抗Nectin-4抗体及其用途的制作方法

本申请涉及生物医药领域，具体而言，涉及抗nectin-4抗体及其用途。

背景技术：

1、nectin-4，又称pvrl4，是免疫球蛋白超家族中nectin家族成员，其通过激活pi3k/akt、wnt-β-catenin等通路促进肿瘤增殖、转移及血管生成，并通过cxcr4/cxcl12轴诱导淋巴转移。nectin-4作为肿瘤特异性高表达的靶点，在多种实体瘤中具有治疗潜力。

2、vhh抗体，又称纳米抗体，是一种仅由重链可变区(vhh)构成的单域抗体。由于其特殊结构，相对于传统抗体具有很多优势，如纳米抗体具有更小的分子尺寸与更强的组织穿透性，卓越的稳定性，多价/多功能设计，人源化简单，应用场景广泛等。因此，纳米抗体在疾病的治疗和诊断中具有很大的价值，逐渐成为新一代治疗性生物医药与临床诊断试剂中的新兴力量。

3、本领域存在开发针对nectin-4蛋白的vhh抗体药物的需求。

技术实现思路

1、鉴于此，第一方面，本申请提供了抗nectin-4抗体或其抗原结合片段，其包含vhh链，所述vhh链包含互补决定区cdr1，cdr2和cdr3，其中cdr的序列按照kabat定义。

2、在一些实施方案中，本申请提供的抗nectin-4抗体的重链可变区包含与seq idno: 4-9、13-15、17-18、22-24、28-30、32、36-38、42、44、46、48、49和51中任一所示的氨基酸序列具有至少85%，90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%或99%同一性的氨基酸序列。

3、在另一些实施方案中，所述抗nectin-4抗体的重链可变区由seq id no: 4-9、13-15、17-18、22-24、28-30、32、36-38、42、44、46、48、49和51中任一所示的氨基酸序列组成。

4、在一些实施方案中，所述抗nectin-4抗体为vhh抗体。

5、在另一些实施方案中，所述抗nectin-4抗体为单价或多价(例如，二价、三价或四价等)的形式。

6、在一些实施方案中，所述抗nectin-4抗体为vhh-fc抗体。

7、在一些具体实施方案中，所述fc片段源自人igg。

8、在另一些具体实施方案中，所述fc片段源自人igg1。

9、在又一些具体实施方案中，所述fc片段具有如seq id no: 53所示的氨基酸序列。

10、在一些实施方案中，所述vhh-fc抗体为多价(例如，二价)的形式。

11、第二方面，本申请提供了分离的核酸分子，其编码上述抗nectin-4抗体或其抗原结合片段。

12、在一些实施方案中，本申请还提供了载体，例如表达载体，其包含上述核酸分子。

13、在一些实施方案中，本申请还进一步提供了宿主细胞，其包含上述核酸分子或载体。

14、第三方面，本申请提供了抗体缀合物，其包含上述抗nectin-4抗体或其抗原结合片段和效应物。

15、在一些实施方案中，上述效应物选自以下中的一种或多种效应物：放射性核素、抗肿瘤剂、免疫调节剂、生物反应修饰剂、凝集素、细胞毒性药物、发色团、荧光团、显像剂、化学发光化合物、酶和金属离子。

16、在一些实施方案中，所述抗nectin-4抗体或其抗原结合片段和所述效应物之间通过连接子相连接。

17、在一些实施方案中，所述连接子包括可裂解连接子和不可裂解连接子。在具体实施方案中，本领域技术人员根据效应物的类型选择连接子的类型。

18、第四方面，本申请提供了放射性核素标记的抗体缀合物，其包含上述抗nectin-4抗体或其抗原结合片段和放射性核素-螯合剂。

19、在一些实施方案中，所述放射性核素标记的抗体缀合物还包含连接子。

20、在一些实施方案中，本申请提供的放射性核素标记的抗体缀合物中的放射性核素包括α射线核素、γ射线核素、β射线核素或正电子核素。

21、第五方面，本申请提供了药物组合物，其包含上述抗nectin-4抗体或其抗原结合片段、上述核酸分子、载体或宿主细胞、上述抗体缀合物、或者上述放射性核素标记的抗体缀合物。

22、第六方面，本申请提供了上述抗nectin-4抗体或其抗原结合片段、上述核酸分子、上述载体、上述宿主细胞、上述抗体缀合物、上述放射性核素标记的抗体缀合物、或者上述药物组合物在制备用于预防、诊断和/或治疗以nectin-4表达为特征的疾病(例如，nectin-4阳性肿瘤)的药物中的用途。

23、此外，本申请还提供了用于预防、诊断和/或治疗个体中以nectin-4表达为特征的疾病(例如，nectin-4阳性肿瘤)的方法，其包括向有需要的个体施用上述抗体缀合物、上述放射性核素标记的抗体缀合物、或者其药物组合物。

24、在一些实施方案中，本申请提供的上述用途或方法中涉及的以nectin-4表达为特征的疾病选自：头颈部鳞状细胞癌、膀胱癌、尿路上皮癌、 乳腺癌、非小细胞肺癌(nsclc)、胃癌、食管癌、卵巢癌、宫颈癌、 黑色素、瘤胰腺癌、肝癌和前列腺癌。

1.抗nectin-4抗体或其抗原结合片段，其包含vhh链，所述vhh链包含cdr1，cdr2和cdr3，其中：

2.如权利要求1所述的抗nectin-4抗体或其抗原片段，其中：所述vhh链包含与seq idno: 4-9、13-15、17-18、22-24、28-30、32、36-38、42、44、46、48、49和51中任一所示的氨基酸序列具有至少85%同一性的氨基酸序列，或者由seq id no: 4-9、13-15、17-18、22-24、28-30、32、36-38、42、44、46、48、49和51中任一所示的氨基酸序列组成。

3.如权利要求1所述的抗nectin-4抗体或其抗原片段，其中所述抗nectin-4抗体为vhh抗体或vhh-fc抗体；

4.分离的核酸分子，其编码权利要求1至3中任一项所述的抗nectin-4抗体或其抗原片段。

5.载体，其包含权利要求4所述的核酸分子。

6.宿主细胞，其包含权利要求4所述的核酸分子或权利要求5所述的载体。

7.抗体缀合物，其包含权利要求1至3中任一项所述的抗nectin-4抗体或其抗原片段、连接子和效应物；

8.放射性核素标记的抗体缀合物，其包含权利要求1至3中任一项所述的抗nectin-4抗体或其抗原结合片段和放射性核素-螯合剂；

9.药物组合物，其包含权利要求1至3中任一项所述的抗nectin-4抗体或其抗原结合片段、权利要求4所述的核酸分子、权利要求5所述的载体、权利要求6所述的宿主细胞、权利要求7所述的抗体缀合物、或者权利要求8所述的放射性核素标记的抗体缀合物。

10.权利要求1至3中任一项所述的抗nectin-4抗体或其抗原结合片段、权利要求4所述的核酸分子、权利要求5所述的载体、权利要求6所述的宿主细胞、权利要求7所述的抗体缀合物、权利要求8所述的放射性核素标记的抗体缀合物物、或者权利要求9所述的药物组合物在制备用于预防、诊断和/或治疗以nectin-4表达为特征的疾病的药物中的用途；