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油菜基因BnCAMTA3的抗病调控功能应用

2022-04-09 09:52:38 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种油菜基因bncamta3的抗病调控功能应用,其特征在于,所述功能是油菜(brassica napus)钙信号途径基因bncamta3对抗病性的调控功能,所述基因bncamta3的核苷酸序列如seq id:1所示,其编码的蛋白序列如seq id:2所示。2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述应用是通过创制转基因油菜(brassica napus)来获取抗病性得到改变的油菜材料中的应用。3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,在通过创制超表达bncamta3的转基因油菜来获得增高菌核病抗性的油菜材料中的应用。4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,在通过创制bncamta3-rnai转基因油菜来获得降低菌核病抗性的油菜材料中的应用。5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,通过以下步骤实现获得增高菌核病抗性的油菜材料中的应用:(1)bncamta3基因超表达结构的构建和获取将bncamta3基因开放阅读框(orf)克隆入一个植物表达载体,使其受强启动子的驱使表达;(2)转化bncamta3基因超表达结构的农杆菌的获取将构建好的bncamta3基因超表达结构通过电击等方法转化对油菜具有强侵染能力的农杆菌菌株;(3)超表达bncamta3的转基因油菜创制和获取通过农杆菌介导法将bncamta3基因超表达结构导入油菜,获取转bncamta3基因超表达结构的油菜;(4)超表达bncamta3的转基因油菜纯合系的获取分别以抗生素抗性和bncamta3基因表达为检测指标,检测转基因植株后代的性状分离情况,获取后代性状不再分离的、并能稳定遗传的超表达bncamta3的转基因油菜纯合系;(5)对菌核病抗性增高的超表达bncamta3的转基因油菜纯合系筛选鉴定和获取以超表达bncamta3的转基因油菜纯合系为材料,检测分析对菌核病的抗性,获取抗病性增高的转bncamta3基因油菜。6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,通过以下步骤实现获得降低菌核病抗性的油菜材料中的应用:(1)bncamta3基因rnai结构的构建和获取将bncamta3基因的一个特异性序列片段分别以正反方向克隆入中间表达载体pkannibal,再将重组结构插入rnai载体(part27),获取rnai结构part27-bncamta3;(2)转化bncamta3基因rnai结构的农杆菌的获取将bncamta3基因rnai结构(part27-bncamta3)通过电击等方法转化对油菜具有强侵染能力的农杆菌菌株;(3)转bncamta3基因rnai结构油菜的创制和获取通过农杆菌介导法将bncamta3基因rnai结构导入油菜,获取转bncamta3基因rnai结构的油菜;(4)转bncamta3基因rnai结构油菜纯合系的获取分别以抗生素抗性和bncamta3基因表达为检测指标,检测转基因植株后代的性状分离
情况,获取后代性状不再分离的、并能稳定遗传的转bncamta3基因rnai结构的油菜纯合系;(5)抗菌核病的转bncamta3基因rnai结构油菜纯合系的筛选鉴定和获取以转bncamta3基因rnai结构(part27-bncamta3)的油菜纯合系为材料,检测分析对菌核病的抗性,获取抗菌核病的bncamta3基因rnai油菜。

技术总结
本发明提供油菜基因BnCAMTA3的抗病调控功能应用,具体提供一种油菜基因BnCAMTA3在菌核病防控中的应用,是通过创制转基因油菜(Brassica napus)来获取抗病性得到改变的油菜材料中的应用。本发明构建了BnCAMTA3的超表达和RNAi转基因油菜,首次揭示了该基因对菌核病抗性的正调控功能,提供了通过创制BnCAMTA3-RNAi油菜来获取菌核病抗性下降的油菜材料的应用,以及通过创制BnCAMTA3超表达油菜来获取抗菌核病油菜材料的应用。本发明提供的BnCAMTA3基因是一种适用于创制和选育抗菌核病油菜新材料和新品种的新基因资源,对于菌核病绿色防控有较重要意义。核病绿色防控有较重要意义。


技术研发人员:蔡新忠 任春秀 杨玉涵
受保护的技术使用者:浙江大学
技术研发日:2021.12.29
技术公布日:2022/4/8
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