从曼地亚红豆杉中同时提取三尖杉宁碱和紫杉醇的方法与流程

技术特征：
1.一种从曼地亚红豆杉中同时提取三尖杉宁碱和紫杉醇的方法，其特征是：其包括以下步骤：步骤s1、将原料曼地亚红豆杉枝叶阴干、粉碎、过筛，得到0.1～2.5mm的粉料；将粉料以丁烷为溶剂、并以体积浓度70～95％的乙醇或甲醇为夹带剂进行亚临界萃取，得到曼地亚红豆杉浸膏和残渣；亚临界萃取条件为：粉料与溶剂的料液比为1:3～7kg/l，夹带剂与溶剂的体积比为1:10～50，萃取温度为40～90℃，超声波功率为500～800w，萃取压力为0.2～1.0mpa，萃取时间为30～100min，萃取次数为1～4次；步骤s2、将步骤s1中得到的曼地亚红豆杉浸膏用蒸馏水打散，采用第一溶剂进行萃取，浸膏与第一溶剂的质量比为1:10～30，将萃取后的剩余物减压浓缩，得到曼地亚红豆杉萃取剩余物；第一溶剂为石油醚、氯仿、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、或四氢呋喃；步骤s3、将步骤s2中得到的曼地亚红豆杉萃取剩余物加入第二溶剂进行溶解，萃取剩余物与第二溶剂的料液比为1:10～20kg/l；搅拌使其充分溶解，静置30～100min，将上清液倒入另一容器中，再重复上述搅拌、静置操作3～5次，最后将上清液减压浓缩至干状；第二溶剂为体积浓度10～90％的甲醇、乙醇或乙腈溶液；步骤s4、将步骤s3中得到的干状物，采用第三溶剂进行溶解，干状物与第三溶剂的料液比为1:1～5g/ml，向上述溶解液中加入剩余物的质量5～20％的活性炭，60～80℃吸附1～3h，过滤，收集滤液，滤液浓缩至比重为2.0～3.0，得到曼地亚红豆杉上样液；第三溶剂为甲醇、丙酮、乙醇或乙腈；步骤s5、中高压液相色谱分离：将第一色谱柱和第二色谱柱串联，第一色谱柱所用填料为mci，第二色谱柱所用填料为c18，采用体积浓度5～30％的乙腈或甲醇平衡柱子，紫外检测器波长为200～400nm，待基线稳定后，将步骤s4中的上样液采用预装柱进行上样，采用体积浓度30～70％的乙腈或甲醇作为流动相，根据uv检测收集洗脱液，uv检测器的检测波长为200～254nm，先流出的洗脱液含有三尖杉宁碱，后流出的洗脱液含有紫杉醇，经减压浓缩、过滤和干燥，分别得到高纯度三尖杉宁碱和紫杉醇，三尖杉宁碱的纯度为95％～99％，紫杉醇的纯度为95％～99％。2.根据权利要求1所述的从曼地亚红豆杉中同时提取三尖杉宁碱和紫杉醇的方法，其特征是：其步骤s1中，亚临界萃取条件为：粉料与丁烷的料液比为1:3～5kg/l，丁烷与乙醇或甲醇的体积比为1:10～35，萃取温度为40～65℃，超声波功率为500～700w，萃取压力为0.2～0.8mpa，萃取时间为30～60min，萃取次数为1～3次。3.根据权利要求2所述的从曼地亚红豆杉中同时提取三尖杉宁碱和紫杉醇的方法，其特征是：其步骤s1中，亚临界萃取条件为：粉料与丁烷的料液比为1:4kg/l，丁烷与乙醇或甲醇的体积比为1:20，萃取温度为40℃，超声波功率为500w，萃取压力为0.8mpa，萃取时间为30min，萃取次数为2次。4.根据权利要求1所述的从曼地亚红豆杉中同时提取三尖杉宁碱和紫杉醇的方法，其特征是：其步骤s5中，第一色谱柱中，填料粒径为10～100μm，柱长为310～920mm，柱内径为15～100mm。5.根据权利要求1所述的从曼地亚红豆杉中同时提取三尖杉宁碱和紫杉醇的方法，其特征是：其步骤s5中，第二色谱柱中，填料粒径为5～50μm，柱长为310～920mm，柱内径为15～100mm。
6.根据权利要求1所述的从曼地亚红豆杉中同时提取三尖杉宁碱和紫杉醇的方法，其特征是：其三尖杉宁碱得率为0.5～1％，紫杉醇得率为0.1～1％。

技术总结
本发明公开一种从曼地亚红豆杉中同时提取三尖杉宁碱和紫杉醇的方法，其将原料曼地亚红豆杉枝叶阴干、粉碎、过筛，再通过亚临界萃取、溶剂萃取、溶剂沉淀以及串联中高压柱色谱方法，同时从曼地亚红豆杉中提取得到高纯度三尖杉宁碱和紫杉醇两种单体活性成分。本发明工艺流程简单，易于操作，绿色无毒、高效，成本低，适合大规模生产。适合大规模生产。适合大规模生产。


技术研发人员：吴磊 熊伟 蔡力创 刘建平 吕友平 戚豫川
受保护的技术使用者：江西省科学院生物资源研究所 四川杉宝生物科技有限公司
技术研发日：2021.05.26
技术公布日：2022/1/6