15日 优先权日1990年3月15日
发明者J·B·希尔, 何子乐, M·R·约翰逊, G·韦伯, R·A·艾力克森, R·克利斯 申请人:纽特拉斯威特公司
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