一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法

本发明涉及食品加工，具体为一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法。

背景技术：

1、大豆多肽作为大豆蛋白的水解产物，具有分子量小、易吸收、低抗原、生理功能多样等优点，广泛应用于功能性食品、饲料及医药领域。传统制备方法多以大豆腐渣或大豆分离蛋白为原料，通过酶解、离心、干燥等步骤获得多肽。然而，现有技术中普遍存在酶解效率低、产物苦味重、色泽深、工艺复杂等问题，尤其是针对高异黄酮大豆这类特殊原料，其异黄酮成分在加工过程中易损失，难以兼顾多肽得率与活性成分保留。

2、高异黄酮大豆是一类通过系统选育或物理诱变获得的特异种质，籽粒中异黄酮以丙二酰基糖苷形式富集，被视为开发女性营养、运动修复及特医食品的理想原料。然而，异黄酮对热、酸碱及长时酶解极为敏感，在常规“碱溶酸沉-酶解-浓缩-干燥”路线中极易发生去糖苷或降解，活性大幅降低；同时，高异黄酮大豆的蛋白构象更致密，疏水区埋藏深，导致提取率低、酶解缓慢、苦味肽与色素生成多，且脱盐环节伴随异黄酮同步流失。

3、现有技术尚未兼顾“高效制肽”与“活性保留”，严重制约了高异黄酮大豆在高端肽基功能食品中的产业化应用。因此，需要一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明提供了一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，解决了现有技术尚未兼顾“高效制肽”与“活性保留”的问题。

2、为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：

3、一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，包括：

4、步骤一、选取高异黄酮大豆作为原料，将其研磨压榨得到脱脂豆粕，将脱脂豆粕进行提纯处理，获取大豆蛋白溶液；

5、步骤二、分离大豆蛋白溶液调节ph至7.0-10.0，加入碱性蛋白酶，在微波反应器中进行酶解反应，微波功率为100-1000w；

6、步骤三、对酶解后的溶液进行酶灭活，调节ph至中性，离心后得到大豆多肽原液；

7、步骤四、将大豆多肽原液与活性炭粉按固液比1:10混合，在40-50℃下搅拌25-45min，进行脱色脱苦，并将大豆多肽原液以10倍柱体积/h的流速依次流经h型阳离子交换树脂和oh-型阴离子交换树脂，脱除na+和cl-，进行脱盐；

8、步骤五、将脱色脱苦后的溶液经分子量为3000-5000da的超滤膜过滤，得到滤过液，再进行减压浓缩，得到固形物含量为25-40%的大豆多肽浓缩液；

9、步骤六、将所述大豆多肽浓缩液干燥，得到大豆多肽粉。

10、优选的，所述步骤一中提纯处理的具体步骤包括：

11、s1、将脱脂豆粕与水按固液比1:8-1:12混合，升温至30-60℃；

12、s2、向混合液体中添加浓盐酸，将混合液体的ph值调节至3.0-6.0，沉淀大豆蛋白；

13、s3、将混合液体进行离心，随后水洗沉淀，重复水洗2～3次，收集沉淀并加水调配成分离大豆蛋白溶液。

14、优选的，所述步骤二中碱性蛋白酶为卡氏枯草杆菌丝氨酸碱性蛋白酶，酶用量以e/s计为2%～4%，其中e为酶质量，s为底物蛋白质量。

15、优选的，所述步骤二中酶解反应环境保持在35～55℃的环境中，反应时间为5～30min，。

16、优选的，所述步骤三中酶灭活条件为90～95℃的温度环境，时间持续10～20min。

17、优选的，所述步骤三中离心条件为转速保持在12000～15000rpm，时间持续15～30min。

18、优选的，所述步骤五中超滤膜为陶瓷膜或有机膜，工作压力为2～2.5bar，跨膜压差为1.5～2bar。

19、优选的，所述步骤五中减压浓缩条件为：真空度600～700mmhg，压力85～95kpa，时间25～40min。

20、优选的，所述步骤六中干燥方式选用喷雾干燥或冷冻干燥中的任意一种。

21、优选的，所述步骤二中碱性蛋白酶为basillus sp.8a6菌分泌的蛋白酶，酶活力为5000-30000u/ml。

22、本发明提供了一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法。具备以下有益效果：

23、1、本发明通过同步调控ph、温度、功率与时间，使大豆蛋白快速展开并完成定点剪切，显著缩短酶解周期，降低苦味肽生成，提高可溶性氮得率，且能够避免高温浓缩引起的异黄酮转化，实现脱色脱苦与活性保留协同，使最终肽粉保持高异黄酮特征，保证了成品的质量。

24、2、本发明选用适宜截留分子量的超滤膜，在低压力区间对脱色液进行一步分级，同步完成苦味肽与色素截留、活性寡肽与异黄酮富集，膜通量稳定且清洗周期长，且通过配合减压浓缩与温和干燥，显著降低能耗与热敏损失。

1.一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，所述步骤一中提纯处理的具体步骤包括：

3.根据权利要求1所述的一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，所述步骤二中碱性蛋白酶为卡氏枯草杆菌丝氨酸碱性蛋白酶，酶用量以e/s计为2%～4%，其中e为酶质量，s为底物蛋白质量。

4.根据权利要求1所述的一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，所述步骤二中酶解反应环境保持在35～55℃的环境中，反应时间为5～30min，。

5.根据权利要求1所述的一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，所述步骤三中酶灭活条件为90～95℃的温度环境，时间持续10～20min。

6.根据权利要求1所述的一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，所述步骤三中离心条件为转速保持在12000～15000rpm，时间持续15～30min。

7.根据权利要求1所述的一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，所述步骤五中超滤膜为陶瓷膜或有机膜，工作压力为2～2.5bar，跨膜压差为1.5～2bar。

8.根据权利要求1所述的一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，所述步骤五中减压浓缩条件为：真空度600～700mmhg，压力85～95kpa，时间25～40min。

9.根据权利要求1所述的一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，所述步骤六中干燥方式选用喷雾干燥或冷冻干燥中的任意一种。

10.根据权利要求1所述的一种从高异黄酮大豆制备多肽的方法，其特征在于，所述步骤二中碱性蛋白酶为basillus sp.8a6菌分泌的蛋白酶，酶活力为5000-30000u/ml。