一种具有改善犬猫肠道功能的“四位一体”的组合添加剂及其制备方法

1.本发明属于宠物食品领域，更具体地说，涉及一种具有改善犬猫肠道功能的“四位一体”组合添加剂及应用。


背景技术：

2.肠道作为动物机体的吸收和免疫器官，不仅具有消化吸收功能，也可抑制病原菌的繁殖，然而，宠物在饲养过程中，致病菌是导致宠物肠道腹泻的主要原因之一，包括弯曲杆菌、肠致病性大肠杆菌、沙门菌和艰难梭菌等。腹泻主要是因为肠道上皮细胞对离子和溶质吸收及分泌的失衡会使机体丧失过多体液及电解质，进而表现腹泻症状，严重时甚至会导致死亡。引起犬猫腹泻的原因有多种，其中主要包括过敏、理化因素、细菌、病毒及寄生虫等。细菌性腹泻影响广、危害大且发病率高，通常是宠物食用腐败、不洁等细菌污染的食物造成的。然而目前主要治疗手段是使用抗生素类药物，导致宠物产生耐药性，从而宠物腹泻的治疗面临更大的挑战。
3.近年来有大量研究通过在日粮中添加益生菌和益生元，例如益生菌制剂和酶制剂促进宠物肠道有益菌的繁殖，维持肠道菌群的平衡，增加肠道的通畅性，预防宠物腹泻。长期饲喂益生菌可在肠道内定值并迅速繁殖，抑制病原微生物的生长，维持肠道平衡；酶制剂可通过分解宠物日粮中的蛋白、淀粉和脂肪，提高饲料的消化率，降低肠道食糜的粘度，促进肠道消化吸收。此外，淀粉酶或多糖酶酶解的小分子物质，如甘露寡糖、果寡糖等，可作为促进益生菌繁殖的益生元，增加有益微生物数量，抑制病原菌的生长，改善动物肠道健康。
4.现有宠物日粮研究主要聚焦于改善宠物肠胃饲料及畜禽复合饲料添加剂的研究，如公开号：cn 111109433 a公开了一种调节母猪肠道健康的复合生物制剂及其制备方法和应用；公开号：cn 113892553 a公开了一种调节动物肠道的益生素制剂及其应用；公开号：cn202010552389.6公开了一种具有改善畜禽肠道功能的菌-酶融合发酵培养物及其制备方法；公开号：cn 108338277 a公开了一种宠物肠胃健微生物饲料添加剂的制备方法。公开号：cn113287681 a公开了一种以银杏叶渣类脂提取物为原料制备复合替抗饲料添加剂的方法，其步骤(2)包括取银杏叶渣类脂提取物微囊与其它替抗植物提取物、植物精油、益生菌、寡糖、有机酸、酶制剂、抗菌肽中的一种或几种按一定质量比例进行混合，直至混合均匀，然后再加入一定量的载体，继续混合均匀，即得到银杏叶渣类脂提取物复合替抗饲料添加剂产品。但是这些现有技术的缺点是：(1)没有考虑到复合添加剂的协同和互补作用，如抗氧化作用、酶制剂的作用、益生菌及益生元作用、载体的作用；(2)没有考虑到组合添加剂之间的配比，只有科学合理的配比才能发挥组合添加剂的作用。


技术实现要素：

5.针对现有技术中存在的上述缺陷，本发明的目的在于提供一种具有改善犬猫肠道功能的“四位一体”的组合添加剂，其可减少或替代抗生素的使用，调节犬猫肠道健康，提高
饲料消化率。为实现本发明的目的，本发明的技术方案采用如下技术方案：
6.具有改善犬猫肠道功能的“四位一体”的组合添加剂，所述组合添加剂包括海藻酸钠和负载在海藻酸钠上的活性组分：茶多酚、甘露寡糖、枯草芽孢杆菌和复合酶制剂，其中所述复合酶制剂包括木聚糖酶、植酸酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶、蛋白酶。
7.优选地，按重量百分比计，组合添加剂中各组分的含量分别为茶多酚5～10％，甘露寡糖4～10％、枯草芽孢杆菌20～60wt％、复合酶制剂20～50wt％、海藻酸钠3～8％。更优选地，按重量百分比计，各组分的含量分别为茶多酚5～8％，甘露寡糖5～8％、枯草芽孢杆菌30～50wt％、复合酶制剂30～50wt％、海藻酸钠4～7％。
8.优选地，复合酶制剂中酶活为：木聚糖酶3000～24000u/g、植酸酶10000～50000u/g、纤维素酶5000～2000u/g、果胶酶50000～200000u/g、淀粉酶2000～10000u/g、β-葡聚糖酶3000～10000u/g、蛋白酶5000～20000u/g。更优选地，复合酶制剂酶活为：木聚糖酶5800u/g、植酸酶20000u/g、纤维素酶12000u/g、果胶酶55000u/g、淀粉酶2400u/g、β-葡聚糖酶9000u/g、蛋白酶6500u/g。
9.优选地，木聚糖酶、植酸酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶的酶活配比为1～2:0.2～1:0.2～1:0.2～0.5:1～2:1～2:1～2。更优选地，复合酶制剂的配比：木聚糖酶、植酸酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶的酶活配比为2:1:0.5:0.5:1.3:1.5:2。
10.优选地，枯草芽孢杆菌的总活菌数为3.0
×
109～5.0
×
10
11
cfu/g。更优选地，枯草芽孢杆菌的总活菌数为5.0
×
10
11
cfu/g。
11.本发明另一方面提供了上述具有改善犬猫肠道功能的“四位一体”的组合添加剂的制备方法，其特征在于，该制备方法包括步骤：将所述茶多酚、所述甘露寡糖、所述枯草芽孢杆菌和所述复合酶制剂充分混合即可。
12.优选地，上述组合添加剂与油脂混合后喷涂在犬或猫基础日粮的表面，其中所述组合添加剂与所述油脂的重量比为1:0.1～0.3。
13.优选地，所述油脂选自植物油、鸡油、鱼油、牛油中的一种或多种。
14.本发明再一方面提供一种改善犬或猫肠道功能的宠物粮，所述犬或猫日粮包括犬或猫基础日粮和上述具有改善犬猫肠道功能的“四位一体”的组合添加剂，其中所述组合添加剂的添加量为所述犬或猫基础日粮重量的0.5～1％，更优选0.8％。
15.优选地，上述犬基础日粮包括如下质量份数的下列组分：鸡肉粉20～35％、鸡胸肉20～35％、牛肉骨粉10～25％、小米5～15％、豌豆5～15％、马铃薯5～15％、甜菜粕1～5％、预混料1～2％、氯化胆碱0.5～3％、磷酸氢钙0.2～1％、食盐0.3～0.5％。
16.优选地，上述猫基础日粮包括如下质量份数的下列组分：鸡肉粉20～35％、鸡胸肉20～35％、鱼粉1～5％、牛肉骨粉10～15％、小米10～15％、豌豆10～15％、预混料1～2％、蛋氨酸0.3～0.5％、牛磺酸0.3～0.5％、氯化胆碱0.3～0.5％、磷酸氢钙0.2～1％、食盐0.3～0.5％。
17.本发明结合犬和猫肠道生理特点，科学配制四位一体的组合添加剂，如枯草芽孢杆菌耐高温和耐酸碱，可有效调节肠道菌群平衡、维护肠道健康；复合酶制剂可协同提高犬猫日粮中蛋白、淀粉等消化率，减少食糜黏度，降低犬猫腹泻；茶多酚可增强犬猫抵抗力，提高机体抗氧化(清除自由基)能力；甘露寡糖可作为益生元，提高枯草芽孢杆菌的繁殖能力
和在犬猫肠道中的定植效率。因此，本发明的组合添加剂各个组分之间协同发挥作用，宠物肠道健康、降低犬猫腹泻率提高犬猫抵抗力。并且本发明的组合添加剂通过使用海藻酸钠作为载体，可有效降低犬猫日粮在加工过程中活性损失，防止组合添加剂在胃中被胃酸、酶等降解，提高其肠生物活性。本发明进行63天的犬猫饲喂实验，分析粪便评分、饲料消化率等指标，这些指标表明本发明的组合添加剂可有效降低犬猫腹泻、增强其肠道健康。
附图说明
18.图1a表示实施例1、实施例2和对比实施例1的犬在63天内的日采食量，图1b表示实施例1、实施例2和对比实施例1的猫在63天内的日采食量。
19.图2a表示实施例1、实施例2和对比实施例1的犬在63天内的周增重，图2b图表示实施例1、实施例2和对比实施例1的猫在63天内的周增重。
20.图3a图表示实施例1、实施例2和对比实施例1的犬在63天内的粪便评分，图3b图表示实施例1、实施例2和对比实施例1的猫在63天内的粪便评分。
具体实施方式
21.针对现有技术中宠物食粮添加剂存在的缺点，本技术发明人经过深入的研究发现茶多酚、甘露寡糖、枯草芽孢杆菌和复合酶制剂的组合可明显改善宠物肠道，并且将这些组分与海藻酸钠复配，可防止宠物食粮在加工过程中枯草芽孢杆菌存活率降低以及复合酶制的活性损失，并防止组合添加剂在胃中被胃酸、酶等降解，使得含有该组合添加剂的宠物食粮食用效果更佳。在此基础上完成了本发明。
22.本发明提供的具有改善犬猫肠道功能的“四位一体”的组合添加剂，包括海藻酸钠和负载在海藻酸钠上的活性组分：茶多酚、甘露寡糖、枯草芽孢杆菌和复合酶制剂，其中所述复合酶制剂包括木聚糖酶、植酸酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶、蛋白酶。
23.本发明中，复合酶制剂中酶活的测定方法为：木聚糖酶活测定：温度为37℃，ph为5.0，1min内催化木聚糖产生1μmol木糖所需的酶量为1u。植酸酶活测定：温度为37℃，ph7.0，1min释放1μmol磷酸盐所需的酶量定义为一个单位的植酸酶活性。纤维素酶活测定：温度为37℃，ph为5.5，1min内催化羧甲基纤维素钠产生1μmol还原糖所需的酶量为1u。果胶酶活测定：温度为37℃，ph为5.0，1min内催化果胶产生1μmol半乳糖醛酸所需的酶量为1u。淀粉酶活测定：温度为37℃，ph为5.5，1min内催化淀粉产生1μmol还原糖所需的酶量为1u。β-葡聚糖酶活测定：温度为37℃，ph为7.0，1min内催化β-葡聚糖产生1μmol还原糖所需的酶量为1u。蛋白酶活测定：温度为40℃，ph为3.0，1min内催化酪素产生1μg酪氨酸所需的酶量为1u。
24.该组合添加剂中各个组分的如下作用：(1)枯草芽孢杆菌可分泌蛋白酶、淀粉酶等消化酶，促进动物肠道营养吸收，提高饲料利用率；可有效调节肠道菌群平衡，增加肠粘膜保护屏障功能，减少或预防宠物腹泻；此外还能能够形成芽孢，具有耐高温、耐酸碱等抗逆特性，更适合在宠物粮加工或膨化过程中添加。(2)复合酶制剂所包括的木聚糖酶、植酸酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶共同作用，具有有效提高宠物日粮中蛋白、淀粉和抗营养因子的消化率、降低肠道食糜的黏度、促进肠道消化吸收；经复合酶制剂酶解的小分子物质可作为枯草芽孢杆菌的益生元，提高益生菌的丰度，有助于调节宠物肠道平
衡。(3)茶多酚作为一种无刺激性气味、安全、有效的抗氧化剂，可提高宠物抗应激和抗氧化能力，减少宠物腹泻。(4)甘露寡糖作为一种常用的益生元，可有效在宠物结肠端提高益生菌的活性，有利于益生菌的繁殖和定植，改善宠物肠道健康和减少或预防宠物腹泻。(5)海藻酸钠作为载体，可有效降低犬猫日粮在加工过程中枯草芽孢杆菌存活率的损失、复合酶制剂的活性损失，并防止组合添加剂在胃中被胃酸、酶等降解，提高其生物活性。
25.因此，本发明中，枯草芽孢杆菌、复合酶制剂、茶多酚和甘露寡糖这些活性成分相互作用，共同起到对宠物肠道进行改善的效果。海藻酸钠做为这些活性成分的载体，起到保护枯草芽孢杆菌存活率和复合酶制的活性的作用。
26.本发明的具有改善犬猫肠道功能的“四位一体”的组合添加剂用于制备犬或猫日粮时，可通过将组合添加剂与油脂混合后喷涂到到犬或猫基础日粮表面。
27.优选地，上述油脂包括但不局限于鸡油、鱼油和牛油。
28.上述组合添加剂与油脂的用量(重量)比为1:0.1～0.3，更优选1:0.2。
29.喷涂可通过本领域常规的方法方法和条件进行。
30.本发明提供的改善犬或猫肠道功能的犬或猫日粮包括犬或猫基础日粮和上述具有改善犬猫肠道功能的“四位一体”的组合添加剂，其中所述组合添加剂的添加量占犬或猫基础日粮的重量的0.5～1％，更优选0.8％。
31.本发明中“宠物基础日粮”是指满足宠物基本营养的日粮。例如，犬基础日粮的营养标准为：粗蛋白≥26％、粗脂肪≥12％、粗纤维≤5.0％、粗灰分≤10％、钙≥1.3％、总磷≥1.0％、食盐≤1.2％、水分≤10％。在本发明的一些具体实施中，犬基础日粮包括如下质量份数的下列组分：鸡肉粉20～35％、鸡胸肉20～35％、牛肉骨粉10～25％、小米5～15％、豌豆5～15％、马铃薯5～15％、甜菜粕1～5％、预混料1～2％、氯化胆碱0.5～3％、磷酸氢钙0.2～1％、食盐0.3～0.5％。例如，猫基础日粮的营养标准为：粗蛋白≥20％、粗脂肪≥13％、粗纤维≤3％、粗灰分≤7％、钙≥1.3％、总磷≥1.0％、牛磺酸≥0.3％、食盐≤1.2％、水溶性氯化物≥0.5％、水分≤10％。在本发明的一些具体实施中，猫基础日粮包括如下质量份数的组分：鸡肉粉20～35％、鸡胸肉20～35％、鱼粉1～5％、牛肉骨粉10～15％、小米10～15％、豌豆10～15％、预混料1～2％、蛋氨酸0.3～0.5％、牛磺酸0.3～0.5％、氯化胆碱0.3～0.5％、磷酸氢钙0.2～1％、食盐0.3～0.5％。
32.本发明的描述中，“预混料”是指维生素、微量元素、合成氨基酸等成分的组合物，奥特奇生物制品(中国)有限公司生产的预混料。
33.市售可得的宠物日粮(不含有枯草芽孢杆菌和酶制剂)也可以作为本发明的宠物基础日粮，在其表面喷涂上述组合添加剂，即可得到本发明的宠物日粮。
34.本发明将具有特定功能的枯草芽孢杆菌、复合酶制剂、茶多酚和甘露寡糖进行科学组合、协同应用，能够有效调节宠物肠道，提高采食量和宠物日粮利用率，抑制有害微生物的生长，促进益生菌在肠道中的增殖，降低犬猫腹泻，维持犬猫肠道健康。
35.下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。具体实施例是在以本发明技术方案为前提下进行实施的，给出了详细的实施方式和操作过程。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件进行。除非另有说明，比例和百分数按重量计。
36.下列具体实施例子中，犬和猫的选取标准和饲养方式如下：
37.犬的选取标准：每组选择健康的柴犬18只，体重10kg左右，体温、呼吸频率、心率正常，年龄1.5～2.5岁，免疫程序齐全。
38.猫的选取标准：每组选择健康的英短18只，年龄在1～2岁，平均体重为3.70kg左右，免疫程序齐全。
39.饲养方式：犬和猫在上海农科院动物房饲喂，饲养在同一环境下超过30天，才开始正式实验，试验期为63天，试验前7天转入犬舍和猫舍，单笼饲养，自由采食及饮水，相对湿度60～70％。
40.下列具体实施例子中，饲喂效果的评价采用的标准为犬和猫周增重、饲料消化率和粪便的评分标准。每周对犬猫进行限量饲喂，犬饲喂量为200g/天，猫饲喂量为120g/天，每天统计采食量、粪便评分，每周测定犬猫增重和饲料消化率。
41.饲料消化率：包括蛋白质消化率、脂肪消化率和干物质消化率；饲料消化率的参照标准：粗蛋白质参考方法：gb/t 6432；粗脂肪参考方法：gb/t 6433；粗灰分参考方法：gb/t 6438。
42.犬猫粪便的评分标准：5分：含水量极低，干燥、易碎，呈块状；4分：粪便表面有清晰可见的纹路和干裂，容易拾起，基本不在地面有残留；3分：粪便潮湿，呈圆柱状，从地面捡起时会有残留；2分：粪便湿度较大，但不是完全呈液态。不易拾起，有些时候还会在宠物肛周粘连；1分：完全的液态粪便。
43.按照枯草芽孢杆菌产品批号kcs211219，购于奥特奇生物制品(中国)有限公司，执行标准q/370126trh001-2020。
44.复合酶制剂包括：木聚糖酶(cas:37278-89-0)、植酸酶(cas：9001-89-2)、纤维素酶(cas:9012-54-8)、果胶酶(cas:9032-75-1)、淀粉酶(cas:9001-11-0)、β-葡聚糖酶(cas:9074-98-0)和蛋白酶(cas:9001-92-7)，购于sigma公司；甘露寡糖(cas:37288-54-3)购于江苏奥福生物科技有限公司；茶多酚(cas:84650-60-2)和海藻酸钠(cas:9005-38-3)购于sigma公司。
45.实施例1
46.宠物日粮制备
47.(1)犬基础日粮通过常规的方法(例如，将宠物基础日粮的原料依次经过粉碎、混合、膨化)制得的膨化宠物基础日粮，为颗粒状，其由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉23.6％、鸡胸肉34％、牛肉骨粉10％、小米10％、豌豆6％、马铃薯5％、甜菜粕4.8％、氯化胆碱3.7％、预混料1％、磷酸氢钙0.5％、食盐0.4％。
48.(2)猫基础日粮通过常规的方法(例如，将宠物基础日粮的原料依次经过粉碎、混合、膨化)制得的膨化宠物基础日粮，为颗粒状，其由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉30％、鸡胸肉35％、牛肉骨粉11％、鱼粉3％、小米8.1％、豌豆6％、氯化胆碱3.5％、蛋氨酸0.5％、预混料1％、牛磺酸0.4％、氯化胆碱0.4％、磷酸氢钙0.6％、食盐0.5％。
49.(3)将组合添加剂(按重量计，其组成为：枯草芽孢杆菌45％、复合酶制剂(复合酶制剂的酶活为：木聚糖酶20000u/g、植酸酶50000u/g、纤维素酶2000u/g、果胶酶200000u/g、淀粉酶10000u/g、β-葡聚糖酶10000u/g、蛋白酶20000u/g；木聚糖酶、植酸酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶的酶活配比为2:1:0.5:0.5:1.3:1.5:2)34％，甘露寡糖8％、茶多酚8％和海藻酸钠5％(参见表1处理组a))与油脂搅拌混合，其中组合添加剂和油
脂的重量比为1:0.2，然后，20℃条件下分别喷涂在犬和猫基础日粮的表面，其中组合添加剂的用量为犬基础日粮重量的0.7％，为猫基础日粮重量的0.6％，制备犬日粮和猫日粮。
50.选取18只犬和18只猫分别作为犬和猫的处理组a，分别对犬和猫利用犬日粮和猫日粮进行饲喂，实验前7天预实验，正式试验为63天。每天测定采食量和对粪便评分，每周测定犬和猫体重和收集犬和猫粪便，测定周增重和饲料消化率。在0天、30天和63天分别对犬和猫静脉采血，收集血清和全血测定饲料消化率。测试结果如表2和表3所示。由表2(处理a组)可以看出，犬在0天、28天和63天对日粮中蛋白的消化率分别为86.60、85.22和85.66％，脂肪的消化率分别为95.38、96.22和96.08％；干物质消化率分别为83.25、82.61和81.12％，灰分含量分别为29.50、26.55和28.02％。由表3(处理a组)可以看出在0天、28天和63天，猫对日粮中蛋白的消化率分别为72.36、80.11和78.10％，脂肪的消化率分别为86.57、95.71和95.35％；干物质消化率分别为65.58、72.88和74.08％，灰分含量分别为25.27、22.18和22.25％。
51.犬的采食量结果如图1a中处理组a所示，从该图可以看出犬在前六周犬的的采食量在150g左右，7周之后，采食量在180g左右。猫的采食量结果如图1b中处理组a所示，从该图可以看出猫的采食量基本维持在100g左右。
52.犬和猫的周增重结果分别如图2a中处理组a和图2b中处理组a所示。
53.犬和猫的粪便评分结果分别如图3a中处理组a和图3b中处理组a所示整个饲喂周期都未见犬猫腹泻的情况。
54.实施例2
55.宠物日粮制备
56.(1)犬基础日粮：同实施例1。
57.(2)猫基础日粮：同实施例1。
58.将组合添加剂(按重量计，其组成为：枯草芽孢杆菌40％、复合酶制剂(同实施例1)39％、甘露寡糖8％、茶多酚8％和海藻酸钠5％(参见表1处理组b)与油脂搅拌混合，其中组合添加剂和油脂的重量比为1:0.3，20℃条件下分别喷涂在犬和猫基础日粮的表面，其中组合添加剂的用量为犬基础日粮重量的0.6％，为猫基础日粮重量的0.8％，制备犬日粮和猫日粮。
59.选取18只犬和18只猫分别作为犬和猫的为处理组b，分别对犬和猫利用犬日粮和猫日粮进行饲喂，实验前7天预实验，正式试验为63天。每天测定采食量和对粪便评分，每周测定犬和猫体重和收集犬和猫粪便，测定周增重和饲料消化率。在0天、30天和63天分别对犬和猫静脉采血，收集血清和全血测定饲料消化率。测试结果分别如表2和表3所示。如表2(处理组b)所示，犬在0天、28天和63天对日粮中蛋白的消化率分别为80.70、83.77和84.66％，脂肪的消化率分别为94.96、96.70和97.20％；干物质消化率分别为76.19、77.59和79.78％，灰分含量分别为29.30、20.24和30.45％。如表3(处理组b)所示，猫在0天、28天和63天对日粮中蛋白的消化率分别为75.41、65.71和66.08％，脂肪的消化率分别为89.60、93.63和91.90％；干物质消化率分别为67.82、76.09和72.21％，灰分含量分别为24.10、26.64和21.71％。
60.犬的采食量结果如图1a中处理组b所示，从该图可以看出犬在前六周的采食量在150g左右，7周之后，采食量在180g左右。猫的采食量结果如图1b中处理组b所示，从该图可
以看出猫的采食量基本维持在100g左右。
61.犬和猫的周增重结果分别如图2a中处理组b和图2b中处理组b所示。
62.犬和猫的粪便评分结果分别如图3a中处理组b和图3b中处理组b所示。整个饲喂周期都未见犬猫腹泻的情况。
63.对照实施例1
64.该对比例的犬基础日粮和猫基础日粮均同实施例1
65.组合添加剂与实施例1相比不含有海藻酸钠，其组成为：枯草芽孢杆菌47％，复合酶制剂(同实施例1)37％、甘露寡糖8％、茶多酚8％(参见表1处理组)。
66.将该组合添加剂与油脂搅拌混合，其中组合添加剂和油脂的重量比为1:0.3，然后，20℃条件下分别喷涂在犬和猫基础日粮的表面，其中组合添加剂的用量为犬基础日粮重量的0.7％，为猫基础日粮重量的0.6％，制备犬日粮和猫日粮。
67.选取18只犬和18只猫分别作为犬和猫的对照组，分别对犬和猫利用犬日粮和猫日粮进行饲喂，实验前7天预实验，正式试验为63天。每天测定采食量和对粪便评分，每周测定犬和猫体重和收集犬和猫粪便，测定周增重和饲料消化率。在0天、30天和63天分别对犬和猫静脉采血，收集血清和全血测定饲料消化率。测试结果如表2所示，犬在0天、28天和63天对日粮中蛋白的消化率分别为81.82、84.20和83.03％，脂肪的消化率分别为96.95、95.40和96.24％；干物质消化率分别为78.57、78.36和78.00％，灰分含量分别为30.02、30.74和32.40％。猫在0天、28天和63天对日粮中蛋白的消化率分别为65.58、73.04和67.46％，脂肪的消化率分别为88.10、89.95和91.55％；干物质消化率分别为67.66、71.95和70.90％，灰分含量分别为35.98、26.43和28.66％。
68.犬的采食量结果如图1a中对照组所示，从该图可以看出犬在前六周的采食量在150g左右，但7周之后，犬的采食量在180g左右，与两个处理组之间采食量没有较大差异。猫的采食量结果如图1b中对照组所示，从该图可以看出猫的采食量基本维持在100g左右。
69.犬和猫的周增重结果分别如图2a中对照组和图2b中对照组所示。
70.犬和猫的粪便评分结果分别如图3a中对照组和图3b中对照组所示。
71.从图1a可以看出犬处理组a、b和对照组之间采食量没有较大差异。
72.从图1b可以看出前3周，处理组b的采食量高于对照组和处理组a，对照组高于处理组a。在4、5、6周处理组a、b与对照组采食量没有显著性差异，但在7周之后，对照组的采食量显著低于处理组b。说明了添加海藻酸钠可提高犬猫的采食量。
73.从图2a可以看出4周以后犬对照组的周增重明显低于处理组a和b的犬的周增重。
74.从图2b可以看出添加量海藻酸钠可提高犬的周增重，表明海藻酸钠的添加可提高犬猫的采食量。
75.从图3a可以看出看出处理组a和处理组b的犬粪便的评分在饲喂周期内评分都要优于对照组。说明了海藻酸钠的添加可提高粪便的成型，减少犬猫软便，其与海藻酸钠较高的吸水性有关，并且与海藻酸钠可有效提高枯草芽孢杆菌、复合酶制剂、甘露寡糖和茶多酚的生物活性，从而提高犬猫肠道蠕动，减少软便的发生，表明海藻酸钠载体的加入至关重要。
76.从图3b可以看出处理组a和处理组b的猫的粪便评分在前6周处理组要优于对照组，7周之后，实验组的评分与对照组无显著性差异。
77.虽然对照组与处理组a以及处理组b的基础日粮成分完全相同，组合添加剂差别仅仅在不含有或含有海藻酸钠，但是饲养后对犬和猫的肠道影响差别比较大，尤其是影响犬和猫对日粮中蛋白、脂肪和干物质消化率。可能的原因是，虽然海藻酸钠本身不直接对犬和猫的肠道健康产生明显的益处，但是海藻酸钠作为载体有效地保护了益生菌的存活活性以及酶的活性。
78.对照实施例2
79.该对比例的犬基础日粮和猫基础日粮均同实施例1。
80.组合添加剂与实施例1相比不含有枯草芽孢杆菌和甘露寡糖，其组成为(按重量计)复合酶制剂30％(同实施例1)、鸡肉粉57％、茶多酚8％、海藻酸钠5％。
81.将该组合添加剂与油脂搅拌混合，其中组合添加剂和油脂的重量比为1:0.2，然后，20℃条件下分别喷涂在犬和猫基础日粮的表面，其中组合添加剂的用量为犬基础日粮重量的0.7％，为猫基础日粮重量的0.6％，制备犬日粮和猫日粮。
82.选取6只犬和6只猫分别利用犬日粮和猫日粮进行饲喂，实验前也是进行7天预实验，正式试验为63天。我们考察了这些犬和猫腹泻情况，犬的腹泻率达到33％，猫的腹泻率达到20％。该结果表明组合饲料添加剂中不添加枯草芽孢杆菌和甘露寡糖不能改善宠物的肠道功能。
83.对照实施例3
84.该对比例的犬基础日粮和猫基础日粮均同实施例1。
85.组合添加剂与实施例1相比不含有复合酶制剂，按重量计，其组成为枯草芽孢杆菌40％、甘露寡糖8％、鸡肉粉35％、茶多酚8％、海藻酸钠5％和油脂4％。
86.将该组合添加剂与油脂搅拌混合，其中组合添加剂和油脂的重量比为1:0.2，然后，20℃条件下分别喷涂在犬和猫基础日粮的表面，其中组合添加剂的用量为犬基础日粮重量的0.7％，为猫基础日粮重量的0.6％，制备犬日粮和猫日粮。
87.选取6只犬和6只猫，分别利用犬日粮和猫日粮进行饲喂，实验前也是进行7天预实验，正式试验为63天。犬在63天时蛋白的消化率为75.46％，脂肪的消化率为90.24％；干物质消化率分别为75.59％，灰分含量分别为28.58％。猫在63天时蛋白的消化率为73.42％，脂肪的消化率为87.45％；干物质消化率为75.39％，灰分含量为23.16％。该结果表明复合酶制剂对犬猫肠道功能至关重要。
88.表1犬猫组合添加剂的配方
[0089][0090]
注：后喷涂的配方比例占膨化日粮比例的0.5％。**表示组合添加剂直接添加到日粮中，制备膨化饲料。
[0091]
表2实施例1、实施例2和对照实施例1中的犬对日粮中蛋白、脂肪和干物质消化率
[0092][0093]
注：同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(p＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
[0094]
表3实施例1、实施例2和对照实施例1猫对日粮中蛋白、脂肪和干物质消化率
[0095][0096][0097]
注：同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(p＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
[0098]
以上所述的，仅为本发明的较佳实施例，并非用以限定本发明的范围，本发明的上述实施例还可以做出各种变化。即凡是依据本发明申请的权利要求书及说明书内容所作的简单、等效变化与修饰，皆落入本发明专利的权利要求保护范围。本发明未详尽描述的均为常规技术内容。