一种改善肠道提高存活率的南美白对虾发酵饲料的制作方法

1.本发明涉及动物养殖技术领域，特别是涉及一种改善肠道提高存活率的南美白对虾发酵饲料。


背景技术：

2.中国曾于20世纪80年代末引进南美白对虾，并于90年代初期人工繁殖成功。2000年以后开始大规模进行养殖。已成为中国虾类养殖的主要对象，在这个从东到西、从沿海到内陆的大部分地区广泛养殖。据不完全统计，南美白对虾占所有海水虾类养殖的65％，包括淡水养殖的白南美对虾，其产量已占了中国所有养殖虾类总产量的80％。2006年中国养殖虾类的产量在60～70万吨，保守估计南美白对虾的产量也有39万吨。
3.然而随着集约化、高密度养殖规模日益扩大，集中投饵造成养殖水体中积累大量的残饵、粪便，造成有害物质的不断积累，促使致病菌大量繁殖，进而影响南美白对虾的健康生长，导致疾病爆发。对虾一旦出现病情，经常造成养殖虾大面积死亡，给养殖户造成重大经济损失。


技术实现要素：

4.针对现有技术不足，本技术提供了一种改善肠道提高存活率的南美白对虾发酵饲料。该饲料由市售全价虾饲料，乳酸菌，地衣芽孢杆菌等进一步发酵而成。通过微生物对虾颗粒饲料进行预处理，降解饲料中的有毒物质，产生小分子营养物质和生长因子，可以改善虾颗粒饲料的适口性，提高虾的采食量，以及虾颗粒饲料中营养物质的消化率和利用率，降低饵料剩余量，有益于虾的肠道健康，增强虾的免疫力，提高存活率。
5.本发明技术方案包括：
6.本技术所述的改善肠道提高存活率的南美白对虾发酵饲料，其发酵原料包括虾饲料及菌液，菌液按照虾饲料质量百分比添加，其中：乳酸菌菌液5-10％，地衣芽孢杆菌ⅰ菌液1-5％、地衣芽孢杆菌ⅱ菌液1-5％。所述的虾饲料为市售全价饲料。
7.优选的，所述的发酵原料含水率为45-50％。
8.所述的乳酸菌菌液为植物乳杆菌发酵液，菌量在2*109cfu/ml-5*109cfu/ml；优选植物乳杆菌cgmcc no.18401发酵液。
9.所述的地衣芽孢杆菌ⅰ菌液为地衣芽孢杆菌cgmcc no.18398发酵液，菌量在5*109cfu/ml-10*109cfu/ml。
10.地衣芽孢杆菌ⅱ菌液为地衣芽孢杆菌bncc335815发酵液，菌量在5*109cfu/ml-10*109cfu/ml。
11.进一步的，所述的乳酸菌菌液制备方法为：将植物乳杆菌，按照1-2％的接种量接入mrs肉汤培养基中，35
±
2℃培养24-26h。
12.进一步的，所述的地衣芽孢杆菌ⅰ菌液的制备方法为：将地衣芽孢杆菌ⅰ，按照5-10％的接种量接入lb培养基中，35
±
2℃培养24-26h。
13.进一步的，所述的地衣芽孢杆菌ⅱ菌液的制备方法为：将地衣芽孢杆菌ⅱ，按照1-5％的接种量接入lb培养基中，35
±
2℃培养24-26h。
14.本技术所述的改善肠道提高存活率的南美白对虾发酵饲料，其制备方法为：
15.按照配比将虾饲料、乳酸菌菌液、地衣芽孢杆菌ⅰ菌液、地衣芽孢杆菌ⅱ菌液混合，调节水分45-50％，混合均匀后，装入带有呼吸孔的呼吸袋内，35
±
2℃，封口后发酵培养3-5天，即得发酵虾饲料。
16.与现有技术相比本发明的有益效果为：
17.一方面，植物乳杆菌产酸能力强，尤其本技术选用的植物乳杆菌cgmcc no.18401可使发酵底物ph快速下降，有效抑制金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠杆菌等有害菌的生长。地衣芽孢杆菌ⅰ为高产酶菌株，利用呼吸袋内少量的空气发酵，发酵过程中产生多种活性酶，有利于虾饲料中大分子营养物质的分解，提高饲料的消化吸收效率。地衣芽孢杆菌ⅱ发酵过程中产生蛋白酶和纤维素酶，可以促进蛋白质和纤维素的水解，形成小分子的氨基酸和糖类。
18.另一方面，活性酶与肠道益生菌一同进入南美白对虾肠道内，与肠道益生菌共同促进饲料的消化吸收；在发酵过程中有益菌大量繁殖，随饵料进入南美对虾肠道后，可定植肠道，促使机体产生抗菌活性物质、杀灭致病菌，能产生抗活性物质，并具有独特的生物夺氧作用机制，能抑制致病菌的生长繁殖，改善肠道健康，提高南美对虾的免疫力，促进南美对虾的健康生长，提高存活率15-18％。
19.另外，三种菌复合发酵饲料，具有一定的保持水体水质稳定和抑制绿弧菌生长的净水作用。
具体实施方式
20.以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容做进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围，除特殊说明外，下述实施例中均采用常规现有技术完成。
21.以下实施例中未特别说明的虾饲料均为市售全价饲料，采购自海大饲料公司。
22.以下实施例中：
23.乳酸菌菌液制备方法为：将植物乳杆菌cgmcc no.18401，按照1-2％的接种量接入mrs肉汤培养基中，35
±
2℃培养24-26h；菌量在2*109cfu/ml-5*109cfu/ml；
24.地衣芽孢杆菌ⅰ菌液的制备方法为：将地衣芽孢杆菌ⅰcgmcc no.18398，按照5-10％的接种量接入lb培养基中，35
±
2℃培养24-26h；菌量在5*109cfu/ml-10*109cfu/ml。
25.地衣芽孢杆菌ⅱ菌液的制备方法为：将地衣芽孢杆菌ⅱbncc335815，按照1-5％的接种量接入lb培养基中，35
±
2℃培养24-26h；菌量在5*109cfu/ml-10*109cfu/ml；地衣芽孢杆菌ⅱ采购于北纳生物。
26.实施例1
27.取适量虾饲料，接种乳酸菌菌液5％，地衣芽孢杆菌ⅰ菌液5％，地衣芽孢杆菌ⅱ菌液5％，调节水分至45％，混合均匀后，装入带有呼吸孔的呼吸袋内，35
±
2℃，封口后发酵培养5天，即得发酵虾饲料。
28.实施例2
29.取适量虾饲料，接种乳酸菌菌液8％，地衣芽孢杆菌ⅰ菌液3％，地衣芽孢杆菌ⅱ菌液3％，调节水分至45％，混合均匀后，装入带有呼吸孔的呼吸袋内，35
±
2℃，封口后发酵培养5天，即得发酵虾饲料。
30.实施例3
31.取适量虾饲料，接种乳酸菌菌液10％，地衣芽孢杆菌ⅰ菌液5％，地衣芽孢杆菌ⅱ菌液5％，调节水分至45％，混合均匀后，装入带有呼吸孔的呼吸袋内，35
±
2℃，封口后发酵培养5天，即得发酵虾饲料。
32.对比例1
33.取与实施例1等量虾饲料，接种地衣芽孢杆菌ⅱ菌液5％，调节水分45％，混合均匀后，装入带有呼吸孔的呼吸袋内，35
±
2℃，封口后发酵培养5天，即得发酵虾饲料。
34.对比例2
35.取与实施例1等量虾饲料，接种乳酸菌菌液5％，地衣芽孢杆菌ⅰ菌液5％，调节水分45％，混合均匀后，装入带有呼吸孔的呼吸袋内，35
±
2℃，封口后发酵培养5天，即得发酵虾饲料；
36.对照组
37.取与实施例1等量虾饲料，加水调节水分至45％，混合均匀后，作为对照。
38.检测菌量、水溶蛋白含量、水溶性有机质释放量等指标，评价虾饲料的发酵水平。
39.表1发酵虾饲料检测指标
[0040][0041]
实施例1、实施例2、实施例3的菌量、水溶蛋白含量、水溶性有机质释放量明显较对照组有提高，结果显示添加发酵菌种后虾饲料的可溶性增加，更有利于南美对虾的消化吸收。地衣芽孢杆菌ⅱ和植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌ⅰ复配的菌种，发酵水平更高，发酵后菌量更高。
[0042]
实验例
[0043]
室外饲喂实验：实验池塘面积约3亩，放苗密度：每亩水面3万尾，饲喂周期60天。实验组饲喂实施例1中方法制备的发酵虾饲料，以未发酵的虾饲料为对照组，每天上午6：00投喂一次，饲喂结束后记录。相同饲喂量下观察记录南美白对虾的进食量、进食时间、肠道菌群、存活率等指标。取最后5天数据记录如表2所示：
[0044]
表2发酵虾饲料饲喂实验结果记录
[0045][0046][0047]
备注：肠道乳酸菌菌量和肠道大肠杆菌均为10000倍稀释后的检测结果。
[0048]
在饲喂过程中，同时关注水体指标变化，每天下午4点定时取水样进行水质指标检测。
[0049]
表3发酵饲料饲喂实验水质指标
[0050][0051]
注：总弧菌数为tcbs固体培养基上绿弧菌和黄弧菌之和。
[0052]
实验结果显示：
[0053]
(1)实验组进食时间一直低于对照组，说明本技术所述的一种改善肠道的南美白对虾发酵饲料具有一定的适口性，刺激南美对虾进食；
[0054]
(2)肠道乳酸菌菌量实验组明显高于对照组，同时大肠杆菌菌量实验组明显低于对照组，说明本技术所述的一种改善肠道的南美白对虾发酵饲料，可促进肠道益生菌定植，抑制有害菌，起到调节肠道功能的作用；
[0055]
(3)存活率实验组高于对照组18.3％，产量实验组高于对照组20％，说明本技术所述的一种改善肠道的南美白对虾发酵饲料，通过调节南美对虾肠道菌群，形成良好的消化系统使南美对虾的免疫力得到提高，进而产量和存活率都得到根本保障；
[0056]
(4)水质指标检测结果显示，实验组和对照组溶氧和ph没有明显变化，比较稳定，均处于安全范围内，亚硝酸盐含量实验组低于对照组。总弧菌数实验组与对照组基本相同，但绿弧菌菌量实验组较对照组低22％，说明本技术所述的一种改善肠道的南美白对虾发酵饲料，具有一定的保持水体水质稳定，抑制绿弧菌生长的净水作用。