一株鱼肠源酵母SFI1及其在水产动物养殖中的应用

本发明涉及水产养殖微生物，特别是涉及一株从鱼类肠道分离的酵母（

sakaguchia oryzae）sfi1菌株及其在提高水产动物抗嗜水气单胞菌（

aeromonas

hydrophila）感染能力中的应用。

背景技术：

1、嗜水气单胞菌（

aeromonas hydrophila）是水产养殖中常见的条件致病菌，可引起鱼类败血症、烂鳃病和肠炎等疾病，导致严重的经济损失。传统防治方法主要依赖抗生素，但长期使用抗生素易导致耐药菌株产生、药物残留和环境污染等问题。因此，利用益生菌提高水产动物自身抗病能力成为重要的替代策略。

2、现有技术中，如cn1189075c公开了一种刺五加在水产养殖中的应用。刺五加的提取物在适当剂量下，具有增强淡水或海水养殖鱼类免疫系统、特别是非特异性免疫功能的作用，可广泛性地提高养殖鱼类对各类病原性疾病的抵抗力，提高养殖成活率。此外，刺五加对鱼体还具有抗应激作用，从而增强鱼体对环境胁迫的适应能力。刺五加及其提取物是一种无毒、无害、无污染的饲料添加剂。本发明制备方法易行，生产工艺简单。

3、cn104435297a公开了一种短小芽孢杆菌和免疫增强剂粉状制剂的制备方法。短小芽孢杆菌经固态发酵或液体发酵制成粉状菌剂，其中短小芽孢杆菌活菌数为109-1011cfu/g，将所述的粉状菌剂、维生素c、黄芪、杜仲、党参、当归、金银花、柴胡、乌梅、石榴皮和五味子分别粉碎过100目筛后，按照重量份配比混匀，即得所述的粉状制剂。制备得到的粉状制剂能够显著提高鱼体抵抗嗜水气单胞菌的感染能力，增强养殖鱼类的机体免疫力，显著抑制鱼类肠道致病菌的生长，促进鱼体快速生长，提高养殖鱼类的增重率和抗病力。

4、cn106928333a一种拟穴青蟹抗病因子spalf6单核苷酸突变体spalf6-m，该spalf6-m对真菌和病原性细菌(特别是耐药性弧菌)具有明显的抑制和杀伤作用，拟穴青蟹抗病因子spalf6单核苷酸突变体spalf6-m在制备动物抗病原微生物饲料添加剂中，对酵母菌、白色念珠菌；溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌、嗜水气单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌具有作用。

5、酵母类益生菌在水产养殖抗病方面的应用也有少量探索，如choudhury等（2005，fish&shellfish immunology，doi: 10.1016/j.fsi.2005.01.004）发现饲料中添加膳食酵母rna可降低露斯塔野鲮因嗜水气单胞菌感染导致的死亡率。

6、然而，现有技术中所使用的酵母菌株主要为

saccharomyces、

debaryomyces等传统商业菌种，其来源并非鱼类宿主自身菌群，在不同鱼种及养殖条件下的效果并不稳定。

技术实现思路

1、本发明目的是针对现有水产养殖抗病技术的安全性、可靠性问题，经研究并发现一株来源明确、安全性好、通过宿主介导机制即可提高水产动物抗嗜水气单胞菌感染能力的益生酵母菌株。

2、为达上述目的，本发明首先提供了一株鱼肠源酵母sfi1菌株（

sakaguchia

oryzae），所述菌株从褐篮子鱼肠道中分离，经26s rdna d1/d2区序列鉴定为

sakaguchia

oryzae，保藏编号为：gdmcc no.：68705。

3、优选地，所述菌株在ypd培养基中28℃培养，呈γ溶血，不产生对嗜水气单胞菌的直接抑菌圈。

4、本发明第二目的是提供一种上述菌株在水产动物养殖中的应用。

5、优选地，所述应用为提高水产动物抗嗜水气单胞菌感染能力。

6、优选地，所述应用的制剂的剂型为菌悬液、浓缩菌体、冻干菌粉、水体添加剂或饲料添加剂。

7、优选地，所述制剂通过浸浴方式施用，具体为，将鱼肠源酵母sfi1制备为1×108cfu/ml的菌悬液浸浴水产动物，每48小时换水并补充菌液，连续施用21天。

8、优选地，所述制剂改善水产动物肠绒毛高度和肠上皮完整性，以宿主介导机制提高抗嗜水气单胞菌感染能力。

9、优选地，所述水产动物为斑马鱼或其他鱼类。

10、本发明第三目的是提供一种提高水产动物抗嗜水气单胞菌感染能力的制剂，其包含上述鱼肠源酵母sfi1作为活性成分。

11、本发明的有益效果：

12、（1）显著的抗感染保护效果：以1×108 cfu/ml菌悬液浸浴斑马鱼21天后，以1×107 cfu/ml嗜水气单胞菌浸浴攻毒2小时并观察7天，sfi1组最终存活率为68.97%，感染对照组仅为23.33%，存活率提高45.64个百分点，约为对照组的2.96倍。但sfi1不产生对嗜水气单胞菌的直接抑菌圈。

13、（2）改善肠道形态结构：h&e染色结果显示，sfi1显著提高肠绒毛高度并改善肠上皮结构，且在无直接抑菌的前提下产生上述改善，提示其通过增强肠黏膜屏障功能发挥保护作用。

14、（3）安全性良好：sfi1呈γ溶血（非溶血性），且

sakaguchia oryzae物种在文献中无任何致病性报道，具有良好的生物安全性。21天养殖试验中存活率为100%。

15、（4）来源明确、宿主匹配：sfi1从褐篮子鱼肠道分离，来源于鱼类宿主自身菌群，相比非鱼源的商业菌株具有更好的鱼类宿主适应性。

1.一株鱼肠源酵母sfi1，其特征在于，所述菌株从褐篮子鱼肠道中分离，经26s rdnad1/d2区序列鉴定为sakaguchia oryzae，保藏编号为gdmcc no.：68705。

2.根据权利要求1所述的鱼肠源酵母sfi1，其特征在于，所述菌株在ypd培养基中28℃培养，呈γ溶血，不产生对嗜水气单胞菌的直接抑菌圈。

3.如权利要求1或2所述的鱼肠源酵母sfi1在水产动物养殖中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述应用为提高水产动物抗嗜水气单胞菌感染能力。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述应用的制剂的剂型为菌悬液、浓缩菌体、冻干菌粉、水体添加剂或饲料添加剂。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述应用的制剂通过浸浴方式施用。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，将鱼肠源酵母sfi1制备为1×108 cfu/ml的菌悬液浸浴水产动物。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述菌悬液浸浴，每48小时换水并补充菌液，连续施用21天。

9.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述水产动物为斑马鱼或其他鱼类。

10.一种提高水产动物抗嗜水气单胞菌感染能力的制剂，其特征在于：包含权利要求1或2所述的鱼肠源酵母sfi1作为活性成分。