工程化免疫细胞及其用途的制作方法

技术特征：
1.一种工程化免疫细胞，其表达(i)嵌合受体，和(ii)外源性的ccl3、ccl4和/或ccl5基因。2.权利要求1所述的工程化免疫细胞，其中所述ccl3基因与seq id no：77或79所示的核酸序列具有至少90％同一性，或者所述ccl3基因编码的多肽与seq id no：78或80所示的氨基酸序列具有至少90％同一性；ccl4基因与seq id no：81或83所示的核酸序列具有至少90％同一性，或者所述ccl4基因编码的多肽与seq id no：82或84所示的氨基酸序列具有至少90％同一性；ccl5基因与seq id no：85或87所示的核酸序列具有至少90％同一性，或者所述ccl5基因编码的多肽与seq id no：86或88所示的氨基酸序列具有至少90％同一性。3.权利要求1-2任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述工程化免疫细胞进一步表达(iii)外源性的白细胞介素。4.权利要求3所述的工程化免疫细胞，其中所述白细胞介素是il-2、il-7、il-12、il-15、il-21、il-17、il-18、il-23、il-33、或其亚基、或其组合、或其亚基的组合。5.权利要求4所述的工程化免疫细胞，其中所述白细胞介素的编码基因与seq id no：41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75所示的核酸序列具有至少90％同一性，或者所述白细胞介素与seq id no：42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76所示的氨基酸序列具有至少90％同一性。6.权利要求1-5任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述嵌合受体是嵌合抗原受体或t细胞受体。7.权利要求6所述的工程化免疫细胞，其中所述嵌合受体是包含以下的嵌合抗原受体：配体结合结构域、跨膜结构域、共刺激结构域和胞内信号传导结构域。8.权利要求7所述的工程化免疫细胞，其中所述配体结合结构域选自免疫球蛋白分子、fab、fab'、f(ab')2、fv片段、scfv、二硫键-连接的fv(sdfv)、抗体的重链可变区(vh)或轻链可变区(vl)、由vh和ch1结构域组成的fd片段、线性抗体、单结构域抗体、纳米抗体，以及非免疫球蛋白抗原结合支架。9.权利要求7或8所述的工程化免疫细胞，其中所述配体结合结构域与选自以下的靶标结合：tshr、cd19、cd123、cd22、baff-r、cd30、cd171、cs-1、cll-1、cd33、egfrviii、gd2、gd3、bcma、gprc5d、tn ag、psma、ror1、flt3、fap、tag72、cd38、cd44v6、cea、epcam、b7h3、kit、il-13ra2、间皮素、il-l lra、psca、prss21、vegfr2、lewisy、cd24、pdgfr-β、ssea-4、cd20、afp、folate受体α、erbb2(her2/neu)、muc1、egfr、cs1、cd138、ncam、claudin18.2、prostase、pap、elf2m、ephrin b2、igf-i受体、caix、lmp2、gploo、bcr-abl、酪氨酸酶、epha2、fucosyl gml、sle、gm3、tgs5、hmwmaa、o-乙酰基-gd2、folate受体β、tem1/cd248、tem7r、cldn6、gprc5d、cxorf61、cd97、cd 179a、alk、多聚唾液酸、plac1、globoh、ny-br-1、upk2、havcr1、adrb3、panx3、gpr20、ly6k、or51e2、tarp、wt1、ny-eso-1、lage-la、mage-a1、豆荚蛋白、hpv e6、e7、mage al、etv6-aml、精子蛋白17、xage1、tie 2、mad-ct-1、mad-ct-2、fos相关抗原1、p53、p53突变体、前列腺特异性蛋白、存活蛋白和端粒酶、pcta-l/galectin 8、melana/martl、ras突变体、htert、肉瘤易位断点、ml-iap、erg(tmprss2 ets融合基因)、na17、pax3、雄激素受体、cyclin bl、mycn、rhoc、trp-2、cyp1b 1、boris、sart3、pax5、oy-tes 1、lck、akap-4、ssx2、rage-1、人端粒酶逆转录酶、ru1、ru2、肠道羧酸酯酶、mut hsp70-2、cd79a、cd79b、cd72、lair1、fcar、lilra2、cd300lf、clec12a、bst2、emr2、ly75、gpc3、fcrl5、igll1、
pd1、pdl1、pdl2、tgfβ、april、nkg2d和它们的任意组合。10.权利要求7-9所述的工程化免疫细胞，其中所述跨膜结构域选自以下蛋白质的跨膜结构域：tcrα链、tcrβ链、tcrγ链、tcrδ链、cd3ζ亚基、cd3ε亚基、cd3γ亚基、cd3δ亚基、cd45、cd4、cd5、cd8α、cd9、cd16、cd22、cd33、cd28、cd37、cd64、cd80、cd86、cd134、cd137和cd154。11.权利要求7-10任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述胞内信号传导结构域选自以下蛋白的信号传导结构域：fcrγ、fcrβ、cd3γ、cd3δ、cd3ε、cd3ζ、cd22、cd79a、cd79b和cd66d。12.权利要求7-11任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述共刺激结构域是一个或多个选自以下蛋白质的共刺激信号传导结构域：tlr1、tlr2、tlr3、tlr4、tlr5、tlr6、tlr7、tlr8、tlr9、tlr10、card11、cd2、cd7、cd8、cd18(lfa-1)、cd27、cd28、cd30、cd40、cd54(icam)、cd83、cd134(ox40)、cd137(4-1bb)、cd270(hvem)、cd272(btla)、cd276(b7-h3)、cd278(icos)、cd357(gitr)、dap10、dap12、lat、nkg2c、slp76、pd-1、light、trim、cd94、ltb、zap70以及它们的组合。13.权利要求1-12任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述免疫细胞还包含至少一种失活基因，其选自以下：cd52、gr、tcrα、tcrβ、cd3γ、cd3δ、cd3ε、cd247ζ、hla-i、hla-ii、b2m、pd1、ctla-4、lag3和tim3。14.权利要求1-13任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述ccl3、ccl4和/或ccl5基因的表达是条件型表达。15.权利要求1-13任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述ccl3、ccl4和/或ccl5基因与定位结构域可操作连接。16.权利要求1-15任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述免疫细胞选自t细胞、巨噬细胞、树突状细胞、单核细胞、nk细胞、或nkt细胞。17.权利要求16所述的工程化免疫细胞，其中所述t细胞是cd4 /cd8 t细胞、cd4 辅助t细胞、cd8 t细胞、肿瘤浸润细胞、记忆t细胞、幼稚t细胞、γδ-t细胞或αβ-t细胞。18.权利要求1-17所述的工程化免疫细胞，其中所述免疫细胞衍生自成体干细胞、胚胎干细胞、脐带血干细胞、祖细胞、骨髓干细胞、诱导多能干细胞、全能干细胞或造血干细胞。19.一种核酸分子，其包含：(i)编码嵌合受体的核酸序列，和(ii)编码ccl3、ccl4和/或ccl5的核酸序列。20.权利要求19所述的核酸分子，其中所述嵌合受体是嵌合抗原受体。21.权利要求19所述的核酸分子，其进一步包含编码白细胞介素的核酸序列。22.权利要求21所述的核酸分子，其中所述白细胞介素是il-2、il-7、il-12、il-15、il-21、il-17、il-18、il-23、il33、其亚基、或其组合、或其亚基的组合。23.一种载体，其包含权利要求19-22任一项所述的核酸分子。24.一种药物组合物，其包含权利要求1-18任一项所述的工程化免疫细胞、权利要求19-22任一项所述的核酸分子或权利要求23所述的载体，和一种多种药学上可接受的赋型剂。25.权利要求1-18任一项所述的工程化免疫细胞、权利要求19-22任一项所述的核酸分子、权利要求23所述的载体、或权利要求24所述的药物组合物在制备治疗癌症、感染或自身
免疫性疾病的药物中的用途。

技术总结
本发明涉及一种工程化免疫细胞，其表达(i)嵌合受体，和(ii)外源性的CCL3、CCL4和/或CCL5。本发明还提供了该工程化免疫细胞在治疗癌症、感染或自身免疫性疾病中的用途。与传统的工程化免疫细胞细胞相比，本发明的工程化免疫细胞具有显著提高的肿瘤杀伤活性。疫细胞具有显著提高的肿瘤杀伤活性。疫细胞具有显著提高的肿瘤杀伤活性。


技术研发人员：邢芸 任江涛 贺小宏 王延宾 韩露
受保护的技术使用者：南京北恒生物科技有限公司
技术研发日：2021.08.12
技术公布日：2022/2/23