一株具有广谱抑菌活性的地中海假单胞菌CS95及其在防治柑橘溃疡病中的应用

本发明属于微生物农药，具体涉及一株具有广谱抑菌活性的地中海假单胞菌cs95及其在防治柑橘溃疡病中的应用。

背景技术：

1、病原细菌与真菌引发的植物病害是造成全球作物减产、品质下降的重要原因。其中，柑橘溃疡病作为典型的高危害细菌性病害，由柑橘黄单胞菌（

xanthomonas citri subsp. citri，xcc）侵染所致。该病原菌可经由植株气孔或伤口侵入，在叶片和果实表面形成典型溃疡斑，进而引发落叶、落果及果实品质下降。据联合国粮农组织（fao）数据，该病在亚洲、美洲等柑橘主产区年均产量损失达20%~30%，目前尚无根治手段。长期以来，化学农药（如铜基杀菌剂）和抗生素（链霉素等）成为主要防治措施，使用广泛。然而，长期单一用药引发了病原菌抗药性增强、防效下降和用药量攀升的恶性循环。

2、生物防治因其环境友好特性成为理想的替代方案，开发安全高效的生物防治策略已成为研究热点和迫切需求。在众多生防微生物中，假单胞菌属（

pseudomonas sp.）因繁殖快、代谢旺盛且能产生多种拮抗代谢物（如抗生素、铁载体、胞外酶）而备受关注。其中，地中海假单胞菌（

pseudomonas mediterranea）已被证实具有良好的根际定殖能力及生防潜力。现有研究表明，部分菌株能通过产生可扩散抗菌化合物和挥发性物质抑制多种病原真菌与细菌。例如，菌株s58（yilin gu, jing wang, zhenyuan xia, hai-lei wei.characterization of a versatile plant growth-promoting rhizobacteriumpseudomonas mediterranea strain s58.microorganisms 2020, 8, 334）可防治小麦纹枯病和烟草野火病并具促生特性；菌株b21-060（accession编号为samn23038870）产生的脂肽类化合物对核盘菌、灰葡萄孢等真菌有明显抑制作用。但需指出，这些菌对植物细菌性病害仅具预防作用而无治疗效果，预先接种虽可触发植物pti与局部免疫，降低细菌性病害发病率，但对已发病植株无法控制病情扩展。同时，部分菌株可导致番茄髓部坏死，存在致病风险，生产中需优先筛选安全无毒菌株。

3、现阶段已报道的地中海假单胞菌大多功能单一、抑菌谱较窄，兼具高效抗真菌与抗细菌活性的优良菌株十分稀缺，且暂未有公开相关的地中海假单胞菌是否对柑橘溃疡病有良好预防和治疗效果。因此，筛选获得安全、高效、广谱且性状稳定的地中海假单胞菌新菌株，既能有效规避化学防治与现有生防产品的短板，拓展生防菌应用场景，也能为新型生物农药研发提供优质菌种资源，对农业绿色可持续发展具有重要的理论价值与实际应用意义。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的不足，本发明提供一株具有广谱抑菌活性和提高植物免疫功能的地中海假单胞菌cs95（

pseudomonas mediterranea cs95，其保藏编号为cctcc no.m20261044，保藏日期为2026年05月21日，保藏单位：cctcc-中国典型培养物保藏中心）及其在防治柑橘溃疡病中的应用。本发明通过对病原菌的拮抗活性测定表明，地中海假单胞菌cs95可显著抑制多种病原真菌和柑橘溃疡病菌的生长，形成抑菌圈；同时地中海假单胞菌cs95可激活植物自身免疫反应，能有效预防和抑制柑橘溃疡病的发生。

2、本发明的第一个目的是提供一株地中海假单胞菌（

pseudomonas mediterranea）cs95，其保藏编号为cctcc no. m20261044。

3、本发明的第二个目的是提供一种生物制剂，含有所述的中海假单胞菌cs95的培养物作为活性成分。

4、优选，所述的地中海假单胞菌cs95的培养物的浓度为od600=1.0。

5、优选，所述的地中海假单胞菌cs95的培养物的制备方法如下：将地中海假单胞菌cs95接种至lb液体培养基中，置于28℃、200 rpm条件下培养。

6、本发明的第三个目的是提供所述的地中海假单胞菌在制备防治柑橘溃疡病的生物制剂中的应用。

7、本发明的第四个目的是提供所述的地中海假单胞菌cs95或任一项所述的制剂在以下任一方面中的应用：

8、（1）防治植物病害，所述的植物病害为桃褐腐病、柑橘青霉病、柑橘酸腐病、梨黑斑病、辣椒青枯病或柑橘溃疡病；

9、（2）提高植物免疫反应。

10、本发明的第五个目的是提供一种防治柑橘溃疡病的方法，包括以下步骤：将所述的地中海假单胞菌cs95或任一项所述的制剂施用于柑橘类植株上。

11、优选，所述的地中海假单胞菌cs95或任一项所述的制剂是通过抑制柑橘溃疡病原菌的繁殖和/或促进柑橘类植株的免疫反应以防治柑橘溃疡病。

12、优选，所述的施用的方式为喷洒。

13、本发明具有以下有益效果：

14、本发明筛选获得的地中海假单胞菌（

pseudomonas mediterranea）cs95，保藏编号为cctcc no. m20261044），对多种植物病原真菌和细菌均表现出显著的拮抗活性。体外拮抗实验表明，地中海假单胞菌cs95菌株的培养液能够形成明显的抑菌圈，抑制效果广谱且稳定，克服了现有生防菌株抑菌谱窄、功能专一性强的技术缺陷。

15、本发明首次将地中海假单胞菌cs95应用于柑橘溃疡病的生物防治。柑橘溃疡病是由柑橘黄单胞菌柑橘亚种（

xanthomonas citri subsp.

citri）引起的严重细菌性病害，目前主要依赖铜制剂等化学农药进行防控。本发明通过实验证实，地中海假单胞菌cs95菌株及其培养液能够有效预防和抑制柑橘溃疡病的发生，为该病害的绿色防控提供了全新的微生物资源和技术方案。

16、地中海假单胞菌cs95菌株不仅通过分泌抗菌活性物质直接抑制病原菌的生长，还能激活植物自身免疫系统，实现“外抑病原、内促免疫”的双重协同防病效果。这一作用机制增强了防治效果的持效性和系统性，降低了病原菌产生抗药性的风险，具有显著的生物学优势。

17、利用地中海假单胞菌cs95或其培养液制备成生防制剂，可应用于植物真菌性或细菌性病害的防治中，进而实现不依赖化学合成农药，且所制成的生防制剂无有毒有害残留，对环境友好，对人畜安全，符合现代农业绿色、可持续发展的战略方向，可广泛应用于有机农业和综合病害管理体系。

1. 一株地中海假单胞菌（pseudomonas mediterranea）cs95，其特征在于，其保藏编号为cctcc no. m20261044。

2.一种生物制剂，其特征在于，含有权利要求1所述的中海假单胞菌cs95的培养物作为活性成分。

3.根据权利要求2所述的制剂，其特征在于，所述的地中海假单胞菌cs95的培养物的浓度为od600=1.0。

4. 根据权利要求2所述的制剂，其特征在于，所述的地中海假单胞菌cs95的培养物的制备方法如下：将地中海假单胞菌cs95接种至lb液体培养基中，置于28℃、200 rpm条件下培养。

5.权利要求1所述的地中海假单胞菌在制备防治柑橘溃疡病的生物制剂中的应用。

6.权利要求1所述的地中海假单胞菌cs95或权利要求2-4任一项所述的制剂在以下任一方面中的应用：

7.一种防治柑橘溃疡病的方法，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求1所述的地中海假单胞菌cs95或权利要求2-4任一项所述的制剂施用于柑橘类植株上。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，权利要求1所述的地中海假单胞菌cs95或权利要求2-4任一项所述的制剂是通过抑制柑橘溃疡病原菌的繁殖和/或促进柑橘类植株的免疫反应以防治柑橘溃疡病。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的施用的方式为喷洒。