一种南极来源的出芽短梗霉和其应用的制作方法

1.本发明涉及微生物领域，具体而言，涉及一种南极来源的出芽短梗霉和其应用。


背景技术：

2.皮肤老化的原因之一是自由基衰老，该学说认为过多的自由基是造成生物老化的重要原因。根据这一理论，体内过量的活性氧自由基与不饱和脂肪酸作用产生丙二醛等物质，丙二醛与细胞膜上的蛋白质等作用产生褐色素，沉淀于皮肤成为各种色斑。过量的自由基还能使皮肤内的胶原纤维、弹性纤维发生交联变性、变脆、失去弹性，当皮肤水分不足时，容易使弹性纤维断裂，出现暗纹、细纹、皱纹等皮肤老化现象。此外，环境中的离子辐射以及诸如空气污染与化学物质的环境污染物，也会使生物体内不断地产生自由基。例如，紫外线会使皮肤真皮中的纤维母细胞及粒线体受到刺激，进而释放出超氧阴离子，而过量的超氧阴离子则会转换成其它破坏性更强的自由基。虽然，人体内具有能够维持氧化与抗氧化之间平衡状态的抗氧化防御系统，用以减缓活性氧及自由基的产生，但若长期过度地曝晒在阳光下，则人体内大量产生的自由基会导致皮肤的抗氧化防御能力降低，造成皮肤的伤害，例如，光老化、表皮皱纹、皮肤免疫力失调等。目前，已知有维生素e和维生素c等生物体内的清除自由基型抗氧化剂，另外，也报道了植物来源的抗氧化剂，如柑橘果提取物等。
3.皮肤老化的另一个重要原因是光老化，紫外线(uv)暴露引起的光老化会引起皮肤弹性蛋白酶的活性增加。目前，已知有植物来源的抗老化活性物有蓼蓝、香豌豆等。
4.尽管来源于微生物的具有抗氧化清除自由基和抗衰老活性作用的抗老化物质正日渐得到护肤产业的重视，但是，目前仍然缺乏具有抵御紫外线能力强、产多糖含量高或抗氧化活性强的微生物。
5.鉴于此，特提出本发明。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提供一种南极来源的出芽短梗霉和其应用。
7.本发明是这样实现的：
8.第一方面，本发明实施例提供了一种出芽短梗霉，其保藏号为cgmccno.21195。
9.第二方面，本发明实施例提供了一种出芽短梗霉的生产方法，其包括培养如前述实施例所述的出芽短梗霉。
10.第三方面，本发明实施例提供了一种微生物菌剂，其包括如前述实施例所述的出芽短梗霉。
11.第四方面，本发明实施例提供了一种发酵物，其由前述实施例所述的出芽短梗霉发酵培养获得。
12.第五方面，本发明实施例还提供了一种具有特定功能的产品，所述产品包括如前述实施例所述的出芽短梗霉和如前述实施例所述的发酵物中的至少一种；所述特定功能包括：保湿、抗紫外线和抗氧化活性中的至少一种。
13.第六方面，本发明实施例提供了如前述实施例所述的出芽短梗霉或如前述实施例所述的发酵物在制备具有特定功能的产品中的应用，所述特定功能包括：保湿、抗紫外线和抗氧化活性中的至少一种。
14.本发明具有以下有益效果：
15.针对目前缺乏具有抵御紫外线能力强、产多糖含量高、抗氧化活性强的微生物的不足，本发明实施例提供了一种出芽短梗霉，保藏号为cgmccno.21195，该菌株在耐寒、耐渗透性、抗uv等方面具有良好性能，且其发酵产物具有良好的抵御uv损伤的护肤功效。
附图说明
16.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
17.图1为出芽短梗霉osm-nj01-gly-1-01在pda培养基上菌株形态以及在显微镜下的形态；
18.图2为紫外辐射环境中菌株存活率；
19.图3为低温环境菌株存活率；
20.图4为高渗环境菌株生长曲线；
21.图5为不同菌株粗多糖与菌体质量对比。
具体实施方式
22.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
23.本发明实施例提供了一种出芽短梗霉，其保藏号为cgmcc no.21195。
24.将分离自南极土壤的出芽短梗霉，经选择获得所述的出芽短梗霉 cgmcc no.21195。所述的出芽短梗霉cgmcc no.21195在pda液体培养基中生长良好，具有抵御紫外线能力强、产多糖含量高、抗氧化活性强的特性。
25.生物材料保藏信息：本发明的所述的出芽短梗霉(aureobasidiumpullulans)，已于2020年11月16日保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心(china general microbiological culture collection center,cgmcc)，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物所，邮编：100101，保藏编号为cgmcc no.21195，培养物名称为出芽短梗霉osm-nj01-gly-1-01，分类命名为aureobasidiumpullulans osm-nj01-gly-1-01。
26.在一些实施例中，所述出芽短梗霉的形态特征包括：在麦芽汁液体培养基中24～26℃培养2～4天(优选为3天)，细胞大小为(3.0～5.7)
×
(4.7～10.0) μm，形态为卵形、椭圆形和长椭圆形中的至少一种，形成沉淀；麦芽汁琼脂斜面24～26℃培养，菌落为奶酪状，乳白色，表面湿润光滑，有光泽，两周后菌落变为黑色；在玉米粉琼脂dalmau平板中培养，不
产生假菌丝。
27.在一些实施例中，所述出芽短梗霉的生理生化特性包括：出芽短梗霉能够利用的碳源包括葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、半乳糖、棉子糖和l-山梨糖中的至少一种；不发酵葡萄糖、半乳糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖和棉子糖中的至少一种；不同化的碳源包括l-鼠李糖、甘油、半乳糖醇、乳糖、d-山梨醇和核糖醇中的至少一种。
28.本发明还提供了一种出芽短梗霉的生产方法，其包括培养如前任意实施例所述的出芽短梗霉。
29.其中，所述的培养基为本领域常规的培养基，能够生长所述的出芽短梗霉cgmcc no.21195即可，较佳地为pda液体培养基、ypd培养基或 gmmy培养基。
30.所述的pda液体培养基为本领域常规的pda液体培养基，较佳地，其包括5g/l马铃薯浸粉、15g/l葡萄糖和10g/l蛋白胨。所述培养的温度为本领域常规的温度，能够生长所述的出芽短梗霉cgmcc no.21195即可，较佳地为15～35℃，更佳地为28℃。所述培养的时间为本领域常规的时间，较佳地为2～7天，更佳地为2天。出芽短梗霉osm-nj01-gly-1-01在pda 培养基上菌株形态以及在显微镜下的形态参照图1。
31.较佳地，所述的培养前还包括使用种子培养基进行种子培养的步骤。所述的种子培养为本领域常规的种子培养。所述的种子培养基为本领域常规的种子培养基，较佳地为pda液体培养基。所述种子培养的时间为本领域常规的时间，较佳地为48～60小时，更佳地为48小时。所述种子培养的温度为本领域常规的温度，较佳地为28～30℃。所述种子培养的接种量为本领域常规的接种量，较佳地为5％，所述百分比为体积百分比。
32.本发明实施例还提供了一种微生物菌剂，其包括如前述任意实施例所述的出芽短梗霉。
33.本发明实施例还提供了一种发酵物，其由如前述任意实施例所述的出芽短梗霉发酵培养获得。
34.在一些实施例中，所述发酵包括：将出芽短梗霉的种子液接种于含有珍珠粉的液体培养基中培养，以获得珍珠发酵物。
35.在一些实施例中，所述种子液的接种量为：体积分数1％～5％，具体可以为1％、2％、3％、4％、5％中的任意一种或任意两种之间的范围。
36.在一些实施例中，所述珍珠粉在所述液体培养基中的质量分数为 0.01％～3％，具体可以为0.01％、0.05％、0.1％、0.5％、1％、2％、3％中的任意一种或任意两种之间的范围。
37.在一些实施例中，接种后，于28～30℃培养3～7天，获得培养液。培养时间具体可以为3天、4天、5天、6天、7天中的任意一种或任意两种之间的范围；培养的具体温度可以为28℃、29℃、30℃中的任意一种或任意两种之间的范围。
38.在一些实施例中，所述发酵还包括：对所述培养液进行离心，取上清液，过滤除菌后获得珍珠发酵物。
39.在一些实施例中，所述离心的条件为：4～10℃，3000～10000rpm， 1～10min。
40.本发明实施例提供了一种具有特定功能的产品，所述产品包括如前述实施例所述的出芽短梗霉和如前述实施例所述的发酵物中的至少一种；所述特定功能包括：保湿、抗紫外线和抗氧化活性中的至少一种。
41.在一些实施例中，所述产品的类型为皮肤外用剂、化妆品、保健品和药物中的任意一种。皮肤外用剂可有是通常用于皮肤外部的所有成分的统称概念，例如可以是化妆品或药品。所述化妆品中可以是基础化妆品、面部妆容化妆品、眼部化妆品、头部用护理品、身体用化妆品等，对其剂型无特殊限制，根据不同目的可合理选择。
42.在一些实施例中，所述产品的形态为气态、固态和液态中的任意一种。所述的产品形式包括但不限于气溶胶型喷雾剂、霜剂、乳液、固体、液体、分散体、泡沫、凝胶、化妆水、摩丝、软膏、粉剂、贴剂、润发油、手按泵型喷雾剂、棒状物、面膜和湿纸巾。众所周知地，本发明的皮肤外用剂可为化妆品、皮肤病学或药物局部施用产品，其制备方法可为本领域常规的制备方法。
43.在一些实施例中，所述产品还可以包括载体，载体是本领域常规可药用载体，较佳地为防腐剂、香精、亲水性活性剂和亲脂性活性剂中的一种或多种。所述的可药用载体的含量为本领域常规的含量。
44.在一些实施例中，所述皮肤外用剂还可以进一步包括一种或多种下述成分：赋脂剂、分散剂、粘度调节剂、溶剂、增稠剂、美白剂、皮肤保护剂、螯合剂、祛斑剂、肤感调节剂、润肤剂、清洁剂、保湿剂、防晒剂、 ph调节剂、悬浮剂、增溶剂、缓冲剂、还原剂、乳化剂、乳化稳定剂、光稳定剂、清凉剂、表面改性剂、抗氧化剂、成膜剂或其任意组合。该些成分的含量可为本领域常规的含量。
45.在一些实施例中，所述特定功能还包括高产多糖。
46.在符合本领域常识的基础上，上述各优选或可选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
47.本发明实施例提供了如前述任意实施例所述的出芽短梗霉或如前述任意实施例所述的发酵物在制备具有特定功能的产品中的应用，所述特定功能包括：抗紫外线和抗氧化活性中的至少一种。
48.可以理解的是，应用中的产品的具体指代可以同前述任意实施例所述，不再赘述。
49.以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
50.实施例1
51.从采集自南极的潮间带土壤样本(样本编号：s02；采集地点：南极菲尔德斯半岛地区；经度058
°
57.8225
′
；纬度62
°
13.0705
′
；采样深度：0米；重量：100g；采样时间：2008年1月10日)中分离获得27株菌株，其中一株nj1p3(nj1p3为该菌株编号，下同)经分离后菌种鉴定，确定为出芽短梗霉(aureobasidium pullulans)，于2020年11月16日保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心(china general microbiological culture collectioncenter,cgmcc)，保藏地址：中国科学院微生物所，邮编：100101，保藏编号为cgmcc no.21195，培养物名称为出芽短梗霉osm-nj01-gly-1-01，分类命名为aureobasidium pullulans osm-nj01-gly-1-01。
52.对照菌株为从采集自云南的土壤中分离获得的出芽短梗霉，菌株编号为：yn128-1，从采集自甘肃菊科叶子上分离获得的出芽短梗霉，菌株编号为：23-1，其采集地属于海拔高、紫外辐射强，温差大的极端气候环境。
53.(1)紫外辐射(uv)环境中存活率测试
54.菌株活化：将保存于4℃的菌株在超净台内转到新的斜面上，28℃培养两天。菌株
培养：刮取活化的斜面上的菌落至50ml ypd培养基中(10g/l 酵母提取物、20g/l葡萄糖、20g/l蛋白胨)在摇床上培养48小时(28℃、 150rpm)。
55.菌体获取：取10ml培养两天的培养液离心(8000rpm、10min)，弃去上清，加入10ml无菌水，重悬菌体。
56.紫外照射：将获得的菌体悬浮液，于生物安全柜内(预先紫外预热10min)，进行紫外照射，时间为0s和20min，紫外照射后在平板内充分混合菌液，稀释10-3
后，取20μl进行pda涂布计数，每次测三个平行，28℃，避光培养48小时。
57.存活率计算：待平板培养结束以后进行平板计数，根据以下公式进行计算，得到存活率。
58.x＝1-(a-b)/a
×
100％；其中，x：存活率；a：0s平板生长菌落数； b：20min平板生长菌落数。
59.将来源于南极、云南和甘肃的出芽短梗霉的菌悬液进行紫外处理20分钟后，相比较对照菌株yn128-1和23-1，nj1p3存活率较高，表明nj1p3 抵抗强紫外辐射的能力更强。结果如图2所示。
60.(2)耐低温存活率测试
61.菌株活化：将保存于4℃的菌株在超净工作台内接种于新的pda斜面上，28℃培养两天。
62.菌株培养：刮取活化斜面上的菌落至50ml ypd培养基中(10g/l酵母提取物、20g/l葡萄糖、20g/l蛋白胨)在摇床上培养48小时(28℃、150rpm)。
63.菌体获取：取10ml培养液离心(8000rpm、10min)，弃去上清，加入 10ml无菌水，重悬菌体。
64.低温处理：取菌液1ml稀释10-3
，涂布平板。将菌悬液放置于-20℃冰箱一周，低温处理之后，将其稀释10-3
,取20μl进行pda涂布，每个菌株做三个平行，28℃，培养48小时。
65.存活率计算：待平板长出菌落之后进行计数，根据以下公式进行计算。
66.x＝1-(a-b)/a
×
100％；其中，x：存活率；a：低温处理之前的平板生长菌落数量；b：-20℃处理之后的平板生长菌落数量。
67.将两株菌株放置于-20℃冰箱中，放置于一周后，进行pda平板涂布，将平板上长出的菌落进行计数，计算其存活率。结果表明，nj1p3在-20℃条件下的存活率高于对照菌株yn128-1和23-1，表明nj1p3具有更强抵御低温环境的能力。如图3所示。
68.(3)耐高渗存活率测试
69.菌株活化：将保存于4℃的菌株在超净工作台内接种于新的pda斜面上，28℃培养两天。
70.菌株培养：刮取活化斜面上的菌落至50ml ypd培养基中(10g/l酵母提取物、20g/l葡萄糖、20g/l蛋白胨)在摇床上培养48小时(28℃、150rpm)。
71.菌体获取：取10ml培养液离心(8000rpm、10min)，弃去上清，加入 10ml无菌水，重悬菌体。
72.高渗环境培养：将菌悬液稀释10-3
，配置15％的nacl母液，用ynb 培养基(67g/l bacto yeast nitrogen base、50g/l葡萄糖)将nacl母液稀释至0％、5％和11％，其渗透压分别为接近0mosm、2000mosm和3142mosm (作为对比，细胞的渗透压约为300mosm，而普通海
水的渗透压为1000 mosm)。在96孔板中加入180μl ynb培养基以及20μl菌悬液，放入酶标仪(texan spark)培养，每隔一个小时测定od600，绘制生长曲线，直至达到平稳期，测定菌株在不同渗透压环境中生长情况。
73.研究表明，在渗透压接近0mosm的情况下，nj1p3生长情况较yn128-1 和23-1好，并且在8天左右到达平衡期。随着渗透压的升高，三株菌的生长逐渐减弱，但是nj1p3生长情况一直高于yn128-1和23-1，到达平衡期的时间也在延长，表明高渗环境会影响菌株的生长，但是nj1p3对高渗环境具有更强的抵御能力。结果如图4所示，从上到下环境渗透压依次为接近0mosm、2000mosm和3142mosm。
74.实施例2
75.菌株的形态学和培养学特征。
76.nj1p3菌株在麦芽汁液体培养基中25℃培养三天，细胞大小(3.0～5.7)
ꢀ×
(4.7～10.0)μm，卵形、椭圆形、长椭圆形，形成沉淀。麦芽汁琼脂斜面 25℃培养，菌落奶酪状，乳白色，表面湿润光滑，有光泽，两周后菌落变为黑色。玉米粉琼脂dalmau平板培养，不产生假菌丝。将测定nj1p3菌株 d1/d2序列(如seq id no.1所示)与ncbi数据库进行26s rdna序列blast比对，与aureobasidium pullulans strain同源性大于99％以上，具有非常相近的亲缘关系，再结合菌株的形态学特征，确定该菌株为出芽短梗霉。
77.seq id no.1所示序列如下：
78.gcggacctcagtcccggctggccgtattacacactgggctataacacctccaccgaagtggaggccacatt cccagagcctttatccggccgccgaaactgatgctggcctgtccaaactgagtaaaccggtcagaagaccggcc gaacagtttaaacaagtctgattgcaagcgcttccctttcaacaatttcacgtgctttttaactctctttccaaagtgctttt catctttcgatcactctacttgtgcgctatcggtctctcgccaatatttagctttagaagaaatttacctcccatttagagc tgcattcccaaacaactcgactcgtcgaaggagctttacataggttaacatttccagtcacatacgggattctcaccct ctatgacgtcctgttccaaggaacttagactggcgttttacccaaagcatcctctacaaattacaatgcgaacccgaa ggctagctttcaaatttgagctgttgccgcttcactcgccgttactagggcaatccctgttggtttcttttcctccgcttat tgatatgcttaagttcagcgggtatccctacctgatccgaggtcaacctagaaaaataaaggtttcaatcggcagagt tcctctcctttgacagacgttcgaataaattctactacgcctaaagccggagtggcctcgccgaggtctttaaggcgc gcccaactaaggacg。
79.实施例3
80.菌株的生理生化特性。
81.参照祖若夫，胡宝龙，周德庆《微生物学实验教程》(复旦大学出版社 1993年)对菌株进行生理生化特征分析。
82.结果发现，nj1p3菌株可以利用碳源葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、半乳糖、棉子糖、l-山梨糖等；不发酵葡萄糖、半乳糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、棉子糖；不同化碳源l-鼠李糖、甘油、半乳糖醇、乳糖、d-山梨醇、核糖醇。
83.将nj1p3菌株于2020年11月16日保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心(china general microbiological culture collection center,cgmcc)，保藏地址：中国科学院微生物所，邮编：100101，保藏编号为cgmcc no. 21195，培养物名称为出芽短梗霉osm-nj01-gly-1-01，分类命名为aureobasidium pullulans osm-nj01-gly-1-01。
84.实施例4
85.菌株的培养。
86.nj1p3菌株接种至pda液体培养基中，28℃培养48小时，得种子液；
87.接种5％(v/v)种子液于至pda液体培养基中，28℃，200rpm摇床培养2天。
88.实施例5
89.珍珠发酵物的制备。
90.分别将菌株yn128-1和nj1p3接种至pda液体培养基中，28℃培养 48小时，得种子液；
91.接种5％(v/v)种子液于至含有1％(w/w)珍珠粉的pda液体培养基中， 28℃，200rpm摇床培养5天，得培养液；
92.将培养液于8℃，8000rpm离心5分钟，取上清液过滤除菌即得珍珠发酵物。
93.实施例6
94.珍珠发酵物的多糖含量及分子量检测。
95.将两株菌株进行发酵培养，获得粗多糖，将菌体与粗多糖烘干后进行称重。结果表明，nj1p3菌体质量与粗多糖质量较yn128-1高，表明nj1p3 的生长活性较yn128-1高，发酵液中多糖含量也高于对照菌株yn128-1。结果如图5所示。
96.将发酵获得的粗多糖进行去蛋白处理之后，通过场流分离技术进行分子量的测定，nj1p3发酵产生的多糖的分子量分布和平均分子量。结果如表1所示。
97.表1发酵液中多糖分子量范围
[0098][0099][0100]
实施例7
[0101]
珍珠发酵物的抗氧化活性的检测。
[0102]
以vc为阳性对照，取1.5mg vc用1ml蒸馏水混匀溶解，得1.5mg/ml 的vc储备液，取100μl，稀释至30ml，获得浓度为0.005mg/ml的vc溶液，在反应中vc溶液终浓度为2.5ppm。
[0103]
按实施例5制备发酵样品，用dpph法测定其清除自由基的抗氧化活性。
[0104]
每1ml测试样品，用无水乙醇稀释2.5倍，3800rpm离心12min，取上清液，每2ml用超纯水稀释至4ml，得到终浓度10％的样品溶液；
[0105]
取样品溶液2ml加入试管中，加入2
×
10-4
mol/l dpph乙醇溶液2ml，混匀，25℃下避光反应30min，在517nm处测定吸光度a517；按照下面公式计算清除率，清除率越大抗氧化能力越强，结果见下表。
[0106]
清除率i(％)＝[1-(t-t0)/(c-c0)]
×
100％
[0107]
式中：t：2ml样品溶液加2ml dpph溶液的吸光度；
[0108]
t0：2ml样品溶液加2ml无水乙醇溶液的吸光度；
[0109]
c0：2ml水加2ml无水乙醇的吸光度；
[0110]
c：2ml dpph溶液加2ml超纯水的吸光度。
[0111]
表2不同菌种发酵液自由基清除率(％，n＝2)
[0112]
样品vcyn128-1珍珠发酵物nj1p3珍珠发酵物清除率23.7522.8956.07
[0113]
由上表可知，yn128珍珠发酵物自由基清除率远低于nj1p3珍珠发酵物，南极菌发酵液具有更强的抗氧化活性。
[0114]
实施例8
[0115]
珍珠发酵物抵御紫外损伤活性测试。
[0116]
按实施例5制备发酵样品。
[0117]
测定步骤为：
[0118]
将hacat细胞按5000个/孔接种于96孔板，待细胞融合度约80％时，按下表配制样品并处理细胞，置co2培养箱继续孵育。24h后，用uva或 uvb辐照细胞，并设置未辐照组为空白对照。uva辐照后立即吸掉培养基，加0.5mg/ml mtt，3h后加dmso提取甲臜，用酶标仪检测560nm处吸光度；uvb辐照后，置co2培养箱继续孵育。24h后，吸掉培养基，加0.5mg/mlmtt，3h后加dmso提取甲臜，用酶标仪检测560nm处吸光度。
[0119]
结果见表3和表4，表明珍珠发酵物有助于皮肤抵御uva和uvb损伤，并且效果与阳性对照0.005％vc效果相近。
[0120]
表3珍珠发酵物抵御uva损伤活性测试
[0121][0122]
表4珍珠发酵物抵御uvb损伤活性测试
[0123][0124]
[0125]
实施例9
[0126]
珍珠发酵物的保湿活性测试。
[0127]
按实施例5制备发酵样品，用体外称重法测试6％的透明质酸钠溶液和珍珠发酵物(固含量为5.95％)的保湿率。
[0128]
准确称取2.5g样品与透明质酸钠溶液，放置在干燥器(放置硅胶干燥剂)中，定时在2、4、6、8、24h后称量样品质量。结果如表5所示。
[0129]
表5珍珠发酵物保湿率
[0130]
时间(h)ha保湿率(％)珍珠发酵物保湿率(％)276.2578.57473.7376.19671.0073.53868.6670.802449.4852.48
[0131]
由表5可知，在各个时间下，珍珠发酵物保湿率都高于6％的透明质酸钠溶液，说明南极菌发酵液具有更好的保湿性。
[0132]
实施例10
[0133]
含有珍珠发酵物的精华液。
[0134]
按照本领域常规的化妆水的制备方法和表6组成成分，制得实施例10 的精华液。
[0135]
表6精华液组成成分表
[0136]
[0137]
实施例11
[0138]
含有珍珠发酵物的精华液稳定性测试。
[0139]
按实施例10制备的精华，进行耐热、耐寒、交变、光照等稳定性测试。其中，耐热测试条件为：45
±
1℃，恒温避光，7d；
[0140]
耐寒测试条件为：-20
±
1℃，恒温避光，7d；
[0141]
交变测试条件为：-20℃恒温3.5天转至45℃恒温3.5天，避光；
[0142]
光照测试条件为：光照恒温恒湿试验箱(1.47
×
106lux
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hr)，7d。
[0143]
测试结果如下表所示。
[0144]
表7稳定性测试
[0145][0146][0147]
以上结果表明，本发明的珍珠发酵物制备的化妆品，具优良稳定性。
[0148]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。