一种用于预防和治疗胆红素脑病的大麻二酚靶向缓释制剂及其制备方法与应用与流程

本发明涉及一种用于预防和治疗胆红素脑病的大麻二酚靶向缓释制剂及其制备方法与应用，属于生物医药制剂制造。

背景技术：

1、当前胆红素脑病由未结合胆红素透过血脑屏障沉积脑基底核引发神经系统损伤，大麻二酚具神经保护及抗炎活性，是缓解神经损伤药物，但水溶性差及生理环境不稳定限制临床疗效，现有技术利用聚乳酸-羟基乙酸共聚物构建纳米载体，装载疏水药物并修饰亲水功能层，提升长循环或靶向能力；现有技术常单纯追求药效成分药理学叠加而忽视递送系统结构化构建，例如公开号为cn116688099a的中国发明专利申请公开一种预防和/或治疗血栓疾病的联合用药物和应用，虽尝试大麻二酚与成纤维细胞生长因子联合使用，但本质仅将两种活性成分简单物理混合或分步给药，未构建具空间结构统一载体系统，此非一体化给药模式使疏水性大麻二酚直接暴露于复杂生理体液，无法屏蔽血液环境酶降解作用，导致药物代谢动力学行为不可控。

2、构建多层结构靶向制剂时，常规制备工艺存在界面稳定性瓶颈，常规分步法先将疏水内核完全固化及脱溶剂干燥，再物理吸附或表面化学反应修饰亲水水凝胶或靶向配体，因疏水聚酯内核与亲水功能外壳界面张力及热力学不相容，二者仅靠微弱范德华力连接，制剂进入血液循环受血流剪切及血浆蛋白竞争吸附置换，结合力弱的功能壳层易解体剥离，界面失效导致靶向基团过早流失，疏水内核暴露生理环境引发药物突释，加剧非特异性毒性。

3、因此，如何开发增强核壳界面机械稳定性，维持高生物安全性及精准ph响应特性，抵御体内循环剪切力结构破坏与药物突释，成为本发明所要解决的技术问题。

技术实现思路

1、为解决背景技术中提出的问题，本发明的技术方案如下：一种用于预防和治疗胆红素脑病的大麻二酚靶向缓释制剂的制备方法，方法包括以下步骤：

2、步骤s1，建立半固化溶胀界面，将聚乳酸-羟基乙酸共聚物、大麻二酚及水飞蓟素溶解于二氯甲烷油相中，以聚乙烯醇水溶液为水相，经均质乳化形成水包油型乳液；对乳液实施受控溶剂挥发操作并实时监测体系状态，在聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒内部的二氯甲烷残留量达到5.0wt%至8.0wt%的半固化临界区间时停止挥发，从而得到表面处于溶胀半流变状态的载体混悬液；

3、步骤s2，构建界面互穿网络，向处于溶胀半流变状态的载体混悬液中加入ph敏感性水凝胶前体溶液，在25摄氏度条件下执行搅拌孵育操作，利用颗粒内部残留二氯甲烷向外扩散产生的传质动力，诱导ph敏感性水凝胶前体溶液中的水凝胶分子链逆向扩散并嵌入聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒的溶胀表层；

4、步骤s3，固化锁钉，将步骤s2所得体系置于真空度为-0.08mpa至-0.09mpa的负压环境中去除剩余二氯甲烷，使聚乳酸-羟基乙酸共聚物颗粒链段收缩结晶，并将已嵌入的水凝胶分子链物理锁钉在内核表面，经离心洗涤得到具有互穿网络界面的核壳前体；

5、步骤s4，靶向修饰，将特异性抗体偶联至核壳前体的ph敏感层表面。

6、优选的，步骤s2中ph敏感性水凝胶前体溶液包含浓度为2.0mg/ml至5.0mg/ml的羧甲基壳聚糖或海藻酸钠；搅拌孵育操作的转速控制在100rpm至200rpm，孵育时间控制在15分钟至30分钟，转速和时间参数用于使水凝胶分子链在溶胀表层的渗透深度达到10纳米至30纳米。

7、优选的，步骤s3中去除剩余二氯甲烷的过程遵循特定的溶剂移除速率，溶剂移除速率满足以下关系式：，其中，表示二氯甲烷的质量移除速率，表示负压环境的真空度绝对值，表示体系的有效蒸发表面积，表示ph敏感性水凝胶前体溶液的动力粘度，为与聚乳酸-羟基乙酸共聚物的结晶度相关的预设常数；关系式用于通过控制真空度与粘度的匹配关系，使聚乳酸-羟基乙酸共聚物的收缩速率与水凝胶分子链的固化速率同步。

8、优选的，步骤s1中大麻二酚与水飞蓟素的质量比为3:1至5:1；大麻二酚和水飞蓟素在二氯甲烷油相中的总浓度为20mg/ml至50mg/ml；聚乳酸-羟基乙酸共聚物的分子量为10,000da至50,000da，且乳酸与羟基乙酸的摩尔比为50:50至75:25。

9、优选的，步骤s1中均质乳化的转速为3000rpm至5000rpm，时间为5分钟至10分钟；受控溶剂挥发操作是在-0.04mpa至-0.06mpa的真空度下进行，直至体系折光率变化至对应5.0wt%至8.0wt%残留量的预设阈值。

10、优选的，步骤s4中特异性抗体为抗神经元特异性烯醇化酶抗体或抗胶质纤维酸性蛋白抗体；偶联是通过将核壳前体表面的羧基活化后与特异性抗体的氨基形成酰胺键实现的。

11、优选的，制备方法还包括对步骤s4所得产物进行冷冻干燥的步骤，冷冻干燥包括在-80摄氏度预冻4小时，在-50摄氏度、10pa真空度下升华干燥24小时，以获得平均粒径为100纳米至200纳米的干粉制剂，步骤s2中ph敏感性水凝胶前体溶液的ph值为7.4，且水凝胶具有在ph7.2至7.6范围内发生体积相变或溶解度增加的材料属性，材料属性用于在胆红素脑病病灶微环境中触发大麻二酚和水飞蓟素的释放。

12、优选的，制剂具有核壳结构，核壳结构在聚乳酸-羟基乙酸共聚物内核与ph敏感性水凝胶外壳之间具有由步骤s2及步骤s3形成的厚度为10纳米至30纳米的界面互穿网络物理锁钉层；制剂在ph7.4的磷酸盐缓冲液中，48小时内的累积药物释放量小于20%，而在ph7.2至7.6的模拟病理环境中，24小时内的累积药物释放量大于80%。

13、优选的，制剂在5000rpm离心力作用10分钟后的粒径变化率小于5%，且特异性抗体在ph敏感性水凝胶外壳表面的保留率大于90%。

14、相比于现有技术，本发明的有益效果是：

15、1、在预防和治疗胆红素脑病中，制备方法控制plga载体脱溶剂半固化窗口期，利用残留溶剂扩散动力学诱导亲水性ph敏感水凝胶分子链渗透溶胀疏水内核表面，随溶剂快速移除将渗入分子链物理锁钉于收缩致密聚合物晶格，在核壳界面构建微米级分子互穿网络，此物理结构使功能壳层与药物内核形成高强度机械互锁，结合稳定性不依赖弱范德华力，确保制剂遭受血液循环高速流体剪切力及血浆蛋白竞争置换作用时保持壳层结构完整与靶向配体留存，防止壳层剥离导致药物早期泄漏或靶向功能失效。

16、2、利用溶剂挥发诱导形成致密界面层作为药物扩散物理屏障，结合表面修饰ph敏感水凝胶层建立针对胆红素脑病特定病理参数精准门控释放机制，致密界面互穿结构封闭疏水性药物分子向外扩散孔隙通道，使制剂在非病变生理ph体液环境维持药物封存状态，降低突释效应；制剂富集于胆红素异常蓄积特定ph微环境时，外层水凝胶体积相变或构象改变即刻触发界面通道开启，双重调控机制保证药物分子全身输送过程稳态分布，实现脑部病灶区域高浓度定点释放，提升病灶部位药效浓度同时降低对正常神经组织非特异性影响。

17、3、利用plga内核基质强疏水特性实现大麻二酚与辅助成分水飞蓟素高密度共装载与时空同步递送，微观结构在单一纳米颗粒内部固定两种活性成分质量比例，确保二者以预定配比同步跨越血脑屏障接触靶向神经组织，共输送模式避免物理混合给药或分别给药造成两种药物体内分布代谢速率不一致问题，使水飞蓟素在病灶局部及时发挥膜稳定作用协助大麻二酚阻断神经损伤通路，通过药代动力学行为同步化提升单位剂量药物对胆红素诱导神经毒性综合防御与修复效能。