一种氢化烟酰胺核糖的制备方法及应用与流程

1.本发明涉及有机合成技术领域，尤其涉及一种氢化烟酰胺核糖的制备方法及应用。


背景技术：

2.氢化烟酰胺核糖，简称为nrh，其分子结构式为是天然存在的一种淡黄色的有机化合物，在谷氨酸棒状杆菌、乳酸杆菌等细菌的代谢物中可少量发现，但含量非常低，低于0.1％。
3.烟酰核苷是维生素b3的衍生物，并作为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad )的驱动物质。研究者对能够增加组织细胞nad 含量的药物的兴趣浓度刺激了烟酰核苷(nr)和烟酰胺单核苷酸(nmn)的大量深入研究。2016年市场首先出现的nad 药物是nr，属于第一代nad 补充剂，之后2018年出现了第二代nad 补充剂也就是nmn，nmn出现之后因为效果良好，市场上销售情况也非常好。但是从目前大量的研究文献可知，nr和nmn需要较大剂量才能起作用。动物实验表明，nrh提升组织细胞nad 的功效远优于第一代和第二代产品，效果提升2-5倍。不同于已知的nr与nmn转化成nad 的机制，nrh在较低剂量即可显著升体外培养皿中细胞nad 的浓度，在体内试验中，较小的nrh补充剂量也实现了各种组织细胞中nad 浓度的显著提升。
4.现有技术中nrh是从细菌代谢物种提取nrh，其耗时长且工艺非常复杂，所以成本十分昂贵，每克成本超过1万元，而且最终纯度只能达到90％左右。市面上销售的氢化烟酰胺核糖大多数是烟酰胺核糖的氯化盐，并非氢化烟酰胺核糖，目前，文献中尚未有人工合成高纯度nrh方法的报道。


技术实现要素：

5.为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，其以低成本化合物烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)为原料，通过低温化学催化的方法，合成氢化烟酰胺核糖核糖(nrh)，其成本低，且纯度高。
6.本发明的目的之二在于提供一种将上述制备方法所得的氢化烟酰胺核糖在提高nad 水平、细胞修复、皮肤修复、抗衰老、提升精力，改善睡眠、慢性病预防和康复、还有特医食品、药品等领域的应用。
7.本发明的目的之一采用如下技术方案实现：
8.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
9.s1：将烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐在溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，
分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐；
10.s2：在惰性和弱碱性氛围下，将烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐与还原剂置于微通道反应器中，在低温下反应，得到粗产物；
11.s3：采用高效液相色谱法对粗产物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖。
12.进一步地，在步骤s1中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:1～1:3。
13.进一步优选地，所述三氟甲磺酸盐为三氟甲磺酸钠、三氟甲磺酸钾、三氟甲磺酸锂、三氟甲磺酸镁中的一种或者两种以上。
14.进一步地，在步骤s1中，溶剂为纯净水。
15.进一步地，在步骤s2中，烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐与还原剂的摩尔比为1：(0.8-1.2)。
16.进一步优选地，所述还原剂为连二亚硫酸钠。
17.进一步地，步骤s2的具体步骤为：
18.在惰性气氛下，调配磷酸氢钾溶液，将ph值调配至8.0-10.0，并将温度降低至-10℃～5℃并保持低温，然后加入烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入还原剂，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和缚酸剂送入微通道反应器中，并在-10℃～5℃和惰性气氛下反应5min-20min，粗产物以固体形式沉淀出来。
19.进一步优选地，所述烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐与磷酸氢钾溶液、缚酸剂的质量比为(0.01-0.05)：1：(0.012-0.055)。
20.进一步优选地，所述缚酸剂为三乙胺；所述微通道反应器中微型通道的内径为0.1mm-1mm，长度为5m-10m。
21.进一步地，在步骤s3中，高效液相色谱法中纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇。
22.本发明的目的之二采用如下技术方案实现：
23.一种上述制备方法所得的氢化烟酰胺核糖在制备提高nad 水平、细胞修复、皮肤修复、抗衰老、提升精力、改善睡眠、慢性病预防和康复、特医食品、药品的产品中的应用。
24.相比现有技术，本发明的有益效果在于：
25.本发明的制备方法以低成本化合物烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐为原料，通过低温化学催化的方法，合成氢化烟酰胺核糖核糖，其成本低，且纯度高，并将烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐通过一步法制备得到氢化烟酰胺核糖，大大地缩短氢化烟酰胺核糖的制备时间。
26.本发明的制备方法在nr-triflate与还原剂的反应中，由于反应溶液的弱碱性的变化，越趋向于碱性时，反应越容易向正方向进行，且温度越低，反应所得的粗产物产率更高，更容易通过高效液相色谱设备纯化后，纯度更高。
27.本发明所使用的微通道反应器是经过微加工和精密技术制造的一种多通道微机构的小型反应器，其是在高压恒流泵推动下进行反复撞击的原理进行反应，有效提高收得率，缩短反应时间，减少副反应的发生，完全消除放大效应。本发明的制备方法通过将烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐与还原剂的反应置于微通道反应器中，通过控制微通道反应条
件，降低副反应的产生，从而能够提高氢化烟酰胺核糖的产量。
28.本发明的制备方法在烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐与还原剂的反应中，加入了缚酸剂，三乙胺能够与三氟甲磺酸生成盐，以促进反应进行，同时，可以加入金属粉(锌粉、镁粉、铁粉、铝粉)，能使盐重新分解出三乙胺，以三乙胺能够循环使用，环保性好。加入了磷酸氢钾溶液，一方面作为溶剂，另一方面可以对nr-triflate中的-oh作保护，避免在还原反应的过程中与还原剂发生反应，同时在三乙胺的缚附中，又从nrh中脱离。
附图说明
29.图1为本发明的实施例1的nrh提升nad 的效果图，其中，ctrl为空白对照组；
30.图2为本发明的实施例1的nrh与其它补充剂的相互功效对比图，其中，ctrl为空白对照组。
具体实施方式
31.下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。需要说明的是，其中实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，不构成对本发明保护范围的限制。另外，本发明使用的原料均为普通市售产品，因此不需要对其来源做具体限定。
32.产率是以实际的产品质量与理论的产品质量的百分比比值，理论的产品质量是以反应方程式中不过量的原料进行计算。
33.实施例1烟酰胺核糖的氯化盐的制备
34.将四乙酰核糖和烟酰胺加入反应缓冲液中，在生物催化剂和hcl的作用下，进行催化反应，生成烟酰胺核糖的氯化盐(nr-cl)，其中，反应温度为40℃-50℃，反应时间为6h-12h，溶液ph＝6.5-7.0，反应缓冲液是质量比为1：(1-3)的咪唑-磷酸缓冲液，生物催化剂为质量比为1：(0.5-0.8)的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶(nmnat)和烟酰胺核糖苷激酶(nrk)的组合物，生物催化剂、四乙酰核糖和烟酰胺的质量比为(1-1.5):1:(0.8-1)。
35.在本实施例中，反应温度为45℃，反应时间为6h，溶液ph＝6.5，反应缓冲液是质量比为1：2的咪唑-磷酸缓冲液，生物催化剂为质量比为1：0.6的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶(nmnat)和烟酰胺核糖苷激酶(nrk)的组合物，生物催化剂、四乙酰核糖和烟酰胺的质量比为1:1:0.8，产品产率为90.6％。
36.上述的烟酰胺核糖的氯化盐的制备方法中通过采用nmnat和nrk所组成的生物催化剂，对四乙酰核糖和烟酰胺进行酶催化反应，得到产率较高的烟酰胺核糖的氯化盐。
37.实施例2
38.将四乙酰核糖和烟酰胺加入反应缓冲液中，在生物催化剂和hcl的作用下，进行催化反应，生成烟酰胺核糖的氯化盐(nr-cl)，其中，反应温度为45℃，反应时间为10h，溶液ph＝6.8，反应缓冲液是质量比为1：2的咪唑-磷酸缓冲液，生物催化剂为质量比为1：0.6的烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶(nmnat)和烟酰胺核糖苷激酶(nrk)的组合物，生物催化剂、四乙酰核糖和烟酰胺的质量比为1.2:1:0.9，产品产率为92.9％。
39.以下实施例中，可以采用实施例1和实施例2所制备的烟酰胺核糖的氯化盐或者市
售的烟酰胺核糖的氯化盐，微通道反应器中微型通道的内径为0.5mm，长度为8m。
40.实施例3
41.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
42.s1：将100g的市售的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:1；
43.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至8.5，并将温度降低至0℃并保持低温，然后加入1％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和三乙胺送入微通道反应器中，并在0℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:0.8，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.01：1：0.016，粗产物的产率为为70.6％。
44.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为90.1％，纯度98.8％。
45.实施例4
46.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
47.s1：将100g的市售的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:1；
48.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至9.8，并将温度降低至-6℃并保持低温，然后加入1％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和三乙胺送入微通道反应器中，并在-6℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:0.8，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.01：1：0.016，粗产物的产率为77.1％。
49.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为94.3％，纯度99.0％。
50.实施例5
51.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
52.s1：将100g的市售的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:2；
53.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至8.5，并将温度降低至0℃并保持低温，然后加入3％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和三乙胺送入微通道反应器中，并在0℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:0.8，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.01：1：0.02，粗产物的产率为73.2％。
54.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产
物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为91.7％，纯度97.4％。
55.实施例6
56.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
57.s1：将100g的市售的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:2；
58.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至9.0，并将温度降低至2℃并保持低温，然后加入3％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和三乙胺送入微通道反应器中，并在2℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:0.8，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.01：1：0.02，粗产物的产率为72.9％。
59.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为93.4％，纯度96.8％。
60.实施例7
61.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
62.s1：将100g的市售的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:3；
63.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至8.5，并将温度降低至0℃并保持低温，然后加入1％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和三乙胺送入微通道反应器中，并在0℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:1，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.01：1：0.03，粗产物的产率为78.4％。
64.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为95.3％，纯度99.0％。
65.实施例8
66.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
67.s1：将100g的市售的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:3；
68.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至10.0，并将温度降低至-10℃并保持低温，然后加入1％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和三乙胺送入微通道反应器中，并在-10℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:1，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.01：1：0.03，粗产物的产率为80.2％。
69.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产
物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为97.7％，纯度99.8％。
70.实施例9
71.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
72.s1：将100g的实施例1的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:1.5；
73.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至8.5，并将温度降低至0℃并保持低温，然后加入1％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和三乙胺送入微通道反应器中，并在0℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:0.8，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.02：1：0.016，粗产物的产率为75.5％。
74.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为92.6％，纯度99.2％。
75.实施例10
76.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
77.s1：将100g的实施例1的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:1.5；
78.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至8.2，并将温度降低至2℃并保持低温，然后加入1％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和三乙胺送入微通道反应器中，并在2℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:0.8，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.02：1：0.016，粗产物的产率为71.9％。
79.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为88.3％，纯度98.8％。
80.实施例11
81.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
82.s1：将100g的实施例2的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:1；
83.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至8.5，并将温度降低至0℃并保持低温，然后加入1％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液送入微通道反应器中，并在0℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:1.1，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.01：1：0.016，粗产物的产率为为65.6％。
84.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产
物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为84.2％，纯度99.0％。
85.实施例12
86.一种氢化烟酰胺核糖的制备方法，包括如下制备步骤：
87.s1：将100g的实施例2的烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸钠在10l水溶剂中反应，然后采用浓缩结晶法，分离出烟酰胺核糖的三氟甲基磺酸盐(nr-triflate)，其中，烟酰胺核糖的氯化盐与三氟甲磺酸盐的摩尔比为1:1；
88.s2：在n2惰性气氛下，调配100ml的磷酸氢钾溶液，将ph值调配至8.5，并将温度降低至0℃并保持低温，然后加入1％质量比的nr-triflate，待其完全溶解并充分搅拌混合后，得到混合液，接着，向上述混合液中加入连二亚硫酸钠，充分搅拌混合，得到混合反应溶液，将混合反应溶液和三乙胺送入微通道反应器中，并在0℃和n2惰性气氛下反应5min，粗产物以固体形式沉淀出来；其中，nr-triflate与连二亚硫酸钠的摩尔比为1:0.8，nr-triflate与磷酸氢钾溶液、三乙胺的质量比为0.01：1：0.016，微通道反应器中微型通道的内径为0.8mm，长度为8m。粗产物的产率为为68.4％。
89.s3：采用以纯化柱为c-18柱，洗脱液为纯水或纯异丙醇的高效液相色谱法对粗产物进行纯化，得到纯化后的氢化烟酰胺核糖，产物纯化后的产率为88.5％，纯度94.9％。
90.性能测试
91.1、功效试验
92.为了确定本发明所得的nrh是否比其他nad 前体拥有更好的效果，我们以腹腔注射的方法，以同样的250mg/kg的剂量给小鼠分别补充实施例1的nrh、nmn、nr、空白对照剂，然后在4小时后，测试小鼠肝脏和肾脏组织细胞中nad 的浓度(参见图1和图2)。
93.如图2所示，发现在肾脏中，对比于空白组，nr、nrh和nmn三种补充剂都明显增加了nad ，其中nrh提高肾脏中nad 浓度的效果为180％，而nr与nmn的提升效果则只有159％和156％。在肝脏中，nrh使nad 的浓度提升了惊人的540％，而nr和nmn分别只使nad 增加了132％和149％。
94.因此，在同等剂量下，与nr和nmn做对比，nrh提供了更大的nad 提升功效，服用较低剂量即可显著提升体内nad 的浓度。我们也做了体外培养皿中的细胞实验，发现了同样的结果。
95.2、毒性试验
96.nad 浓度的大幅增加导致我们想知道对nrh对细胞可能的毒性。我们将neuro2a系细胞暴露于非常高浓度(1mm nrh)的环境中，24小时后查看细胞的状况，发现即便细胞暴露在超高浓度的nrh中，细胞的数量和质量没有明显的变化，表示nrh不具备细胞毒性。此外，我们以1000mg/kg的高剂量以腹腔注射的方式给型号为c57bl/6j的小鼠进行了为期6个月的nrh补充实验，实验过程中未发现该剂量的nrh对小鼠产生了任何的毒副作用。体外细胞实验和体内动物实验均表明nrh的毒副作用非常低，与nr和nmn类似。
97.上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。