一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽及其制备方法和应用

本发明属于生物，具体涉及一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽及其制备方法和应用。

背景技术：

1、随着临床抗生素的长期、大量甚至不规范使用，细菌耐药性问题日益严峻，多重耐药菌感染已成为全球公共卫生领域的重大难题。传统抗生素易通过细菌基因突变、耐药基因转移、生物膜形成等机制诱导细菌产生耐药性，极大增加了重症感染患者的治疗难度与死亡风险。因此，研发新型、高效、不易诱导耐药的抗菌替代药物成为当前抗感染领域的研究热点。

2、抗菌肽是一类阳离子小分子多肽，具有广谱抗菌、不易产生耐药性、生物相容性好等诸多优势，被认为是替代传统抗生素的理想候选药物。但抗菌肽也存在结构稳定性差，极易被生物体内的蛋白酶、肽酶识别并降解，在体液、血液及病灶微环境中半衰期短、有效浓度维持时间短，严重制约了其抗菌效果。同时，部分抗菌肽对普通敏感菌抑菌效果良好，但对临床高发的多重耐药菌、耐药菌株杀菌活性弱，难以满足耐药菌感染的临床治疗需求。

技术实现思路

1、基于以上不足之处，本发明的目的在于提供一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽b1，该肽兼具良好的蛋白酶稳定性与对多重耐药临床菌株的强效抑菌活性，从而有助于缓解细菌耐药性问题。

2、本发明所采用的技术方案如下：一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽b1，包括疏水功能模块和短肽，所述疏水功能模块位于抗菌肽的n端，由两个连续的联苯丙氨酸残基构成，所述的疏水模块的c端与短肽连接，所述的短肽的序列如seq id no.1所示，所述抗菌肽b1的c端采用-nh2酰胺化。

3、进一步的，如上所述的抗菌肽b1的分子式如式（i）所示，

4、式（i）。

5、本发明的另一目的是提供如上所述的一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽b1的制备方法，如下：肽链n端由两个连续的联苯丙氨酸残基构成疏水功能模块，所述的疏水模块的c端衔接一条短肽，所述的短肽由6个精氨酸和6个脯氨酸依次交替连接构成，由此设计得到多肽，并将多肽的c端采用-nh2酰胺化；然后采用固相化学合成法合成所述的多肽，将所述的多肽经过质谱鉴定及反相高效液相色谱纯化，再经过抑菌活性测定、细胞毒性的测定和抗酶解能力测定，最终命名为抗菌肽b1。

6、本发明的另一目的是提供如上所述的一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽b1在制备治疗革兰氏阴性菌和/或革兰氏阳性菌感染性疾病的药物中的应用。

7、进一步的，如上所述的应用，所述的革兰氏阴性菌为大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、多重耐药鲍曼不动杆菌、多重耐药肺炎克雷伯菌、耐碳青霉烯类肠杆菌。

8、进一步的，如上所述的应用，所述的革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。

9、本发明还提供一种适用于治疗和/或预防革兰氏阴性菌和/或革兰氏阳性菌感染的药物，所述药物含有如上所述的一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽b1。

10、本发明具有如下优点及有益效果：本发明的抗菌肽b1对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等常见的细菌及多重耐药临床菌株具有很强的抗菌活性；溶血活性低且对巨噬细胞毒性低；对胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶等具有明显的抗酶解活性；其抑菌机制主要通过破坏细菌膜发挥抗菌作用，具有较高应用价值。

1.一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽b1，其特征在于，包括疏水功能模块和短肽，所述疏水功能模块位于抗菌肽的n端，由两个连续的联苯丙氨酸残基构成，所述的疏水模块的c端与短肽连接，所述的短肽的序列如seq id no.1所示，所述抗菌肽b1的c端采用-nh2酰胺化。

2.根据权利要求1所述的一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽b1，其特征在于，其分子式如式（i）所示，

3.根据权利要求1或2所述的一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽b1的制备方法，其特征在于，方法如下：肽链n端由两个连续的联苯丙氨酸残基构成疏水功能模块，所述的疏水模块的c端衔接一条短肽，所述的短肽由6个精氨酸和6个脯氨酸依次交替连接构成，由此设计得到多肽，并将多肽的c端采用-nh2酰胺化；然后采用固相化学合成法合成所述的多肽，将所述的多肽经过质谱鉴定及反相高效液相色谱纯化，再经过抑菌活性测定、细胞毒性的测定和抗酶解能力测定，最终命名为抗菌肽b1。

4.一种如权利要求1所述的抗菌肽b1在制备治疗革兰氏阴性菌和/或革兰氏阳性菌感染性疾病的药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，所述的革兰氏阴性菌为大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、多重耐药鲍曼不动杆菌、多重耐药肺炎克雷伯菌、耐碳青霉烯类肠杆菌。

6.根据权利要求4所述的应用，所述的革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。

7.一种适用于治疗和/或预防革兰氏阴性菌和/或革兰氏阳性菌感染的药物，其特征在于，所述药物含有如权利要求1所述的一种抗酶解型的抗耐药菌的抗菌肽b1。