一种F1/F3多肽联合免疫检查点抑制剂的肿瘤免疫治疗组合物及其应用的制作方法

本发明属于生物医药和肿瘤免疫治疗，具体涉及一种包含 f1/f3 多肽和免疫检查点抑制剂的药物组合物，以及 f1/f3 多肽在制备增强免疫检查点抑制剂抗肿瘤疗效的药物或药物增敏剂中的应用。

背景技术：

1、肿瘤的治疗并非依赖单一手段，而是根据肿瘤类型、分期和患者身体状况制定的‌综合方案‌。目前，临床上主流的治疗方法包括‌手术、放射治疗（放疗）、化学治疗（化疗）、靶向治疗和免疫治疗‌等几大类。近年来，免疫检查点抑制剂治疗已经成为肿瘤治疗的重要组成部分。

2、 免疫检查点抑制剂通过阻断 ctla-4、pd-1 或 pd-l1 等免疫抑制性信号，解除肿瘤微环境中 t 细胞功能受抑状态，从而增强抗肿瘤免疫反应。其中，pd-1/pd-l1 通路抑制剂在多种实体瘤中显示了临床价值。

3、然而，部分实体瘤，尤其是部分结直肠癌，对免疫检查点抑制剂治疗低响应、无响应或发生治疗耐受。对于此类肿瘤，仅依赖 pd-1 抑制剂单药治疗往往难以获得满意疗效。因此，开发能够提高肿瘤对免疫检查点抑制剂治疗敏感性的局部免疫调节药物，具有重要的临床和转化价值。

4、f1/f3多肽为caerin 1.1和caerin 1.9的组合物，已有研究显示，f1/f3多肽具有抗菌作用以及一定的抗肿瘤活性。

5、现有技术没有公开f1/f3多肽与免疫检查点抑制剂联合用于制备抗结直肠癌药物的相关报道，也未公开 f1/f3 多肽作为免疫检查点抑制剂治疗的增敏剂的用途，尤其未公开 f1/f3 多肽通过诱导中性粒细胞相关趋化因子信号放大和肿瘤免疫微环境重塑来增强pd-1 抑制剂治疗结直肠癌的作用。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的缺陷，本发明旨在提供一种结直肠癌免疫治疗组合物及其应用，以解决现有结直肠癌对免疫检查点抑制剂治疗低响应、无响应或耐受的问题。本发明通过将 f1/f3 多肽与免疫检查点抑制剂联合使用，增强免疫检查点抑制剂的抗肿瘤疗效，并改善肿瘤免疫微环境。

2、本发明通过如下技术方案实现：

3、本发明提供一种肿瘤免疫治疗组合物，所述的肿瘤免疫治疗组合物包含f1/f3多肽和免疫检查点抑制剂。

4、其中，所述 f1/f3 多肽为 caerin 1.1 和 caerin 1.9 的组合物。所述 caerin1.1 与 caerin 1.9 的质量比为 1:0.2–5，优选为 1:0.5–2，更优选为 1:1。

5、所述caerin 1.1如seq id no.1，caerin 1.9如seq id no.2。

6、所述免疫检查点抑制剂选自 pd-1 抑制剂、pd-l1 抑制剂或 ctla-4 抑制剂；优选地，所述免疫检查点抑制剂为 pd-1 抑制剂；进一步优选地，所述 pd-1 抑制剂为抗 pd-1 单克隆抗体。

7、所述抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。优选来源于哺乳动物的单克隆抗体。

8、所述抗pd-1单克隆抗体选自抗小鼠pd-1抗体、抗人pd-1抗体。

9、所述免疫检查点抑制剂和f1/f3的质量比为1：0.5-5.0，优选为1：0.8-1.5。

10、所述药物组合物还包含药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂、缓冲剂、稳定剂或其任意组合。

11、所述 f1/f3 多肽和所述免疫检查点抑制剂被配制为同一制剂，或者分别配制为独立制剂。

12、所述 f1/f3 多肽和所述免疫检查点抑制剂可以同时、分别或依次给药。

13、所述 f1/f3 多肽用于局部给药、瘤内给药、瘤周给药、腔内给药或经内镜局部给药，优选为瘤内给药。所述免疫检查点抑制剂用于全身给药，包括静脉给药、皮下给药或其他适宜的全身给药方式；在动物实验中，可采用腹腔给药。

14、所述肿瘤为实体瘤，优选为结直肠癌。进一步优选地，所述结直肠癌为对免疫检查点抑制剂治疗低响应、无响应或耐受的结直肠癌。

15、f1/f3多肽在制备结直肠癌免疫治疗的增敏剂中的应用。

16、f1/f3多肽在制备治疗结直肠肿瘤或增强结直肠肿瘤对免疫检查点抑制剂治疗敏感性药物中的应用。

17、f1/f3多肽联合免疫检查点抑制剂在制备结直肠癌免疫治疗药物中的应用。

18、在实验中，所述 f1 与 f3 给药的质量比为 1:1。

19、免疫检查点抑制剂和f1/f3多肽的质量比为1：0.5-5.0，优选为1：0.8-1.5，更优选为1：0.8-1.1。

20、实验结果表明，瘤内注射的f1/f3多肽通过中性粒细胞介导的趋化因子放大作用，诱导巨噬细胞重极化、肿瘤-基质重塑以及 nk /t细胞活化，增强结直肠肿瘤对pd-1抗体抑制剂的敏感性。

21、本发明提供f1/f3多肽联合pd-1抗体抑制剂在制备结直肠癌免疫治疗药物中的应用。

22、如上所述应用中，f1/f3 多肽联合免疫检查点抑制剂可以在同基因结直肠癌模型中增加中性粒细胞浸润、诱导趋化因子表达、促进巨噬细胞向促炎样表型转化，并增强 nk细胞和/或 t 细胞相关抗肿瘤免疫反应。

23、f1/f3 联合免疫检查点抑制剂通过诱导以中性粒细胞为中心的趋化因子信号放大，协调巨噬细胞重极化、肿瘤-基质重塑以及 nk细胞或 t细胞介导的抗肿瘤免疫反应。趋化因子包括ccl2/cxcl2、ccl3/cxcl3、ccl4/cxcl4或其任意组合。

24、当两者联合使用时，可以在一定时间期限内给予至少一种剂量的f1/f3多肽和/或至少一种剂量的pd-1抗体抑制剂。所述的时间期限可以是一个给药周期内，优选4周内，3周内，2周内，1周内，或24小时以内。

25、本发明的有益技术效果：

26、本发明提供了 f1/f3多肽联合免疫检查点抑制剂在制备结直肠癌免疫治疗药物中的应用，包含f1/f3多肽和免疫检查点抑制剂的组合物可以用于治疗pd-1抗体治疗低响应、无响应或耐药的结直肠癌。将f1/f3多肽与免疫检查点抑制剂联合使用，与单独使用免疫检查点抑制剂相比，本发明的药物组合物能够显著增强结直肠癌模型中的抗肿瘤效果，表现为肿瘤生长受到抑制、生存期延长和长期无瘤生存比例提高。

27、进一步地，本发明的药物组合物能够增加肿瘤组织中中性粒细胞浸润，诱导趋化因子表达，促进巨噬细胞向促炎样表型转化，并促进肿瘤免疫微环境由免疫抑制状态向免疫激活状态转变。

28、在 mc38、ct26 和 colon26 同基因结直肠癌模型中，f1/f3 多肽联合 pd-1 抑制剂显示出较单药治疗更强的抗肿瘤作用。单细胞 rna 测序及中性粒细胞去除实验进一步提示，中性粒细胞相关趋化因子信号放大是 f1/f3 多肽联合 pd-1 抑制剂重塑肿瘤免疫微环境的重要机制之一。

1.一种用于肿瘤免疫治疗的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含 f1/f3 和免疫检查点抑制剂；其中，所述的肿瘤优选为结直肠癌。

2.根据权利要求 1 所述的药物组合物，其特征在于，所述f1/f3为caerin1.1和caerin1.9的组合物；其中，所述的caerin 1.1 与 caerin 1.9 的质量比为 1:0.2–5，优选为 1:0.5–2，更优选为 1:1。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，caerin 1.1的氨基酸序列如seqid no.1所示，caerin 1.9的氨基酸序列如seq id no.2所示。

4.根据权利要求1-3任何一项所述的药物组合物，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂为pd-1抑制剂、pd-l1抑制剂或 ctla-4抑制剂，优选pd-1抑制剂，更优选抗pd-1单克隆抗体。

5.根据权利要求1-4任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂和f1/f3的质量比为1：0.5-5.0，优选为1：0.8-1.5。

6.根据权利要求 1-5 任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体、赋形剂、缓冲剂、稳定剂或其任意组合。

7.根据权利要求 1-6 任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述 f1/f3 和所述免疫检查点抑制剂被配制为同一制剂，或者分别配制为独立制剂。

8.根据权利要求 1-7 任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述 f1/f3 和所述免疫检查点抑制剂用于同时、分别或依次给药。

9.根据权利要求 1-8 任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述 f1/f3 用于局部给药、瘤内给药、瘤周给药、腔内给药或经内镜局部给药，优选为瘤内给药；所述免疫检查点抑制剂用于全身给药，优选为静脉给药或皮下给药。

10.根据权利要求 1-9 任何一项所述的药物组合物，其特征在于，所述结直肠癌为对免疫检查点抑制剂治疗低响应、无响应或耐药的结直肠癌。

11.权利要求1-10 任一项所述的药物组合物在制备治疗结直肠癌药物中的应用。

12.f1/f3多肽在制备治疗结直肠癌或制备增强结直肠癌对免疫检查点抑制剂治疗敏感性药物中的应用。

13.f1/f3多肽联合免疫检查点抑制剂在制备结直肠癌免疫治疗药物中的应用。

14.根据权利要求13所述的应用，其特征在于，所述 f1与 f3的质量比为 1:0.2-5，优选为 1:0.5-2，更优选为 1:1。

15.根据权利要求 13或14所述的应用，其特征在于，所述 f1/f3 用于局部给药、瘤内给药、瘤周给药、腔内给药或经内镜局部给药，优选为瘤内给药，所述 pd-1抑制剂用于全身给药，优选为静脉给药或皮下给药。

16.根据权利要求 13-15任一项所述的应用，其特征在于，所述免疫检查点抑制剂为pd-1抑制剂，优选为抗pd-1单克隆抗体。

17.根据权利要求 13-16任一项所述的应用，其特征在于，所述结直肠癌为对 pd-1抑制剂治疗低响应、无响应或耐药的结直肠癌。

18.根据权利要求 13-17 任一项所述的应用，其特征在于，所述 f1/f3 多肽通过增加肿瘤组织中中性粒细胞浸润、诱导趋化因子表达、促进巨噬细胞向促炎样表型转化、增强nk 细胞或 t 细胞相关抗肿瘤免疫反应中的一种或多种，提高结直肠癌对免疫检查点抑制剂治疗的敏感性，发挥结直肠癌免疫治疗作用。

19.根据权利要求 18 所述的应用，其特征在于，所述趋化因子包括 ccl2/cxcl2、ccl3/cxcl3、ccl4/cxcl4 或其任意组合。

20.根据权利要求 13-19 任一项所述的应用，其特征在于，所述 f1/f3 联合免疫检查点抑制剂通过诱导以中性粒细胞为中心的趋化因子信号放大，协调巨噬细胞重极化、肿瘤-基质重塑以及 nk细胞或 t细胞介导的抗肿瘤免疫反应，发挥结直肠癌免疫治疗作用。