高效降解四甲苯的硝基还原假单胞菌WX4-1及应用的制作方法

技术特征：
1.一株高效降解四甲苯的硝基还原假单胞菌，其特征在于，微生物分类命名为硝基还原假单胞菌(pseudomonas nitroreducens)wx4-1，已在2021年08月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为cctcc no:m 20211033；所述wx4-1的16s rrna序列如seq id no.1所示。2.一种以权利要求1所述硝基还原假单胞菌为活性成分的含菌悬液，其特征在于，所述含菌悬液以高效降解四甲苯的硝基还原假单胞菌wx4-1经斜面培养、种子培养、发酵后制成。3.一种权利要求2所述含菌悬液的制备方法，其特征在于，包括以下具体步骤：(1)斜面培养：将高效降解四甲苯的硝基还原假单胞菌wx4-1接种至斜面培养基上，在30-35℃下培养1-3d，获得斜面菌体；所述斜面培养基终浓度组成为：k2hpo4·
2h2o 4.25g
·
l-1
，nah2po4·
2h2o 1.13g
·
l-1
，nh4cl 0.2g
·
l-1
，mgso4·
7h2o 0.2g
·
l-1
，feso4·
7h2o 0.012g
·
l-1
，mnso4·
h2o 0.015g
·
l-1
，znso4·
7h2o 0.003g
·
l-1
，cocl2·
6h2o 0.0085g
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l-1
，四甲苯0.1g
·
l-1
，琼脂20g
·
l-1
，ph值7.0-8.0；(2)种子培养：从斜面菌体挑取菌落接种至lb培养基，在30-35℃下培养18-24h，获得种子液；所述lb培养基终浓度组成为：nacl 10g
·
l-1
，酵母浸粉5g
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l-1
，蛋白胨10g
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l-1
，ph值7.0-8.0；(3)发酵：将种子液以体积浓度2％的接种量接种至发酵培养基，在30-35℃、160-180rpm恒温摇床上振荡培养18-24h，获得发酵培养液即为含菌悬液；所述发酵培养基终浓度组成为：k2hpo4·
2h2o 4.25g
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l-1
，nah2po4·
2h2o 1.13g
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l-1
，h4cl 0.2g
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l-1
，mgso4·
7h2o 0.2g
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l-1
，feso4·
7h2o 0.012g
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l-1
，mnso4·
h2o 0.015g
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l-1
，znso4·
7h2o 0.003g
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l-1
，cocl2·
6h2o 0.0085g
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l-1
，四甲苯0.1g
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l-1
，ph值7.0-8.0。4.一种权利要求2所述含菌悬液在降解四甲苯中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，具体为：将所述含菌悬液接种至含有终浓度为100mg
·
l-1
的四甲苯的液体选择培养基中，以四甲苯为唯一碳源，在30-40℃、160-300rpm恒温摇床上振荡培养，获得培养液；所述液体选择培养基的终浓度组成为：k2hpo4·
2h2o 4.25g
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l-1
，nah2po4·
2h2o 1.13g
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l-1
，h4cl 0.2g
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l-1
，mgso4·
7h2o 0.2g
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l-1
，feso4·
7h2o 0.012g
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l-1
，mnso4·
h2o 0.015g
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，znso4·
7h2o 0.003g
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l-1
，cocl2·
6h2o 0.0085g
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，四甲苯0.1g
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l-1
，ph值7.0-8.0。

技术总结
本发明公开了一株高效降解四甲苯的硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens)WX4-1及其降解应用，所述硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens)WX4-1保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮政编码：430072，保藏编号：M 20211033，保藏日期2021年8月16日；本发明提供的一株高效降解四甲苯的硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens)WX4-1在72h内能对初始浓度为100mg


技术研发人员：杨卫东 高军 李陈想 周轶 陈国峰 石露
受保护的技术使用者：平湖石化有限责任公司
技术研发日：2021.12.02
技术公布日：2022/4/26