技术特征:
1.一种用于重组人血清白蛋白纯化过程去除色素的填料组合物,所述填料组合物包括阴离子脱色树脂和硼酸填料,所述阴离子脱色树脂和硼酸填料的组合比例为1
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8:1。2.一种重组人血清白蛋白纯化过程去除色素的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)将含有hsa基因的重组酵母菌株经活化培养得到的种子液进行发酵培养;(2)发酵结束后,取含有rhsa的发酵液,通过离心去除酵母细胞,得到rhsa浓缩发酵上清液;(3)将步骤(2)获得的rhsa浓缩发酵上清液过脱色柱,所述脱色柱内的填料为如权利要求1所述的填料组合物。3.如权利要求2所述的方法,其中,所述填料组合物与rhsa浓缩发酵上清液的体积比为1:10
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1:20。4.如权利要求3所述的方法,其中,所述填料组合物中阴离子脱色树脂和硼酸填料的组合比例为4:1。5.如权利要求3所述的方法,其中,所述填料组合物与rhsa浓缩发酵上清液的体积比为1:20。6.如权利要求3所述的方法,其中,所述步骤(2)包括如下步骤:取含有rhsa的发酵液,通过叠片离心机去除酵母细胞,转速:12000rpm,料液温度:15℃,固含量:20
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30%,离心上清液过微滤,泵频25
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35hz;入口压力不超过0.2mpa,透过液过30kd浓缩,浓缩液中按体积比为40%的比例加入无水乙醇,加入辛酸钠至终浓度为15mm,68℃加热30min,得到30kd浓缩液。7.如权利要求3所述的方法,其中,所述步骤(3)包括如下步骤:阴离子脱色树脂用纯化水浸泡24小时,充分涨溶;硼酸填料以nacl浓度从低到高的梯度进行洗脱,nacl浓度梯度设置在0.1m
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1m之间,洗脱后以20mmpb、ph7.0磷酸钠缓冲液平衡;将阴离子脱色树脂 硼酸填料,按4:1比例充分混匀,装入填料柱中,将获得的浓缩发酵上清液过脱色柱,阴离子脱色树脂 硼酸填料的组合物与上样液的体积比为1:20。
技术总结
本发明提供了一种重组人血清蛋白纯化过程去除色素的方法,所述采用脱色树脂结合硼酸填料作为脱色剂,可快速有效的脱除重组人血白蛋白生产中产生的杂质色素,并且不影响蛋白收率和活性,具有广阔的应用前景。具有广阔的应用前景。具有广阔的应用前景。
技术研发人员:齐智 常贝贝 艾云鹏 高磊 柏凯
受保护的技术使用者:山东健通生物科技有限公司
技术研发日:2021.09.10
技术公布日:2021/12/3
再多了解一些
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