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一种无血清培养基用添加剂及其应用的制作方法

2022-04-13 19:49:35 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种无血清培养基用添加剂,所述添加剂各组分在无血清培养基中的终浓度为:组分终浓度/mg/l瓜氨酸20-200l-茶氨酸0.1-5牛磺酸5-125d-半乳糖10-900棉子糖100-500n-乙酰甘露糖胺100-500。2.根据权利要求1所述的无血清培养基用添加剂,其特征在于:所述添加剂各组分在无血清培养基中的终浓度为:组分终浓度/mg/l瓜氨酸30-180l-茶氨酸0.5-3.6牛磺酸20-120d-半乳糖100-800棉子糖200-400n-乙酰甘露糖胺150-360。3.一种无血清培养基,由基本培养基成分和添加剂组成,其特征在于:所述添加剂如权利要求1或2所述。4.根据权利要求3所述的无血清培养基,其特征在于:所述基本培养基成分的组成为:
5.根据权利要求4所述的无血清培养基,其特征在于:所述基本培养基成分的组成为:
6.一种细胞的无血清培养方法,其特征在于:其使用的无血清培养基如权利要求3~5任一项所述。7.根据权利要求6所述的无血清培养方法,其特征在于:所述细胞用于生产重组蛋白。8.根据权利要求7所述的无血清培养方法,其特征在于:包括如下步骤:s1)对细胞进行驯化,使其适应无血清培养基;s2)将编码目的蛋白基因片段的表达载体导入细胞,以导入外源基因;s3)导入外源基因24h后,加入适量链烷酸和/或链烷酸盐,继续培养;s4)收集表达上清,分离、纯化得到重组蛋白。
9.根据权利要求8所述的无血清培养方法,其特征在于:所述细胞为293细胞;优选的,所述293细胞为悬浮细胞。10.根据权利要求8或9所述的无血清培养方法,其特征在于:所述重组蛋白选自重组mica、micb、ulbp、nkg2d或ige蛋白。

技术总结
本发明属于生物技术领域,公开了一种无血清培养基用添加剂及其应用。添加剂由瓜氨酸、L-茶氨酸、牛磺酸、D-半乳糖、棉子糖和N-乙酰甘露糖胺组成。添加了该添加剂的无血清培养基可以使细胞在悬浮状态下快速生长,结合丁酸钠使用可促进293细胞表达高活性的重组蛋白,有助于在短期内获得大量的具有生物活性的重组蛋白。白。


技术研发人员:陈校园 杨睿祯 杨正根 张海珍 李家萍 陈思锐
受保护的技术使用者:广州康盛生物科技股份有限公司
技术研发日:2021.12.30
技术公布日:2022/4/12
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