一种玉米真菌性病原菌的分离方法与流程

技术特征：
1.一种玉米真菌性病原菌分离方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在玉米病株发病部分的病健交界处截取发病组织，无菌水清洗后对所得发病组织进行第一培养，得培养物；(2)将培养物转移到玉米幼苗茎杆的切口处进行第二培养，得染菌茎杆；所述染菌茎杆的病症包括染菌茎杆变色、染菌茎杆呈水渍发病状和染菌茎杆切口处及其邻近组织出现绒状、絮状或稀薄状菌丝；(3)将染菌茎杆上的病原菌菌丝转置pda培养基进行第三培养，得病原真菌纯培养物。2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述真菌性病原菌包括鞘腐病病原菌、茎腐病病原菌、纹枯病病原菌和根腐病病原菌中的一种或几种。3.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述玉米幼苗为2～4叶龄幼苗。4.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤(1)所述第一培养的温度为20～25℃，时间为1～3d，湿度为85～100wt.％；所述第一培养的方式为黑暗培养。5.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤(2)所述第二培养的温度为20～25℃，时间为1～2d，湿度为85～100wt.％；所述第二培养的光强强度为1000lx，光照时间为10～14h。6.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤(3)所述第三培养包括初培养和纯化培养；所述初培养和纯化培养的温度均为25～28℃，时间均为2～3d，培养的方式均为黑暗培养。7.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤(2)所述转移培养物前，对玉米幼苗茎杆进行表面消毒。8.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤(1)所述发病组织的长度为1～3cm。9.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤(1)所述培养物包括菌丝和/或孢子。10.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述切口为无杂菌污染的切口。

技术总结
本发明涉及植物病害病原菌分离技术领域，特别是涉及一种玉米真菌性病原菌的分离方法。本发明提供了一种玉米真菌性病原菌的分离方法，包括以下步骤：(1)在玉米病株发病部分的病健交界处截取发病组织，无菌水清洗后对所得发病组织进行第一培养，得培养物；(2)将培养物转移到玉米幼苗茎杆的切口处进行第二培养，得染菌茎杆；(3)将染菌茎杆上的病原菌菌丝转置PDA培养基进行第三培养，得病原真菌纯培养物。本发明所述的分离方法无需对病组织进行消毒，且具有分离病菌成功率高、种类多的优势，同时对发病后期含菌量少或受细菌感染的病样中真菌性病原菌的识别和分离具有较好的适用性。性病原菌的识别和分离具有较好的适用性。性病原菌的识别和分离具有较好的适用性。


技术研发人员：杨秀娟 甘林 代玉立 兰成忠 滕振勇 刘晓菲 卢学松
受保护的技术使用者：福建省农业科学院植物保护研究所
技术研发日：2021.09.24
技术公布日：2021/12/3