一种生物催化的高纯度NMN生产工艺的制作方法

技术特征：
1.一种生物催化的高纯度nmn生产工艺，其特征在于：包括以烟酰胺核苷为底物，用含有烟酰胺核苷激酶全293f细胞，进行一步法高效制备β
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烟酰胺单核苷酸，表达式为：2.根据权利要求1所述的一种生物催化的高纯度nmn生产工艺，其特征在于：所述酶氨基酸序列如seq id no.1所示的蛋白质。3.根据权利要求1所述的一种生物催化的高纯度nmn生产工艺，其特征在于：编码seq id no.1所示的蛋白质的基因的核苷酸序列如seq id no.2所示。4.一种重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体含有用于制备nmn的烟酰胺核苷激酶的基因。5.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于：所述宿主细胞包含用于制备nmn的烟酰胺核苷激酶的基因的重组表达载体。6.根据权利要求5所述的一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于：所述宿主细胞为293f细胞。7.一种制备高纯度nmn的方法，其特征在于：包括以下步骤：s1、构建重组表达载体，s2、利用重组表达载体转化宿主细胞，获得遗传工程化的宿主细胞，s3、培养遗传工程化的宿主细胞，持续性表达烟酰胺核苷激酶，s4、添加底物烟酰胺核苷，继续培养细胞，利用摇瓶法培养或发酵罐培养，s5、离心收取上清，进行hplc反应。8.根据权利要求7所述的一种制备高纯度nmn的方法，其特征在于：所述步骤s3为将构建好的稳转烟酰胺核苷激酶全293f细胞，在摇瓶中使用无血清培养基进行培养，调整密度为5
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6million/ml。9.根据权利要求7所述的一种制备高纯度nmn的方法，其特征在于：所述步骤s4为在培养基中加入50mm烟酰胺核苷，在37℃下，摇动反应4h。

技术总结
本发明涉及一种生物催化的高纯度NMN生产工艺，S1、构建重组表达载体，S2、利用重组表达载体转化宿主细胞，获得遗传工程化的宿主细胞，S3、培养遗传工程化的宿主细胞，持续性表达烟酰胺核苷激酶，S4、添加底物烟酰胺核苷，继续培养细胞，利用摇瓶法培养或发酵罐培养，S5、离心收取上清，进行HPLC反应。本发明的优点：成本低，生产工艺简单等优点。生产工艺简单等优点。生产工艺简单等优点。


技术研发人员：丰明乾 朱元奎 刘路
受保护的技术使用者：武汉生命奥义生物科技有限公司
技术研发日：2021.09.09
技术公布日：2022/1/3