一种调节犬或猫肠道菌群和免疫力的宠物日粮加工工艺及宠物日粮

1.本发明涉及宠物日粮加工工艺，更具体地说，涉及一种调节犬或猫肠道菌群和免疫力的日粮加工工艺及宠物日粮。


背景技术：

2.宠物腹泻是犬或猫最常见的疾病，对宠物机体健康造成较大伤害，不仅会导致虚脱脱水、食欲不振、精神沉郁等症状，更会导致犬或猫免疫机能下降及死亡。目前宠物腹泻疾病的治疗主要以口服抗生素药物为主，抗生素会造成宠物肠道的菌群失调，使病后的宠物很难完全康复。因此，寻找预防或治疗宠物腹泻的方法显得尤为重要。
3.除抗生素治疗外，目前主要通过三种方法预防或治疗宠物腹泻，包括物理吸附剂、益生菌制剂和/或酶制剂，三种方法常同时使用，其中物理吸附剂的添加量要控制，否则易导致宠物粪便灰分含量较高；益生菌制剂和酶制剂是市场上常见的预防措施，目前，在宠物日粮加工过程中，常通过后喷涂的方法提高益生菌的存活率和酶制剂的活性，达到调节动物自身肠道微生态平衡、抑制有害菌、增强机体免疫力、促进宠物的健康成长的作用。因此，改善宠物消化道健康，增强动物免疫力是宠物领域迫切需要解决的问题之一。
4.目前大部分研究集中在添加益生菌改善宠物肠道健康，包括酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌等，但没有考虑宠物日量在加工过程中会受到挤压、热等的影响，导致益生菌存活率下降，而益生菌需在肠道中保留106cfu才能发挥益生菌的功能。
5.复合酶制剂也是在宠物日粮中常见的添加剂，因为复合酶制剂可发挥不同种类酶的协同作用，达到增强免疫力，消除蛋白类抗营养因子，破坏植物原料细胞壁，提高营养物质利用率，降解水溶性可溶性非淀粉多糖，降低食糜粘度；抑制微生物的过度繁殖，改善胃肠道微生态环境，影响畜禽血液激素水平，提高机体代谢水平，增强机体免疫力。
6.虽然许多现有技术已经报道了益生菌和酶制剂用于宠物日粮中，如公开号：cn 113439803a公开了一种可替代饲用抗生素的复合酶制剂；公开号：cn113575761a公开了一种可增强免疫力有机宠物食品的制作工艺及生产方法；公开号：cn 113430150 a公开了一种益生菌及其运用；公开号：cn 113546096 a公开了一种治疗便秘和腹泻的活性益生菌配方，但是这些现有技术公开的方法只是将益生菌和酶制剂简单地混合后添加到日粮中或后喷涂到膨化粮的表面，没有考虑益生菌和酶制剂的特性，导致益生菌在加工和在达到肠道之前的和胃中存活率大大降低，以及复合酶在加工和在达到肠道之前的和胃中活性大大降低。


技术实现要素：

7.针对现有技术中宠物日粮及其加工过程中存在的缺陷，本发明提供了一种调节犬或猫肠道菌群(平衡)和免疫力的宠物日粮的加工工艺，该加工工艺制得的宠物日粮中枯草芽孢杆菌存活率高并且复合酶制剂的酶活好，可明显降低宠物腹泻率、改善宠物肠道和提
高免疫力。
8.为实现本发明的目的，本发明采用以下技术方案：
9.一种调节犬或猫肠道菌群和免疫力的宠物日粮的加工工艺，该加工工艺包括以下步骤：
10.(1)将宠物基础日粮的原料经过粉碎、混合、膨化挤出，制得膨化宠物基础日粮；
11.(2)在所述膨化宠物基础日粮的表面喷涂包括复合酶制剂、海藻糖和油脂的第一混合物，
12.(3)喷涂包括枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂的第二混合物。
13.优选地，第一混合物和第二混合物中的油脂是相同的，选自鸡油、鱼油、牛油中的一种或多种。
14.优选地，上述复合酶制剂包括植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶。
15.优选地，上述第一混合物中复合酶制剂、海藻糖和油脂的质量比为(1～5):(0.5～0.8):(0.1～0.3)。
16.优选地，上述第一混合物为所述膨化宠物基础日粮重量的0.1～1.2％。
17.优选地，上述第二混合物中枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂的质量比为(1～5):(0.5～0.8):(0.3～0.5)。
18.优选地，上述第二混合物为所述膨化宠物基础日粮重量的0.2～1.5％。
19.优选地，上述膨化宠物基础日粮用于犬，包括如下质量份数的组分：
20.鸡肉粉20～35％、鸡胸肉20～35％、牛肉骨粉10～25％、小米5～15％、豌豆5～15％、马铃薯5～15％、鸡油10-20％、甜菜粕1～5％、氯化胆碱0.5～3％、抗氧化剂0.3-0.6％、磷酸氢钙0.2～1％、食盐0.3～0.5％。
21.优选地，上述宠物基础日粮用于猫，包括如下质量份数的组分：鸡肉粉20～35％、鸡胸肉20～35％、鱼粉1～5％、牛肉骨粉10～15％、鸡油5～15％、鱼油3～5％、小米5～10％、抗氧化剂0.3～0.6％、豌豆5～10％、蛋氨酸0.3～0.5％、牛磺酸0.3～0.5％、氯化胆碱0.3～0.5％、磷酸氢钙0.2～1％、食盐0.3～0.5％。
22.优选地，上述膨化挤出的温度为130～150℃。
23.优选地，喷涂所述第一混合物和所述第二混合物均在常温进行。
24.本发明另一方面提供了一种调节犬或猫肠道菌群和免疫力的宠物日粮，其包括膨化宠物基础日粮和依次包覆在其表面的第一包覆层和第二包覆层，
25.其中所述第一包覆层包括复合酶制剂、海藻糖和油脂，所述复合酶制剂包括植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶，
26.所述第二包覆层包括枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂。
27.本发明的宠物日粮的加工工艺利用枯草芽孢杆菌耐酸碱和稳定性强的特性，将枯草芽孢杆菌作为后喷涂的最外层；复合酶制剂易受胃酸微环境的影响，将其作为后喷涂的里层；与直接在宠物日粮中添加益生菌和酶制剂相比，本发明的喷涂方式可以提高益生菌的存活率和酶制剂的活性。由于益生菌和酶制剂在宠物膨化日粮的表面，易在宠物胃肠道受到胃酸、胆汁酸、酶制剂以及其他微环境的影响，导致益生菌难以在宠物肠道末端(结肠)定植及酶也难以在小肠段发挥作用，因而通过将它们分别与海藻糖混合后进行喷涂，可减
少益生菌和酶制剂在宠物胃肠道受到胃酸、胆汁酸、酶制剂以及其他微环境的影响。
28.本发明通过调整加工工艺得到的调节犬或猫肠道菌群和免疫力的宠物日粮中芽孢杆菌能够形成芽孢，具有耐高温、耐酸碱等抗逆性，可分泌蛋白酶、淀粉酶等消化酶，促进动物肠道营养吸收，提高饲料利用率，减少或替代抗生素的使用。复合酶制剂中七种酶具有协同作用，可提高饲料消化率，降低食物在肠道中的黏附度，缓解肠胃负担。因此，可以预防和改善宠物便秘、腹泻、消化不良等病症的发生，有利于维持宠物的肠道健康。
具体实施方式
29.针对现有技术中宠物粮加工过程中存在的问题，本技术发明人经过深入的研究发现在宠物基础日粮表面先喷涂复合酶制剂、海藻糖和油脂的第一混合物，再喷涂芽孢杆菌、海藻糖和油脂的第二混合物，最终得到的宠物日粮中益生菌生存率高和酶制剂的活性好，且能有效地减少了组合添加剂在运输和存储过程中被破坏以及在胃中被胃酸、酶等降解，提高其肠生物活性。在此基础上完成了本发明。
30.本发明提供的调节犬或猫肠道菌群平衡和免疫力的宠物日粮的加工工艺包括步骤：(1)将宠物基础日粮的原料经过粉碎、混合、膨化挤出，制得膨化宠物基础日粮；(2)在所述膨化宠物基础日粮的表面喷涂包括复合酶制剂、海藻糖和油脂的第一混合物；(3)喷涂包括枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂的第二混合物。
31.本发明中“宠物基础日粮”是指满足宠物基本营养的日粮。例如，用于犬的基础日粮，可按照犬粮的营养标准进行配制：粗蛋白≥25％，粗脂肪≥14％，粗纤维≤5.0％，粗灰分≤10％，钙≥1.3％，总磷≥1.0％，食盐≤1.2％，水分≤10％配置。用于猫的基础日粮可按照猫粮的营养标准进行配制：粗蛋白≥25％，粗脂肪≥14％，粗纤维≤5.0％，粗灰分≤10％，牛磺酸≥0.2％，钙≥1.3％，总磷≥1.0％，食盐≤1.2％，水分≤10％。
32.本发明中基础日粮的粉碎可通过常规的方式进行，粉碎后(例如，粉碎成20～50目)的原料进行充分混合，混合可通过本领域常用的方法(例如，机械搅拌)进行，充分混合后的原料，进行膨化挤压。膨化挤压可通过本领域常用的膨化机膨化挤压，得到颗粒状膨化基础日粮。膨化挤压温度为130～150℃。优选地，膨化机喂料速度为22～27hz，切料速度为15～27hz，螺杆转速为175～190rpm。本发明中，上述步骤(1)还包括对膨化挤压得到的颗粒状膨化基础日粮进行干燥的步骤，干燥的温度优选为60～90℃，干燥的时间优选为60～90min。
33.本发明中，第一混合物和第二混合物中的油脂是相同的，包括但不局限于鸡油、鱼油、牛油。
34.本发明中，第一混合物中复合酶制剂包括植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶。这些复合酶制剂可协同提高犬或猫日粮中蛋白、淀粉等消化率，减少食糜黏度，降低犬或猫腹泻。复合酶制剂的酶活优选分别为植酸酶10000～50000u/g、纤维素酶5000～2000u/g、溶菌酶50000～200000u/g、淀粉酶2000～10000u/g、β-葡聚糖酶3000～10000u/g、蛋白酶5000～20000u/g；更优选，植酸酶20000u/g、纤维素酶12000u/g、溶菌酶55000u/g、淀粉酶2400u/g、β-葡聚糖酶9000u/g、蛋白酶6500u/g。复合酶制剂中植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶的酶活配比优选为0.2～1:0.2～1:0.2～0.5:1～2:1～2:1～2，更优选，植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶的
酶活配比为0.5:0.5:0.3:1.5:1.5:1.5。本领域技术人员可以理解的是，本发明中复合酶制剂选用的各单酶也可以是其他规格的酶，只需要满足在复合酶制剂中的各单酶活配比即可。
35.本发明中，复合酶制剂酶活的测定方法为：植酸酶活测定：温度为37℃，ph 7.0，1min释放1μmol磷酸盐所需的酶量定义为一个单位的植酸酶活性。纤维素酶活测定：温度为37℃，ph为5.5，1min内催化羧甲基纤维素钠产生1μmol还原糖所需的酶量为1u。溶菌酶活测定：温度为25℃，ph值为6.2、波长450nm时，与溶壁小球菌溶液反应，每分钟引起吸光度值下降0.001为1u。淀粉酶活测定：温度为37℃，ph为5.5，1min内催化淀粉产生1μmol还原糖所需的酶量为1u。β-葡聚糖酶活测定：温度为37℃，ph为7.0，1min内催化β-葡聚糖产生1μmol还原糖所需的酶量为1u。蛋白酶活测定：温度为40℃，ph为3.0，1min内催化酪素产生1μg酪氨酸所需的酶量为1u。
36.本发明的复合酶制剂中各个酶的作用为：1)植酸酶能破坏植酸对矿物元素强烈的亲和力，增加矿物元素的营养效价；2)β-葡聚糖酶可产生的葡萄糖酸，被肠道中益生菌所利用，产生琥珀酸，乳酸，甲酸，乙酸，丙酸和丁酸等物质；
37.3)纤维素酶可将不易消化的大分子多糖、蛋白质和脂类降解成小分子物质有利于动物胃肠道的消化吸收，补充内源酶的不足，消除抗营养因子，促进犬或猫健康生长；4)溶菌酶可保护胃黏膜，降低血液当中的胆固醇和甘油三酯含量，预防胃溃疡所引发的食欲不振和消化不良的现象；5)淀粉酶可分解直链淀粉、糖元等α-1,4-葡聚糖，水解α-1,4-糖苷键，促进淀粉消化；6)蛋白酶能够降解内毒素中蛋白类成分，彻底消除内毒素对肠道炎症的不利影响，减少腹泻率的发生。因此，6种酶制剂通过科学配比和协同作用，可有效减小饲料中致泻因子、减少肠道中有毒物质的释放，提高肠道消化能力，降低犬或猫的腹泻率。
38.第一混合物中油脂的作用是与复合酶制剂和海藻糖混合，可起到在膨化颗粒表面黏附和提高犬猫适口性的作用。
39.第一混合物中复合酶制剂、海藻糖和油脂的质量比为(1～5):(0.5～0.8):(0.1～0.3)，更优选(2～4):(0.6～0.7):(0.2～0.3)。
40.本发明中，上述步骤(2)喷涂第一混合可通过本领域常用的方式进行，喷涂温度为常温。
41.本发明中，第二混合物中枯草芽孢杆菌总活菌数为3.0
×
109～5.0
×
10
11
cfu/g，更优选5.0
×
10
11
cfu/g。
42.本发明中，第二混合物中油脂的作用是与枯草芽孢杆菌和海藻糖混合，可起到在膨化颗粒表面黏附和提高犬猫适口性的作用。
43.本发明中，第二混合物中枯草芽孢杆菌的作用为：1)可以产生消化酶，可提高胃肠道蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活性，对植物性碳水化合物具有较强的降解能力；2)提供宠物日粮的耐受性，耐高温性、耐盐性、耐酸性；3)枯草芽孢杆菌可消耗肠道中的氧气，抑制致病菌的定植和生长，维持肠道内的厌氧环境，从而维持肠道菌群生态平衡，促进动物健康生长；4)枯草芽孢杆菌还是较好的免疫激活剂，可通过产生抗体和提高巨噬细胞的活性刺激机体产生细胞免疫和体液免疫，从而增强机体的免疫力和抗病力。
44.第二混合物中枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂的质量比优选为(1～5):(0.5～0.8):(0.3～0.5)，更优选为(2～4):(0.6～0.7):(0.3～0.5)。
45.本发明中，海藻糖作为枯草芽孢杆菌和复合酶制剂的辅助载体，由于海藻糖不仅可作为枯草芽孢杆菌的益生元，也可作为生物活性物质的保湿剂，使得生物活性物质具有耐干燥性，因此可增加益生菌的活性，可改善肠道微生态环境，加强胃肠道消化吸收功能，有效排除体内毒素，增强机体免疫抗病能力。
46.本发明的调节犬或猫肠道菌群平衡和免疫力的宠物日粮的加工工艺是通过将复合酶制剂和枯草芽孢杆菌分别与海藻糖混合，通过层层喷涂的方式，依次附着在宠物日粮表面，该方式可有效提高宠物日粮的枯草芽孢杆菌和复合酶在犬或猫肠道中的定值率和酶活，从而更有效地抑制有害微生物的繁殖，调节肠道菌群平衡，降低犬或猫的腹泻率。
47.本发明的宠物日粮加工工艺提供的调节犬或猫肠道菌群平衡和免疫力的宠物日粮包括膨化宠物基础日粮和依次包覆在其表面的第一包覆和第二包覆层，所述第一包覆包括复合酶制剂、海藻糖和油脂，其中所述复合酶制剂包括植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶，所述第二包覆包括枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂。
48.本发明中，海藻酸钠做为枯草芽孢杆菌和复合酶制剂的载体，起到保护枯草芽孢杆菌存活率和复合酶制剂的活性的作用。
49.在本发明的一个具有实施例中，膨化宠物基础日粮用于犬，包括如下质量份数的组分：
50.鸡肉粉20～35％、鸡胸肉20～35％、牛肉骨粉10～25％、小米5～15％、豌豆5～15％、马铃薯5～15％、鸡油10～20％、甜菜粕1～5％、氯化胆碱0.5～3％、天然抗氧化剂0.3～0.6％、磷酸氢钙0.2～1％、食盐0.3～0.5％。其中天然抗氧化剂包括维生素、微量元素、合成氨基酸等成分的组合物，例如，可购自于奥特奇生物制品(中国)有限公司。
51.在本发明的一个具有实施例中，宠物基础日粮用于猫，包括如下质量份数的组分：鸡肉粉20～35％、鸡胸肉20～35％、鱼粉1～5％、牛肉骨粉10～15％、鸡油5～15％、鱼油3～5％、小米5～10％、天然抗氧化剂0.3-0.6％、豌豆5～10％、蛋氨酸0.3～0.5％、牛磺酸0.3～0.5％、氯化胆碱0.3～0.5％、磷酸氢钙0.2～1％、食盐0.3～0.5％，其中天然抗氧化剂包括维生素、微量元素、合成氨基酸等成分的组合物，例如，可购自于奥特奇生物制品(中国)有限公司。在本发明中，若无特殊说明，所有的原料组分均为本领域技术人员熟知的市售商品。下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。具体实施例是在以本发明技术方案为前提下进行实施的，给出了详细的实施方式和操作过程。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件进行。除非另有说明，比例和百分数按重量计。
52.下列具体实施例子中，犬和猫的选取标准和饲养方式如下：
53.犬的选取标准：选择健康的柴犬，体重10kg左右，体温、呼吸频率、心率正常，年龄1.5～2.5岁，免疫程序齐全。
54.猫的选取标准：选择健康的英短，年龄在1～2岁，平均体重为3.70kg左右，免疫程序齐全。
55.饲养方式：犬和猫在上海农科院动物房饲喂，饲养在同一环境下超过30天，才开始正式实验，试验期为63天，试验前7天转入犬舍，单笼饲养，自由采食及饮水，相对湿度60～70％。
56.下列具体实施例子中，饲喂效果的评价参考以下标准：犬或猫粪便ph值、犬或猫粪
便评分和腹泻率检测、犬或猫血清学指标检测、犬或猫粪便中的益生菌。这些标准的测定方式如下：
57.(1)粪便ph值测定：
58.称取10g新鲜粪样悬浮于20ml蒸馏水中，旋涡震荡，充分混匀，测定ph值，试验重复三次，结果取平均值。
59.(2)粪便评分和腹泻率检测：
60.每天观测犬或猫的粪便情况，计算腹泻率：
61.腹泻率＝(腹泻头数/实验组总头数)*100％。
62.(3)犬或猫血清学指标检测：
63.在0天、30天和60天对犬或猫，颈静脉采集乙二胺四乙酸二钠(edta-na2)抗凝血0.5ml，分别用于免疫指标测定。免疫指标包括免疫球蛋白a(iga)、血清免疫球蛋白m(igm)、免疫球蛋白g(igg)的含量采用免疫比浊法测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
64.(4)粪便中的益生菌测定测定方法：
65.通过qrt-pcr测定粪便中的大肠杆菌、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌。根据superreal荧光定量预混试剂增强版(sybr green)试剂盒的操作规程进行qrt pcr反应。qrt pcr反应程序设置为95℃预变性15min，95℃变性10秒，60℃退火/延伸32秒，变性和退火/延伸进行40个循环。以β-actin为内参，采用2-δδct
方法计算大肠杆菌、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌的相对丰度。大肠杆菌的引物为f:agagtttgatcctggctcag和r:aaggaggtgatccagccgca，沙门杆菌的引物为f:gcggcgttggagagtgata和r:agcaatggaaaaagcaggat。枯草芽孢杆菌的引物为f:gggtccagaacgctgagaa和r:aaagcctccgacataaccg。
66.下列具体实施例子中，枯草芽孢杆菌产品批号kcs211219，购于奥特奇生物制品(中国)有限公司，执行标准q/370126trh001-2020。复合酶制剂购于奥特奇生物制品(中国)有限公司，复合酶制剂包括：植酸酶(cas:9001-89-2)、纤维素酶(cas:9012-54-8)、果胶酶(cas：9032-75-1)、淀粉酶(cas:9001-11-0)、β-葡聚糖酶(cas:9074-98-0)和和蛋白酶(cas:9001-92-7)，购于sigma公司；甘露寡糖(cas:37288-54-3)购于江苏奥福生物科技有限公司；茶多酚(cas:84650-60-2)和海藻酸钠(cas:9005-38-3)购于sigma公司。
67.上述测试试剂盒购于南京建成生物工程研究所。
68.下列实施例中提到的天然抗氧化物包括维生素、微量元素、合成氨基酸等成分的组合物，购自于奥特奇生物制品(中国)有限公司。犬的宠物日粮和猫的宠物日粮中天然抗氧化物是一样的。
69.实施例1
70.1.1制备用于犬的宠物日粮
71.(1)将基础日粮的原料粉碎，细度约40目，均匀混合，150℃条件下通过双螺旋膨化挤出制得膨化犬基础日粮，
72.其中膨化犬基础日粮由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉21％、鸡胸肉32％、牛肉骨粉15％、小米5％、豌豆5.7％、马铃薯5％、鸡油11％、甜菜粕3％、天然抗氧化物0.7％、氯化胆碱1.1％、磷酸氢钙0.2％、食盐0.3％；
73.(2)通过喷涂机在上述膨化宠物基础日粮的表面喷涂包括复合酶制剂、海藻糖和油脂的第一混合物，
74.其中复合酶制剂、海藻糖和鸡油的重量比为3:0.6:0.2；
75.其中第一混合物为膨化宠物基础日粮的重量的0.3％；
76.其中复合酶制剂的酶活优选分别为植酸酶50000u/g、纤维素酶2000u/g、溶菌酶200000u/g、淀粉酶10000u/g、β-葡聚糖酶10000u/g、蛋白酶20000u/g；更优选，植酸酶20000u/g、纤维素酶12000u/g、溶菌酶55000u/g、淀粉酶2400u/g、β-葡聚糖酶9000u/g、蛋白酶6500u/g。植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶的酶活配比为0.5:0.5:0.3:1.5:1.5:1.5。
77.(3)通过喷涂机喷涂包括枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂的第二混合物，自然冷却，制得用于犬的宠物日粮，
78.其中第二混合物为膨化宠物基础日粮的重量的0.4％；
79.其中枯草芽孢杆菌、海藻糖和鸡油的重量比为3:0.6:0.4。
80.其中枯草芽孢杆菌总活菌数为5.0
×
10
11
cfu/g。
81.1.2制备用于猫的宠物日粮
82.(1)将基础日粮的原料粉碎，细度约40目，均匀混合，150℃条件下通过双螺旋膨化挤出，制得膨化猫基础日粮，
83.其中膨化猫基础日粮由如下质量份数的组分组成：
84.猫基础日粮由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉30％、鸡胸肉28％、鱼粉3％、牛肉骨粉13％、鸡油6％、鱼油4％、小米7％、天然抗氧化物0.6％、豌豆6％、蛋氨酸0.5％、牛磺酸0.4％、氯化胆碱0.4％、磷酸氢钙0.6％、食盐0.5％；
85.(2)通过喷涂机在上述膨化宠物基础日粮的表面喷涂包括复合酶制剂、海藻糖和油脂的第一混合物，
86.其中复合酶制剂、海藻糖和鸡油的重量比为3:0.6:0.2；
87.其中第一混合物为膨化宠物基础日粮重量的0.5％；
88.其中复合酶制剂的酶活优选分别为植酸酶50000u/g、纤维素酶2000u/g、溶菌酶200000u/g、淀粉酶10000u/g、β-葡聚糖酶10000u/g、蛋白酶20000u/g；更优选，植酸酶20000u/g、纤维素酶12000u/g、溶菌酶55000u/g、淀粉酶2400u/g、β-葡聚糖酶9000u/g、蛋白酶6500u/g。植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶的酶活配比为0.5:0.5:0.3:1.5:1.5:1.5。
89.(3)通过喷涂机喷涂包括枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂的第二混合物，自然冷却，制得用于猫的宠物日粮，
90.其中枯草芽孢杆菌、海藻糖和鸡油的重量比为3:0.6:0.4，
91.其中第二混合物为膨化宠物基础日粮重量的0.4％；
92.其中枯草芽孢杆菌总活菌数为5.0
×
10
11
cfu/g。
93.实施例2
94.2.1制备用于犬的宠物日粮
95.(1)将基础日粮的原料粉碎，细度约45目，均匀混合，150℃条件下通过双螺旋膨化挤出制得膨化犬基础日粮，
96.其中膨化犬基础日粮由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉21％、鸡胸肉32％、牛肉骨粉15％、小米5％、豌豆5.7％、马铃薯5％、鸡油11％、甜菜粕3％、天然抗氧化物0.7％、氯
化胆碱1.1％、磷酸氢钙0.2％、食盐0.3％。
97.(2)通过喷涂机在上述膨化宠物基础日粮的表面喷涂包括复合酶制剂、海藻糖和油脂的第一混合物，
98.其中复合酶制剂、海藻糖和鸡油的重量比为4:0.7:0.2。
99.其中第一混合物为膨化宠物基础日粮重量的0.4％；
100.其中复合酶制剂的酶活优选分别为植酸酶50000u/g、纤维素酶2000u/g、溶菌酶200000u/g、淀粉酶10000u/g、β-葡聚糖酶10000u/g、蛋白酶20000u/g；更优选，植酸酶20000u/g、纤维素酶12000u/g、溶菌酶55000u/g、淀粉酶2400u/g、β-葡聚糖酶9000u/g、蛋白酶6500u/g。植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶的酶活配比为0.5:0.5:0.3:1.5:1.5:1.5。
101.(3)通过喷涂机喷涂包括枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂的第二混合物，自然冷却，制得用于猫的宠物日粮，
102.其中枯草芽孢杆菌、海藻糖和鸡油的重量比为2:0.7:0.4。
103.其中第二混合物为膨化宠物基础日粮重量的0.3％；
104.其中枯草芽孢杆菌总活菌数为5.0
×
10
11
cfu/g。
105.2.2制备用于猫的宠物日粮
106.(1)将基础日粮的原料粉碎，细度约40目，均匀混合，150℃条件下通过双螺旋膨化挤出，制得膨化猫基础日粮，
107.其中膨化猫基础日粮由如下质量份数的组分组成：
108.猫基础日粮由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉30％、鸡胸肉28％、鱼粉3％、牛肉骨粉13％、鸡油6％、鱼油4％、小米7％、天然抗氧化物0.6％、豌豆6％、蛋氨酸0.5％、牛磺酸0.4％、氯化胆碱0.4％、磷酸氢钙0.6％、食盐0.5％；
109.(2)通过喷涂机在上述膨化宠物基础日粮的表面喷涂包括复合酶制剂、海藻糖和油脂的第一混合物，
110.其中复合酶制剂、海藻糖和鸡油的重量比为4:0.5:0.3，
111.其中第一混合物为膨化宠物基础日粮重量的0.3％；
112.其中复合酶制剂的酶活优选分别为植酸酶50000u/g、纤维素酶2000u/g、溶菌酶200000u/g、淀粉酶10000u/g、β-葡聚糖酶10000u/g、蛋白酶20000u/g；更优选，植酸酶20000u/g、纤维素酶12000u/g、溶菌酶55000u/g、淀粉酶2400u/g、β-葡聚糖酶9000u/g、蛋白酶6500u/g。植酸酶、纤维素酶、溶菌酶、淀粉酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶的酶活配比为0.5:0.5:0.3:1.5:1.5:1.5。
113.(3)通过喷涂机喷涂包括枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂的第二混合物，自然冷却，制得用于猫的宠物日粮，
114.其中枯草芽孢杆菌、海藻糖和鸡油的重量比为2:0.8:0.3；
115.其中第二混合物为膨化宠物基础日粮重量的0.5％；
116.其中枯草芽孢杆菌总活菌数为5.0
×
10
11
cfu/g。
117.对照实施例
118.制备用于犬的宠物日粮
119.(1)将基础日粮的原料粉碎，细度约40目，均匀混合，150℃条件下通过双螺旋膨化
挤出制得膨化犬基础日粮，
120.其中膨化犬基础日粮由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉21％、鸡胸肉32％、牛肉骨粉15％、小米5％、豌豆5.7％、马铃薯5％、鸡油11％、甜菜粕3％、天然抗氧化物0.7％、氯化胆碱1.1％、磷酸氢钙0.2％、食盐0.3％；
121.(2)将上述膨化宠物基础日粮和包括复合酶制剂(同实施例1)、枯草芽孢杆菌(同实施例1)、海藻糖和油脂的混合物充分混合制得用于犬的宠物日粮，
122.其中复合酶制剂、枯草芽孢杆菌、海藻糖和鸡油的重量比为3:3:1.2:0.6；
123.其中混合物为膨化宠物基础日粮重量的0.7％。
124.制备用于猫的宠物日粮
125.(1)将基础日粮的原料粉碎，细度约40目，均匀混合，150℃条件下通过双螺旋膨化挤出，制得膨化猫基础日粮，
126.其中膨化猫基础日粮由如下质量份数的组分组成：
127.猫基础日粮由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉30％、鸡胸肉28％、鱼粉3％、牛肉骨粉13％、鸡油6％、鱼油4％、小米7％、天然抗氧化物0.6％、豌豆6％、蛋氨酸0.5％、牛磺酸0.4％、氯化胆碱0.4％、磷酸氢钙0.6％、食盐0.5％；
128.(2)将上述膨化宠物基础日粮和包括复合酶制剂(同实施例1)、枯草芽孢杆菌(同实施例1)、海藻糖和油脂的混合物充分混合制得用于猫的宠物日粮，
129.其中复合酶制剂、枯草芽孢杆菌、海藻糖和鸡油的重量比为3:3:1.2:0.6；
130.其中混合物为膨化宠物基础日粮的重量的0.9％。
131.对比实施例
132.制备用于犬的宠物日粮
133.(1)将基础日粮的原料粉碎，细度约40目，均匀混合，150℃条件下通过双螺旋膨化挤出制得膨化犬基础日粮，
134.其中膨化犬基础日粮由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉21％、鸡胸肉32％、牛肉骨粉15％、小米5％、豌豆5.7％、马铃薯5％、鸡油11％、甜菜粕3％、天然抗氧化物0.7％、氯化胆碱1.1％、磷酸氢钙0.2％、食盐0.3％；
135.(2)通过喷涂机在上述膨化宠物基础日粮的表面喷涂包括复合酶制剂(同实施例1)、枯草芽孢杆菌(同实施例1)、海藻糖和油脂的混合物，得用于犬的宠物日粮，
136.其中复合酶制剂、枯草芽孢杆菌、海藻糖和鸡油的重量比为3:3:1.2:0.6；
137.其中混合物为膨化宠物基础日粮重量的0.7％。
138.制备用于猫的宠物日粮
139.(1)将基础日粮的原料粉碎，细度约40目，均匀混合，150℃条件下通过双螺旋膨化挤出，制得膨化猫基础日粮，
140.其中膨化猫基础日粮由如下质量份数的组分组成：
141.猫基础日粮由如下质量份数的组分组成：鸡肉粉30％、鸡胸肉28％、鱼粉3％、牛肉骨粉13％、鸡油6％、鱼油4％、小米7％、天然抗氧化物0.6％、豌豆6％、蛋氨酸0.5％、牛磺酸0.4％、氯化胆碱0.4％、磷酸氢钙0.6％、食盐0.5％；
142.(2)通过喷涂机在上述膨化宠物基础日粮的表面喷涂包括复合酶制剂(同实施例1)、枯草芽孢杆菌(同实施例1)、海藻糖和油脂的混合物，制得用于猫的宠物日粮，
143.其中复合酶制剂、枯草芽孢杆菌、海藻糖和鸡油的重量比为3:3:1.2:0.6；
144.其中混合物为膨化宠物基础日粮的重量的0.9％。
145.实施例1的宠物日粮实际使用效果
146.选择36只犬和36只猫，分别利用实施例1的用于犬的宠物日粮和用于猫的宠物日粮进行饲喂，实验前1周预实验，正式试验为60天。每天测定采食量和对粪便评分，每周测定犬或猫体重和收集犬或猫粪便，测定日增重和饲料消化率。在0天、30天和60天分别对犬和猫静脉采血，收集血清和全血。由表1可知，犬粪便的ph为6.17，腹泻率为0％，猫粪便的ph为6.36，腹泻率为0％。
147.如表2所示，在0天、30天和60天时，犬粪便中的大肠杆菌分别为4.90、4.32和3.12lgcfu/g，沙门氏菌分别为4.92、3.24和2.94lgcfu/g，枯草芽孢杆菌分别为2.34、4.39和7.67lgcfu/g。在0天、30天和60天时，猫粪便中的芽孢杆菌分别为4.37、3.26和2.36lgcfu/g，沙门氏菌分别为3.65、2.85和2.46lgcfu/g，枯草芽孢杆菌分别为3.57、5.37和6.92lgcfu/g。与对照组相比，犬或猫粪便中的大肠杆菌、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌有显著性差异。因此，饲喂60天时，粪便中的枯草芽孢杆菌已大于106lgcfu/g，可有效定植于犬或猫的肠道，同时可抑制大肠杆菌和沙门氏菌的数量。
148.如表3所示，在0天和60天时，犬血清中iga含量分别为142.34和154.2mg/l，igg含量分别为1456.82和1488.71mg/l，igm含量分别为310.44和315.01mg/l。如表4所示，在0天和60天时，猫血清中iga含量分别为170.89和192.35mg/l，igg含量分别为210.34和223.56mg/l，igm含量分别为110.23和135.64mg/l。因此，实验组可有效提高犬或猫血清中的iga、igg和igm含量，可维持犬或猫肠道健康，提高抵抗力。
149.实施例2的宠物日粮实际使用效果
150.选择36只犬和36只猫，分别利用实施例2的用于犬的宠物日粮和用于猫的宠物日粮进行饲喂，实验前1周预实验，正式试验为60天。每天测定采食量和对粪便评分，每周测定犬或猫体重和收集犬或猫粪便，测定日增重和饲料消化率。在0天、30天和60天分别对犬和猫静脉采血，收集血清和全血。由表1可知，犬粪便的ph为6.23，腹泻率为0％，猫粪便的ph为6.25，腹泻率为0％。
151.如表2所示，在0天、30天和60天时，犬粪便中的大肠杆菌分别为5.10、4.39和3.41lgcfu/g，沙门氏菌分别为4.84、3.35和2.85lgcfu/g，枯草芽孢杆菌分别为2.45、4.27和6.62lgcfu/g。在0天、30天和60天时，猫粪便中的大肠杆菌分别为4.62、3.45和2.43lgcfu/g，沙门氏菌分别为3.70、2.93和2.41lgcfu/g，枯草芽孢杆菌分别为3.64、5.82和7.83lgcfu/g。与对照组相比，犬或猫粪便中的大肠杆菌、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌有显著性差异。因此，饲喂60天时，粪便中的枯草芽孢杆菌已大于106lgcfu/g，可有效定植于犬或猫的肠道，同时可抑制大肠杆菌和沙门氏菌的数量。
152.如表3所示，在0天和60天时，犬血清中iga含量分别为145.63和155.54mg/l，igg含量分别为1398.34和1450.32mg/l，igm含量分别为320.24和326.35mg/l。如表4所示，在0天和60天时，猫血清中iga含量分别为172.34和192.34mg/l，igg含量分别为220.45和240.68mg/l，igm含量分别为110.46和125.09mg/l。因此，实验组可有效提高犬或猫血清中的iga、igg和igm含量，可维持犬或猫肠道健康，提高抵抗力。
153.对照实施例的宠物日粮实际使用效果
154.选择36只犬和36只猫，分别利用对照实施例的用于犬的宠物日粮和用于猫的宠物日粮进行饲喂，实验前1周预实验，正式试验为60天。每天测定采食量和对粪便评分，每周测定犬或猫体重和收集犬或猫粪便，测定日增重和饲料消化率。在0天、30天和60天分别对犬和猫静脉采血，收集血清和全血。
155.由表1可知，犬粪便的ph为6.73，腹泻率为20％，猫粪便的ph为6.60，腹泻率为25％。与实验组相比，犬或猫有一定比例的腹泻情况发生。
156.如表2所示，在0天、30天和60天时，犬粪便中的大肠杆菌分别为5.23、5.14和4.84lgcfu/g，沙门氏菌分别为4.79、4.35和3.93lgcfu/g，枯草芽孢杆菌分别为2.95、2.78和3.51lgcfu/g。在0天、30天和60天时，猫粪便中的大肠杆菌分别为4.76、3.96和3.83lgcfu/g，沙门氏菌分别为3.68、3.18和2.92lgcfu/g，枯草芽孢杆菌分别为3.47、4.43和4.19lgcfu/g。与实验组相比，犬或猫粪便中的大肠杆菌、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌有显著性差异，没有经过新型后喷涂工艺的犬或猫膨化日粮，饲喂60天时，粪便中的枯草芽孢杆菌达不到定植数量，同时也不能有效抑制大肠杆菌和沙门氏菌的数量。
157.如表3所示，在0天和60天时，犬血清中iga含量分别为148.23和150.21mg/l，igg含量分别为1416.56和1420.21mg/l，igm含量分别为317.34和320.10mg/l。如表4所示，在0天和60天时，猫血清中iga含量分别为173.96和183.96mg/l，igg含量分别为220.57和226.54mg/l，igm含量分别为100.94和112.88mg/l。对照组，在饲喂周期，iga、igg和igm含量没有显著性差异，对比实施例的宠物日粮实际使用效果
158.选取10只犬和10只猫分别利用对比实施例的用于犬的宠物日粮和用于猫的宠物日粮进行饲喂，实验前1周预实验，正式试验为60天。我们考察了这些犬和猫腹泻情况，虽然没有犬出现腹泻，也没有猫出现腹泻，但是一半的犬和一半的猫的粪便的黏度明显比食用实施例1和实施例1的犬和猫的粪便黏度大。
159.说明先喷涂包括复合酶制剂、海藻糖和油脂的第一混合物然后喷涂包括枯草芽孢杆菌、海藻糖和油脂的第二混合物可使得复合物酶制剂的活性得到更好的保护，在肠道中发挥更好的作用。
160.表1实施例1、实施例2和对照实施例中犬和猫粪便ph和腹泻率指标
[0161][0162]
表2实施例1、实施例2和对照实施例中犬和猫粪便中大肠杆菌、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌的数量
[0163]
[0164][0165]
注：同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(p＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
[0166]
表3实施例1、实施例2和对照实施例中犬血清中iga、igm和igg的测定
[0167][0168]
注：同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(p＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
[0169]
表4实施例1、实施例2和对照实施例中猫血清中iga、igm和igg的测定
[0170][0171]
注：同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(p＞0.05)，不同小写字母表示差异显著(p＜0.05)。
[0172]
以上所述的，仅为本发明的较佳实施例，并非用以限定本发明的范围，本发明的上述实施例还可以做出各种变化。即凡是依据本发明申请的权利要求书及说明书内容所作的简单、等效变化与修饰，皆落入本发明专利的权利要求保护范围。本发明未详尽描述的均为
常规技术内容。