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一种放线菌的特征肽及其应用的制作方法

2022-03-02 02:32:30 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种放线菌(actinomyces graevenitzii)的特征肽,其特征在于,氨基酸序列为ieeslgedavyagasafpr、aqtvedvistisgqvqsvdwk、sewegtlssqlr和aflgmdiegvr中的至少一种。2.如权利要求1所述特征肽在非医学诊断为目的的检测放线菌中的应用。3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,检测使用液相色谱质谱联用方法。4.一种非医学诊断为目的的检测放线菌的方法,其特征在于,使用液相色谱质谱联用方法检测样品,若样品中存在权利要求1所述特征肽,则样品中存在放线菌。5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,待检测的样品为以下一种:(1)人口腔、食道、胃、肠道或肺来源样品,(2)环境样本。6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:将待测的样品经蛋白质提取、胰蛋白酶进行酶切处理后,取酶解溶液经截留分子量3k-10k的超滤管离心超滤,收集滤液冷冻干燥,脱盐后干燥含多肽的洗脱液,加0.1%甲酸溶解,经多肽含量定量后进样,经液相色谱c
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柱梯度分离和高分辨质谱进行谱图采集、鉴定。7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,液相色谱质谱联用时,进样量为0.5~1g,进样流速为10nl/分钟;液相色谱c
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柱梯度分离的条件如下:a相为含0.1%甲酸的水溶液,b相为含0.1%甲酸的乙腈溶液。8.如权利要求6所述的方法,其特征在于,谱图采集时间为150分钟,纳升液相分离梯度如下:9.如权利要求6所述的方法,其特征在于,高分辨质谱进行谱图采集的参数如下:高分辨质谱进行谱图采集的参数如下:

技术总结
本发明公开了一种放线菌的特征肽及其应用。本发明研究发现了放线菌(Actinomyces graevenitzii)特征性多肽,能够用于放线菌检测鉴定,本发明所提供的特征性多肽的氨基酸序列为IEESLGEDAVYAGASAFPR、AQTVEDVISTISGQVQSVDWK、SEWEGTLSSQLR和AFLGMDIEGVR中的至少一种,该特征性多肽为放线菌所特有,可用液相色谱串联质谱进行鉴定。该方法具有特异性强,灵敏度高,能够准确的鉴定放线菌。定放线菌。定放线菌。


技术研发人员:高神骏 冯丽君 楼兵干 高其康
受保护的技术使用者:浙江大学
技术研发日:2021.10.27
技术公布日:2022/3/1
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