一种辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置的制作方法

1.本技术涉及生物医学基础实验设备领域，特别涉及一种辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置。


背景技术：

2.本部分的陈述仅仅是提供了与本技术相关的背景技术，并不必然构成现有技术。
3.免疫印记实验(即western blot)是生物医学基础研究中常用的实验方法，其基本原理是使用聚丙烯酰胺凝胶电泳从蛋白样品中分离出目标蛋白，并将其转附在固相载体(硝酸/醋酸纤维素膜)上，然后使用过氧化物酶标记的抗体与附着在固相载体上的目标蛋白进行特异性结合，然后将含有鲁米诺和过氧化氢的化学发光底物(发光液)滴加在目标蛋白条带上，发光液通过与蛋白抗体复合物中的过氧化物酶发生鲁米诺反应，从而实现目标蛋白发光显影的目的，实验人员通过显影深度分析目标蛋白的表达情况。
4.发明人发现，在进行显影操作时，由于固相载体上的目标蛋白无色透明且以等间距分布(即分离目标蛋白步骤中的所使用的聚丙烯酰胺凝胶电泳道的间距)，实验人员需要以固相载体上彩色预染蛋白标记条带(作为指示标记用的有色蛋白条带，通常置于最边缘的凝胶电泳道)为起点，通过目测将发光液以固定间距滴加在固相载体上。但采用这种操作方式存在有以下问题：(1)通过目测估计的间距可能不够准确，导致发光液不能均匀覆盖甚至遗漏部分蛋白条带；(2)发光液中的过氧化氢在日光条件下会发生分解，因此滴加发光液操作只能在暗室中开启安全灯的条件下进行，但照明不佳的操作环境会进一步给实验人员目测带来不便，造成发光液无法均匀覆盖蛋白条带和试剂浪费。


技术实现要素：

5.本技术的目的是针对现有技术存在的缺陷，提供一种辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置。通过在实验槽内设置可移动的推杆、推板结构，能够对位于实验槽内的固相载体进行位置调整与固定，使固相载体上的彩色预染蛋白标记条带与实验槽内定位线对齐，由于固相载体上的蛋白条带为等间距分布，当位于边缘的彩色预染蛋白标记条带位置确定后，配合与蛋白条带间距分布相同的梳齿状定位槽和导向槽，可引导移液器枪头将发光液准确地滴加在固相载体的蛋白条带上，提高了发光液滴加的准确性并可减少试剂浪费。
6.为了实现上述目的，采用以下技术方案：
7.一种辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置，包括相对设置、能够扣合形成实验腔的上箱体、下箱体，下箱体包括顶部开口的实验槽，实验槽内设有沿实验槽底面滑动的推板，推板一侧连接有推杆，推杆与下箱体侧壁上预设的通孔滑动配合并能够沿轴向相对滑动，上箱体侧壁上设有贯穿侧壁的开口，开口底面等间隔依次设置有多个定位槽。
8.进一步地，所述下箱体为立方体箱体，实验槽的四周侧壁上分别设有通孔，每个通
孔均滑动配合有推杆，每个推杆末端均连接有推板。
9.进一步地，位于实验槽侧壁相对面的两个推杆同轴设置，其对应的两个推板正对，且所有推板的底面均贴合实验槽底面。
10.进一步地，所述下箱体外侧壁上转动安装有调节螺母，调节螺母套设在推杆外部，并与推杆外圆周面设置的螺纹配合，调节螺母用于通过转动带动推杆沿通孔轴向往复滑动，以带动推板调节与实验槽的相对位置。
11.进一步地，所述调节螺母侧壁上设有指针，调节螺母贴合下箱体外侧壁处设有刻度。
12.进一步地，开口布置在上箱体的一侧，上箱体底面上设有箱体定位销，下箱体顶面上设有对应配合箱体定位销的箱体定位孔。
13.进一步地，所述定位销为沿远离上箱体方向上截面积依次减小的变截面销钉，箱体定位孔为适应变截面销钉的变截面销钉孔。
14.进一步地，所述实验槽底面上设有定位线，定位线用于引导固相载体上的彩色预染蛋白标记条带与之对齐。
15.进一步地，所述上箱体上开口所在的侧板有多个，可拆卸连接上箱体本体，不同侧板对应的定位槽间距不同。
16.进一步地，所述上箱体内侧壁设有沿定位槽轴向延伸的导向板，导向板上设有与定位槽一一对应的导向槽，每个导向槽底面上均开设有贯穿导向板的滴液通道。
17.与现有技术相比，本技术具有的优点和积极效果是：
18.(1)通过在实验槽内设置可移动的推杆、推板结构，能够对位于实验槽内的固相载体进行位置的调整与固定，使固相载体上的彩色预染蛋白标记条带与实验槽内定位线对齐，配合与蛋白条带间距分布相同的梳齿状定位槽和导向槽，引导移液器枪头将发光液准确地滴加在固相载体的蛋白条带上，提高发光液滴加的精确度，并可减少试剂的浪费。
19.(2)通过开设在上箱体侧面的开口作为移液器枪头的通过口，滴加发光液的过程在相对密封且避光的实验腔内进行，光照从上而下照射的路径被顶部遮挡，从而避免了光照进入实验腔内对发光液产生影响的问题，满足减少发光液日光分解的需求，保证了显影的质量。
20.(3)设置能够转动的调节螺母，通过螺母与推杆螺纹分布段形成丝杠螺母结构，利用调节螺母的转动带动推杆沿其轴向的精确调节，从而使得推板对实验槽内的固相载体位置进行精确调整，使其彩色预染蛋白标记条带与实验槽内设定的定位线精确对齐定位。
21.(4)设置变截面销钉孔配合变截面销钉，销钉为下端细、上端粗的结构，销钉孔为上端粗、下端细的盲孔结构，上箱体在下落过程中，销钉的小直径端先与销钉孔的大直径端配合，提高其对中效率，在其下落过程中，在销钉孔和销钉的配合作用下，上箱体和下箱体能够逐渐对齐。
22.(5)通过配置带有不同定位槽间距的上箱体侧板，上箱体侧板可拆卸连接上箱体本体，在对不同间距分布的蛋白条带进行发光液滴加操作时，可更换定位槽间距与之匹配的侧板，以使得定位槽间距与蛋白条带间距保持对应，提高本装置的兼容适用性。
附图说明
23.构成本技术的一部分的说明书附图用来提供对本技术的进一步理解，本技术的示意性实施例及其说明用于解释本技术，并不构成对本技术的不当限定。
24.图1是本技术实施例1中辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置的正视结构示意图；
25.图2是本技术实施例1中辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置整体结构示意图；
26.图3是本技术实施例1中辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置内部结构示意图；
27.图4是本技术实施例1中辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置下箱体俯视示意图；
28.图5是本技术实施例中1辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置侧板与导向板配合示意图；
29.图6是本技术实施例中1辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置侧板与上箱体配合示意图；
30.图7是本技术实施例中1辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置更换侧板后上箱体的示意图。
31.图中，1、上箱体，2、开口，3、定位槽、4、箱体定位销，5、下箱体，6、支腿，7、调节螺母，8、推杆，9、推板，10、箱体定位孔，11、定位线，12、侧板，13、安装杆，14、安装孔，15、导向板，16、导向槽，17、滴液通道。
具体实施方式
32.实施例1
33.本技术的一种典型的实施方式中，如图1
‑
图7所示，提出了一种辅助免疫印迹实验中化学发光底物滴加和显影的装置。
34.如图1、图2所示，主要包括上箱体1、下箱体5，下箱体5内设有实验槽，实验槽用于容纳并承载固相载体，上箱体1和下箱体5扣合后形成实验腔，移液器的枪头依次穿过箱体侧壁的定位槽3，并在导向槽16的引导下，将发光液由内至外均匀地滴定在实验槽内的固相载体上，由于发光液是从箱体侧面进入相对密封的箱体内部，滴定的发光液避免受到外界光照的影响，从而减少发光液的分解。
35.上箱体1和下箱体5呈上下相对布置，下箱体5的底部设有支腿6，多个支腿6对下箱体5进行稳定支撑，下箱体5的实验槽为顶部开口，朝向上箱体1，上箱体1和下箱体5扣合，形成内部的实验腔，如图3所示，对于上箱体1和下箱体5，在本实施例中为立方体箱体结构。
36.如图4所示，对于下箱体5结构，下箱体5设置的实验槽也为立方体槽结构，实验槽的四周内壁上均设有通孔，实验槽内设有沿实验槽底面滑动的推板9，推板9的一侧连接有推杆8，推杆8与实验槽侧壁上的通孔一一对应配合，推杆8与通孔滑动配合，从而能够带动推板9沿推杆8轴向往复运动，以改变推板9与实验槽底面的相对位置。
37.可以理解的是，实验槽的四周侧壁上共设有四个通孔，每个通孔均滑动配合有推杆8，配置四根相同的推杆8与四个通孔一一对应配合，每个推杆8末端均连接有推板9，从而
带动四个推板9沿底板滑动改变位置。
38.如图4所示，在本实施例中，配合推杆8的通孔开设在下箱体5的侧壁上，为了推杆8对推板9移动的调节，可以将通孔布置在对应侧壁的中线上；对应的，通孔的直径与推杆8的直径相同，或通孔直径略大于推杆8直径，使其形成间隙配合，方便推杆8在通孔内的滑动。
39.实验槽的相对侧壁上布置的两个通孔，呈同轴布置，对应的，位于实验槽侧壁相对面上的两个推杆8同轴设置，推杆8一端位于实验槽内连接推板9，另一端穿过实验槽侧壁后延伸至下箱体5外部；
40.推杆8所连接的推板9正对，且所有推板9的底面均贴合实验槽底面，使其能够紧贴实验槽底面滑动。
41.通过在实验槽内设置可移动的推杆8、推板9结构，当固相载体布置在实验槽内后，推板9的侧面能够接触固相载体，利用推板9的移动来推动固相载体，从而能够对位于实验槽内的固相载体进行位置的调整与固定，使固相载体上的彩色预染蛋白标记条带与实验槽内定位线11对齐。
42.进一步地，如图1、图4所示，在对推杆8位置进行调节时，为了满足推杆8位置的精确调节需求，以使得彩色预染蛋白标记条带可以与定位线11准确对齐，下箱体5外侧壁上转动安装有调节螺母7，调节螺母7连接在下箱体5侧壁上，并能够相对于下箱体5侧壁相对转动；
43.推杆8外圆周面上设有螺纹段，调节螺母7套设在推杆8外部，并能够与推杆8螺纹段上预设的螺纹配合，从而形成丝杠螺母机构，调节螺母7能够通过转动带动推杆8沿通孔轴向往复滑动。
44.利用调节螺母7的转动带动推杆8沿其轴向产生移动，由于螺纹的转动角度和转动圈数方便进行控制，因此能够实现推杆8轴向的精确调节。
45.可以理解的是，在调节螺母7、推杆8螺纹段的螺纹参数已知的条件下，根据螺纹间距和转动角度能够对推杆8的轴向移动距离进行计算，即螺母转动一周时，推杆8的轴向移动距离为一倍螺距的长度，当螺纹转动不足一周时，推杆8的轴向移动距离为：转动角度/360
°
*螺距。在调节时，根据推板9所需的位移距离，控制螺母的转动角度即可。
46.为方便控制螺母的转动角度，在每个调节螺母7的侧壁上均设有指针，在每个调节螺母7对应的下箱体5外侧壁上均设有对应的刻度，可通过控制转动前后指针朝向的刻度值的变化量精确控制螺母的转动角度。
47.需要指出的是，如图4所示，所述实验槽底面上设有定位线11，定位线11用于引导固相载体上的彩色预染蛋白标记条带与之对齐；
48.对于定位线11，其可以为带有突出颜色的标记线，在定位槽3的长度方向上，间隔设有两条定位线11，实现彩色预染蛋白标记条带无论位于固相载体上的左侧边缘还是右侧边缘，均有定位线11可以与之对齐定位。
49.可以理解的是，对于定位线11，还可以采用凹槽结构，相较于凸块结构，能够避免对推板9的滑动产生阻挡，方便推板9对固相载体的推动调整；当然，在采用凹槽结构时，其深度较小，比如可以设置为0.5mm，能够形成辨识标记即可。
50.为了方便在使用时的定位，在定位线11附近还可做出文字标记。
51.设置能够转动的调节螺母7，通过螺母与推杆8螺纹分布段形成丝杠螺母结构，利
用调节螺母7的转动带动推杆8沿其轴向的精确调节，使得推板9对实验槽内的固相载体位置进行精确调整，使其彩色预染蛋白标记条带与实验槽内设定的定位线11精确对齐定位。
52.如图6、图7所示，对于上箱体1的结构，上箱体1设有可拆卸连接的侧板12，侧板12上设有贯穿侧壁的开口2，开口2底面等间隔依次设置有多个定位槽3；开口2为长条状结构，沿开口2的长度方向上，开口2的底面上等间隔依次设有定位槽3；定位槽3为适应移液器枪头的弧形凹槽，起到对移液器枪头限位的作用。
53.为了进一步提高发光液滴加的准确性，对移液器枪头的移动路径进行导向，如图5所示，上箱体1的侧板12内侧壁设有沿定位槽3轴向延伸的导向板15，导向板15上设有与定位槽3一一对应的导向槽16，每个导向槽16底面上均开设有贯穿导向板15的滴液通道17。
54.所述导向槽16与定位槽3截面形状相同，适应移液器枪头并可在滴加发光液过程中对其移动路径进行限位和导向。
55.可以理解的是，在设置定位槽3的基础上，增加连接在侧板12上的导向板15，上箱体1侧壁上的开口2配合定位槽3和导向槽16构成可辅助滴加发光液的梳齿状结构，相邻定位槽3的间距相等且与固相载体上的蛋白条带分布一致。当固相载体上的彩色预染蛋白标记条带与实验槽内设定的定位线11对齐后，定位槽3即与固相载体上的蛋白条带的位置对齐，进而在滴加发光液的过程中，通过定位槽3、导向槽16共同对移液器枪头的移动路径进行限位和导向，蛋白条带可始终位于移液器枪头的正下方，提高滴加准确度。
56.进一步地，由于蛋白条带的间距分布取决于分离目标蛋白步骤中的所使用的聚丙烯酰胺凝胶电泳道之间的间距，目前有若干种常用的聚丙烯酰胺凝胶电泳道规格，针对适配不同间距分布的蛋白条带的需求，在本实施例中，如图6、图7所示，配置有多个可拆卸的上箱体1侧板12，多个侧板12能够替换安装在上箱体1的主体上，侧板12与上箱体1本体配合的位置设有安装杆13，上箱体1本体与侧板12配合的位置设有安装孔14，通过安装孔14与安装杆13的配合，将不同的侧板12安装在上箱体1本体上。
57.不同侧板12对应的定位槽3间距不同，如图6中的定位槽3间距，其小于图7中的定位槽3间距，在对不同间距分布的蛋白条带进行发光液滴加操作时，可更换定位槽3间距与之匹配的侧板12，以使得定位槽3间距与蛋白条带间距对应，提高滴加的准确性以及本装置的兼容适用性。
58.所述导向板15一端与上箱体1的侧板12连接，另一端向外延伸形成悬臂结构；每个侧板12上均设有导向板15结构，在上箱体1更换所配合的侧板12时，使得导向板15一并更换，适应不同间距的定位槽3。
59.对于上箱体1和下箱体5的配合结构，如图1、图2、图3所示，上箱体1底面上设有箱体定位销4，下箱体5顶面上设有对应配合箱体定位销4的箱体定位孔10；所述箱体定位销4为沿远离上箱体1方向上截面积依次减小的变截面销钉，箱体定位孔10为适应变截面销钉的变截面销钉孔。
60.在本实施例中，设置有两个箱体定位销4，对应的下箱体5上设有两个箱体定位孔10，辅助上箱体1和下箱体5的扣合对齐。
61.在其他的实施方式中，还可以将箱体定位销4的数目增加，比如设置为3个、4个或更多个，随着销钉数目的增加，定位精度虽然提高，但是对齐时的容错率降低，因此，可以选择为2个或3个。
62.在采用3个箱体定位销4时，箱体定位销4不共线，在取下上箱体1后，箱体定位销4还可以作为支撑腿将上箱体1支撑，避免上箱体1直接与支撑面接触，减少外部污染。
63.设置变截面销钉孔配合变截面销钉，销钉为下端细、上端粗的结构，销钉孔为上端粗、下端细的盲孔结构，上箱体1在下落过程中，销钉的小直径端先与销钉孔的大直径端配合，提高其对中效率，在其下落过程中，在销钉孔和销钉的配合作用下，上箱体1和下箱体5能够逐渐对齐。
64.以上所述仅为本技术的优选实施例而已，并不用于限制本技术，对于本领域的技术人员来说，本技术可以有各种更改和变化。凡在本技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。