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用于菌落挑取的方法和系统

2023-02-16 13:40:55 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种菌落挑取的方法,所述方法包括以下步骤:将细菌悬液与油基载液混合,用于生成包含所述细菌悬液中所含细菌的多个液滴;将所述多个液滴孵育预定的时间段,以允许细菌在所述多个液滴内生长;筛选流过微流体装置的一个或多个微流体通道的所述多个液滴中的每一个,以确定所述多个液滴中的每一个的不透明度,其中所述不透明度指示所述多个液滴中的菌落形成;以及基于所述多个液滴中的每一个的不透明度对所述多个液滴进行分选。2.根据权利要求1所述的方法,其中筛选所述多个液滴中的每一个包括以下步骤:测量与所述多个液滴中的每一个相关的明视场强度;以及基于所测量的明视场强度生成信号。3.根据权利要求2所述的方法,其中筛选所述多个液滴中的每一个包括使用光电倍增管(pmt)检测光。4.根据权利要求2或3所述的方法,其中分选所述多个液滴包括以下步骤:将所生成的信号与预定阈值进行比较;以及基于所生成的信号与所述预定阈值的比较,将所述多个液滴转移到不同的组。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中对所述多个液滴进行分选包括通过介电泳分离所述多个液滴。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法,进一步包括将经孵育的液滴注入所述一个或多个微流体通道的步骤,其中所述多个液滴中的每一个连续流过所述一个或多个微流体通道。7.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中选择所述液滴的半径和所述细菌悬液的浓度,以实现每液滴1个细菌。8.根据权利要求7所述的方法,其中根据公式个细菌/ml确定待使用的细菌悬液的浓度,其中r是所述方法中待使用的液滴的半径,单位为μm。9.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述悬液包含细菌、细菌培养基和适于对遗传修饰的细菌施加选择压力的组分。10.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述油基载液是氟碳油。11.一种用于菌落挑取的系统,所述系统包含:液滴生成器,用于将细菌悬液与油基载液混合,以生成包含细菌悬液中所含细菌的多个液滴;培养箱,用于培养所述多个液滴预定的时间段,以允许细菌在所述多个液滴内生长;微流体装置,包含用于接收经孵育的液滴的一个或多个微流体通道,其中所述多个液滴中的每一个连续流过所述一个或多个微流体通道;光学装置,用于筛选流过所述一个或多个微流体通道的所述多个液滴中的每一个,以确定所述多个液滴中的每一个的不透明度,其中所述不透明度指示所述多个液滴中的菌落形成;和分选模块,被配置为基于所述多个液滴中的每一个的不透明度对所述多个液滴进行分选。
12.根据权利要求11所述的系统,其中所述光学装置被配置为:测量与所述多个液滴中的每一个相关的明视场强度;以及基于所测量的明视场强度生成信号。13.根据权利要求12所述的系统,其中所述光学装置包含光电倍增管(pmt)。14.根据权利要求12或13所述的系统,其中所述分选模块被配置为:将所生成的信号与预定阈值进行比较;以及基于所生成的信号与所述预定阈值的比较,将所述多个液滴转移到不同的组。15.根据权利要求11至14中任一项所述的系统,其中所述分选模块包含非均匀电场的合成器,以通过介电泳分离所述多个液滴。16.根据权利要求11至15中任一项所述的系统,其中选择所述液滴的半径和所述细菌悬液的浓度,以实现每液滴1个细菌。17.根据权利要求16所述的系统,其中根据公式个细菌/ml确定细菌悬液的浓度,其中r是液滴的半径,单位为μm。18.根据权利要求11至17中任一项所述的系统,其中所述悬液包含细菌、细菌培养基和适于对遗传修饰的细菌施加选择压力的组分。19.根据权利要求11至18中任一项所述的系统,其中所述油基载液是氟碳油。

技术总结
本公开涉及一种菌落挑取的方法。该方法包括以下步骤:将细菌悬液与油基载液混合,用于生成包含细菌悬液中所含细菌的多个液滴,以及将该多个液滴孵育预定时间,以允许细菌在该多个液滴内生长。该方法进一步包括以下步骤:筛选流过微流体装置的一个或多个微流体通道的该多个液滴中的每一个,以确定该多个液滴中每一个的不透明度,其中该不透明度指示多个液滴中的菌落形成,以及基于该多个液滴中每一个的不透明度分选该多个液滴。不透明度分选该多个液滴。不透明度分选该多个液滴。


技术研发人员:王明 朱伟杰 傅觉鲁 林水德
受保护的技术使用者:新加坡国立大学
技术研发日:2021.06.24
技术公布日:2023/2/13
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