一种螺纹嗜氢菌及其在防治根结线虫中的应用的制作方法
本说明书涉及微生物,具体涉及一种螺纹嗜氢菌及其在防治根结线虫中的应用。序列表本申请包含一份序列表,该序列表以xml格式电子提交,并通过引用以其整体并入本文。该xml副本创建于2026年8月25日,文件名为“序列表-80006-h001cn00”,文件大小为7,460字节。
背景技术:
1、根结线虫(
meloidogyne spp.)是危害全球农业的土传病原物,被称为作物癌症,随全球贸易扩散至各农业产区,每年造成千亿级经济损失。其中南方根结线虫(
meloidogyne incognita)在我国分布最广、危害最重,可侵染番茄、辣椒、花生等数百种经济作物。南方根结线虫二龄幼虫(j2)从作物根尖侵入根系,诱导植株形成根瘤,阻碍水分与养分吸收,造成作物地上部矮化、黄化、长势衰退,坐果数量减少、果实品质劣变。根结线虫病害暴发后,田间作物减产幅度可达10%-75%,重病田甚至出现绝收。同时根结线虫可随灌溉水、种苗、农机跨区域传播,繁殖量大、土壤存活周期长,常规农事操作难以彻底根除,田间防控难度大。
2、当前生产中主要依靠化学杀线剂防控南方根结线虫,但该方案缺陷十分突出,长期施用容易诱导根结线虫产生抗药性,药剂本身降解速度缓慢还会破坏土壤微生态平衡,同时农药残留会威胁农产品安全与人畜健康,多重弊端导致化学药剂的使用范围持续受限,行业迫切需要可替代的绿色防控技术。
3、生物防治凭借低毒环保、不易诱导抗性的优势成为根结线虫防控主流研究方向,现有生防资源多为真菌、芽孢杆菌与假单胞菌,真菌存在根际定殖差、田间防效不稳的问题,芽孢杆菌与假单胞菌虽兼具促生、杀线特性,但整体杀线活性有限,相关菌株仅能防治作物真菌病害,生防菌种同质化严重,缺乏新型高效杀线虫资源。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题,本说明书提供一种螺纹嗜氢菌及其在防治根结线虫中的应用,利用螺纹嗜氢菌稳定定殖于作物根际,长效调节土壤微生态、抑制线虫增殖,以克服化学杀线剂高毒残留、线虫易产生抗性以及现有生防菌株根际定殖能力弱、田间防效不佳的技术缺陷。
2、本说明书一个或多个实施例提供一种防治根结线虫的螺纹嗜氢菌(
hydrogenophaga sp.),所述螺纹嗜氢菌的保藏名称为wb-nt001,保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc),保藏编号为gdmcc no:68225,保藏日期为2026年5月8日。
3、本说明书一个或多个实施例一种防治根结线虫的拟节杆菌(
paenarthrobacter
sp.),所述拟节杆菌的保藏名称为wb-nt002,保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc),保藏编号为gdmcc no:68226,保藏日期为2026年5月8日。
4、本说明书一个或多个实施例提供一种防治根结线虫的鞘氨醇单胞菌(sphingomonas sp.),所述鞘氨醇单胞菌的保藏名称为wb-nt003,保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc),保藏编号为gdmcc no:68227。保藏日期为2026年5月8日。
5、本说明书一个或多个实施例提供一种防治根结线虫病的螺纹嗜氢菌菌剂,所述螺纹嗜氢菌菌剂包括螺纹嗜氢菌的发酵产物,所述发酵产物包括以下中的至少一种:(a)所述螺纹嗜氢菌的菌体;(b)所述螺纹嗜氢菌的发酵培养物;(c)所述螺纹嗜氢菌的发酵培养物的发酵液上清。
6、本说明书一个或多个实施例提供一种制备上述实施例所述的防治根结线虫病的螺纹嗜氢菌菌剂的方法,所述方法包括:(1)菌种活化:将保藏菌株划线于1/2 tsb固体培养基,于25-30 ℃培养至获得单菌落;(2)液体种子培养:挑取所述单菌落接入1/2 tsb液体培养基,于25-30 ℃振荡培养,调整od600为1得到种子液;(3)扩大发酵:所述种子液按1%接种量接入发酵培养基,于25-30 ℃进行发酵,所述发酵完成后进行离心分离,利用所述菌体、所述发酵培养物或所述发酵液上清中的至少一种制备所述螺纹嗜氢菌菌剂。
7、本说明书一个或多个实施例提供一种防治根结线虫病的拟节杆菌菌剂,所述拟节杆菌菌剂包括拟节杆菌的发酵产物,所述发酵产物包括以下中的至少一种:(a)所述拟节杆菌的菌体;(b)所述拟节杆菌的发酵培养物;(c)所述拟节杆菌的发酵培养物的发酵液上清。
8、本说明书一个或多个实施例提供一种制备上述实施例所述的防治根结线虫病的拟节杆菌菌剂的方法,所述方法包括:(1)菌种活化:将保藏菌株划线于1/2 tsb固体培养基,于25-30 ℃培养至获得单菌落;(2)液体种子培养:挑取所述单菌落接入1/2 tsb液体培养基,于25-30 ℃振荡培养,调整od600为1得到种子液;(3)扩大发酵:所述种子液按1%接种量接入发酵培养基,于25-30 ℃进行发酵,所述发酵完成后进行离心分离,利用所述菌体、所述发酵培养物或所述发酵液上清中的至少一种制备所述拟节杆菌菌剂。
9、本说明书一个或多个实施例提供一种防治根结线虫病的鞘氨醇单胞菌菌剂,所述鞘氨醇单胞菌菌剂包括鞘氨醇单胞菌的发酵产物,所述发酵产物包括以下中的至少一种:(a)所述鞘氨醇单胞菌的菌体;(b)所述鞘氨醇单胞菌的发酵培养物;(c)所述鞘氨醇单胞菌的发酵培养物的发酵液上清。
10、本说明书一个或多个实施例提供一种制备上述实施例所述的防治根结线虫病的鞘氨醇单胞菌菌剂的方法,所述方法包括:(1)菌种活化:将保藏菌株划线于1/2 tsb固体培养基,于25-30 ℃培养至获得单菌落;(2)液体种子培养:挑取所述单菌落接入1/2 tsb液体培养基,于25-30 ℃振荡培养,调整od600为1得到种子液;(3)扩大发酵:所述种子液按1%接种量接入发酵培养基,于25-30 ℃进行发酵,所述发酵完成后进行离心分离,利用所述菌体、所述发酵培养物或所述发酵液上清中的至少一种制备所述鞘氨醇单胞菌菌剂。
11、本说明书一个或多个实施例提供上述实施例所述的螺纹嗜氢菌或上述实施例所述的螺纹嗜氢菌菌剂在防治南方根结线虫中的应用,适用寄主作物包括茄科、葫芦科、豆科经济作物。
12、本说明书一个或多个实施例提供上述实施例所述的拟节杆菌或上述实施例所述的拟节杆菌菌剂在防治南方根结线虫中的应用,适用寄主作物包括茄科、葫芦科、豆科经济作物。
13、本说明书一个或多个实施例提供上述实施例所述的鞘氨醇单胞菌或上述实施例所述的鞘氨醇单胞菌菌剂在防治南方根结线虫中的应用,适用寄主作物包括茄科、葫芦科、豆科经济作物。
1.一种防治根结线虫的螺纹嗜氢菌(hydrogenophaga sp.),其特征在于,所述螺纹嗜氢菌的保藏名称为wb-nt001,保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc),保藏编号为gdmcc no:68225,保藏日期为2026年5月8日。
2.根据权利要求1所述的螺纹嗜氢菌,其特征在于,所述螺纹嗜氢菌分离自新疆库尔勒野生番茄solanum pimpinellifolium根际土壤。
3.根据权利要求1所述的螺纹嗜氢菌,其特征在于,所述螺纹嗜氢菌的16s rrna序列如seq id no.1所示。
4.根据权利要求1所述的螺纹嗜氢菌,其特征在于,所述螺纹嗜氢菌的发酵液对南方根结线虫二龄幼虫j2的致死率不小于95%,离体毒杀效果与1 μg/μl商用阿维菌素无显著差异。
5.一种防治根结线虫病的螺纹嗜氢菌菌剂,其特征在于,所述螺纹嗜氢菌菌剂包括权利要求1所述的螺纹嗜氢菌的发酵产物,所述发酵产物包括以下中的至少一种:
6.根据权利要求5所述的螺纹嗜氢菌菌剂,其特征在于,所述螺纹嗜氢菌菌剂的制剂剂型包括液体菌剂、固体菌粉或可溶代谢原液;
7.一种制备权利要求5所述的防治根结线虫病的螺纹嗜氢菌菌剂的方法,其特征在于,所述方法包括:
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述方法还包括:
9.权利要求1所述的螺纹嗜氢菌或权利要求5所述的螺纹嗜氢菌菌剂在防治南方根结线虫中的应用,其特征在于,适用寄主作物包括茄科、葫芦科、豆科经济作物。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,施用方式包括幼苗浸根、土壤混拌、根部灌根中的至少一种;
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