用于预防和治疗纤维化的肽的制作方法

本发明涉及一种用于预防或治疗纤维化的肽，并且更具体地说，涉及一种用于预防或治疗纤维化的肽，其通过与整联蛋白结合来抑制tgf-β1从lcc的解离，或者其抑制上皮细胞向间充质细胞的转化并促进间充质细胞向上皮细胞的转化，并且还通过细胞穿透与smad2和smad3结合以此抑制其磷酸化，从而表现出预防或治疗纤维化的效果。

背景技术：

1、纤维化是由组织中胶原纤维的过度产生和积聚引起的，并且已知主要发生在肺、肝、心脏、肾等。随着肺纤维化的进展，不仅出现呼吸障碍，而且出现各种并发症。可能发生由肺活量减少和氧扩散受损引起的全身性缺氧、由于纤维组织收缩使得肺动脉和毛细血管受到压迫引起的肺动脉高血压、由于肺循环受损使得右心室血液淤积引起的心力衰竭以及其它并发症诸如血栓形成、肺炎等。此外，炎症和纤维化可能会增加肺癌的风险。肺纤维化可能由吸入有毒物质或持续炎症引起，但也存在无法确定具体原因的特发性肺纤维化(ipf)。当特发性肺纤维化(ipf)发生时，肺组织随着时间的推移增厚和硬化，使得肺不能适当地吸收氧气并将其输送到血流中，最终导致肺的永久性疤痕和纤维化，从而使呼吸困难，并减少输送到身体主要器官的氧气量(coward wr, the pathogenesis of idiopathicpulmonary fibrosis. ther. adv. respir. dis. 2010; 4:367-388)。

2、肺纤维化是一种致命的疾病，诊断后平均生存时间约为2至3年，并且仍然没有办法恢复晚期肺纤维化的肺组织。目前，抑制炎症反应的类固醇和免疫抑制剂被用作肺纤维化的治疗剂，但是纤维化在炎症反应后发展，并且大多数患者是因呼吸困难才去医院就诊，因此治疗开始于炎症反应期已经过去并且纤维化反应期已经开始后，因此，难以预期现有抗炎药物的纤维化抑制作用。

3、同时，在肝病中，非酒精性脂肪性肝炎(nash或非酒精性脂肪性肝病(nafld))是由非饮酒性肥胖、糖尿病、高脂血症、药物等引起的脂肪性肝炎。非酒精性脂肪性肝炎由于肝细胞中脂肪积聚导致的肝细胞变性/坏死引起的炎症和肝纤维化而发展成肝硬化和肝癌。因此，即使是非酒精性脂肪性肝炎，如果发生纤维化，恢复成正常组织是不可能的。除了肺和肝，纤维化还可能发生在心脏、肾脏、血管、皮肤、脑等。

4、目前可用的纤维化药物之一是尼达尼布(nintedanib)(产品名：ofev®)，其为一种靶向参与肺纤维化机制的生长因子受体的酪氨酸激酶抑制剂，其中血小板衍生生长因子受体(pdgfr)、成纤维细胞生长因子受体(fgfr)和血管内皮生长因子受体(vegfr)被阻断(wollin l, mode of action of nintedanib in the treatment of idiopathicpulmonary fibrosis. eur. respir. j. 2015; 45:1434-1445；ep 1224170 b9)。此外，吡非尼酮(pirfenidone)用于治疗特发性肺纤维化，其中纤维化在没有明确原因的情况下在肺中进展。这种药物是一种小分子口服药剂，其抑制胶原蛋白的合成，减少促纤维化细胞因子，并抑制产生胶原蛋白的成纤维细胞的增殖(us 8383150 b2)。

5、在正常状态下，组织中的胶原蛋白保持恒定，但在某些病理状态下，这种平衡被打破，并且胶原蛋白在组织中过度产生和积累，导致纤维化。减少纤维化的抑制剂主要发挥以下功能：1)减少与纤维化相关的炎症反应，2)抑制促纤维化细胞因子或生长因子的活性，3)抑制细胞增殖，以及4)减少前胶原生物合成和加工，并且因此，这些作用机制是纤维化抑制剂的主要靶标。tgf-β(转化生长因子-β)已知是一种代表性的促纤维化生长因子，并且直接抑制tgf-β的化合物正被用于开发纤维化治疗剂。然而，由于tgf-β参与体内的各种生理反应，通过靶向tgf-β或tgf-β受体的直接抑制可能具有很大的副作用。因此，需要一种具有间接抑制tgf-β作用的机制的药物。

6、当从细胞的角度来看纤维化时，当正常的上皮细胞被炎症或一些刺激破坏时，tgf-β的表达增加，并且上皮细胞向间充质细胞的转化(上皮-间质转化，emt)增加，导致上皮细胞向肌成纤维细胞转化。已知这种肌成纤维细胞通过过度产生胞外基质蛋白诸如胶原蛋白而最终导致纤维化(rock jr, multiple stromal populations contribute topulmonary fibrosis without evidence for epithelial to mesenchymal transition.proc. natl. acad. sci. usa 2011; 108:e1475-e1483；fernandez ie, the impact oftgf-b on lung fibrosis: from targeting to biomarkers. proc. am. thorac. soc.2012; 9:111-116；decaris ml, proteomic analysis of altered extracellularmatrix turnover in bleomycin-induced pulmonary fibrosis. mol. cell proteomics2014; 13:1741-1752)。因此，防止了上皮细胞向肌成纤维细胞过度转化，以及相反地，促进了间充质细胞向正常上皮细胞的转化(间充质-上皮转化，met)，即细胞重编程，从而治疗纤维化。

7、因此，本发明人已经确定，由本发明人开发的肽不会直接抑制tgf-β1，但是与存在于肺成纤维细胞中的整联蛋白结合，从而防止tgf-β1从lcc(大潜伏复合物)分离，因此通过抑制tgf-β1诱导的促纤维化信号转导来抑制纤维化，并且还确定该肽抑制上皮细胞向间充质细胞的转化，以及同时促进间充质细胞转向上皮细胞的转化，诱导细胞重编程，并且通过细胞穿透与smad2和smad3结合以此抑制其磷酸化，从而抑制纤维化，并且此外，当向肺纤维化动物模型或由非酒精性脂肪性肝炎诱导的肝纤维化动物模型给药该肽时，该肽有效地减少纤维化，从而完成了本发明。

8、背景技术中描述的信息仅用于改善对本发明的背景的理解，并且不应被解释为包括形成本发明所属领域的普通技术人员已知的相关技术的信息。

技术实现思路

1、本发明的一个目的是提供一种有效预防和治疗纤维化的肽。

2、本发明的另一个目的是提供包含该肽的用于预防或治疗纤维化的药物组合物。

3、本发明的又一个目的是提供包括给药该肽的预防或治疗纤维化的方法。

4、本发明的再一个目的是提供用于预防或治疗纤维化的肽的用途。

5、本发明的还有一个目的是提供该肽在制备用于预防或治疗纤维化的药物中的用途。

6、为了完成上述目的，本发明提供了用于预防或治疗纤维化的肽，该肽由seq idno: 1或seq id no: 2的氨基酸序列表示。

7、此外，本发明提供了用于预防或治疗纤维化的药物组合物，该药物组合物包含作为活性成分的由seq id no: 1的氨基酸序列表示的肽和/或由seq id no: 2的氨基酸序列表示的肽。

8、此外，本发明提供了预防或治疗纤维化的方法，该方法包括向需要其的受试者给药由seq id no: 1或seq id no: 2的氨基酸序列表示的肽或包含该肽的组合物。

9、此外，本发明提供了由seq id no: 1或seq id no: 2的氨基酸序列表示的肽或包含该肽的组合物用于预防或治疗纤维化的用途。

10、此外，本发明提供了由seq id no: 1或seq id no: 2的氨基酸序列表示的肽或包含该肽的组合物在制备用于预防或治疗纤维化的药物中的用途。