氨甲环酸改性透明质酸钠及其制备方法与流程

本发明属于生物医用材料，具体涉及一种氨甲环酸改性透明质酸钠及其制备方法。

背景技术：

1、氨甲环酸又称止血环酸，临床用于纤维蛋白溶解亢进所致的各种出血，富含纤溶酶原激活物脏器的外伤或手术出血，人工流产、胎盘早期剥落、死胎和羊水栓塞引起的纤溶性出血等。在皮肤科发现氨甲环酸治疗黄褐斑具有显著疗效。氨甲环酸可通过竞争性结合酪氨酸酶，抑制酪氨酸酶的活性，抑制纤溶酶原激活剂的活性，减少黄褐斑皮损区真皮层的血管增生及炎症介质释放，缓解血管因素引发的色素沉着，除黄褐斑治疗外，氨甲环酸还可用于缓解炎症后色素沉着。

2、目前，氨甲环酸在黄褐斑治疗中主要分为口服和外敷两种给药方式。口服给药后吸收较慢且不完全，长期口服氨甲环酸可能引发胃肠道不适，经期血液凝固异常，甚至可能增加血栓形成的风险。外敷给药主要包括涂抹乳膏、敷贴等形式直接作用于皮肤表面，由于皮肤屏障的阻碍氨甲环酸难以穿透表皮到达真皮层的黑色素细胞所在部位，大部分药物仅停留于皮肤表面。

3、透明质酸钠是一种天然存在于人体组织中的线性多糖，具有优异的生物相容性、生物可降解性和无免疫原性，是理想的药物载体材料。以透明质酸钠作为氨甲环酸的药物载体，避免药物在体内被快速降解，延长药物的作用时间，实现药物的缓慢释放。其次，直接注射至病灶可提高病变部位的药物浓度，增强治疗效果，同时减少药物在正常组织中的分布，降低药物的毒副作用。

4、直接用氨甲环酸对透明质酸钠进行改性会不可避免地导致氨甲环酸自聚，已发表专利cn114432232b通过先用希夫碱封闭氨基，再通过酯化反应结合安息香，最后打开希夫碱完成酰胺化修饰，得到具有紫外响应性释放的氨甲环酸改性透明质酸。该制备过程中希夫碱在酸性条件下制备，稳定性差，紫外响应性释放的过程同等遭受紫外照射损伤。专利cn118994439b通过在有机相中获得透明质酸钠活性中间体，再与氨甲环酸甲酯盐酸盐反应获得氨甲环酸改性透明质酸。反应过程经历油相到水相的不连续反应，步骤复杂，通过透析水解的方式脱离甲酯，漫长的碱性透析环境导致透明质酸大幅降解，未充分水解的甲酯在体内水解后被代谢为甲醛，具有强烈致癌特性。

5、因此，如何同时解决氨甲环酸改性透明质酸钠过程中的自聚、修饰步骤繁琐和安全性缺陷是本领域亟需解决的技术问题。

6、需要说明的是，本背景技术部分中公开的以上信息仅用于理解本申请构思的背景技术，因此，并不认为上述描述构成现有技术的信息。

技术实现思路

1、本公开实施例至少提供一种氨甲环酸改性透明质酸钠及其制备方法。

2、第一方面，本公开实施例提供了一种氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，包括如下步骤：s1，将透明质酸钠粉末加入水中充分溶解；s2，在透明质酸钠溶液中加入催化剂活化羧基，并调节ph为5～6；s3，在s2所得溶液中加入氨甲环酸乙酯盐酸盐，并调节ph为7～8，充分反应得到氨甲环酸甲酯修饰的透明质酸钠；s4，调节s3所得溶液ph至10～12，使酯键水解获得氨甲环酸修饰的透明质酸钠，并在水解完成后调节ph至6～8以终止水解；s5，在s4所得溶液中加入氯化钠并进行透析，经醇沉获得絮状产物，真空干燥得到纯净的氨甲环酸改性透明质酸钠。

3、在一种可选的实施方式中，所述s2中催化剂为1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺和n-羟基琥珀酰亚胺，且所述催化剂与所述透明质酸钠的羧基摩尔比为1～5:1；所述活化羧基的时间为30～60min。

4、在一种可选的实施方式中，所述s1中透明质酸钠的分子量为10～3000kda，所述s2中透明质酸钠溶液的浓度不超过5wt%。

5、在一种可选的实施方式中，所述s3中氨甲环酸乙酯盐酸盐与羧基的摩尔比为0.5～5:1，反应阶段的温度为室温，反应时间为5～15h。

6、在一种可选的实施方式中，所述s5中所加入氯化钠的终浓度为18～27g/l；所述透析的透析袋大小为3500da，透析介质为18～27g/l nacl或磷酸盐缓冲液，透析时间为24～48h。

7、第二方面，本公开实施例还提供一种氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，包括如下步骤：s1，将透明质酸钠粉末加入水中充分溶解；s2，在透明质酸钠溶液中加入催化剂活化羧基，并调节ph为5～6；s3，在s2所得溶液中加入氨甲环酸乙酯盐酸盐，并调节ph为7～8，充分反应得到氨甲环酸甲酯修饰的透明质酸钠；s4，在s3所得溶液中加入氯化钠，经醇沉获得絮状产物；s5，将絮状产物加水溶解，并调节ph至10～12，使酯键水解获得氨甲环酸修饰的透明质酸钠，并在水解完成后调节ph至6～8以终止水解；s6，在s5所得溶液中加入氯化钠并进行透析，醇沉、洗涤、真空干燥得到纯净的氨甲环酸改性透明质酸钠。

8、在一种可选的实施方式中，所述s2中催化剂为4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐，且所述催化剂与所述透明质酸钠的羧基摩尔比为1～5:1；所述活化羧基的时间为30～60min。

9、在一种可选的实施方式中，所述s1中透明质酸钠的分子量为10～3000kda，所述s2中透明质酸钠溶液的浓度不超过5wt%；所述s3中氨甲环酸乙酯盐酸盐与羧基的摩尔比为0.5～5:1，反应阶段的温度为室温，反应时间为5～15h；所述s6中所加入氯化钠的终浓度为18～27g/l；所述透析的透析袋大小为3500da，透析介质为18～27g/l nacl或磷酸盐缓冲液，透析时间为24～48h。

10、第三方面，本公开实施例还提供一种氨甲环酸改性透明质酸钠，采用如前所述方法制备得到。

11、第四方面，本公开实施例还提供一种如前所述氨甲环酸改性透明质酸钠在黄褐斑药物领域中的应用。

12、本发明的有益效果是，本氨甲环酸改性透明质酸钠及其制备方法以氨甲环酸乙酯盐酸盐作为修饰物与透明质酸钠直接酰胺化反应，乙酯在体内的代谢途径和产物与酒精一致，安全性更高；以水为介质一锅反应，完成催化修饰和水解过程，水解脱酯过程迅速，对透明质酸钠的影响小；高盐环境能有效洗脱催化剂，醇沉过程能迅速收集产物，同时洗脱未反应的单体。

13、本发明的其他特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他优点在说明书以及附图中所特别指出的结构来实现和获得。

14、为使本发明的上述目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合所附附图，作详细说明如下。

1.一种氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，其特征在于，

3.如权利要求1所述的氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，其特征在于，

4.如权利要求1所述的氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，其特征在于，

5.如权利要求1所述的氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，其特征在于，

6.一种氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

7.如权利要求6所述的氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，其特征在于，

8.如权利要求6所述的氨甲环酸改性透明质酸钠的制备方法，其特征在于，

9.一种氨甲环酸改性透明质酸钠，其特征在于，采用如权利要求1-8任一项所述方法制备得到。

10.一种如权利要求9所述氨甲环酸改性透明质酸钠在黄褐斑药物领域中的应用。