一株发酵乳杆菌1209HJ及其应用
本发明属于微生物技术及功能性食品加工,具体涉及一株发酵乳杆菌1209hj及其应用。
背景技术:
1、共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,cla)是亚油酸的一组位置和几何异构体,具有抗肥胖、抗动脉粥样硬化、调节免疫及改善肠道屏障等多种生理活性,目前cla的获取主要依赖于化学合成和微生物发酵。化学合成法往往伴随着副产物的产生且环境友好性较差,而利用微生物(如乳酸菌)将游离la生物转化为cla,因其反应条件温和、安全性高而备受关注。
2、乳酸菌作为口服益生菌发挥健康功效的前提是能够以足够数量存活并通过胃肠道。胃液ph可低至1.5~3.5,多数产cla乳酸菌的耐酸性不足,导致其在胃环境中大量失活,难以到达肠道定植。
3、现有研究显示,分离自母乳的发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)cect5716(wo2004003235)虽具有良好的耐酸特性(耐ph=3.0),并可粘附于肠道黏膜细胞,但现有技术尚未对该菌株的共轭亚油酸(cla)合成能力开展系统评估,缺少该菌株高效合成cla的相关报道;而现有能够生产cla的乳酸菌大多耐酸性差,如现有技术《产共轭亚油酸的嗜酸乳杆菌cbg-c13菌株及其用途》公开的cbg-c13菌株能在ph=3~6区间的酸性环境中存活,但在ph=2.0的强酸环境下无法存活;现有技术《产共轭亚油酸乳酸菌的筛选及体外特性评价》从117株泡菜和婴儿粪便源中筛选产cla的乳酸菌,并对其进行功能性和安全性评价,公开了筛选到的发酵乳杆菌的耐酸性试验结果,即ph=2.5条件下部分菌株存活率80%~95%,而ph=2.0强酸处理后,所有菌株存活率趋近于0;因此能够生成cla的发酵乳杆菌在ph=2.0时存活率不足,在胃环境中大量失活,难以到达肠道定植。
4、肠道粘附性是益生菌抵抗肠蠕动冲刷、与致病菌竞争占位、实现免疫调节的关键因素。针对粘附性不足的问题,现有技术多采用胞外多糖包被、纳米载体包埋等外源物质干预方法,但这些手段工艺复杂、成本高,且可能引入安全性风险。ca2+作为人体必需的安全矿物质,在介导细胞间粘附中发挥重要作用,但目前尚无研究将外源性ca2+针对性地用于提升产cla的发酵乳杆菌的肠道上皮粘附能力。
5、综上所述,现有技术缺乏一株同时具备高产cla、强耐酸性(ph=2.0具有较高存活率)及高肠道粘附性的发酵乳杆菌,因此亟需提供相应的菌株与改良工艺以弥补现有技术的不足。
技术实现思路
1、本发明的目的是为了克服现有技术的上述不足,提供一株发酵乳杆菌1209hj及其应用。
2、本发明的第一个目的是提供一株发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj。
3、本发明的第二个目的是提供所述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj在制备生产共轭亚油酸的菌剂中的应用。
4、本发明的第三个目的是提供一种微生物制剂。
5、本发明的第四个目的是提供所述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或微生物制剂在生产共轭亚油酸中的应用。
6、本发明的第五个目的是提供一种生产共轭亚油酸的方法。
7、本发明的第六个目的是提供一种提高上述发酵乳杆菌(
lactobacillus
fermentum)1209hj肠道粘附性的方法。
8、本发明的第七个目的是提供所述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或微生物制剂在制备用于改善肠道健康的产品中的应用。
9、本发明的第八个目的是提供所述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或微生物制剂在制备用于降低血脂的产品中的应用。
10、本发明的第九个目的是提供所述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或微生物制剂在制备用于调节肠道菌群的产品中的应用。
11、为了实现上述目的,本发明是通过以下方案予以实现的:
12、本发明以传统家庭自制的腌菜的汁水为原料,经菌株分离、平板初筛、产cla能力的复筛和分子鉴定,得到发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj,并通过将发酵乳杆菌1209hj与ca2+接触提升其肠道粘附性。
13、因此,本发明请求保护一株发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc),保藏编号为cgmcc no.38629,保藏日期为2026年5月11日,分类学命名为发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum),保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所。
14、所述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj的16s rrna序列如seq idno:1所示。
15、本发明请求保护的发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj在含亚油酸的mrs培养基中培养后,共轭亚油酸的产量不低于57.17 μg/ml。
16、所述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj在ph=2.0条件下孵育2 h后,存活率不低于93%。
17、本发明请求保护上述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj在制备生产共轭亚油酸的菌剂中的应用。
18、本发明请求保护一种微生物制剂,其包含上述发酵乳杆菌(
lactobacillus
fermentum)1209hj。
19、本发明请求保护上述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或上述微生物制剂在生产共轭亚油酸中的应用。
20、本发明请求保护一种生产共轭亚油酸的方法,所述方法利用上述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或上述微生物制剂生产共轭亚油酸。
21、优选地,生产共轭亚油酸时以亚油酸作为底物。
22、本发明还提供了一种提高上述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj肠道粘附性的方法,所述方法为将上述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj与ca2+共孵育。
23、优选地,所述ca2+来源于ca盐。
24、更优选地,所述ca盐为cacl2。
25、优选地,所述ca2+在共孵育时的终浓度为0.5 mm~20 mm。
26、更优选地,所述ca2+在共孵育时的终浓度为1 mm~10 mm。
27、进一步优选地,所述ca2+在共孵育时的终浓度为10 mm。
28、优选地,所述共孵育的温度为25℃~42℃,共同孵育的时间为0.5 h~24 h。
29、更优选地,所述共孵育的温度为37℃,共同孵育的时间为24 h。
30、本发明请求保护上述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或上述微生物制剂在制备用于改善肠道健康的产品中的应用。
31、本发明请求保护上述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或上述微生物制剂在制备用于降低血脂的产品中的应用。
32、本发明请求保护上述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或上述微生物制剂在制备用于调节肠道菌群的产品中的应用。
33、优选地,上述产品通过上述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj和/或上述微生物制剂与ca2+共孵育得到。
34、与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
35、本发明公开了一株发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj,所述发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc),保藏编号为cgmcc no. 38629,保藏日期为2026年5月11日,分类学命名为发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)。该发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj在含亚油酸的培养基中发酵,共轭亚油酸产量达57.17 μg/ml,在ph 2.0条件下处理2 h存活率高达93%,且对caco-2细胞具有优良的粘附性。本发明的发酵乳杆菌(
lactobacillus fermentum)1209hj克服现有发酵乳杆菌耐胃酸不足的问题,在调节肠道菌群、改善肠道健康、增强免疫及制备功能性食品或药品中具有广泛应用前景。
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