一种基于N-乙酰-D-氨基葡萄糖的复方酒剂及其制备方法和应用与流程

本发明涉及生物医药，更具体的说是涉及一种基于n-乙酰-d-氨基葡萄糖的复方酒剂及其制备方法和应用。

背景技术：

1、氧化应激是机体在遭受各种有害刺激时，体内活性氧自由基（ros）产生过多，氧化程度超出氧化物的清除能力，导致氧化系统和抗氧化系统失衡，从而引起组织损伤的过程。氧化应激与衰老、肿瘤、心血管疾病、糖尿病、神经退行性疾病等多种疾病的发生发展密切相关。因此，开发安全有效的抗氧化功能食品或保健品具有重要意义。

2、n-乙酰-d-氨基葡萄糖（n-acetyl-d-glucosamine，nag）是构成昆虫和甲壳类动物外骨骼中甲壳素成分的最小组成单位，也是生物细胞内许多重要多糖的基本组成单位。n-乙酰-d-氨基葡萄糖具有消炎、抗肿瘤及抗氧化作用，广泛应用于骨关节健康食品、美容饮料和膳食补充剂等领域。

3、关于n-乙酰-d-氨基葡萄糖的安全性，已有充分的毒理学研究予以证实。湖南省疾病预防控制中心出具的毒理学实验报告（受理编号：j20090248）表明：（1）急性经口毒性试验中，对雌、雄昆明种小鼠的最大耐受剂量（mtd）均大于20.0g/kg·bw，属无毒级；（2）三项遗传毒性试验（ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验）结果均为阴性，无遗传毒性；（3）以1.67g/kg·bw、3.33g/kg·bw、5.00g/kg·bw剂量（分别相当于人体推荐剂量的100、200、300倍）给sd大鼠灌胃90天，各剂量组雌、雄大鼠体重增长、进食量、食物利用率、血常规指标（血红蛋白、红细胞压积、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及白细胞分类）、血生化指标（总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、血糖、胆固醇、甘油三酯）、脏器重量、脏器/体重比值与对照组比较无显著性差异（p>0.05），大体解剖和组织病理检查未见与样品有关的异常改变。上述数据充分证明n-乙酰-d-氨基葡萄糖具有极高的食用安全性。

4、牛磺酸是动物体内的一种含硫氨基酸，广泛分布于生物体内各组织器官，主要以游离状态存在于组织间液和细胞内液中。研究发现，牛磺酸具有维持正常视觉功能、维持机体渗透压平衡、调节细胞钙平衡、降血糖、调节神经传导、增加心脏收缩能力、提高机体免疫能力、增强细胞膜抗氧化能力、保护心肌细胞等广泛的生物学作用。牛磺酸的安全性已得到广泛认可，被各国批准作为食品添加剂和膳食补充剂使用。

5、马齿苋（portulaca oleracea l.）为马齿苋科马齿苋属一年生草本植物，是一种药食同源的中药材，被国家卫生健康委员会列为既是食品又是药品的物品。现代药理学研究表明，马齿苋提取物含有丰富的黄酮类、生物碱类、多糖类等活性成分，具有显著的抗氧化、抗炎、抗菌、降血糖、降血脂等药理活性。马齿苋多糖能够显著提高机体的免疫功能，增强巨噬细胞的吞噬能力，促进淋巴细胞增殖。

6、l-精氨酸（l-arginine）是一种条件必需氨基酸，在体内可经一氧化氮合酶（nos）催化生成一氧化氮（no），参与多种生理过程。l-精氨酸能够促进生长激素分泌、增强免疫功能、促进伤口愈合、保护心血管系统。研究表明，l-精氨酸缺乏可导致免疫功能下降，补充l-精氨酸可显著增强机体的细胞免疫和体液免疫功能。l-精氨酸已被美国fda认定为"一般认为安全"（gras）的物质。

7、中国专利cn102199513a、cn103695273a公开了以n-乙酰-d-氨基葡萄糖和牛磺酸为原料制备成药酒，该药酒具有抗自由基、抗氧化的活性协同效果。中国专利cn108272808b公开了一种含有n-乙酰-d-氨基葡萄糖和牛磺酸的具有抗肿瘤作用的药物组合物及其酒剂，二者在特定比例范围内具有抗肿瘤协同作用。

8、然而，现有技术中尚未有将n-乙酰-d-氨基葡萄糖、牛磺酸与马齿苋提取物、l-精氨酸进行组合，以发挥多组分协同抗氧化和增强免疫功能的研究报道。申请人经过创造性研究发现，将上述四种成分在特定比例范围内组合，不仅各成分自身的抗氧化和免疫增强作用得到充分发挥，而且四种成分之间存在显著的协同增效效应，其抗氧化和增强免疫功能的效果显著优于单独使用或两两组合使用。同时，由于各原料均已具有充分的安全性数据支撑，本发明具有可靠的安全性保障。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种基于n-乙酰-d-氨基葡萄糖的复方酒剂，该复方酒剂以n-乙酰-d-氨基葡萄糖和牛磺酸为核心活性成分，辅以马齿苋提取物和l-精氨酸，四种成分在特定比例范围内协同增效，具有优异的抗氧化和增强免疫功能，且安全性高。

2、本发明的另一目的在于提供上述复方酒剂的制备方法。

3、本发明的再一目的在于提供上述复方酒剂在制备抗氧化和增强免疫力保健品中的应用。

4、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

5、一种基于n-乙酰-d-氨基葡萄糖的复方酒剂，所述复方酒剂的活性成分由以下重量份的原料组成：

6、n-乙酰-d-氨基葡萄糖 150-250份，牛磺酸 20-40份，马齿苋提取物 5-15份，l-精氨酸 5-15份。

7、优选的，所述复方酒剂的活性成分由以下重量份的原料组成：

8、n-乙酰-d-氨基葡萄糖 190-210份，牛磺酸 28-32份，马齿苋提取物 8-12份，l-精氨酸 8-12份。

9、更优选的，所述复方酒剂的活性成分由以下重量份的原料组成：

10、n-乙酰-d-氨基葡萄糖 200份，牛磺酸 30份，马齿苋提取物 10份，l-精氨酸 10份。

11、本发明所述马齿苋提取物的制备方法为：取马齿苋干燥全草，粉碎至20-40目，加入8-12倍重量（以马齿苋干燥全草重量计）的质量分数为60%-80%的乙醇溶液，加热回流提取2-3次，每次1-2小时，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.10-1.20（60℃测）的浸膏，于60-80℃减压干燥至含水量≤5%，粉碎过80目筛，即得。所得马齿苋提取物中总黄酮含量应不低于5%（以芦丁计，紫外-可见分光光度法测定）。

12、本发明所述复方酒剂的制备方法，包括以下步骤：

13、（1）取白酒作为基质，先加入n-乙酰-d-氨基葡萄糖重量三分之二的牛磺酸，搅拌至完全溶解；

14、（2）降温至5-10℃，加入n-乙酰-d-氨基葡萄糖，搅拌混合均匀，5-10℃静置1-3小时；

15、（3）加入余量牛磺酸，搅拌混合均匀，5-10℃静置；

16、（4）加入马齿苋提取物和l-精氨酸，搅拌混合均匀；

17、（5）过滤，灌装，密封，于5-10℃静置保存10-20天，即得。

18、步骤（1）中所述白酒为酒精度30-42度的食用白酒（优选清香型或浓香型），所述n-乙酰-d-氨基葡萄糖与白酒的用量比为200g：8000-12000ml。所述n-乙酰-d-氨基葡萄糖的纯度≥98%（hplc法），所述牛磺酸的纯度≥98%（符合《中国药典》或食品添加剂标准）。

19、步骤（4）中所述马齿苋提取物和l-精氨酸的混合方式为：先将l-精氨酸加入无水乙醇中溶解，再加入马齿苋提取物，混合均匀，干燥后加入步骤（3）所得混合物中。

20、本发明复方酒剂中各组分的作用机理如下：

21、n-乙酰-d-氨基葡萄糖作为核心活性成分，具有直接的抗氧化活性，能够清除体内自由基，减轻氧化应激损伤。同时，n-乙酰-d-氨基葡萄糖是构成糖蛋白和糖胺聚糖的重要前体物质，参与免疫球蛋白的合成，对维持正常免疫功能具有重要作用。

22、牛磺酸作为重要的含硫氨基酸，具有显著的抗氧化活性，能够直接清除次氯酸和过氧亚硝酸盐等活性氧物种，保护细胞膜免受氧化损伤。牛磺酸还能调节细胞内钙离子浓度，稳定细胞膜结构，增强机体免疫细胞的活性。

23、马齿苋提取物富含黄酮类、多糖类等活性成分，其中马齿苋黄酮具有显著的自由基清除能力和脂质过氧化抑制活性，马齿苋多糖能够激活巨噬细胞、促进淋巴细胞增殖、增强自然杀伤细胞活性，从多途径增强机体免疫功能。

24、l-精氨酸在体内经一氧化氮合酶（nos）催化生成一氧化氮（no），no作为重要的信号分子和效应分子，参与免疫调节、血管舒张等多种生理过程。l-精氨酸还能促进t淋巴细胞增殖、增强巨噬细胞的杀伤活性，对细胞免疫和体液免疫均有促进作用。

25、申请人经过大量实验研究发现，上述四种成分在本发明特定比例范围内组合使用时，不仅各成分自身的抗氧化和免疫增强作用得到充分发挥，而且四种成分之间存在显著的协同增效效应。具体而言，n-乙酰-d-氨基葡萄糖与牛磺酸的协同作用已在先有技术中得到证实；在此基础上，马齿苋提取物的加入能够通过其丰富的黄酮类成分进一步增强体系的抗氧化能力，同时其多糖成分与l-精氨酸的免疫调节作用相互配合，形成多靶点、多途径的免疫增强机制；而l-精氨酸的加入不仅增强了免疫功能，其生成的no还能促进血液循环，有利于其他活性成分的吸收和分布。