一种7-丁炔-四氢异喹啉类口服小分子抗炎药物及其制备方法和应用

本发明涉及一类以7-丁炔-四氢异喹啉为母核的化合物，涉及它的制备方法以及体内外抗炎活性，因而本发明涉及它在制备抗炎药物中的应用。本发明属于生物医药。

背景技术：

1、炎症是机体受到组织损伤、物理损伤、缺血损伤、细菌病毒感染等损伤做出的反应。机体的炎症反应引起细胞变化和免疫反应，从而导致受损组织的修复和受损组织部位的细胞增殖。如果炎症一直存在，就会导致慢性炎症的发生。慢性炎症环境下，细胞会发生突变和增殖，通常会创造一个有利于癌症发展的环境。因此，调控炎症是至关重要的。

2、tnf-α主要是由活化的巨噬细胞和t淋巴细胞产生的。高水平的tnf-α与多种炎症性疾病如类风湿关节炎(ra)、克罗恩病、溃疡性结肠炎、糖尿病、多发性硬化和动脉粥样硬化相关。目前主要通过注射生物制剂如阿达木单抗、英夫利昔、特纳西普等药物与体内tnf-α结合，降低人体内的tnf-α水平，但是此类生物制剂存在着费用昂贵、无法口服、患者依从性差等问题。

3、tnf-α转换酶(tace)是负责切割膜结合型tnf-α(pro-tnf-α)生成可溶性tnf-α的关键蛋白酶。因此，抑制tace活性是阻断tnf-α释放、调控炎症的另一重要策略。开发高效、可口服的小分子tace抑制剂被认为是克服现有生物制剂缺点的理想途径。然而，现有报道的小分子tace抑制剂在活性、选择性、安全性等方面仍存在不足，亟需新型结构的高效抑制剂。

4、目前进入临床试验的tace抑制剂(如tmi-1、incb7839)均采用强锌离子结合剂羟肟酸基团与tace活性部位的锌离子配位，提升抑制剂对tace的亲和力。羟肟酸类抑制剂虽能有效抑制tace酶活性，但也与其他含有锌离子的mmp家族成员结合，影响其下游调控通路，造成严重肝毒性及肌肉骨骼副作用，导致多项ii期临床试验终止。因此，提升tace抑制剂的选择性，进而减少副作用是目前研究的热点。

5、喹啉及其衍生物是一类具有重要生物活性的杂环化合物，部分喹啉类生物碱已被证实具有抑制促炎细胞因子产生的潜力。这提示对喹啉结构进行合理修饰，有望获得具有良好抗炎活性的新型化合物。

6、本发明设计了一类基于四氢异喹啉母核的新型小分子抑制剂：以具有抗炎作用的天然产物骨架四氢异喹啉为母核；以较弱的锌离子结合基团羧基替代强锌离子结合基团羟肟酸，降低副作用风险；同时以tace特异切割二肽(aa1-aa2)修饰母核结构，提升抑制剂与靶点的选择性和亲和力；以丁炔基团与tace特异s1’-s3’深口袋结合，提升抑制剂与靶点的选择性。发明人发现设计的7-丁炔-四氢异喹啉类化合物在体外raw 264.7细胞模型中能有效地抑制tnf-α释放，在小鼠lps急性炎症实验中能有效降低血清tnf-α水平，在小鼠体内耳肿胀模型具有良好的抗炎活性且呈现一定的剂量依赖。

7、故，发明人提出了本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一类新型的口服小分子抗炎药物及其制备方法和应用。

2、为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

3、本发明的第一个目的是提供一种具有通式i结构的(3s)-2-(aa1-aa2)-7-丁炔-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-酸，其中，aa1-aa2为val-phe、thr-phe、ser-phe或leu-phe，分别命名为butyn-fv-ql、butyn-fl-ql、butyn-ft-ql、butyn-fs-ql。

4、

5、本发明的第二个目的是提供所述的(3s)-2-(aa1-aa2)-7-丁炔-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-酸的制备方法，该方法包括以下步骤:

6、(1)采用二环己基碳二亚胺(dcc)为缩合剂，1-羟基苯并三氮唑(hobt)为催化剂的液相缩合的方法，合成boc-phe-val-obzl、boc-phe-leu-obzl、boc-phe-thr-obzl、boc-phe-ser-obzl；

7、(2)脱去boc-phe-val-obzl、boc-phe-leu-obzl、boc-phe-thr-obzl、boc-phe-ser-obzl的c端保护基制备boc-phe-val、boc-phe-leu、boc-phe-thr、boc-phe-ser；

8、(3)以3，5-二碘-l-酪氨酸为原料，在浓盐酸和乙二醇二甲醚的催化下，3，5-二碘-l-酪氨酸与甲醛进行pictec-spengler缩合，得到(3s)-7-羟基-6，8-二碘-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸；

9、(4)在甲醇，socl2体系下，生成(3s)-7-羟基-6，8-二碘-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；

10、(5)在1，4二氧六环和水1:1的体系中，(3s)-7-羟基-6，8-二碘-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯与二碳酸二叔丁酯，三乙胺反应生成(3s)-2-叔丁酯-7-羟基-6，8-二碘-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；

11、(6)在甲醇溶剂中，以三乙胺和pd/c为催化剂，将碘氢解得到(3s)-2-叔丁酯-7-羟基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；

12、(7)使用4n ea·hcl脱除boc基团得到(3s)-7-羟基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；

13、(8)在干燥的thf溶剂中，在edc，hobt，nmm条件下，(3s)-7-羟基-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯与boc-phe-val、boc-phe-leu、boc-phe-thr、boc-phe-ser二肽耦合，生成(3s)-7-羟基-2-(叔丁酯-aa1-aa2)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；

14、(9)在dmf溶剂中，使用n2保护，1-溴-2-丁炔，碳酸钾，生成(3s)-7-(2-丁炔-1-氧)-2-(aa1-aa2)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；

15、(10)使用4n ea·hcl脱除boc基得到(3s)-7-(2-丁炔-1-氧)-2-(aa1-aa2)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸；

16、(11)在甲醇中，由氢氧化钠催化，甲酯水解得到(3s)-7-(2-丁炔-1-氧)-2-(aa1-aa2)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸；

17、本发明的第三个目的是提供所述的(3s)-2-(aa1-aa2)-7-丁炔-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-酸在制备抗炎药物中的应用。

18、其中，优选的，所述的抗炎药物为口服小分子抗炎药物。

19、相较于现有技术，本发明的有益效果是：

20、(3s)-2-(aa1-aa2)-7-丁炔-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-酸是一类具有新型四氢异喹啉骨架的tace抑制剂，在体内外抗炎实验中，均表现出良好的抗炎效果。在体外raw 264.7细胞模型中能有效地抑制tnf-α和il-6释放，在小鼠lps急性炎症实验中能有效降低血清tnf-α和il-6水平，在小鼠体内耳肿胀模型具有良好的抗炎活性，量效实验表明butyn-fs-ql在低至2.5μmol/kg剂量下仍具有显著抗炎活性，展现出良好的量效关系。(3s)-2-(aa1-aa2)-7-丁炔-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-酸以弱锌离子结合基团羧基替代强锌离子结合基团羟肟酸，降低了副作用风险。本发明的提出为炎症的治疗提供了新的治疗药物，丰富了人们对于治疗炎症的药物选择。