低成本提取鱼蛋白的方法与流程

1.本发明属于蛋白质的制备技术领域，特别涉及一种低成本提取鱼蛋白的方法。


背景技术：

2.我国是一个渔业大国，仅广东省为例，近年来海洋渔业每年递增海产品总量不断增长，捕捞量每年300万吨，但其中30
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40%为低值小杂鱼，由于价格低，加工手段落后，其中很大一部分直接切碎作为养殖用饲料，造成产品使用价值低，资源浪费现象严重。现有技术中可以以低值小杂鱼为原料，经粉碎、酶解和蛋白提取等过程得到蛋白质。
3.如申请号为cn201710067498.7的专利公开了一种提取鱼蛋白的方法，包括以下步骤：（1）准备：将小杂鱼、低价值海鱼去除内脏后洗净，经匀浆器搅碎制成鱼糜；（2）脱腥：将鱼糜置于10
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20℃的脱腥溶液中漂洗4
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6次，然后经0
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4℃冷水漂洗2
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3次后过滤，保留鱼糜；（3）制备原混料：向重量份的100份鱼糜中加入800
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1200份的水，并调节ph值至5.5
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7.5，制得原混料；（4）提取：保持原混料温度45
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60℃，添加复合分解酶进行超声分解处理3
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5h，搅拌速度100
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120r/min，超声功率35
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45w，作用时间30
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60s，间隔15
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20min，得到酶解料；（5）脱脂脱苦：继续加入甘油酯水解酶、复合风味酶和质量百分比为10
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15%的脱腥溶液对酶解料进行脱腥、脱苦味、脱脂处理，处理时间2
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4小时；（6）灭活：将步骤（5）所得酶解料温度升高至80
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90℃并保持45
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60min以杀灭酶活性，然后过滤酶解料，保留滤液；（7）脱色：将滤液通过离子交换树脂进行脱色处理；（8）浓缩：脱色后的溶液通过筛网过滤，然后真空浓缩至原体积的30
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40%；（9）制粉：将浓缩后的溶液送至喷雾干燥设备喷雾干燥得鱼蛋白粉。
4.如申请号为cn201710317816.0的专利公开了一种增强免疫的低值鱼蛋白粉的加工技术，所述制备方法包括以下步骤：1）前处理：将鲜活低值小杂鱼，经宰杀、去鳞、去内脏、去头、去尾、剥皮，清洗干净；2）斩拌成糜：放斩拌机切成肉糜，斩拌时间控制在8
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10 min，确保斩拌均匀，无大块组织；3）低值小杂鱼肉糜内源蛋白酶自溶：称取500g鱼糜置于酶解罐中在5℃，ph6.0
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8.0条件下自溶0
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12h；4）酶解：加入一定量的外源蛋白酶，在ph7.0
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9.0，55
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60℃温度下，搅拌酶解6
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24h；5）灭酶：升温到85℃，保温30 min后，灭酶；离心：将酶解液泵入碟式分离机中，调整离心机转速为6000
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10000r/min，离心后分离出上层低值小杂鱼初鱼油；
6）纯化：压滤得澄清酶解液，加入鱼骨粉、糊精、甜奶粉、甘露醇、营养强化剂，搅拌；7）喷雾干燥：控制酶解液的温度，保持在60℃，进风温度为185℃，出风温度为80℃，控制进液泵流量。
5.但是前述方法存在酶价格高,处理大量小杂鱼经济成本高。


技术实现要素：

6.为了解决前述问题，本发明提供了一种低成本提取鱼蛋白的方法，该方法具有成本低、酶解效果好和废物再利用等优点。所述技术方案如下：本发明实施例提供了一种低成本提取鱼蛋白的方法，该方法包括：以低值小杂鱼为原料，经粉碎、酶解和蛋白提取等过程得到。其中，粉碎与蛋白提取过程与现有技术类似。酶解的酶液的制备过程包括：以鱼内脏为原料，经粉碎、脱脂、水提取和冷冻离心等得到。酶解条件为：温度为35
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60℃，ph值为5
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7，时间为1
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24小时，酶液的用量以鱼内脏计为低值小杂鱼重量的0.1
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10倍，如低值小杂鱼重量为1kg，则以0.1
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10kg的鱼内脏为原料制备酶液以进行酶解。
7.其中，酶液的原料选自青鱼内脏、草鱼内脏、鲢鱼内脏、鳙鱼内脏和罗非鱼内脏等中的一种或多种，具体来自鱼加工厂下脚料。
8.优选地，酶液的原料选自白鲢内脏和罗非鱼内脏中的一种或两种，不但便宜且效果好。更优选地，酶液的原料为白鲢内脏和罗非鱼内脏；经发明人大量实验，以白鲢内脏和罗非鱼内脏作为酶液原料，蛋白水解度达到30%以上，产品多肽含量高。
9.进一步地，鱼内脏去除鱼胆后作为制备酶液的原料。
10.优选地，酶解条件为：温度为45
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60℃，ph值6.5，时间为2.0
‑
2.5小时，酶液的用量以鱼内脏计为低值小杂鱼重量的0.5
‑
1.0倍。
11.在本专利的一种方式中，酶液的制备过程包括：将粉碎后的鱼内脏溶于有机溶剂中，调整ph为5
‑
7，在
‑
10—10℃（优选为5℃）下进行脱脂，有机溶剂的用量为鱼内脏重量的0.2
‑
0.5倍（优选为0.3倍），脱脂完成后，固液分离，固体加水水提至少一次（优选为2次），水提时水的用量为鱼内脏重量的0.5
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2.0倍（优选为1倍），合并水提液并冷冻离心得到酶液。其中，有机溶剂选自正丁醇、石油醚、乙醚、丙酮或正己烷等。
12.具体地，有机溶剂为正丁醇。
13.在本专利的另一种方式中，酶液的制备过程包括：将粉碎后的鱼内脏溶于0.5
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2.0倍（优选为1倍）重量的水中，调整ph为5
‑
7，在
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10—10℃（优选为5℃）下冷藏5
‑
25小时，去除表面的油层，固液分离得到固体和冷冻液，固体加水水提至少一次（优选为2次），水提时水的用量为鱼内脏重量的0.5
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2.0倍（优选为1倍），合并冷冻液和水提液并冷冻离心得到酶液。
14.其中，蛋白提取过程包括：酶解过程的产物经灭酶、离心、脱色脱腥、微滤、纳滤和闪蒸（最好至固含量在30%以上）等得到鱼蛋白。
15.优选地，本发明提供的低成本提取鱼蛋白的方法包括：(1)粉碎：将低值小杂鱼粉碎。
16.(2)酶解：将酶液和步骤(1)的产物进行酶解（根据需要加水或不加水，水的用量最
好小于低值小杂鱼重量的2倍），酶解条件为：温度为45
‑
60℃，ph值6.5，时间为2.0
‑
2.5小时，酶液的用量以鱼内脏计为低值小杂鱼重量的0.5
‑
1.0倍。
17.(3)蛋白提取：将步骤(2)的产物经离心、脱色脱腥、微滤、纳滤和闪蒸得到鱼蛋白。
18.其中，酶液的制备过程包括：将粉碎后的鱼内脏溶于正丁醇中，调整ph为5
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7，在
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10—10℃下进行脱脂，正丁醇的用量为鱼内脏重量的0.2
‑
0.5倍，脱脂完成后，固液分离，固体加水水提两次，水提时水的用量为鱼内脏重量的0.5
‑
2.0倍，合并水提液并冷冻离心得到酶液。其中，鱼内脏选自白鲢内脏和罗非鱼内脏中的一种或两种。
19.具体地，纳滤得到清亮浓缩液，固含量一般在20
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25%；闪蒸后固含量可达到35
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40%；闪蒸后的浓缩液可以进行喷雾干燥得到固体粉末，也可以先调味后做成固体或液体产品。
20.本发明提供了一种低成本提取鱼蛋白的方法，该方法具有成本低、酶解效果好和废物再利用等优点。得到的产品的蛋白含量可达80%左右或更高（常规酶法的蛋白含量为70
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80%），收率可达10%以上，产品中的氨基酸和多肽与常规酶法基本一致且多肽含量高；另外，本方法在低温下脱脂，酶液杂质少，保留活性高。
具体实施方式
21.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明作进一步地详细描述。
22.实施例1：罗非鱼内脏1kg在5℃下用0.3kg正丁醇脱脂，柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液调控ph值到6，纯净水提取二次，每次水提的用水量为1kg，冷冻离心30分钟的上清液得到酶液。
23.将小杂鱼搅碎后称取1kg与前述酶液在ph值6，温度55℃ 反应4小时，水解液经灭酶、离心弃渣、脱色脱腥、微滤、纳滤、闪蒸后得到的水解液在喷雾干燥得到蛋白多肽粉，蛋白质含量80%，与市售蛋白酶法水解所得产品相当。
24.实施例2：白鲢鱼内脏1kg, 在5℃下清洗加1kg水捣碎后至于低温库冷冻过夜，将冷冻上面一层油脂去除，然后加水在ph值7提取二次，每次水提的用水量为1kg，冷冻离心机离心得上清液得到酶液。
25.将小杂鱼2kg搅碎碎后加前述酶液和适量水ph值7，温度55℃下反应4小时再经灭酶、离心、脱色脱腥、组合膜微滤、纳滤得到清液在闪蒸得到固形物30%以上液体喷雾干燥得到浅黄色粉末197.3g，蛋白含量80.2%，与市售蛋白酶法水解所得产品相当。
26.以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。